试述产气荚膜梭菌可引起的鉴定依据。

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1.什么是菌落?了解菌落有何实际意义?
2.绘出细菌的基本结构和特殊结构图。
3.比较革兰阳性菌和阴性菌的细胞壁结构及化学组成的差异。
4.试述脂多糖及外膜蛋白的组成及功能。
5.叙述细菌核体与真核细胞核的异同。
6.解释荚膜的概念及其功能。
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产气荚膜梭菌培养条件
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实验室新买了株产气荚膜梭菌,说明书上说要划哥伦比亚琼脂斜面,加液体石蜡37度培养。
因为买不到哥伦比亚琼脂培养基,所以划了营养琼脂斜面,同时也接种了营养肉汤和疱肉培养基并加液体石蜡。培养了48小时后均无生长。
请问产气荚膜梭菌要用什么培养基培养,厌氧条件用的是加液体石蜡的方法可以吗?(因为实验室没有厌氧培养箱)
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为什么买不到哥伦比亚琼脂?青岛海博就有啊。质量不错呢
1 主题内容与适用范围
  本标准规定了产气荚膜梭菌的检验方法。
  本标准适用于食品和食物中毒样品中产气荚膜梭菌的检验。
  2 引用标准
  GB 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
  3 设备和材料
  3.1 均质器。
  3.2 显微镜。
  3.3 温箱:36±1℃。
  3.4 水浴。
  3.5 厌氧培养装置:常温催化除氧式或碱性焦性没石子酸除氧式。
  3.6 吸管:1mL,10mL。
  3.7 试管。
  3.8 平皿。
  3.9 接种环或接种针。
  4 培养基和试剂
  4.1 庖肉培养基:GB .67。
  4.2 亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂(SPS):GB .69。
  4.3 液体硫乙醇酸盐培养基(FT):GB .70。
  4.4 动力-硝酸盐培养基:GB .72。
  4.5 含铁牛奶培养基:GB .71。
  4.6 卵黄琼脂培养基:GB .68。
  4.7 0.1%蛋白胨水稀释剂:GB .86。
  4.8 硝酸盐还原试剂:GB .17。
  4.9 革兰氏染色液:GB .2。
  5 检验程序
  产气荚膜梭菌检验程序如下:
  (图略)
  6 操作步骤
  6.1 活菌计数培养
  6.1.1 按无菌操作称取食品检样25g(mL)放入均质器,加0.1%蛋白陈水稀释剂225mL,低速搅动1~2min,使之均质化,作为1∶10稀释液。
  6.1.2 以上述1∶10稀释的均质液按1mL加0.1%蛋白陈稀释剂9mL做成10-2~10-6的系列稀释液。
  6.1.3 吸取各稀释液1mL分别放入2个灭菌平皿内。每个平皿浇注约50℃的SPS琼脂15~20mL,仔细转动平皿,使稀释液和琼脂充分混匀。
  6.1.4 上述琼脂平板凝固后,倒置于厌氧培养装置内,于36±1℃培养24h。
  6.1.5 选取长有30~300个黑色菌落的平板,计数黑色菌落数。
  6.2 确证试验
  6.2.1 由平板上任取10个黑色菌落,分别按种FT培养基,于36±1℃培养18~24h。
  6.2.2 用上述培养液涂片,革兰氏染色镜检。产气荚膜梭菌为革兰氏阳性粗大杆菌,其耐热株可能形成卵形芽孢,位于菌体中央或近端,其宽度一般不大于菌体。
  6.2.3 用接种环(针)穿刺接种动力-硝酸盐培养基,于36±1℃培养24h,观察接种线的生长情况,判断有无动力。然后,滴加甲萘胺液和对氨基苯磺酸液各0.5mL,观察硝酸盐是否被还原。产气荚膜梭菌无动力,能将硝酸盐还原为亚硝酸盐。
  6.2.4 取生长旺盛的FT培养液1mL接种于含铁牛乳培养基,在46℃水浴中培养2h后观察有无“暴烈发酵”现象,5h内不发酵者为阴性。产气荚膜梭菌发酵乳糖,凝固酪蛋白并大量产气,呈“暴烈发酵”现象,但培养基不变黑。
  6.2.5 用接种环取FT培养液点种于卵黄琼脂平板(每张平板至少可接种10点),于36±1℃厌氧培养24h,观察接种点的变化。产气荚膜梭菌产生卵磷脂酶,分解卵黄中的卵磷脂,接种点的底部及周围形成乳白色的混浊带。
  6.3 菌数计算
  根据黑色菌落的计数(6.1.5)和确证试验的结果(6.2),计算每克(毫升)食品检样的含菌数。  
  例如:10-4稀释液的平板长有黑色菌落100个,而供做确证试验的10个菌落中有7个被确证为产气荚膜梭菌,则每克(毫升)食品检样所含产气荚膜梭菌数为:
  100×0.7×104=7×105
  附加说明:
  本标准由卫生部卫生监督司提出。
  本标准由卫生部兰州生物制品研究所负责起草。
  本标准主要起草人王成怀。
  本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
(日水贝贝)
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培养产气荚膜梭菌需要用到庖肉培养基,卵黄琼脂培养基,具体的可以联系青岛日水生物,供应日水培养基,产品齐全。
可以选择无菌液体石蜡进行厌氧培养
另外你可以去日水生物网站上下载产品目录,联系电话:,
日水牌培养基供应商日水生物
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实在没用用血琼脂代替啊
加液体石蜡就是隔离空气啊
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楼主,厌氧条件也可以用厌氧罐和厌氧产气袋,我们的oxoid厌氧罐用的人还挺多的,培养一次用一片厌氧产气袋就行了。
另外,我们oxoid的哥伦比亚血琼脂从我们公司可以买到。
华粤瑞科科学器材有限公司上海分公司
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培养产气荚膜梭菌需要用到庖肉培养基,卵黄琼脂培养基,具体的可以联系青岛日水生物,供应日水培养基,产品 ...
请问,培养产气角膜梭菌需要庖肉培养基,那检测产气荚膜梭菌还需要么?用来做什么?检测方法上面培养基里有这个,但是整个过程也没看到哪里用到呀
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请问,培养产气角膜梭菌需要庖肉培养基,那检测产气荚膜梭菌还需要么?用来做什么?检测方法上面培养基里有这个,但是整个过程也没看到哪里用到呀
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