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1分子筛层析原理及应用分享如何轻松脱盐
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【求助】分子筛柱效测定
分子筛柱效测定一般选择1%丙酮上样（体积为1%柱床体积），上样量大了或者小了有什么影响呢？
上样大了，各峰交叠，分离效果不佳，
上样少了，分离效果可以保证，但是分离得到的蛋白量少，可能某峰就被因此被忽略了。
除了按照柱体积1%-2%外，跟样品本身的蛋白含量也是有关的。 这是GE公司SuperdexTM 75说明书的部分介绍，我把说明书作为附件传上来
Column performance control
Check the performance of the column using the following procedure:
Sample: 100 μl 0.5% acetone (5mg/ml)
Eluent: buffer solution or distilled H2O
Flow rate: 0.75 ml/min, room temperature
Detection: 280 nm
Column efficiency, expressed as the number of theoretical plates per meter, N/m, is
calculated using the following equation:
N/m = 5.54 × (vr / w½)平方 × (1000/L)
N/m = number of theoretical plates/meter
vr = peak elution distance (m)
w½ = peak width at half peak height (m)
L = bed height (m)
上述层析柱长0.24m。
假如上样量体积大，则峰宽与半峰宽更接近，比值更接近1，则理论塔板数/m更小，柱效低。另外，楼主所用的体积如果依据这个说明书来看就太大了。PS：用丙酮测柱效而不是用蛋白质，二楼说的是分离蛋白质时上样量的问题。 N/m = 5.54 × (vr / w&frac12平方 × (1000/L)
怎么给我弄出了个害羞表情来。
每米的理论塔板数N/m=5.54×（峰宽/半峰宽）平方×（1000/柱长）
var cpro_id = 'u1216994';
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分子筛的Buffer的pH是不是跟你的蛋白PI很接近啊，如果是的话，调节分子筛Buffer的pH。另外分子筛Buffer的电导是不是很高，如果是的话，也可以适当降低一些。
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