铁棍山药有效成分提取分离及其活性研究--《西北大学》2011年硕士论文
铁棍山药有效成分提取分离及其活性研究
【摘要】：铁棍山药为山药中的上品,现代中医认为其具有预防心血管疾病和提高免疫作用。为了明确其活性物质的化学成分和作用原理,我们进行了如下研究：
首先,采用系统预试验法对铁棍山药中可能含有的化学物质进行了系统检测研究；其次,采用极性分级试验法对其尿囊素的提取分离进行研究；再次,采用醇回流、柱层析、化学检测与紫外光谱检测,对其黄酮提取分离及检定进行研究,提取实验的安排和数据处理采用响应面法；还采用膜过滤法及柱层析法对其多糖分离及纯化进行研究；还采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对其蛋白的分子量进行测定；最后,采用水杨酸法、邻苯三酚自氧化法等对其多糖及黄酮清除自由基活性进行了评价。
实验得出：铁棍山药提取液中尿囊素、酚性成分、黄酮醇、黄酮、蛋白质、多糖、皂苷及脂类化学物质的鉴别反应为正反应；有机酸及生物碱为阴性反应。其正丁醇饱和水溶液中得到的白色结晶,IRvmaxcm-1为：、、、、、780、760、710。其黄酮的紫外吸收为：带Ⅰ362nm,带Ⅱ259nm；10项黄酮化学诊断反应现象明确。其蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳Rf值为0.31,其多糖成分Ⅰ的TLC分析,Rf值为0.47,0.57。多糖成分Ⅱ的TLC分析,Rf值为0.47,0.53,0.57。其总黄酮及总多糖在浓度为1mg/ml时,对·OH清除率依次为74.55%,29.45%；对NO2-清除率依次为29.41%,39.79%：对DPPH-自由基清除率依次为30.2%,41.65%；对超氧阴离子O-清除率依次为18.31%,27.2%。
实验得出：在实验条件下,铁棍山药的总黄酮提取率在0.31%-0.88%范围内,其总多糖的提取率为0.74%-2.28%。D101树脂对其总黄酮,静态饱和吸附量为15.3mg/g,动态饱和吸附量为12.6mg/g,静态洗脱率为94.7%,动态洗脱率为91.2%；上柱溶液与树脂比5：1时,回收率95.2%,10：1时,回收率87.43%；树脂脱色率D101为70.19%,AB-8为67.17%,NKA-9为62.63%。陶瓷膜纯化多糖,回收率为92.2%。超滤膜2000纯化多糖,透过率为51.3%,纯度为42.7%。超滤膜20000纯化多糖,透过率为89.6%。纯度为33.8%。
研究表明,铁棍山药含有尿囊素、黄酮醇、黄酮、蛋白质、多糖、皂苷及脂类化学物质。其中薯蓣皂苷含量很低；尿囊素含量较高,达0.53%以上；黄酮类物质中3,5,7,3′-四羟基黄酮含量较高的；蛋白为单纯蛋白,分子量约为22KD；多糖中分子量小于2000D的占21.9%,分子量大于2000D小于20000D占30.3%,分离得到的两个纯多糖,多糖Ⅰ由葡萄糖及山梨糖组成；多糖Ⅱ由葡萄糖、山梨糖及果糖组成；铁棍山药中的黄酮和多糖类物质具有良好的自由基有清除作用是其预防心血管疾病和提高免疫作用的物质基础。
研究还表明,在试验范围内铁棍山药中黄酮类物质最佳提取条件为：料液比为1：10、80%乙醇、82℃、4h,提取方程为Y=0.67+0.092A+0.082C+0.074A2-0.15B2+0.056C2+0.069D2,理论最大提取率为0.88%,实测值与预测值误差为3.3%；D101树脂纯化黄酮的最佳工艺条件为：水溶液上样,上样速度为1BV/h,动态饱和吸附量为12.6mg/g,70%乙醇洗脱,洗脱速度为1BV/h,洗脱液量为3BV,多糖脱色率可达70.19%。总多糖提取条件为：浸提2次,料液比1：15、60℃、1.5h,总提取率可达2.28%；陶瓷膜纯化多糖工艺条件为：压力2.4bar,温度30℃,膜通量3.69,多糖回收率可达92.2%。薯蓣皂苷提取条件为：10倍量95%乙醇回流提取3次,每次2小时。尿囊素采用双醇法提取可获得化学单体。
通过本研究,基本明确了铁棍山药的合理应用的方向,并为其化学成分的提取分离提供可靠的实验依据。
【关键词】：
【学位授予单位】：西北大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2011【分类号】：S567.239【目录】：
摘要3-5Abstract5-8目录8-12第一章 绪论12-21 1.1 铁棍山药12-14
1.1.1 植物资源12
1.1.2 化学成分12-14 1.2 山药有效成分研究现状14-18
1.2.1 山药醇提物14-15
1.2.2 山药多糖15-16
1.2.3 尿囊素16-17
1.2.4 山药蛋白17-18 1.3 研究目的意义及内容18-21
1.3.1 研究目的及意义18
1.3.2 研究内容与方法18-21第二章 系统预实验21-25 2.1 实验材料与仪器21 2.2 实验方法21-23
2.2.1 样品制备方法21-22
2.2.2 系统预实验方法22-23 2.3 结果与讨论23-24 2.4 本章小结24-25第三章 尿囊素提取分离与鉴定25-28 3.1 实验材料与仪器25 3.2 实验方法25-26
3.2.1 提取分离方法25
3.2.2 检测方法25-26 3.3 结果与讨论26-27 3.4 本章小结27-28第四章 铁棍山药黄酮的提取与纯化28-42 4.1 实验材料及仪器28 4.2 实验方法28-32
4.2.1 黄酮定性鉴别方法28
4.2.2 标准曲线的绘制28-29
4.2.3 黄酮提取影响因素研究29
4.2.4 黄酮提取参数优化29-30
4.2.5 总黄酮分离工艺研究30-31
4.2.6 一种黄酮结构的鉴定31-32 4.3 结果与讨论32-40
4.3.1 黄酮定性鉴别结果32-33
4.3.2 黄酮含量测定标准曲线33
4.3.3 黄酮提取影响因素研究结果33-34
4.3.4 提取参数优化结果34-38
4.3.5 总黄酮分离工艺优化结果38-39
4.3.6 一种黄酮结构的鉴定结果39-40 4.4 本章小结40-42第五章 多糖的提取分离与鉴定42-54 5.1 实验材料与仪器42 5.2 实验方法42-47
5.2.1 多糖标准曲线的绘制42
5.2.2 提取影响因素研究42-43
5.2.3 多糖膜过滤工艺研究43-44
5.2.4 大孔树脂脱色工艺研究44-45
5.2.5 多糖DEAE-52离子交换柱层析45-46
5.2.6 多糖G-75葡聚糖凝胶柱层析46
5.2.7 多糖组分研究46-47 5.3 结果与讨论47-52
5.3.1 多糖标准曲线47
5.3.2 提取影响因素研究结果47-48
5.3.3 多糖膜分离研究结果48-50
5.3.4 大孔树脂脱色研究结果50-51
5.3.5 多糖DEAE-52离子交换柱层析结果51
5.3.6 多糖G-75葡聚糖凝胶柱层析结果51-52
5.3.7 多糖组分研究结果52 5.4 本章小结52-54第六章 蛋白质提取分离与鉴定54-58 6.1 实验材料与仪器54 6.2 实验方法54-56
6.2.1 蛋白质制备方法54
6.2.2 蛋白质检测方法54-56 6.3 结果与讨论56-57
6.3.1 颜色反应结果56
6.3.2 紫外检测结果56
6.3.3 分子量测定结果56-57 6.4 本章小结57-58第七章 总皂苷的提取与分离58-64 7.1 实验材料与仪器58 7.2 实验方法58-60
7.2.1 标准曲线的绘制58
7.2.2 提取影响因素研究58-59
7.2.3 提取参数优化59-60 7.3 结果与讨论60-63
7.3.1 标准曲线的绘制60
7.3.2 提取影响因素研究结果60-61
7.3.3 提取参数优化结果61-63 7.4 本章小结63-64第八章 总黄酮及总多糖抗氧化性研究64-69 8.1 实验材料与仪器64 8.2 实验方法64-65
8.2.1 清除·OH作用的研究64
8.2.2 清除NO_2~-作用的研究64
8.2.3 清除DPPH·作用的研究64-65
8.2.4 清除超氧阴离子O~(-·)作用的研究65 8.3 结果与讨论65-68
8.3.1 清除·OH作用的研究结果66
8.3.2 清除NO_2~-作用的研究结果66-67
8.3.3 清除DPPH·作用的研究结果67
8.3.4 清除超氧阴离子O~(-·)作用的研究结果67-68 8.4 本章小结68-69结论与展望69-71 结论69-70 展望70-71参考文献71-75攻读硕士学位期间取得的学术成果75-76致谢76
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京公网安备75号铁棍山药的功效与作用？和普通的山药有什么区别呢？营养成分都一样吗？_百度宝宝知道铁棍山药胀气吗？肠梗阻病人能吃吗？
铁棍山药胀气吗？肠梗阻病人能吃吗？
铁棍山药胀气吗？肠梗阻病人能吃吗？
医院出诊医生
擅长：痔疮、肛瘘、肛裂、大便出血等
擅长：肠胃炎，腹膜炎
共1条医生回复
因不能面诊，医生的建议及药品推荐仅供参考
职称：医师
专长：外科,尤其擅长神经外科等疾病
&&已帮助用户：124111
指导意见：你好，根据你说的情况是需要你给于活血类药物治疗，你可以到医院给于复查
问不完全性肠梗阻可不可以吃山药
职称：三级营养师
专长：高血压、糖尿病、脑梗后遗症
&&已帮助用户：93121
问题分析：不完全性肠梗阻可以吃山药意见建议：一般不完全性肠梗阻患者，是可以做半流质饮食，少食多餐，清淡饮食，一般是需要禁忌辛辣食物和生冷有刺激性的食物，以及油腻食物的！需要做细嚼慢咽，如果做手术，可以用腹腔镜。在某些情况下，肠排列术可以有效减少梗阻再发的可能性。可以吃山药
问肠梗阻可不可以吃长山药
职称：二级营养师
专长：鼻疖,鼻中隔偏曲,扁桃体周围脓肿,鼻窦炎,慢性咽炎,龋齿,口腔溃疡,弱视,口臭,鼻炎
&&已帮助用户：11089
问题分析：肠梗阻可以吃长山药意见建议：肠梗阻的患者可以吃长山药 因为长山药具有健脾补肾的作用 肠梗阻的患者吃了是有好处的 肠梗阻的患者最好吃一些容易消化的食物 不要吃辛辣的食物 不要喝酒 注意休息 抓紧时间治疗 以免延误病情
问您好，胃胀气的人适合吃山药吗
职称：医生会员
专长：内科、消化内科
&&已帮助用户：4171
问题分析：你的症状可能是慢性胃炎的表现，多是由于感染、饮食或化学刺激等因素引起的，胃酸刺激胃肠粘膜，影响胃功能，患者多出现胃疼、胃酸、胃胀、嗳气、泛酸、恶心、烧心、食欲不振等症。意见建议：建议你可以到医院检查一下胃镜，必要时可以做呼气试验查一下是否有幽门螺杆菌感染，明确诊断。可以服用莫沙必利、奥美拉唑、磷酸铝凝胶、香砂养胃丸，木香顺气丸。也可以服中药调理。清淡饮食，山药健脾益气，可以吃一点，但不能多吃，忌食辛辣刺激性食物，忌烟酒，忌油腻，忌生冷，注意防寒保暖。
问肠梗阻手术后能吃山药吗？谢谢。
职称：医生会员
专长：颈椎病,骨质增生,腰椎间盘突出
&&已帮助用户：59331
指导意见：您好，可以吃，手术后可以服用抗肿瘤中成药口服液，可以加快恢复元气，促进伤口愈合和组织修复，减轻痛苦，巩固加强手术成果．消除手术无法切除的微小病灶和残余肿瘤细胞，防止肿瘤的复发和转移．
问肠梗阻可不可以吃山药
职称：二级营养师
专长：螺旋藻片,蛋白质粉
&&已帮助用户：16411
问题分析：肠梗阻可以吃山药意见建议：肠梗阻可以吃山药的，作为一种营养丰富的滋补食品，山药性平味甘，是中医上品之药，具有补肺、健脾作用，能益肾填精，山药粘液少数人接触会过敏发痒，处理时尽量避免直接接触，发痒可以用酱油涂抹一下，尽量不要抓挠。
问肠梗阻术后病人胃胀气是什么原因
专长：外科其它、前列腺、男性不育
&&已帮助用户：218754
这个情况与手术后胃肠功能有关你手术后有可能是是功能性消化不良或慢性肠炎.所以一般可以用点益生菌如乳酸菌素片金双歧胶囊等看看.要注意少吃多餐尽量易消化的饮食
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（2012o宝山区二模）取某种玉米圆粒（AA）紫色（BB）梗性（TT）品种与凹粒（aa）白色（bb）糯性（tt）品种杂交，得子一代；取一部分子一代分别自交和测交，得各自子二代的表现型及相应数据如下表：F1测交所得后代表现型及其比例情况：
4F1自交所得后代F2表现型及比例情况
3（1）上述三对等位基因中，属于不完全显隐性关系的基因是______．（2）用短线和点表示F1的基因型______．（3）取F1自交所获的F2代中，基因型为AA的个体所占的比例，理论上是，若取F1测交所获的圆粒粉色的种子进行种植，并自交繁殖，则自交后代中隐性纯合体出现的概率，理论上占&&&& 如图1为某家族的遗传系谱图，甲病基因用D或d表示，乙病基因用E或e表示；其中，有一种病的基因位于X性染色体上．男性人群中隐性基因d占1%，e占5%；人群的男女之比为1：1；基因频率呈平衡态．（4）甲病基因位于______染色体上，为______性遗传病．（5）5号基因型是______（6）7号为甲病患者的可能性是（用最简分式表示）；7号同时患两种病的几率是（用最简分式表示）．（7）由于7号在一次核泄漏世故中受到核辐射，其睾丸中约4%的精原细胞在分裂过程中出现异常，③号染色体着丝粒不能分裂，其他染色体正常分裂．（8）图2细胞为______细胞；该男性的不正常配子占______%．
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（1）已知F1的基因型是AaBbTt，F1自交所得后代F2，表格中出现了紫色（BB）、白色（bb）和粉色（Bb），说明三对等位基因中，属于不完全显隐性关系的基因是B-b．（2）在自由组合定律里，测交后代的性状分离比应该是1：1：1：1，而表格中测交实验结果是圆粉：圆白：凹粉：凹白=4：1：1：4，说明可知圆粉的基因A与B连锁，控制凹白的基因a与b连锁，所以F1的基因型可以表示为：．（3）已知F1的基因型是AaBbTt，其自交后代出现AA的概率为．表格中F1测交结果是圆粉：圆白：凹粉：凹白=4：1：1：4，说明F1AaBb产生的4种配子及比例为AB：ab：Ab：aB=4：4：1：1，所以取F1测交所获的圆粒粉色（AaBb）的种子进行种植，并自交繁殖，则自交后代中隐性纯合体（aabb）出现的概率×=（16%）．（4）根据遗传图谱分析，1号、2号正常，生出了有甲病的女儿5号，所以甲病为常染色体隐性遗传病；还生出了有乙病的儿子6号，由题干已知有一种病的基因位于X性染色体上，所以乙病为伴X隐性遗传病．（5）根据上题判断的遗传方式可知1号基因型为DdXEY、2号基因型为DdXEXe，所以有甲病的5号的基因型为ddXEXE或ddXEXe．（6）已知男性人群中隐性基因d占1%，e占5%，所以男性XEY的概率为95%；因为d=1%，所以D=99%，则正常男性中Dd的概率为（2×1%×99%）÷（2×1%×99%+99%×99%）=，所以3号的基因型是Dd（）XEY．由1号和2号的基因型可以推知4号的基因型是Dd（）XEXe（），所以7号为甲病患者的可能性是××=，患乙病的可能性为×=，同时患两种病的几率是×=．（8）图2中分离的是姐妹染色单体，且没有同源染色体，细胞质均等分裂，所以该细胞为次级卵母细胞．由于该男性睾丸中约4%的精原细胞在分裂过程中出现异常，③号染色体着丝粒不能分裂，其他染色体正常分分裂，所以该男性的不正常配子占4%×=2%．故答案是：（1）B-b（2）（3）&& （16%）
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取某种玉米圆粒（AA）紫色（BB）梗性（TT）品种与凹粒（aa）白色（bb）糯性（tt）品种杂交，得到的子一代的基因型是AaBbTt，再根据测交和自交后代的性状分离比判断连锁基因，进而解题．
本题考点：
基因的自由组合规律的实质及应用；常见的人类遗传病．
考点点评：
本题考查基因的自由组合定律的实质及应用的相关知识点，表格分析和遗传图解的分析是解题的关键．意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养学生分析图表和解决问题的能力．
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