B型地贫检验结果检测出17种基因突变(gag_aag)基因突变杂和是什么意思?目前怀孕三个月。_百度拇指医生
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?B型地贫检验结果检测出17种基因突变(gag_aag)基因突变杂和是什么意思?目前怀孕三个月。
|科室：产科
大连医科大学附属二院
你好，这个杂和是部分突变的意思，这个有可能会使孩子受影响的，
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向医生提问父母是O型和B型血，小孩却是A型,医生说是基因突变。_百度知道
父母是O型和B型血，小孩却是A型,医生说是基因突变。
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这种情况不太可能吧
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点突变试剂盒说明书
产品及特点
基因的定点突变是重要的分子生物学技术，广泛用于载体构建、基因改造、蛋白质功能研究等领域。但传统的方法需要使用单链DNA模板，而得到单链DNA模板又需要先将基因克隆到类似M13这种载体中，操作过程冗长。为了克服这些缺点，本公司将突变位点设计到一对互补的引物中，用高保真扩增质粒模板，然后用Dpn I去除原始的甲基化模板，新合成的DNA通过互补形成带切口的双链质粒，直接用于转化感受态细菌。&
本产品具有下列特点：
1.&直接使用质粒DNA作为模板，免去了制备单链DNA的步骤。
2.&基于高保真PCR，对模板DNA序列没特殊要求，可以用于突变任何序列。同时对模板的需求量很少。
3.&一管式，全部在一个优化的缓冲体系中完成，非常简单。
4.&使用Dpn I去除未突变模板，突变效率高达90%。
5.&可用于制备点突变，缺失突变和插入突变。
6.&本产品A型适用于8 kb一下，B型适用于8-15 kb。
规格及成分
A型10次包装
B型10次包装
高保真酶A型
高保真酶B型
5&高保真酶Buffer A型
5&高保真酶Buffer B型
dNTP（2.5 mM each）
运输及保存
低温运输、-20℃保存, 有效期一年。
质粒DNA、突变引物、细菌转化试剂
一、 引物设计及注意事项
用于特定基因突变的引物必须用户单独设计，请参考如下一些基本原则进行设计。
1.&共需设计两条完全互补的一对引物，它们覆盖要扩增的突变区位点，突变位点最好放在引物的中心。可以先集中设计一条，然后就可得互补的另一条引物。
2.&引物的长度通常为25-45个碱基。引物中突变位点任何一侧都必需满足Tm 大于45的条件，Tm计算方式为Tm=4&(GC碱基数)＋2&(AT碱基数)。例如引物agtcaggccaattcgAAGcagtcgaattgccaag就达到此标准，它的突变位点AAG所放位置使左侧Tm＝46；右侧Tm＝48，均大于45。
3.&尽量把引物的GC含量控制在40％-60％，结尾的1-3个碱基最好是G或C。
4.&尽量使引物不要产生非常稳定的二级结构和引物二聚体。
5.&最好使用经过PAGE纯化的引物或更高纯度的引物。
二、待突变模板质粒的选择
1.&必需使用从dam＋的大肠杆菌(这类菌中质粒可以被甲基化)中抽提得到的质粒用于基因定点突变，否则Dpn I不能把没有酶切的质粒DNA切除，产生大量的假阳性。常用的大部分大肠杆菌都是dam＋的，包括DH5&、JM109等。不能使用JM110和SCS110以及其它dcm-菌种。
2.&待突变质粒和目的基因的GC含量应该在40-55％，没有任何 GC含量超过70%、长度在50bp以上的区域。如果质粒GC含量过高，请先把目的基因克隆到其它合适的载体上，再进行基因定点突变反应。如果目的基因GC含量过高，而突变位点不在高GC含量区域，可以先把该基因的不含高GC含量的一个区域克隆出来，进行定点突变，然后再把突变后的片断克隆回原基因中。如果突变位点在高GC区，则可以使用高GC专用PCR反应试剂。
三、 基因定点突变反应
1.&&在一个塑料离心管中加入下列成分：
待突变模板质粒
0.1-0.5 ug
5&高保真酶Buffer
引物一 (10-20 uM)
引物二 (10-20 uM)
dNTP Mix (2.5&mM each)
2.&加入 1 uL高保真DNA聚合酶，混匀，如果PCR仪没有热盖则需要加少量石蜡油。放入PCR仪器中按下面参数进行PCR：
（注：只18次循环）
长时间保持
四、Dpn I消化：
PCR反应后，直接在PCR反应体系中加入1uL Dpn I内切酶 （该酶在甘油保存液中会下沉到管底，故用前需要充分混匀）。DpnI可以酶切双链都被甲基化的模板质粒，也能降解一条链被甲基化的双链质粒。混匀后37℃孵育2小时后样品可以直接用于转化，或者-20℃保存备用。
五. 转化、挑克隆鉴定：
每100微升感受态细菌（转化效率必须在107&/ug以上）中可以加入5-10微升经过Dpn I消化后的突变产物，按照所使用的感受态细菌的操作方法进行操作。如果PCR使用了石蜡油，在转化时千万别把它带入转化反应，否则会严重影响转化效率。在涂板前通过离心浓缩的办法，把所有被转化后的细菌全部涂布到含有适当抗生素的平板上培养过夜。通常会得到50个以下的克隆，可按常规方法制备质粒并测序。
六、常见问题：
1. 转化后没有克隆或克隆数极少：(1) 感受态细菌效率不够高，请检测一下感受态细胞的效率，确保转化效率在107&/ug。(2) 把Dpn I消化后的产物用常规的乙醇沉淀浓缩，这样就可以把所有的产物全部用于转化。(3) 优化基因定点突变中的PCR参数。可以把最初的95℃变性时间延长为2分钟，循环中95℃变性的时间延长至1分钟，把循环中的68℃的延伸时间改为1.5分钟/kb 至2分钟/kb，退火可以改为60-55℃或65-55℃等的touch down，退火时间也可以适当延长。(4) 引物设计有问题。通过突变反应中的PCR没有很好地扩增出预期的突变质粒。
2. 有克隆，但没有或很难检测到预期的突变克隆：(1) 使用的待突变的模板质粒量过多，导致Dpn I消化时不完全，可减少质粒用量。
3. 有突变克隆，但突变位点不是预期的位点：(1) 引物设计不佳，退火温度过低，导致引物退火到错误的地方。(2) 引物质量较差，没有经过PAGE纯化。这样引物中通常会含有比设计的引物要短的特异性较差的引物，容易导致非预期的突变。父亲a型母亲o型，生出孩子来b型，会不会有基因突变的可能_百度拇指医生
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?父亲a型母亲o型，生出孩子来b型，会不会有基因突变的可能
女25岁|科室：普通内科
禹城市张庄镇卫生院
你说的这种情况，是绝对不可能的，不可能孩子是b型的。除非不是你的孩子。
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你好，宝宝不可能是A型血哦，宝宝只能是B型血或者有可能是O型血，建议最好上医院查明血...
你好，你家宝宝可能是b型血或者o型血两种可能，但不可能是a型血。
父亲是O型血，母亲是B型血，那么孩子可能是O型血或者B型血，不可能是A型血。
母亲是a型父亲是b型孩子会不会是o型血？
答：孩子可能是O型血。
问题分析：
你好,父亲A型血母亲B型血能生出O型血孩子的.A和B型父母可有A, B, O, AB四种...
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