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归芪散防治奶牛隐性乳房炎的研究
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省农委转发农业部关于印发《奶牛乳房炎防治技术指南(试行)》的
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用CMT法对奶牛隐形乳房炎检测及治疗分析
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用CMT法对奶牛隐形乳房炎检测及治疗分析
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奶牛病原微生物所致乳房炎的诊断与防控
余海波/ 武汉市农业学校
（一）诊断方法
1. 临床表现。各种病原微生物所致乳房炎的表现形式包括临床型、慢性和隐性三类，它们在全身反应（体温、呼吸数、脉搏数、反刍、食欲、鼻镜和精神状态等）、患病乳区（乳房大小、硬度、局部温度、肿胀和疼痛反应等）、牛奶形态（牛奶颜色、黏稠度、有无凝块或血丝、产量变化等）三方面有所差别。从隐性到不同程度的临床表现，是由乳房对刺激源反应的剧烈程度决定的。
（1） 临床型乳房炎。最严重：病牛精神萎靡， 体温高达41℃～ 42℃，食欲废绝，反刍停止；乳房出现坏疽（黑乳房炎）；最急性：发病突然，发展迅速，食欲减退，精神抑郁，体温升高；患病乳区出现明显肿胀、发热、坚硬和疼痛；牛奶形态异常，产量剧减，含有血块或血丝；急性：全身反应不明显；患病乳区出现轻度发热和疼痛；乳汁呈灰白色，内混大小不等的絮状物；亚急性：全身反应及患病乳区无异常；乳汁稍稀薄，牛奶中有少量絮片或凝块；PH 值偏高，体细胞总数增加，氯化钠含量增高。
（2）慢性乳房炎。由急性转变而来，反复发生，病程长，产奶量下降；全身反应无异常，但患病乳区有肿胀感，下部有硬结，乳头管呈索状；牛奶形态变化较小，仅黏稠度变得稀薄一些，放置后可见分出乳清。
（3） 隐性乳房炎。全身反应、患病乳区和牛奶形态均无异常，但乳汁在理化性质及细菌学上已发生变化。如体细胞总数在50 万/ml 以上，细菌数和电导值增高。
2. 基因芯片技术。此法具有快速、简便、低成本、高通量的优点，目前，此技术已应用到奶牛乳房炎病原微生物的检测上。李秀萍等以16SrDNA 为对象设计的通用基因芯片，用于金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓杆菌、无乳链球菌、停乳链球菌及乳房链球菌检测，整个过程仅需6 ～ 7 h，结果显示可以灵敏、快速、特异、准确地对上述6种试验菌株进行检测和鉴定。
3.CMT 检测。其原理是在化学物质作用下，乳中细胞的脂类被乳化，细胞破裂释放出DNA，与试剂作用生成沉淀或凝胶，根据生成物的多少间接判断乳中的细胞数，乳中细胞数越多，产生的沉淀或凝胶也越多。主要检测亚急性临床乳房炎和隐性乳房炎，避开初乳期、泌乳后期（因奶量偏少不能稀释体细胞，即便无乳房炎，CMT 值也偏高），弃去前三把奶。具体方法：将乳盘上四个检验皿中分别放入被检牛四个乳区的乳样，然后向每一个乳样中加等量（2 ml）试剂（配方：烷基硫酸盐30 ～ 50 mg，苛性钠15 g，溴甲酚紫0.1 g，蒸馏水1 000 ml），呈同心圆摇动诊断盘，使乳汁与试剂充分混合，经10 ～ 15 min 后，按表1 进行判定。发生乳房炎时乳汁PH值常接近血浆PH 值7.4，当大桶奶样细胞总数超过50 万/ml 时，说明牛群中有50% 以上的奶牛发生感染。
4. 细菌学鉴定。选择新发乳房炎病例无菌采集奶样，采样前确保未使用抗生素治疗，每份奶样均做好标记（包括患病牛号、乳区、等级、日期等），送至专业实验室进行致病菌分离培养与种属鉴定。根据鉴定结果，统计致病菌病种，并计算混合感染比例。
5. 药敏试验。为制定有效的治疗方案提供依据。目前，国内规模化奶牛场乳房炎发病原因多呈各种致病菌混合感染，因此，应选择相对广谱、敏感的抗生素进行治疗。宋容渊的试验表明，选择由头孢氨苄和卡那霉素两种抗生素复合而成的复方注入剂，对由金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、大肠杆菌和凝固酶阴性葡萄球菌等引起的泌乳期临床乳房炎有很好的治疗效果。
（二）防控措施
1. 总体原则。加强临床乳房炎治疗，根据本场流行病原菌选择最佳药物和治疗方案；避免急性乳房炎转为慢性乳房炎；提倡综合预防，依靠改善环境条件和提高牛体抵抗力等措施来降低隐性乳房炎的阳性率。少用或不用抗生素治疗，阳性牛可口服盐酸左旋咪唑（每千克体重8 mg）或补充亚硒酸钠（每头每天补硒2 mg）、维生素E（每头奶牛日粮中添加0.74 mg），必要时可选用中草药方剂防治。
2. 综合防控措施。
（1）加强饲养管理：最好采用全混合日粮（TMR）饲喂奶牛，以保证营养；适量运动，在运动场设置沙床，搭建凉棚，以增强体质；采用封闭式管理，设置独立的消毒通道、消毒设施，以防致病菌传入等等。
（2）保持良好的挤奶卫生：关键是保持乳头的清洁干爽，既有助于降低乳房炎的发病率，同时能保证牛奶的高品质。目前，规模化奶牛场均采用奶台挤奶，在挤奶前清洗乳头和乳房时，要尽可能少用水或消毒液，在套奶杯前，要确保乳头完全干爽，纸巾或拭巾最好只使用一次。
（3）正确使用合格的挤奶设备并进行规范的清洗消毒：挤奶设备（尤其是与乳头密切接触的挤奶杯）容易成为传递乳房炎致病菌的媒介。挤奶机的日常清洗消毒包括挤奶后的漂洗，碱酸交替清洗和挤奶前的漂洗。即挤奶后马上用清洁且没有任何洗涤剂的温水（35℃～ 46℃）漂洗至水清为止，再用PH 值为11.5的碱洗液循环清洗5 ～ 8 min，碱洗液的初始温度应高于74℃，结束时不低于41℃。再继续用PH 值为3.5的酸洗液循环清洗5 min，酸洗液的温度在35℃～ 46℃之间。挤奶前用氯含量为200 mg/L 的消毒水漂洗2 ～ 10 min，尽可能除去碱性、酸性物质及病原微生物；挤奶杯清洗消毒程序是先用清水冲掉残留的牛奶，然后放在消毒剂（每1 000 g 水中加15 ～ 25 mg 碘溶液）中浸泡2.5 min，最后擦干装上挤奶机即可；而挤奶设备应确保达到设计和安装的性能标准，尤其是稳定挤奶真空度，奶流量最高时奶爪部分的真空度应为3.67×104 ～ 4.0×104Pa。
（4）挤奶后对乳头进行药浴：挤奶后对乳头进行有效的药浴，可以使乳房炎的新感染率显著降低。杀菌剂喷雾很难确保将药液喷洒到乳头的整个表面，导致挤奶末期停留在乳头上的病原微生物不能全部杀灭，故一般不采用乳头喷雾。药浴方法：将配好的药液（0.5% 洗必泰、0.5% ～ 1% 碘伏、0.1% 新洁尔灭等）装入药杯中，于挤奶后45 min 内（越早越好）进行药浴，以浸入乳头二分之一以上30 s 左右为宜，药液现配现用，用后弃掉；药浴次数按干奶期每日1 次，临产前10 d 每日2 次，泌乳期每日3 次进行，药浴后，在乳头管口部涂擦碘甘油则效果更好。
（5）干奶时治疗所有乳区：选用长效干奶治疗药物（ 将青霉素100 万IU、新霉素0.5 g、灭菌豆油5 ～ 10 ml 制成油剂，用专用乳房炎注射器，于干奶时注入乳头）治疗奶牛的每个乳区，既能治疗已存在的致病菌感染，又能防止干奶早期出现的新感染。目前，市场上出售的新产品众多，要选择正规厂家生产的产品，保证疗效确实。
（6）及时治疗所有临床病例：做到早发现、早诊断、早治疗，制定切实有效的治疗方案，遵循兽药使用的相关规定，避免牛奶中有药物残留。
（7）尽早淘汰慢性感染奶牛：尽早淘汰治疗无效且经常复发的奶牛，以防感染牛群中的其他奶牛。
（8）对成母奶牛进行定期检测普查：最好每季度检测普查一次，了解牛群乳房炎发展动态及防控效果，做到心中有数。
3. 传染性乳房炎的防控措施。（1）病牛隔离。首先对本场临床乳房炎病例、刚投产的青年母牛和其他经产牛初次挤奶前奶样进行细菌学鉴定，如确诊为传染性致病菌感染就应隔离；其次是从外地购入的奶牛，应将其视为假定感染牛，必须隔离一段时间并证实确未携带传染性致病菌，方可并入挤奶牛群。
（2） 挤奶顺序。在生产中， 很多牛场没有没有太多隔离牛舍，或者感染牛只比例较高，隔离病牛往往很难落到实处，故给牛挤奶时按头胎牛→未感染牛→感染牛的顺序进行，可有效减少传染性乳房炎的传播和扩散。
4. 环境性乳房炎的防控措施。(1) 环境性病原微生物及所致乳房炎牛群的特点。与传染性乳房炎致病菌相比，它感染的时间短，更易引起临床乳房炎；而在规模化奶牛场里，牛群传染性乳房炎已降至最低，由环境性病原微生物引起的乳房炎已成为主要病因。
(2) 防控措施。重点是改善环境和阻断乳房（尤其是乳头）与环境致病菌的接触。如使用通风良好的牛舍；保证奶牛在清洁卫生的环境中饲养或放牧；改有机垫料（如稻草特别适合乳房链球菌生长，大肠杆菌在锯末屑中更容易生存）为无机垫料（细沙等）；做好乳头药浴等等。
（3）部分环境致病菌的控制措施见表2
5. 临床乳房炎的治疗处方。处方1 ：注射用青霉素钠160 万IU、注射用链霉素100 万IU、0.9%氯化钠注射液50 ml。用法：挤尽患病乳区乳汁后一次灌注。每天2 次，连用3 ～ 5 d。说明：也可用复方磺胺嘧啶钠注射液20 ～ 30 ml 或3%环丙沙星注射液30 ～ 50ml 或菌特灵30 ml 一次灌注。
处方2 ：注射用青霉素钠80 万IU、0.5% ～ 1% 普鲁卡因注射液30 ml。用法：乳房基部封闭注射，每天1 次。
处方3 ：乌洛托品100 g、盐酸普鲁卡因5 g、碘化钾10 g、催产素100 IU、灭菌蒸镏水1 000 ml。用法：滤过灭菌，乳房分3 点封闭注射。
一次注射总量为60 ～ 100 ml。处方4 ：注射用青霉素钠480 万IU、注射用链霉素300 万IU、注射用庆大霉素20 万IU、安痛定注射液或生理盐水50 ml。用法：会阴静脉一次注射，每天2 次。
处方5 ：注射用盐酸四环素400 万IU、10% 葡萄糖酸钙注射液300 ～ 500 ml、0.25% 普鲁卡因注射液300 ml、5% 葡萄糖氯化钠注射液2 000 ～ 3 000 ml。用法：四环素溶入5% 葡萄糖氯化钠注射液中，与其余药物分别一次静脉注射。说明：必要时配合强心、缓解酸中毒等药物。最好进行药敏试验，选用高敏抗生素。
处方6 ：20% ～ 50% 鱼石脂软膏。用法：涂擦患病乳区。6. 中草药方剂。
方一：芙蓉叶500 g，研成末，加4 倍凡士林调成糊状备用。方二：金银花60 g、山甲珠30 g、当归30 g、皂角刺30 g、乳香16 g、没药16 g、蒲公英60 g，煎服。方三：黄芪60 g、穿山甲14 g、川芎16 g、白芷1 6g、当归30 g、皂角刺10 g，煎服。
方四：煅石膏60 g、硼砂12 g、朱砂6 g、冰片2 g，共研末，撒布患处。用法：初期用艾叶煎水温洗乳房，外敷方一，内服方二；脓成未溃或排出不畅，可服方三；脓已排尽，以方四撒布。
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本类论文本周排行奶牛隐性型乳房炎诊断方法的比较试验
奶牛乳房炎,根据患牛有无临床症状这一特点,一般分为临床型(Clinical)和隐性型(Subclinical)两类。前者因有明显临床症状(局部或全身的),故易于确诊;后者因乳腺病损轻微,无或不显临床症状,主要是以乳汁体细胞数增多,并伴有乳汁组成和理化性状的潜在性异常变化为特征,这时乳汁因无肉眼变化,故临床上不易发现和确诊。然而这类乳房炎在整个乳房炎病例中占有极重要的地位:发病率往往高于临床型乳房炎三倍以上,同时又易于转化为临床型乳房炎。因此,为了及时有效地控制乳房炎的发展与播散,对隐性型乳房炎的早期诊断实属必要。 关于隐性型乳房炎诊断方法,国外已有不少研究和报道。实践证明,美国Schalm,O.W.(1957)依据乳房炎时乳汁细胞数增多的原理提出的至今仍然被国际上广泛采用的加州乳房炎试验(California mastitis test,简称CMT)诊断法,方法简便、可靠,尤其适于牛舍现场检查,故特决定引进CMT方法,并通过CM...&
(本文共5页)
权威出处：
关于奶牛隐性型乳房炎的诊断方法,国内外研究报道较多,但对奶山羊隐性型乳房炎的诊断研究报道甚少。我们参照奶牛隐性型乳房炎的诊断方法,进行了奶山羊隐性型乳房炎诊断方法的比较试验,现报告如下。材料和方法(一)羊只的选择被检羊只要求临床健康,乳房和乳头无病损。所检羊以舍饲为主,间或放牧。饲料以玉米、鼓皮和青草为主。每天挤奶两次。 (二)奶样的采集采样于早晨第一次挤奶后1一2小时进行。奶样不包含初乳、末乳和一月内患过乳房炎(包括亚临床型)的羊的乳汁。取样时弃去头把奶,将第二把奶分左右乳室直接挤入洗净晾午的链霉素小瓶内(每个乳室约取奶样7一8毫升)待检。作细菌学检查的奶样,要无菌取于高压灭菌处理的小瓶内。 (三)试验方法及判定标准 1.苛性钠凝乳检验法〔1〕: (1)试剂:4%氢氧化钠溶液。 (2)方法:将无色玻璃板置于黑色衬垫上,先加被检乳汁5滴,再加试剂2滴,用细玻棒(或火柴把)迅速扩展成直径2 .5一3厘米的圆形,继续搅动20秒钟后观...&
(本文共3页)
权威出处：
奶牛隐性乳房炎是严重危害养牛业的疾病之一,世界各国均普遍存在。据国际牛奶联合会统计,患有临床症状的乳房炎牛只约占2%,而隐性乳房炎的患病率则高达50%。国内报道奶牛隐性乳房炎的患病率约为20一的%毛;‘。:病牛不仅奶产量减少,而且乳的营养价值降低,还因乳腺常感染微生物而有害于公共卫生。此外,隐性乳房炎演变为临床型乳房炎而致使高产奶牛被迫淘汰者并不罕见。 对于奶牛隐性乳房炎的诊断,国外研究持续了将近一个世纪,研制出不少快速、简便的方法。其中大部分是依据Whiteside(2939)发现的乳房炎时乳汁细胞数增多的现象设计的,也有人(M。A.Bo二oBe。、o等,1974)曾采用乳清蛋白电泳法诊断奶牛隐性乳房炎。近年来我国在这方面一也有一些研究报道。为了探求一种较为灵敏、快速、简便且适合于奶牛场现场检查的方法,我们于1984年4月采用直接显微镜体细胞计数法、改良华氏试验、双氧水试验、平板到;汁颗粒试验、澳醉香草酚蓝试验、乳汁pH值测定...&
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权威出处：
奶牛隐性乳房炎给奶牛饲养业造成的损失已越来越为人们所重视。多年来,国内外学者一直致力于研究隐性乳房炎的快速,简便的诊断方法。美国的加州乳房炎试验川自问一世以后,就为各国学者所重视,相继研究出各种衍生改良法,如本日的PL试验‘“),我国的兰州乳房炎试验(LMT)(“’,此外尚有改良华氏试验,pH值,电导率测定,乳汁中某些酶活性的测定,乳清蛋白组分变化的检测等。为了选择本地区对奶牛隐性乳房炎的简单有效的诊断方法,本着快速、适合于牛舍现场操作的原则,我们选用了乳汁体细胞计数,LMT等8种诊断方法进行了比较试验。现将试验结果报告如下。材料和方法 一、乳样来源及采集方法 乳样采自西宁奶牛场畜牧二队70头健康正常泌乳母牛的263个乳区。采乳期间,乳牛日粮由混合料、鼓皮、干麦草和玉米青贮等组成。每日挤乳三次。于下午3时第二次挤乳时采样,弃去l一2把乳,先将乳汁挤于LMT试验盘作现场检测,然后榨去10一15毫升乳汁于干燥洁净试管内待检。采取的乳...&
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前, 乳房炎是世界性的奶牛主要疾病之一,国外发病率一般在40%以上,国内约为20一60%。我省贵阳市花溪奶牛场月临床型乳房炎的发病率为22.9%。 乳房炎一般大体分为临床型和隐性型(亚临床型)两大类。隐性乳房炎无特定病原,病变轻微,不显乳房局部或全身的临床症状,仅反映出乳汁的翻化性质、组成成分改变、体细胞数增加以及泌乳减少等乳腺功能障碍,因之常因致病徽生物长期存在,而艾延到健康乳区,另一方面部分隐性乳房炎可能由于未能及时检出和控制而演发为临床型乳房炎,高产奶牛往往因此而被淘汰。 奶牛乳房炎的防治历来受到人们重视,各国都作了大t研究工作,特别是近年来在具有监测意义的隐性乳房炎的诊断技术方面有了新的进展。我们在月采用五种隐性乳房炎的间接试验法—平板乳汁凝集的全乳法(PMGT一WM)、燕姗水等t棍合法(PMGT一DM)、改良怀特舍德法( MWT)、改良加利福尼亚乳房炎试验法 (MCMT)和澳寮香草酚蓝...&
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本实验针对贵州省几个大中型奶牛场和个体养殖户，通过流行病学调查，研究奶牛临床型和隐性型乳房炎的感染情况：比较几种奶牛隐性乳房炎临床诊断方法，寻求最适于本地区的诊断方法；并对隐性型乳房炎乳汁和正常乳汁进行细菌分离鉴定、菌落计数和主要分离菌的体外药物敏感试验的研究，比较正常乳汁和隐性乳房炎乳汁分离菌的种类、数量和所占比例，探讨引起奶牛隐性乳房炎主要致病菌的类型，研究抗生素对乳房炎的主要致病菌的抑制效果，科学地指导临床用药，治疗乳房炎。随机调查310头泌乳奶牛乳房炎的感染情况，结果表明我省奶牛群中临床型乳房炎的感染率为2.26％(7／310)，隐性型乳房炎感染率为58.39％(181／310)。通过对临床常用的快速诊断方法的效果进行比较，结果表明B．T．B、N．F．T和氯化物硝酸银法与体细胞直接计数法的隐性乳房炎阳性乳区检查数符合率较低，差异性显著(P＜0.05)，而C．M．T和体细胞直接计数法的阳性符合率达到100％。以一种阴离子表...&
(本文共70页)
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