WesternBlot为什么必须要用内参？；一、背景：GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是；图示:抗GAPDH单抗（Cat＃KC-5G4）检；摘要：；要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产；内参是最容易被忽略的一项；电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需；在国外发表的文章中，WesternBlottin；在WesternBlotting
Western Blot为什么必须要用内参？
一、 背景：GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30－40kDa的亚基组成，分子量146kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。GAPDH检测。Western Blotting(检测条带大约在36kDa，稀释比例达10，000倍)、ELISA、亲和纯化、免疫荧光及免疫组化。注：因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的。在实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确；或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差需要通过测定每个样品中实际转到膜上的GAPDH的含量来进行校正，所以一般的western实验都需要进行内参设置。具体校正的方法就是将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除，得到每个样品目的蛋白的相对含量。然后才进行样品与样品之间的比较。反应：抗GAPDH单抗（clone 6C5）能够与鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应，但不能与酵母GAPDH反应。应用：GAPDH检测。Western Blotting(检测条带大约在36kDa，稀释比例达10，000倍)、ELISA、亲和纯化、免疫荧光及免疫组化。
图示:抗GAPDH单抗（Cat＃KC-5G4）检测心脏组织匀浆中的GAPDH水平。A-G分别表示不同实验来源的心脏组织匀浆。抗GAPDH单抗稀释比例为1：10，000，HRP羊抗鼠二抗（Cat＃KC-MM-1302）稀释比例为1：1000。采用SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate Kit试剂盒及X胶片曝光显影。
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦DD做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。所以，严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时，借助参照体系很容易就可以查出问题所在，而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括分子量Marker（用来确定蛋白条带对应的分子量大小），空白载体对照（如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照），已知量标准产物的正对照；另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因，国内的不少人做Western Blot往往省略参照，导致结果出现问题时无法分析结果DD即便有结果也可能影响结果的分析。
内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础。特别表达量不高时，上样量的差别就很可能影响结果的分析。所以你需要内参。内参即是内部参照（Internal Control），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样
电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
在国外发表的文章中，Western Blotting 实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是，国内仍有不少科研人员在Western Blotting实验中忽略了内参的使用，将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的唯一方法。然而各种蛋白质浓度定量方法，都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的准确蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，操作简单，但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA，Bradford，Lowry 等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford 法敏感度最高，且与一系列干扰Lowry，BCA 反应的还原剂（如DTT，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在操作误差。在Western blotting实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误差进行校正。
在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
实验结果分析其实很简单：如果样品蛋白量有限，只够进行一次电泳转膜实验时，分别检测样品的内参量和目的蛋白量。将各样品目的蛋白量分别除以其内参含量，得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量，再用此数值进行样品间的比较和分析，得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化结果。如果样品量充分，可以先检测内参，观测样品间内参显色条带是否一致，根据差异大小调整各样品的上样量重新进行Western Blotting实验，至内参量一致为止；若内参一致，即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点，但是可以保证结果更有说服力，更可信。毕竟我们的实验是一种严谨的工作。 常用的蛋白质内参有GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。最近的国外文献报道中使用GAPDH内参的较多。上海康成生物工程有限公司与国外实验室合作开发的GAPDH，100μl一支，浓度为100μg/100μl，稀释比达1：10000以上，至少可做100次Western mini-blots，价格仅为988元人民币，并且只需4℃保存运输，有效期长达两年。这一产品大大降低了内参的费用，性能稳定、质量可靠、易于保存。
在Western Blotting实验过程中，由于使用的二级抗体往往会与总蛋白中本身含有的某些免疫球蛋白产生反应产生较强信号的杂带。因此，上海康成生物工程有限公司推出了HRP标记的GAPDH，在任何情况下使用它都能够得到单一的条带结果，使得内参的使用方法更为简便准确。这种操作省时，无需二级抗体反应的HRP标记的GAPDH内参不仅具备康成生物普通GAPDH的所有优点而且结果条带单一，可避免二级抗体的非特异性反应。售价为1498元人民币100μl，稀释比达1：10000以上，至少可做100次Western mini-blots。
图示: A-G分别表示不同实验小鼠心脏蛋白（上样量50ug），兔抗小鼠Akt抗体（康成生物Cat＃KC-5A01）检测心脏组织匀浆中Akt水平。加入兔二抗（康成生物Cat＃KC-RB-035，稀释比例为1：5，000）时同时加入HRP标记的抗GAPDH单抗（稀释比例为1：10，000，康成生物Cat＃KC-5G5）。采用化学发光试剂盒（康成生物Cat＃KC-420）及X胶片曝光显影。一次反应即可同时检测目的蛋白（Akt）与内参GAPDH的含量。
目前，市场上供应的其他内参则均需要-20℃保存，干冰运输：Sigma公司的Anti-β-Actin， 价格为241美元200μl，可做100次左右的Western mini-blots。Labvision的β-Actin 399美元1ml， 可做50到100次Western mini- 209美元0.5ml，可做25到50次Western mini-blots。Cell Signaling Technology的BETA-ACTIN ANTIBODY 只可做10次 Western mini-blots，美金价为150美元，人民币售价为1875元。
附：在Western Blotting实验过程中使用内参的方法有：
一、 超级简便的标记内参使用法：只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可。
二、普通内参：当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测。然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。
三、当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。
二、 要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦DD做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作
为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。所以，严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时，借助参照体系很容易就可以查出问题所在，而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括分子量Marker（用来确定蛋白条带对应的分子量大小）、空白载体对照（如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照）、已知量标准产物的正对照，另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因，国内的不少人做Western Blot往往省略参照，导致结果出现问题时无法分析结果，即便有结果也可能影响结果的分析。
内参即是内部参照（Internal Control），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
实际上内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础，特别表达量不高时，上样量的差别就很可能影响结果的分析，所以需要内参。在国外发表的文章中，Western Blotting 实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是，国内仍有不少科研人员在Western Blotting实验中忽略了内参的使用，将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的唯一方法。
然而各种蛋白质浓度定量方法，都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，操作简单，但是容易受到平行物质如DNA的干扰，且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA、Bradford、Lowry 等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford法敏感度最高，且与一系列干扰Lowry、BCA 反应的还原剂（如DTT，巯基乙醇）相容，但是对去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的
标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在操作误差。在Western blotting实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误差进行校正。
在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
在Western Blotting实验过程中使用内参的方法通常有一下三种。第一种是超级简便的标记内参使用法，只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可；第二种是普通内参，当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测，然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。第三种，当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开，然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。
常用的蛋白质内参有GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。因此你要知道你检测的蛋白的分子量来选择合适的内参！
actin即肌动蛋白，是细胞的一种重要骨架蛋白。actin大致可分为六种，其中四种是不同肌肉组织特异性的，包括alpha-skeletal muscle actin、 alpha-cardiac muscle actin、alpha-smooth muscle actin和gamma-smooth muscle actin，其余两种广泛分布于各种组织中，包括beta-actin(β-non-muscle)和
gamma-non-muscle actin。这些不同的亚型组织分布是不一样的，在肌肉组织中的beta-actin分布就很少，心肌主要是alpha-cardiac muscle actin。因此不同的组织本来就应该选择不同的内参，不能一概而论的。beta-actin作为内参是得到了公认的，这是针对大多数组织和细胞来说的，它广泛分布于细胞浆内，表达量非常丰富。尽管最近有一些文章已经开始质疑beta-actin作为内参的有效性
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上面那种包装叫做泡罩，背面是铝箔，正面是PVC塑料，但塑料本身有几个缺点，一个是透光，一个是透水气，如果是对光、对水分敏感的药物的话，用泡罩显然是不合理的，不能保证货架期中药品的稳定性与质量。 下面那种叫双铝，正反两面都是复合膜，最内层一般是…
吸血鬼全身都是宝，肉可食，皮可缝制成衣，靴、袋等，吸血鬼头可加工成工艺品，毛发可制作成弹扫灰尘的扫帚，吸血鬼鞭则是一道壮阳药，因其常年吸食鲜血，矿物质养份丰富，其肉鲜美无比，杀后可炒红烧、清沌或凉晒成肉干等，其味独特，吃吸备鬼肉在中原，实在是一种奢华享受，吸血鬼肉干是馈赠亲朋好友的礼品。
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首先你要了解你们实验室的方向和经常发表的杂志，然后，顺着这条线，从顶级杂志到一般杂志，有个十种左右就足够了，每天看他们最新接受或者发表的文章，坚持看一个月，不用查新都知道自己的想法新不新了。&br&&br&再一个，谨记“日光之下，并无新事”。在前面的基础上，你们的想法不会差了的，有了想法就抓紧做出文章来，然后你们就有立足点了，以后沿着做什么都没问题。
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我觉得BBC的这个节目也涉及了针对运动量的讨论，我把我在其它问题下的答案转过来： 对于喜欢经常看看文献的我来说（多么变态的爱好啊~~），最近看到的美国医学会杂志（JAMA ）刊登的一篇Viewpoint（
统计学中30是大样本和小样本的分界线。30属于大样本。
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找来找去也没找到公开披露的国内药企研发支出数据，勉强找到下表：&br&&a href=&///?target=http%3A///yxy/new/news/show/%3Fid%3D472& class=& wrap external& target=&_blank& rel=&nofollow noreferrer&&【研发】2013年国内药企新药注册申报前100名&i class=&icon-external&&&/i&&/a&&br&&p&&b&研发】&/b&&b&2013&/b&&b&年国内药企新药注册申报前&/b&&b&100&/b&&b&名&/b&&/p&&p&1&/p&&p&江苏恒瑞医药股份有限公司
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&/p&&p&16&/p&&p&22&/p&&p&山东京卫制药有限公司
&/p&&p&16&/p&&p&23&/p&&p&宜昌人福药业公司
&/p&&p&15&/p&&p&24&/p&&p&江西施美制药有限公司
&/p&&p&15&/p&&p&25&/p&&p&江苏奥赛康药业股份有限公司
&/p&&p&15&/p&&p&26&/p&&p&四川百利药业有限责任公司
&/p&&p&14&/p&&p&27&/p&&p&浙江金华康恩贝生物制药有限公司&/p&&p&13&/p&&p&28&/p&&p&天津药物研究院
&/p&&p&13&/p&&p&29&/p&&p&北京万生药业有限责任公司
&/p&&p&13&/p&&p&30&/p&&p&北京韩美药品有限公司
&/p&&p&13&/p&&p&31&/p&&p&山东裕欣药业有限公司
&/p&&p&13&/p&&p&32&/p&&p&天津市汉康医药生物技术有限公司&/p&&p&13&/p&&p&33&/p&&p&南京柯菲平盛辉制药有限公司
&/p&&p&13&/p&&p&34&/p&&p&广州艾格生物科技有限公司
&/p&&p&12&/p&&p&35&/p&&p&浙江九洲药业股份有限公司
&/p&&p&12&/p&&p&36&/p&&p&江苏先声药业有限公司
&/p&&p&12&/p&&p&37&/p&&p&江西青峰药业有限公司
&/p&&p&12&/p&&p&38&/p&&p&山东绿叶制药有限公司
&/p&&p&12&/p&&p&39&/p&&p&安徽安科恒益药业有限公司
&/p&&p&12&/p&&p&40&/p&&p&合肥合源药业有限公司
&/p&&p&12&/p&&p&41&/p&&p&北京华素制药股份有限公司
&/p&&p&11&/p&&p&42&/p&&p&石家庄四药有限公司
&/p&&p&11&/p&&p&43&/p&&p&兆科药业（合肥）有限公司
&/p&&p&11&/p&&p&44&/p&&p&齐鲁安替（临邑）制药有限公司
&/p&&p&11&/p&&p&45&/p&&p&重庆华邦胜凯制药有限公司
&/p&&p&10&/p&&p&46&/p&&p&四川科伦药业股份有限公司
&/p&&p&10&/p&&p&47&/p&&p&四川科伦药物研究院有限公司
&/p&&p&10&/p&&p&48&/p&&p&西安新通药物研究有限公司
&/p&&p&10&/p&&p&49&/p&&p&江苏济川制药有限公司
&/p&&p&10&/p&&p&50&/p&&p&北京福瑞康正医药技术研究所
&/p&&p&9&/p&&p&51&/p&&p&重庆医药工业研究院有限责任公司
&/p&&p&9&/p&&p&52&/p&&p&南京正大天晴制药有限公司 &/p&&p&9&/p&&p&53&/p&&p&珠海联邦制药股份有限公司 &/p&&p&9&/p&&p&54&/p&&p&南京先声东元制药有限公司 &/p&&p&9&/p&&p&55&/p&&p&北京天坛生物制品股份有限公司 &/p&&p&9&/p&&p&56&/p&&p&成都苑东药业有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&57&/p&&p&武汉药谷生物工程有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&58&/p&&p&江苏恩华药业股份有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&59&/p&&p&石家庄创建医药科技有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&60&/p&&p&深圳致君制药有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&61&/p&&p&山东轩竹医药科技有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&62&/p&&p&辽宁亿灵科创生物医药科技有限公司&/p&&p&8&/p&&p&63&/p&&p&齐鲁制药（海南）有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&64&/p&&p&河南天方药业股份有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&65&/p&&p&悦康药业集团有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&66&/p&&p&湖南明瑞制药有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&67&/p&&p&北京科莱博医药开发有限责任公司 &/p&&p&8&/p&&p&68&/p&&p&南京艾德凯腾生物医药有限责任公司 &/p&&p&8&/p&&p&69&/p&&p&中国中医科学院中药研究所 &/p&&p&8&/p&&p&70&/p&&p&湖南方盛制药股份有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&71&/p&&p&南京优科制药有限公司 &/p&&p&8&/p&&p&72&/p&&p&合肥拓锐生物科技有限公司 &/p&&p&7&/p&&p&73&/p&&p&浙江医药股份有限公司新昌制药厂 &/p&&p&7&/p&&p&74&/p&&p&内蒙古白医制药股份有限公司 &/p&&p&7&/p&&p&75&/p&&p&山西普德药业股份有限公司 &/p&&p&7&/p&&p&76&/p&&p&解放军军事医学科学院毒物药物研究所 &/p&&p&7&/p&&p&77&/p&&p&山东鲁抗医药股份有限公司 &/p&&p&7&/p&&p&78&/p&&p&合肥科大生物技术有限公司&/p&&p&7&/p&&p&79&/p&&p&珠海联邦制药股份有限公司中山分公司 &/p&&p&7&/p&&p&80&/p&&p&陕西步长制药有限公司 &/p&&p&7&/p&&p&81&/p&&p&石药集团欧意药业有限公司 &/p&&p&7&/p&&p&82&/p&&p&海南美兰史克制药有限公司 &/p&&p&7&/p&&p&83&/p&&p&北京悦康凯悦制药有限公司 &/p&&p&7&/p&&p&84&/p&&p&深圳万乐药业有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&85&/p&&p&北京博时安泰科技发展有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&86&/p&&p&河南福森药业有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&87&/p&&p&浙江京新药业股份有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&88&/p&&p&华兰生物工程重庆有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&89&/p&&p&科贝源（北京）生物医药科技有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&90&/p&&p&重庆莱美药业股份有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&91&/p&&p&瑞阳制药有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&92&/p&&p&江苏万特制药有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&93&/p&&p&山东方明药业集团股份有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&94&/p&&p&北京润德康医药技术有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&95&/p&&p&安徽省新星药物开发有限责任公司 &/p&&p&6&/p&&p&96&/p&&p&广东东阳光药业有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&97&/p&&p&辰欣药业股份有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&98&/p&&p&四川科泽药物研究有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&99&/p&&p&北京德众万全药物技术开发有限公司 &/p&&p&6&/p&&p&100&/p&&p&江苏万邦生化医药股份有限公司 &/p&&p&6&/p&&br&&br&新药注册申报的越多，从一个侧面能反映该企业在新药研发上的投入应该也比较多。根据&a href=&///?target=http%3A///rolling//t7409.shtml& class=& wrap external& target=&_blank& rel=&nofollow noreferrer&&医药企业研发之困 _中国经济网――国家经济门户&i class=&icon-external&&&/i&&/a& 的说法（国内新闻互相抄来抄去，也不知道信息源是谁）：&br&&blockquote&国内研发型的标杆企业恒瑞每年将10%左右的收入投入研发中，但如果算绝对数额，仅有区区5亿元左右。&/blockquote&另附 &strong&2013年医药工业企业利润百强榜&/strong& ←←←←← &em&(对不起我是假链接，网上随手一搜百强榜太多了，我也不知道谁权威谁不权威 T_T)，&/em& 总之不是新药申报排名第一的江苏恒瑞。所以说谁前景更好，这很难说。主要还得看新药申报的治疗领域。&br&药明康德确实不错，不过严格意义上来说它不是一家药企，而是面向药企或生物技术公司提供制药、生物技术以及医疗器械研发外包服务的公司。&br&最后附一张跨国药企2013的研发支出排行榜，了解一下国内药企的差距。&br&&img src=&/ac8cbaf0ebc0f08ba7367e_b.jpg& data-rawwidth=&728& data-rawheight=&585& class=&origin_image zh-lightbox-thumb& width=&728& data-original=&/ac8cbaf0ebc0f08ba7367e_r.jpg&&
找来找去也没找到公开披露的国内药企研发支出数据，勉强找到下表：
研发】2013年国内药企新药注册申报前100名1江苏恒瑞医药股份有限公司 982江苏豪森药业股份有限公司 523南京华威医药科技开发有限公司 524齐鲁…
&img data-rawheight=&307& data-rawwidth=&500& src=&/cf534ffdf98c2bfcb0f1cf991d4de22e_b.jpg& class=&origin_image zh-lightbox-thumb& width=&500& data-original=&/cf534ffdf98c2bfcb0f1cf991d4de22e_r.jpg&&
反对楼上高票答案。&br&凭什么呀！学生物本科不能做研发了！现放着一堆CRO人手不足的呢！你要做上游做下游做分析随你挑~&br&化药能前沿，那是因为化药的前沿已经推不动了。小分子也就这样了~没前途，不靠谱，最后一定会变成卖仪器的。生物药可玩儿的多去了，单抗完了有融合蛋白，融合蛋白搞定了还有双抗，哪个不前沿啊！&br&不过现实点：制药这行没学历就没有话语权，本科毕业起步低晋升累，化药生物药都一样。&br&&br&利益相关：CRO生物制药员工
反对楼上高票答案。 凭什么呀！学生物本科不能做研发了！现放着一堆CRO人手不足的呢！你要做上游做下游做分析随你挑~ 化药能前沿，那是因为化药的前沿已经推不动了。小分子也就这样了~没前途，不靠谱，最后一定会变成卖仪器的。生物药可玩儿的多去了，单抗…
上面的帖子列的药企已经比较详细，不过针对的都是已有产品上市多年的成熟药企，在这个群体里，我看好恒瑞，齐鲁，丽珠（单抗）。绿叶也还行，今年有个505（b）2，虽然我觉得在美国没啥太大商业意义。不多解释。&br&&br&另外还有一些新兴药企值得注意，信达生物，去年和礼来签了两个合作协议，刷爆朋友圈；百济神州，手头有多个创新药在研，已在纳斯达克成功上市；再鼎；君实，已有PD-1批了临床；
上面的帖子列的药企已经比较详细，不过针对的都是已有产品上市多年的成熟药企，在这个群体里，我看好恒瑞，齐鲁，丽珠（单抗）。绿叶也还行，今年有个505（b）2，虽然我觉得在美国没啥太大商业意义。不多解释。 另外还有一些新兴药企值得注意，信达生物，去…
前面几位都已经回答的很完整了。我也来说几句。&br&制药业是一个高投入、高风险的行业。不要以为药卖得贵就觉得药厂很赚钱，开发一个新药是需要大量资源投入的，尤其是一类新药，没个几千万甚至上亿资金投入是玩不转的，而且还不见得辛辛苦苦研发出来的化合物都能成为合格的药物，安全性、有效性都是槛啊；药品生产企业的日常运转也需要大量资源投入的，尤其无菌制剂，它的安全性、有效性全靠车间环境、设备来保证的，空调系统、水系统……车间开一天就是上万的费用，遇上点突发情况甚至停电都可能导致一批产品的报废，作为有责任的药企是不会让有风险的药品上市的，只能销毁。&br&制药业还关系到生命安全，一支有质量缺陷的药品就是一条人命啊，大家有空可以看下FDA百年这本书，GMP的每一步的发展都是有血的教训在背后的。&br&&br&进入制药行业，如果仅是一线工人的话，要求还是比较低的，具有一定的文化程序，经过系统的培训与考核就可以上岗；如果是管理人员，就有学历、专业、经验的要求了，高层领导的资质已经写入GMP条款了，已经作为法规明文规定了。营销人员（如医药代表），如果你想做好，你就必须比医生更懂你这个药品的治疗领域。
前面几位都已经回答的很完整了。我也来说几句。 制药业是一个高投入、高风险的行业。不要以为药卖得贵就觉得药厂很赚钱，开发一个新药是需要大量资源投入的，尤其是一类新药，没个几千万甚至上亿资金投入是玩不转的，而且还不见得辛辛苦苦研发出来的化合物…
糖衣是包衣的一种，包衣分为薄膜衣，糖衣。包衣一般是指在片剂的外表面均匀地包裹上一定厚度的衣膜。&br&&br&包衣的主要作用是为了达到以下几点目的：&br&&br&1.控制在胃肠道的释放部位，例如：在胃酸，胃酶中不稳定的药物，可以制成肠溶衣片，让药物到小肠这个部位才释放出来。避免胃酸，胃酶对药物的破坏，灭活。&br&&br&2.控制药物在胃肠道中的释放速度。有利于半衰期短的药物，可以达到缓释，控释，长效的目的。&br&&br&3.掩盖苦味或不良气味，例如：黄连素入口后很苦，包成糖衣片后，方便服用。&br&&br&4.防潮，避光，隔离空气，增加药物的稳定性。有的药物容易氧化，或者见光易分解，降解。&br&&br&5.防止药物的配伍变化，可把两种药物分别制粒，包衣，再进行压片。最大限度避免二者的直接接触。&br&&br&6.改善片剂的外观。&br&&br&薄膜衣，可分为胃溶型，肠溶性，水不溶型。水不溶型高分子薄膜衣材料，主要用于缓释控释制剂。了解为什么生产工艺中需要给片剂加包衣，这样的思维比较好。
糖衣是包衣的一种，包衣分为薄膜衣，糖衣。包衣一般是指在片剂的外表面均匀地包裹上一定厚度的衣膜。 包衣的主要作用是为了达到以下几点目的： 1.控制在胃肠道的释放部位，例如：在胃酸，胃酶中不稳定的药物，可以制成肠溶衣片，让药物到小肠这个部位才释放…
这样说,一般而言,药品上市前是偶非常严格的审批的,上市后的生产是要严格按照操作程序(专业将是GMP)来生产的,因此应该说大多数药物都是合格的.&br&但是最近几年药害事件层出不穷,很多百年老厂都牵涉其中.同时国内仿制药与国外原药相比,其纯度和有效性上是略逊一筹的.但这并不意味着仿制药的质量有问题,因为纯度的是一个区限,往往仿制药在上限,而原药是在下限.总体而言,不能算是质量问题,但是疗效确实是有差别.&br&哪些厂家可靠,这个实在是太多了,即使今天说了它可靠,有很好声誉,明天依然会被曝出有问题.国人不遵守规则是很常见的事情.同时,如果对于患者而言,推荐的厂家未必就能够覆盖他所用药的生产厂家.从我个人而言,我是看以下几点的:&br&1. 国内可以买到进口药或者原药(即国际药厂生产的药品)就使用进口药或原药,其所付出的代价是今天(可能是好几十倍),但是也要衡量,如果只是维生素C这类无伤大雅的药品,用哪一家其实都无所谓,但是事关严重的,比如抗生素/止痛药/抗高血压等,我尽量使用进口药或原药.&br&2. 尽量了解哪些厂家是做进口药分包装的.有些厂商是和国内的代理厂商签订协议,运送了很多药物过来,但是没有包装,在国内厂家这边按照剂量分包装,那么这样的厂家也是可信度很高的,毕竟不是在他自己那里生产的,比如华瑞专门做国外营养制剂的分包装等等.不过这样的还是很少的&br&3.尽量选择专门类别很强的厂家.比如我亲属有糖尿病的,需要胰岛素什么的我会推荐诺和诺德.&br&4.看产地,现在制药的主要区域是江浙沪,一些天津的药厂等等都是做中药起家的，不知名的，觉得可信度不高（纯属自己的个人倾向！！）&br&5. 看一下这个厂家主打是什么。这个包含两点，比如感冒药我比较倾向于使用强生或中美史克的，另外的话，就是如果这个厂家主打是补品或中药品，但你想买西药，那还是考虑下换个厂家吧，比如之前毒胶囊事件中的修正药业，可以看看他的主打品牌都是以中药为主的一些药品，还有很多补品，这样的厂家主要利润可能来自于这块市场，对于一些其他化学药品可能重视度不够，会出问题的~&br&以上五点绝对不是理性的事实，这是个人在生活中的选择倾向性，代表个人观点，不代表事实，事实就是很多厂家是不敢出事的，出事就是大事 ，谁都不敢拿自己的命开玩笑，患者是、医生是、厂家也是。可能有人说三鹿奶粉也没有赔啊，可是你知道，三鹿奶粉是食品，只是出现了大头娃娃，不是所有吃了奶粉的孩子往生了，而药品一出现问题很有可能就是患者大部分死亡的事实。这个罪过不是相提并论的。&br&啰嗦这么多，不知道解决没有~博后来者一笑吧~感谢邀请
这样说,一般而言,药品上市前是偶非常严格的审批的,上市后的生产是要严格按照操作程序(专业将是GMP)来生产的,因此应该说大多数药物都是合格的. 但是最近几年药害事件层出不穷,很多百年老厂都牵涉其中.同时国内仿制药与国外原药相比,其纯度和有效性上是略逊一…
酒和头孢的双硫仑样反应。
酒和头孢的双硫仑样反应。
研究机构主要分为政府直属、企业研发部门、高校实验室、非营利性独立研究所四大部分。政府直属的研究所当然包括NIH（美国国立卫生研究院）的NCI等；非营利性独立研究所首推CSHL（冷泉港），还有HHMI、TSRI，全是美国的。高校方面有很多，不过许多是与企业合作的，而且企业通过上市产品可以更直观地显示其生物制药技术，所以这里主要讲讲走在前头的企业抗肿瘤研究所。最大热门的抗肿瘤抗体药物的领头企业主要分布在美国跟德国，日本英国也不甘落后（主要是世界十大药企）；而疫苗药物主要由美国企业研发。酶类药物虽然主要定向于遗传病和消炎等等，抗肿瘤方面也不可忽视，最大的企业是丹麦的诺维信，其次是美国的杰能科跟德国的AB酶。发酵工程制药领域目前仅限于生产紫杉醇和某些抗癌抗生素，前者研究机构在美国，后者的最大研究部门是荷兰帝斯曼公司。动物细胞制药和植物工程制药尚显稚嫩，不提也罢。
研究机构主要分为政府直属、企业研发部门、高校实验室、非营利性独立研究所四大部分。政府直属的研究所当然包括NIH（美国国立卫生研究院）的NCI等；非营利性独立研究所首推CSHL（冷泉港），还有HHMI、TSRI，全是美国的。高校方面有很多，不过许多是与企业合…
就我所知至少默沙东是有的。但是这个研发和一般理解的lab work不同，并不是做实验室工作，而更多是临床方面和提交FDA等相关工作，也是研发的一部分。在这意义上说，强生，赛诺菲，诺华等许多药企都有类似或相同的function group
就我所知至少默沙东是有的。但是这个研发和一般理解的lab work不同，并不是做实验室工作，而更多是临床方面和提交FDA等相关工作，也是研发的一部分。在这意义上说，强生，赛诺菲，诺华等许多药企都有类似或相同的function group
看来回答的没有一个做药的。我来回答一下吧，这在做药里面是大家都已熟知的规则。&br&具体可参见《2007版药品注册管理办法》关于新药监测期的规定。&br&其中：&br&第六十六条　国家食品药品监督管理局根据保护公众健康的要求，可以对批准生产的新药品种设立监测期。监测期自新药批准生产之日起计算，最长不得超过5年。&br&　　监测期内的新药，国家食品药品监督管理局不批准其他企业生产、改变剂型和进口。&br&第七十二条　进口药品注册申请首先获得批准后，已经批准境内申请人进行临床试验的，可以按照药品注册申报与审批程序继续办理其申请，符合规定的，国家食品药品监督管理局批准其进行生产；申请人也可以撤回该项申请，重新提出仿制药申请。对已经受理但尚未批准进行药物临床试验的其他同品种申请予以退回，申请人可以提出仿制药申请。&br&&br&生产批件下达后，进入监测期，一般3~5年，既是通常讲的关门，此期间不再受理其他仿制药申请，原来提交的临床申请还未批准的撤回，这对药物企业来说，就形成了3~5年的市场独占期，是非常有利的，如果象立普妥这种药，一年就是100多亿美元的销售额，这对药企研发的鼓励是极大的。所以有了象上面说的报批公司的出现，有临床批件在手，药企也舍得花钱去买。
看来回答的没有一个做药的。我来回答一下吧，这在做药里面是大家都已熟知的规则。 具体可参见《2007版药品注册管理办法》关于新药监测期的规定。 其中： 第六十六条 国家食品药品监督管理局根据保护公众健康的要求，可以对批准生产的新药品种设立监测期。监…
那样就会有很多选手吸毒成瘾；因为服用了神经破坏性药物而成为残疾人；以生命为代价获得冠军后就中毒身亡。&br&全世界将会新生一些毒品制造公司，&br&奥运会将不是以人的体能为提高对象的运动会，而是以药品药性为提高对象的药品实验场。&br&奖牌榜上将不是以选手或者国别列出，而是以各种毒品的品牌来列出。&br&厂家会用奥运会来为他们的毒品做广告，把毒品卖给最容易跟潮流的青少年。&br&吸毒最终必须合法化，全世界将以将牌榜为参考，选择排名&b&更高&/b&，起效&b&更快，&/b&药性&b&更强&/b&的毒品，吸毒成风。&br&…………………………
那样就会有很多选手吸毒成瘾；因为服用了神经破坏性药物而成为残疾人；以生命为代价获得冠军后就中毒身亡。 全世界将会新生一些毒品制造公司， 奥运会将不是以人的体能为提高对象的运动会，而是以药品药性为提高对象的药品实验场。 奖牌榜上将不是以选手或…
药品的颜色绝大多数是药物的原色。西药的片剂多为白色；少数为黄色、橙黄色（如维生素类、黄连素等）及其他原色；也有少数是人工添加色素染色，如非那根止咳糖浆、含碘喉片染成淡红色，这是为了提醒患者不可随意多用；外用消毒的氯化高汞片因剧毒而染成深红色，以示警惕不得内服。中药则一般均为棕黄色，这也是中草药浓缩、提取后的基本原色。&br&　　至于包衣片、胶囊外壳的着色，并无统一规定，带有一定的商业色彩，仅代表产品的个性化特征，一种药品几家药厂生产，外观颜色往往不同。小亮所服的药片之所以有两种颜色正由于是不同厂家生产的。糖浆、口服液的颜色，只是药厂或医院的习惯做法而已，尤其是某些供儿童服用的制剂，有浅黄、桔黄、淡绿、玫瑰红等颜色，目的是为了取悦小患者，能产生一定的心理效应，以减少儿童对服药的畏惧感。
药品的颜色绝大多数是药物的原色。西药的片剂多为白色；少数为黄色、橙黄色（如维生素类、黄连素等）及其他原色；也有少数是人工添加色素染色，如非那根止咳糖浆、含碘喉片染成淡红色，这是为了提醒患者不可随意多用；外用消毒的氯化高汞片因剧毒而染成深红…
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