是重链Vh和轻链Vl区,有三个氨基酸组成和排列顺序高度可变的区域,这3个CDR 共同组成了抗体与抗原结合位
AOI圣诞1555
错误的.正确的描述应该是重链Vh和轻链Vl区,各有三个区域的氨基酸组成和排列顺序高度可变的区域,这3个CDR 共同组成了抗体与抗原结合位.注意是三个区域的氨基酸而不是三个氨基酸.事实上：Vh的三个高变区域分别位于29-31、49-58、95-102位的氨基酸
Vl的三个高变区域分别位于28-35、49-56、91-98位的氨基酸参考：《医学免疫学》
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病毒的高变区和保守区通常都有什么特征？它们的突变机制是什么？有什么功能上的意义？
敝人兽医学生，微生物上要给大家讲一个短课，作为期中作业，希望各位达人给予帮助。各位达人如果时间来不及也可以给我推荐资料，希望内容能够精炼些。敝人不懂英语，劳烦各位了。不求深入，只求相对全面些。病毒的高变区和保守区通常都有什么特征？高变区和保守区通常是编码区还是非编码区？高变区/保守区编码的氨基酸序列有什么特殊性吗？比如说高变区存在是不是因为使复制/逆转录酶复制更容易出错？还是高变区的碱基组成有特别的地方？是不是因为特殊结构所以容易结合宿主/外源微生物的dna，类似于转座子？它们的突变机制是什么？它们在功能上的意义是什么？我仅仅找到了一例，丙肝的hvr1高变区有利于避免抗体的中和反应。保守区和高变区还有其他在功能上的意义么？在这里先谢谢各位达人了。
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如何正确扩增抗体可变区-scfv！请有经验的人走过分享一下啊！急~！求~！
最近在做单链抗体，结果制备的蛋白没有体现单克隆杂交瘤细胞的结合特性，现急求各位有经验的人分析一下！我的方法简述一下：
a。单克隆杂交瘤细胞株（75cm2长期培养）提总rna（未纯化mRNA，必要吗？）直接反转录cDNA，根据细胞株的亚型订购了简并引物VH/VL各一对（IgG1, lambda）进行扩增，挑单克隆（仅一个）测序。
b。根据序列设计含酶切位点和Linker的引物，重叠延伸pcr获得VH-(G4S)3-VL。转化到pet22b/pet29a-BL21(DE3)/Transetta(DE3)中进行表达，同时设昆虫表达。
c。结果做出来的对OVA, BSA有交叉，对小分子ELISA检测特异性不好，是不是我扩增的序列有问题呢？？但是我同时做用相同的方法扩增另一个（IgG1,Kappa），pet29a载体不含信号肽表达出来的蛋白还是能体现一点抑制的，但是亲和力比Mab就差40倍了。:rol:这是什么原因呢，难道我根本没有提取纯化到可溶的真正有活性的蛋白？
PS:另有一些个人疑惑的地方，大家多交流提出看法啊！1. 引物设计的时候前导序列、FR区、恒定区，那个部分的更好呢？下面是我参考文献订购的引物。
2. 单克隆细胞扩增出来的结果会只有一种VH和一种VL吗？为什么书上和文章中很多人要用一套引物去扩增呢，这样的结果应该是多种吧，是一定需要噬菌体展示么？不然如何确定哪个是我的目的序列呢？
3. 关于选用合适的表达载体以更好的获得可溶有活性的蛋白，选择上有什么需要注意的？
4. 一般文章中看到的多数都是提取周质蛋白，用到所谓的渗透休克，有人知道具体怎么做吗？原核表达手册上用到了EDTA，用镍柱的话很难后续纯化吧！胞质的可以吗？
5．:work:其实，归根结底最核心的问题是想请教大家，如何能更可靠、有效扩增出抗体的可变区最终获得有活性的蛋白呢？
Mouse heavy chain constant region primers: IgG1: ‘5 - ATA GAC AGA TGG GGG TGT CGT TTT GGC-3’
Mouse heavy chain FR1 region high degeneracy primers: 5' SAR GTN MAG CTG SAG SAG 3'
Mouse kappa chain constant region primer:&&Kc: 5' - GGA TAC AGT TGG TGC AGC ATC-3'
Mouse kappa chain FR1 region universal degenerate primer: Mk: 5' GAY ATT GTG MTS ACM CAR WCT MCA-3'
lambda back-sense：CAGGCTGTTGTGACTCAGGAATCTG
lambda for-reverse: TAGGACAGWGAGCTTTGTTCCACC
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孩子免疫球蛋白a低于正常值怎么办
09-02-23 &匿名提问
这是补体系统中含量最多、最重要的一个组分，它是补体两条主要激活途径的中心环节，有着重要的生物学功能，因此对免疫球蛋白的研究日趋重视。降低：主要见于免疫复合物引起的肾炎、系统性红斑狼疮、反复性感染、皮疹、肝炎、肝硬化、关节疼痛等。增高：见于各种传染病及组织损伤和急性炎症，肝癌等。免疫缺陷可能是先天性的，也可以是后天获得性的。虽然少见，却已发现70多种先天免疫缺陷疾病。某些疾病中，白细胞数目减少；另一些疾病中，数目正常但功能异常。还有一些疾病，白细胞未受影响，但免疫系统其他组成部分异常或缺失。大多数婴儿每年要患6次或更多的轻度呼吸道感染，特别是他经常与其他孩子接触。而婴儿常常发生严重的细菌感染，病程迁延、反复发生，可引起并发症。如在婴儿咽痛和感冒后，可出现鼻窦炎、慢性耳部感染和慢性支气管炎。支气管炎可发展成肺炎。口、眼和生殖器的皮肤和粘膜易受感染。鹅口疮是一种口腔真菌感染，出现口腔溃疡和牙龈炎，是免疫损害的早期征象。结膜炎、脱发、严重湿疹以及皮下毛细血管扩张、破裂也可能是免疫缺陷的征象。胃肠道感染可导致腹泻、胀气和体重下降。后天发生的免疫缺陷(获得性免疫缺陷)通常由疾病引起。较先天性免疫缺陷更常见。某些疾病仅引起免疫系统很小的损害，而另一些可能破坏机体抵御感染的能力。众所周知，人类免疫缺陷病毒(HIV)感染后可患获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)(见第187节)。病毒打击和破坏通常抵抗病毒和真菌感染的白细胞。许多不同情况都可损害免疫系统。实际上，几乎每种长期严重疾病都不同程度影响免疫系统。口、眼和生殖器的皮肤和粘膜易受感染。鹅口疮是一种口腔真菌感染，出现口腔溃疡和牙龈炎，是免疫损害的早期征象。结膜炎、脱发、严重湿疹以及皮下毛细血管扩张、破裂也可能是免疫缺陷的征象。胃肠道感染可导致腹泻、胀气和体重下降。. 诊断免疫缺陷疾病患者应保持充足的营养、良好的个人卫生，以及避免吃未煮熟的食物和接触感染疾病患者。有些人必须饮用瓶装水，应戒烟，避免被动吸烟和使用违禁药物。特别注意口腔保健，预防口腔感染。能产生抗体的人可以接种疫苗，但对B淋巴细胞或T淋巴细胞缺乏的人只能用灭活的病毒、细菌疫苗，而不能接种活疫苗 (如口服脊髓灰质炎疫苗，麻疹、流行性腮腺炎、风疹和卡介苗)。明确免疫缺陷疾病的准确类型需要实验室检查，通常作血液检查。首先，确定白细胞总数及分类计数；在显微镜下查白细胞形态有无异常；检查免疫球蛋白水平，红细胞及血小板计数有否偏低同时也要检查补体水平。依照报告看来,你的免疫球蛋白偏低了一点,不过还不会导致严重感染.只要少去公共场所,尽量不食冰淇淋(有菌)和生食,避免感染流感和肠胃炎.有须要可以打预防针
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免疫球蛋白目录 概述 注射免疫球蛋白不是万能的 免疫球蛋白的结构 血清中主要免疫球蛋白的作用 运动强度对免疫球蛋白的影响 乙型肝炎免疫球蛋白
　　 Ig[编辑本段]概述　　具有抗体活性的动物蛋白,是由淋巴细胞（B细胞）产生的一种糖蛋白。主要存在于血浆中，也见于其他体液、组织和一些分泌液中。人血浆内的免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白（γ-球蛋白）中。可分为五类，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE），IgG，IgA和IgM还有亚类。IgG，IgD，IgE均为单体，分泌液中IgA（SIgA）是双体，IgM是五聚体。其中IgG是最主要的免疫球蛋白，约占人血浆丙种球蛋白的70%，分子量约15万，含糖2～3%。尽管免疫球蛋白千变万化，但都有类似的结构。抗体分子是由两对长短不同的多肽链所组成，四条链通过链间二硫键构成Y型基本结构（H2L2）。IgG分子由4条肽链组成。其中分子量为2.5万（23kD）的肽链，称轻链（L链），分子量为5万的肽链（50～60kD），称重链（H链）。轻链与重链之间通过二硫键（—S—S—）相连接。　　H和L链上都有可变区，同类重链和同型轻链的近N端约110个氨基酸序列的变化很大，其他部分的氨基酸序列相对恒定，据此可将轻链和重链区分为可变区(V)和恒定区(C)。VH和VI。各有3个区域的氨基酸组成和排列顺序高度变化，称为高变区(HVR)或互补决定区(CDR)，分别为CDRl、CDR2和CDR3。CDR以外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化，称为骨架区(FR)。VH和VI。各有113和107个氨基酸残基，组成4个FR(分别为FRl、FR2、FR3和FR4)和3个CDRs。VH和VI-中的各氨基酸可编号，一些保守的氨基酸都有其固定的编号位置，将不同序列和已编号的序列进行对比以后，在某个位置上多出来氨基酸编号为A、B、C等，如27A、27B、27C、106A等。VH和VL的3个CDR共同组成Ig的抗原结合部位，识别及结合抗原，并决定抗体识别的特异性。　　免疫球蛋白轻、重链可变区氨基酸顺序的编号　　重链和轻链的C区分别称为CH和CL，不同型别(x或入)CI。的长度基本一致．但不同类别IgCH的长度不一，有的包括CHl～CH3，有的为CHl～CH4。同一种属生物体内针对不同抗原的同一类别Ig的C区氨基酸组成和排列顺序比较恒定，其抗原性是相同的，但V区各有不同。C区与抗体的效应功能相关，可激活补体，介导穿过胎盘和黏膜屏障，结合细胞表面的Fc受体从而介导调理作用、ADCC作用和I型超敏反应。　　在Ig分子伸出的两臂和主干之间(CHl与CH2之间)还有个可弯曲的区域，称为铰链区。该区含有丰富的脯氨酸，因此易伸展弯曲，能改变两个结合抗原的Y形臂之间的距离，两臂之间的角度可自0到90变化，这样有利于两臂同时结合两个不同的抗原表位。虽然IgD、IgG、IgA有绞链区，而IgM和IgE没有，但这并不说明它们完全不能弯曲，实际上还有相对的弯曲性。各类抗体的铰链区的长度及氨基酸的顺序也有不同；人IgD的可伸展的距离最大，IgG4和两种IgA的弯曲度则有限。 　　所有的抗体是Ig，但Ig并不都是抗体。Ig的两个重要特征是特异性和多样性。它们是机体受抗原（如病原体）刺激后产生的，其主要作用是与抗原起免疫反应，生成抗原-抗体复合物，从而阻断病原体对机体的危害，使病原体失去致病作用。另一方面，免疫球蛋白有时也有致病作用。临床上的过敏症状如花粉引起的支气管痉挛，青霉素导致全身过敏反应，皮肤荨麻疹（俗称风疹块）等都是由免疫球蛋白制剂能增强人体抗病毒的能力，可作药用。如注射人血清或人胎盘中提取的丙种球蛋白制剂可防治麻疹、传染性肝炎等传染病。Ig是一个多藣有分子：（1）可结合抗原；（2）可作为抗原诱发抗体的产生；（3）可激发一系列如补体激活、吞吐噬调理、信号传导等次级反应。各种特异性Ig已被广泛应用于临床疾病的预防、治疗和诊断。例如，IgM是体液免疫应答首先产生的Ig。SIgA是机体黏膜防御感染的重要因素。IgE是同速发型过敏反应发生有关的Ig。IgD以膜结合形式存在于B细胞，在B细胞分化发育中起重调节有作用。[编辑本段]注射免疫球蛋白不是万能的　　首先，丙种球蛋白注入人体后产生的免疫力是被动给予的，不是自身主动产生的，一般2周就被排泄，之后体内丙种球蛋白的含量又恢复到原来水平，要长期保持体内所含丙种球蛋白的高水平，就必须每隔2周注射1次。 　　其次，应用丙种球蛋白有一定的适应症，因为该药随所含抗体量的不同而预防效果各异。普通的丙种球蛋白主要用于预防麻疹、甲肝、流行性腮腺炎等，想用丙种球蛋白来预防各种疾病是不可能的。 　　第三，如果反复注射丙种球蛋白，因其本身可作为抗原，刺激人体产生一种对抗丙种球蛋白的抗体，即抗抗体，一旦再注射丙种球蛋白，就会被抗抗中和，不能发挥其抗病作用。 　　第四，人体自身能够合成丙种球蛋白，如经常使用外来药品，就会抑制自身抗体的产生，从而降低机体的抗病能力。 　　第五，由于丙种球蛋白是血液制品，万一在来源上把关不严，反而造成血源污染，使健康人体传染上疾病，况且对人体来说，外来的丙种球蛋白毕竟是“异物”，个别人注射后可能会引起过敏反应。 　　因此，把丙种球蛋白作为强化剂、补药来使用是没有科学根据的，想通过反复注射该药来长期预防疾病、增强体质也是不可能的。[编辑本段]免疫球蛋白的结构　　Ig 分子的基本结构是由四肽链组成的，即由二条相同的分子量较小的轻链（L 链）和二条相同的分子量较大的重链（H 链）组成的。L链与H链是由二硫键连接形成一个四肽链分子，称为Ig分子的单体，是构成免疫球蛋白分子的基本结构。现已知5 种免疫球蛋白中IgG、IgA 和IgD的H链各有一个可变区（VH）和三个恒定区（CH1、CH2 和CH3）共四个功能区。IgM和IgE 的H链各有一个可变区（VH）和四个恒定区（CHl、CH2、CH3 和CH4）共五个功能区。VL和VH 是与抗原结合的部位，单体由一对L链和一对H链组成的基本结构，只有2 个与抗原结合的位点，如IgG、IgD、IgE、血清型IgA；双体由J链连接的两个单体，有4 个与抗原结合的位点，如分泌型IgA（SIgA），所以SigA 结合抗原的亲合力要比血清型IgA 高。五聚体由J 链和二硫键连接五个单体，如IgM。五聚体IgM 理论上应为10 个与抗原结合的位点，但实际上由于立体构型的空间位阻，—般只有5 个结合点可结合。[编辑本段]血清中主要免疫球蛋白的作用　　IgG 是血清免疫球蛋白的主要成分，它占总的免疫球蛋白的75%，是初级免疫应答中最持久、最重要的抗体，它仅以单体形式存在。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗体属于IgG，它在抗感染中起到主力军作用，它能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用（调理作用），中和细菌毒素的毒性（中和毒素）和病毒抗原结合使病毒失去感染宿主细胞的能力（中和病毒）。IgG 在机体合成的年龄要晚于IgM，在出生后第3 个月开始合成，3-5 岁接近成年人水平。它是唯一能通过胎盘的Ig，在自然被动免疫中起重要作用。此外，IgG 还具有调理吞噬和结合SPA等作用。　　IgA 分血清型和分泌型两种，血清型IgA可介导调理吞噬ADCC 作用；分泌型IgA（SIgA）是机体粘膜防御系统的主要成分，覆盖在鼻、咽、气管、肠和膀胱粘膜的表面，它能抑制微生物在呼吸道上皮附着，减缓病毒繁殖，是粘膜重要屏障，对某些病毒、细菌和—般抗原具有抗体活性，是防止病原体入侵机体的第一道防线。外来抗原进入呼吸道或消化道，局部免疫系统受到刺激后，无需中央免疫系统的参与，自身就可进行免疫应答，产生分泌型抗体，即SIgA。已有研究证明，呼吸道分泌液中SigA 含量的高低直接影响呼吸道粘膜对病原体的抵抗力，两者呈正相关。　　IgM 是抗原刺激诱导体液免疫应答中最先产生Ig 的，IgM 不是细胞，但可结合补体，主要分布于血清中。由于IgM 有较高的结合价，所以是高效能的抗生物抗体，其杀菌、溶菌、促吞噬和凝集作用比IgG 高500- 1000 倍，IgM 在机体的早期防御中起着重要的作用[2]。[编辑本段]运动强度对免疫球蛋白的影响　　一般认为，运动强度是淋巴B细胞分泌功能改变的首要因素，如强度过小或时间不长，则不会引起抗体水平的变化。　　Edwards 等报道，5min 强度的上下楼梯跑后，B细胞不会发生显著的改变。Hanson 等在观察运动员75%VO2max 跑8-12km 后血中抗体也没有显著变化；Ricken(1990)和Nieman(1991)指出长期有氧训练会引起机体IgG、IgA、IgM 水平提高，机体免疫功能增强。余学好通过对普通学生和太极拳运动员进行一些免疫机能的指标测试发现，长期坚持太极拳运动的实验组，血清中的IgM 含量有显著性提高，并且，实验组无论运动前还是运动后，血清中的IgG,IgA，IgM 含量都显著高于对照组。另外，如气功、太极拳、健身操等运动均可使抗体水平提高[6]；蒋桂凤等研究健身操对女大学生机体免疫球蛋白的影响中得出，每周参加3 次锻炼者，血清IgG 含量比对照组及每周锻炼1次者高，且在第10 周与第12 周存在显著性差异[7]；而实验组间及与对照组血清IgM、IgA 含量差异无显著性。但也有不同结论，如 Michell 等对11 名青年受试者进行了12 周有氧训练，观察运动对人体淋巴细胞功能的影响，测试指标包括免疫球蛋白含量的影响，发现中等强度运动IgA，IgM 会显著下降。这些与前述结论相矛盾的原因可能与实验设计、运动方式、实验系统的差异有关。　　但是长时间的或高强度的运动对于身体免疫力反而有着不利的影响。长时间高强度运动导致免疫抑制反应，增加急性传染病的易感源，降低机体抗感染的免疫机能。我国学者娇伟研究首次发现，持续的大运动量训练可使运动员血清出现免疫抑制蛋白，其分子量为140KD，说明免疫抑制蛋白在运动与免疫的调节中发挥着作用；Tvede 用溶血空斑法检测抗体部分细胞（B 细胞），发现降低，但偶尔几次剧烈运动对主要免疫球蛋白IgG 的浓度基本上无影响，过度训练也仅引起轻微的降低，主要表现在淋巴细胞的数量及免疫球蛋白的水平下降，这种免疫球蛋白的降低随着运动训练负荷的增加而显著加剧。任保莲观察一次大运动量训练课和400m 跑对女子田径运动员免疫球蛋白IgA、IgM、IgG 的影响结果表明大运动量训练后即刻，IgA、IgM 显著升高，IgG 非常显著增高；恢复3h 后，IgM 仍然显著高于训练前水平，IgA、IgG 已恢复到训练前水平。唐苏丽等观察国家女子手球运动员大负荷训练期末血清免疫球蛋白的变化情况得出：大运动负荷后运动员IgA、IgM 水平显著性降低，表明大负荷强度运动疲劳后机体出现免疫抑制，疾病易感性增加。我国学者观察到长跑运动员冬训期间，在加大运动量初期1 个月，IgG,IgA 含量显著下降，IgM无明显变化，冬训2个月后IgG,IgA 均已恢复正常。PtrovaI.V 等发现，高水平运动员的血清免疫球蛋白水平降低，而随着训练强度的增加，其非特异性免疫机能同样明显降低；浦钧宗等研究不同训练量对动物免疫指标的影响指出：5 周游泳训练后小鼠抗原引起的抗体应答受到抑制，抗体产生水平较对照组明显降低；还有研究指出在剧烈运动或几星期的强度运动后，抗体产生改变，运动员以高强度跑45km 或75km 时，血清免疫球蛋白减少10%- 28% 达2d 之久。分泌型抗体IgA(SIgA)在粘膜表面起着重要的防御作用，运动后即刻能减少唾液SigA 的含量，慢性高强度训练导致SigA 降低可持续一段时间，所以长时间剧烈运动会抑制机体粘膜的免疫功能，这可能是运动员在训练或比赛后更易患上呼吸道感染的原因。　　普遍认为适度运动可增强免疫功能，长时间大强度运动会降低运动员的免疫功能，而免疫功能的下降恰恰是一次次过渡训练未能充分恢复造成免疫抑制累积的结果，因此进行体育锻炼时不能掉入“运动越多越大越好”的误区，需掌握自身体育锻炼的最佳范围，以达到真正强身健体的目的。[编辑本段]乙型肝炎免疫球蛋白　　何谓乙型肝炎免疫球蛋白（HBIG）？　　HBIG系用经乙型肝炎疫苗免疫健s康人后，采集的高效价血浆或血清分离提取制备的免疫球蛋白白制剂，其抗体效价在100IU/ML以上。　　什么人群适合使用乙型肝炎免疫球蛋白　　1.乙型肝炎表面抗原（HBsAg)阳性以及HBsAg和e抗原双阳性的母亲和其所生婴儿； 2.意外感染的人群； 3.与乙型肝炎患者或HBsAg携带者密切接触者； 4.免疫功能低下者；　　如何使用乙型肝炎免疫球蛋白　　HBsAg阳性母亲的使用：从产前3个月起，每月注射一针乙型肝炎免疫球蛋白，每次剂量200-400IU。 HBsAg阳性孕妇所生婴儿的使用：出生后24小时内注射乙型肝炎免疫球蛋白，剂量100－200IU，并可同时注射乙型肝炎疫苗或按医生推荐的的方案使用。　　乙型肝炎疫苗和乙型肝炎免疫球蛋白联合使用效果如何　　多项研究证明，乙型肝炎疫苗和乙型肝炎免疫球蛋白联合使用对乙型肝炎母婴传播的阻断效果达95％左右，因此两者合用的预防效果是可靠的
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丙型肝炎病毒高变区1抗体的交叉反应性分析
目的 探索检测丙型肝炎病毒(HCV)高变区1(HVR1)抗体交叉反应性的意义.方法 采用16种重组的HVR1抗原包被,酶联免疫吸附检测不同病程及不同干扰素治疗效果HCV感染者血清中HVR1抗体的情况,分析其高变区抗体交叉反应性.结果 在慢性丙型肝炎、肝硬化和肝细胞癌这三组患者血清中HVRI抗体交叉反应阳性数目分别为10.93±4.98、12±5.57和10.64±4.83,三组间差异无统计学意义(P&0.05);对千扰素治疗效果好的患者HVR1抗体交叉反应阳性数为13.85±2.85,治疗效果差的患者为7±5.27,前者显著高于后者(P&0.05).但两者治疗前HCV病毒载量差异无统计学意义(P&0.05).结论 HVR1抗体的交叉反应性与HCV感染的严重程度无明显关系,但可能成为一项干扰素疗效的辅助预测指标.
作者单位：
北京市肝病研究所,北京,100069
军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
年，卷(期)：
机标分类号：
在线出版日期：
基金项目：
国家科技重大专项，传染病专项
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