茜素红染色试剂盒定量检测矿物结节怎么做

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本帖最后由
23:18 编辑
我这是成骨诱导21天的结果,从第7天就出现了钻石样的结晶样的东西,非常多,可是只有小部分被染色,那么这个钻石样的东西到底是不是矿化结节啊?谢谢指点啊!
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稍微有点小,经验上出现了正八面体的那种小结晶就是快成功了" M; K# f2 h) @+ t! y
右下角的‘3小块’颜色比较像~
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第三张图片右下角着色的以及中上部颜色较深的一大块都像是钙结节,只不过一大块着色不是很好。
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再培养个两三天就差不多了
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是不是染色没染好啊,我一般是直接不管他,放上一两个小时,再慢慢洗干净
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我是95%乙醇固定,PBS洗,PH8.3茜素红染30分钟,我下次多染一段时间试试。之间请教了一位前辈,说我这结晶样的东西可能是碳酸钙,而矿化结节是磷酸钙,我实在搞不明白,既然诱导组出现了这种结晶而对照组没有,为什么不是矿化产物呢?那又是怎么产生的?诱导用的50ug/ml抗坏血酸,10mmol/L的β磷酸钠,10*-8mol/L地塞米松。谢谢!
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另外还有一点很困惑,碱性磷酸酶染色用的是南京建成的试剂盒,我是第3天、7天取得上清做的,诱导组和对照组没有什么差异。请教是时间点有问题吗?还是我没有诱导成功?谢谢啊
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) i, l: Y; O1 r$ D/ K
碱性磷酸酶是成骨的前期指标,7天肯定是不行了,3天的话也不一定,请问你是怎样的处理,建议换个时间点,
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本帖最后由 yinchong42 于
17:25 编辑
" u7 ]- V2 S$ H8 P1 F+ H3 }* o3 r
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还有就是我们的试剂盒是碧云天的
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本帖最后由
22:03 编辑
/ D2 T- ?( Q8 e! R" A$ z+ A
回复 - S* M3 b2 P. g6 J0 G
你好,那么你建议诱导后3天内做吗?我是取上清做的,虽然文献里做细胞裂解的比较多,但我试过,上清的ALP表达更多。可是我ALP没有做出差异。不知道你是怎么做的,求指教谢谢!碧云天的好用吗?
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定量 - 实验交流 - 生物秀
标题: 茜素红染色 封片
摘要: [茜素红染色 封片
定量] 最近做茜素红染色,发现封片和不封片(用甘油)的照片有很大差别,我想用照片进行半定量,到底是不封片的好,还是封片的好啊?红色好还是偏黑色的好啊?ps:图片的左边是未封片的部分,右边的是封片的部分调整大小 image0590 jpg 关键词:[茜素红 甘油 西吡氯胺 结节 西吡氯铵 吸光度]……
最近做茜素红染色,发现封片和不封片(用甘油)的照片有很大差别,我想用照片进行半定量,到底是不封片的好,还是封片的好啊?红色好还是偏黑色的好啊?
ps:图片的左边是未封片的部分,右边的是封片的部分
调整大小 image0590.jpg,非常抱歉,我的没有诱导哦,我只是给了细胞力的刺激,然后直接做的染色。回复
还有就是如果能被茜素红染色,定量为什么通过照片呢,感觉不太可信,可以用西吡氯胺溶解染色的结然后测吸光度定量啊。 您好啊,请问用西吡氯铵怎么溶解钙结节啊?多少浓度,多长时间啊?谢谢了
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ChineseJournalofTissueEngmeeringResearch August732014 VoL18,No.33 一
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