肾上腺素 心脏对心脏活动的影响

肾上腺素和“心得安”药物都可以影响心脏的活动。回答以下问题:(1)
练习题及答案
肾上腺素和“心得安”药物都可以影响心脏的活动。回答以下问题:
(1)肾上腺素既是一种激素,也是一种神经递质,在功能上它是人体内的________分子。“心得安”和肾上腺素具有相似的结构,而且都能直接作用于心脏调节心率,由此推测它们在心脏细胞表面可能具有相同的_________。(2)用肾上腺素和“心得安”进行实验研究,下表为分组实验结果,请完善实验报告:实验目的:探究__________。材料用具:小鼠若干只,注射器,检测耗氧量装置(如图1),肾上腺素溶液和“心得安”溶液(用生理盐水配制)。方法步骤:①.选取大小、生长状况相同的小鼠20只,均分为四组。每组小鼠按上表所示注射药剂,其中A组注射___________。②.将每只小鼠分别放入装置中,开始时大烧杯内外的液面等高。装置放在相同环境中,10分钟后记录___________,计算耗氧量并求出各组的平均值。结果分析:①.为方便比较上表中各组数值,请选择适宜的图表类型绘图(如图2)。②.结果表明,“心得安”和肾上腺素分别具有降低和提高耗氧量的作用,而两者共同作用的效应是相互__________。③.除了控制环境相同外,实验可再设置一个不放入小鼠的对照装置,其目的是用于_________,从而使测得的数值更精确。
题型:实验题难度:偏难来源:模拟题
所属题型:实验题
试题难度系数:偏难
答案(找答案上)
(1)信息(或“传递信息的”)       受体(或特异性受体、受体蛋白)(2)实验目的:“心得安”和肾上腺素对小鼠耗氧量(或呼吸速率、呼吸作用、心脏活动、心率)的影响方法步骤:①.等量的生理盐水    ②.大烧杯内液面上升高度(或大烧杯液面高度变化、大烧杯液面高度、大烧杯液面的刻度读数)结果分析:①.如图②.抑制(或拮抗)③.消除非生物因素或物理因素对实验结果的影响(或排除无关变量的影响)
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初中二年级生物试题“肾上腺素和“心得安”药物都可以影响心脏的活动。回答以下问题:(1)”旨在考查同学们对
科学研究方法、
……等知识点的掌握情况,关于生物的核心考点解析如下:
此练习题为精华试题,现在没时间做?,以后再看。
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考点名称:
科学探究的定义:科学探究是指为了能积极主动地获取生物科学知识,领悟科学研究方法而进行的各种活动。通俗地说,就是让我们自己去发现问题.主动去寻找答案,而不是被动地接受知识。科学探究重在探索的过程,而不是只注重答案本身。科学探究的过程:
探究实验遵循的一般原则:单一变量原则和对照原则①单一变量原则:控制其他因素不变,只改变其中一个因素(要研究的因素),观察其对实验结果的影响。遵循单一变量原则,既便于对实验结果进行科学的分析.又能增强实验结果的可信度和说服力。 ②列照原则:通常一个实验分为实验组和对照组。实验组是接受实验变量处理的对象组。对照组,也称控制组,对实验而言,是不接受实验变量处理的对照组。从理论上说,由于无关变量对实验组与对照组的影响是相等的,故实验组与对照组两者的差异。则可认定为是来自实验变量的效果,这样的实验结果是可信的。按对照实验的内容和形式上的不同.通常可分为:空白对照、自身对照、相互对照和条件对照。 探究实验设计的思路:操纵实验变量,控制实验变量,捕获反应变量①实验变量(自变量):实验中由实验者操纵的因素或条件。例如:温度(60℃、沸水、冰块)等。 ②反应变量(因变量):由实验变量而引起的变化结果。例如:淀粉遇碘后的变蓝现象。 ③无关变量:实验中除实验变量外的影响实验结果与现象的因素或条件。例如:试管的洁净程度、实验的时间长短等。 ③额外变量:由无关变量引起的变化结果。 特别提醒:①并不是所有的问题通过一次探究就能得到正确的结论。有时,由于探究的方法不够完善,也可能得出错误的结论。因此,在得出结论后,还需对整个探究过程进行反思。 ②在科学探究中要坚持实事求是的科学态度,既要以一定的科学知识为基础,又不能被原有的知识所束缚。当科学探完的结论与原有的知识发生矛盾时,应大胆地修正原有的知识。 科学探究的基本方法:①观察法观察法是科学探究的一种基本方法。生物科学的很多重大发现或发明都源于细致的观察。观察法就是在自然状态下,研究者按照一定的目的和计划。用自己的感观外加辅助工具,对客观事物进行系统地感知和描述,以发现和验证科学结论。 a. 观察的类型b.科学观察的特点:第一.要有明确的目的。第二.要掌握正确的观察方法,即从宏观到微观、从整体到局部。第三.观察时要全面,细致和实事求是。第四.  及时做好观察记录。 ②调查法调查是科学探究常用的方法之一,是了解生物种类、生存环境和外部形态等常用的研究方法。调查者以正确的理论与思想作指导,通过访谈、问卷、测验等手段.有计划地,广泛了解.掌握相关资料.在此基础上进行分析、综合、得出结论。科学调查的步骤:明确调在的目的和调查对象一制订合理有序的调查方案→实施实验调查方案。并如实做好记录→对调查情况和结果进行整理和分析→写出调查报告。生物调查活动的注意事项:调查是一项科学工作。对于所看到的生物,你不管是否喜欢它,都要认真观察,如实记录;不要损伤植物和伤害动物,不要破坏其生活环境;注意安全,集体行动。 ③实验法生物学是在实验的基础上建立和发展起来的一门自然科学。利用实验的方法进行科学探究是现代生物学的重要方法。实验法就是利用特定的器具和材料,通过有目的、有步骤的实验操作和观察,记录、分析,发现或验证科学结论。 ④测量法(略)规律总结:①科学探究是认知的主要途径、方法和过程,适用于自然科学和社会科学。 ②认知生物的形态、行为的方法主要是观察法。 ④认知生物的结构、生理的方法主要是实验法。④认知未知且周围不存在的生物的方法主要是文献法。
细胞结构不等于严整结构:     严整结构是指生物结构的完整性和严格有序性。有的同学认为病毒没有细胞结构,也就没有严整的结构,这是不对的.因为:①病毒也是生物,生物都具有严整的结构;(②病毒几乎都是由蛋白质和一种核酸(DNA和RNA)构成的。在病毒中蛋白质总是构成外壳,核酸位于外壳包围围的核心,因而核酸受到蛋白质的保护。研究表明,将病毒的两大成分分离开,用单纯的核酸去感染寄主,感染的能力下降,这说明病毒的结构也是完整有序的。总之,严整的结构是所有生物的结构特征。
辨析生物各种基本特征之间的关系:除病毒外生物都是由细胞构成的。细胞是生物进行生命活动的结构基础,是生物进行新陈代谢前基本场所。新陈代谢是生物体进行一切生命活动的基础。应激性、生长和繁殖都是在新陈代谢的基础上表现出来的,生物通过应激性来适应周围环境,生长发育和繁殖使生物物种得以延续。应激性,反射和适应性的区别:     应激性是指一切生物在生长发育的过稃中,对外界各种刺激所发生的反应,它是牛物的基本特征之一,生物体对刺激发生反应是需要定的结构来完成的,单细胞动物通过原生质来完成。而多细胞动物则主要通过神经系统来完成,对后者而言,通过神经系统对各种刺激发生的反应称为反射。可见,反射是应激性的一种表现,但它所包含的范围较窄,只有高等动物和人类才具有。植物虽然没有反射活动,但仍具有应激性,如茎的向光件、根的向地性等。    适应性也是生物的基本特征之一,它是指生物体与环境相适应的现象。例如,肉食动物有锐利的牙齿、尖锐的爪、盲肠退化等适应性特征。适应性的形成是生物体在一定环境条件下产生的有利变异经过长期的自然选择,并通过遗传逐代定向积累而来的。牛物体所表现出的适应特征,如保护色、拟态,警戒色等,都是通过遗传传递给子代,并非是生物体接受某种刺激后才产生的,这点与应激性是不同的。对生物进行归类是生物学中常用的一种方法。归类有以下几种不同依据:(1)根据生物的形态结构特点归类,生物可分为植物、动物和其他生物三大类。(2)根据生物的生活环境,可分为陆生生物和水生生物。(3)根据生物的用途,可分为家禽、家畜、宠物、作物等。
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药理学综合性实验
实验一& 离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响
【实验目的】
1.学习离体蛙心的灌流方法。2.观察高钾、高钙、低钙、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。3.观察强心苷类药物对心功能不全蛙心的作用。
【实验原理】
&&& 作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。因此,只要将离体的蛙心保持在适宜的环境中,在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。
&&& 心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此。离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。细胞膜离子通透性的变化,以及由此而出现的离子顺浓度差的跨膜扩散,是可兴奋细胞产生生物电活动的根本原因。因此,心肌细胞膜外离子浓度的改变对心肌细胞的生物电活动和心肌细胞的生理特性必然会产生明显的影响。离子中又以K+、Na+、Ca2+最为重要。血K+浓度过高时(高于7.9mmol/L),心肌兴奋性、自律性、传导性、收缩性都下降,表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞,严重时心脏可停搏于舒张期。血Ca2+浓度升高时,心肌收缩力增强,过高可使心室停搏于收缩期。血Ca2+浓度降低,心肌收缩力减弱。血中Na+离子浓度的轻微变化,对心肌影响不明显,只有发生明显变化时,才会影响心肌的生理特性。
&&& 肾上腺素激动心脏的β1受体,使心肌收缩力加强,心率加快,传导加速,心输出量增加,是一个强效的心脏兴奋药。乙酰胆碱是M、N胆碱受体激动剂,它与心血管M胆碱受体结合,从而产生一系列M样作用,主要表现为心率减慢、血管扩张、心肌收缩力减弱、血压下降。
&&& 强心苷是一类选择性作用于心脏的药物,它能抑制心肌细胞膜上的Na+-K+-ATP酶,调控离子通道,使临近心肌膜处的细胞内Na+暂时增多,通过Na+-Ca2+交换机制促进钙内流,导致细胞内Ca2+增加,从而使心肌收缩力增强,表现为正性肌力和负性频率的作用。而在低钙环境中,心脏心肌收缩力和去极化过程均受到影响。本实验即利用低钙环境造成心功能不全,从而观察强心苷类药物对离体蛙心的作用。
【实验对象】蟾蜍或蛙。
【实验药品】
&&& 任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10 000肾上腺素溶液、1:10 000乙酰胆碱溶液、0.2%CaCl2溶液、0.25g/L毒毛花苷K溶液。
【实验器材】
&&& MedLab微机生物信号采集处理系统、张力换能器、蛙心夹、铁支架、双凹夹、蛙心插管、蛙类手术器械(包括探针、玻璃分针、粗剪刀、眼科剪、手术剪、镊子、木锤)、滴管、搪瓷杯、缝线。
【实验方法和步骤】
1.离体蛙心制备
(1)取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓后,使其仰卧固定在蛙板上,然后从剑突下将胸部皮肤向上剪开,再剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏,分离左、右主动脉如图3-1。&&&&&&&&
&图3-1& 蛙心正面示意图
(2)在左主动脉下方穿1根线,在左主动脉上端结扎作插管时牵引用,然后再在主动脉干下方穿1根线,在动脉圆锥上方系一松结用于结扎固定蛙心插管。
(3)左手持左主动脉上方的结扎线,用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小V字形切口,右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心插管由此剪口处插入动脉圆锥。如图3-2,当插管头到达动脉圆锥时,用镊子夹住动脉圆锥少许,将插管稍稍后退,并转向心室中央方向,镊子向插管的平行方向提拉,心室收缩期时将插管插入心室。可根据插管内的任氏液的液面是否能随心室的舒缩而上下波动,来判断蛙心插管是否进入心室。如蛙心插管已进入心室,则将预先准备好的松结扎紧,并固定在蛙心插管的侧钩上以免蛙心插管滑出心室。剪断主动脉左右分支。
&图3-2& 蛙心插管示意图
(4)轻轻提起蛙心插管以抬高心脏,用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎,结扎线应尽量下压,以免伤及静脉窦,在结扎线外侧剪断所有组织,将蛙心游离出来。
(5)用新鲜任氏液反复换洗蛙心插管内含血的任氏液,直至蛙心插管内无血液残留为止。此时离体蛙心已制备成功,可供实验。
2.仪器连接
如图3-3,把蛙心插管用双凹夹固定在铁支架上,将蛙心夹的连线连接到张力换能器弹片孔上。张力换能器也固定于铁支架上,换能器输入线接微机生物信号采集处理系统输入通道。
3.仪器参数设置
(1)生物信号采集处理系统:点击“实验”菜单,选择“循环”或“自定义实验项目”菜单中的“蛙心灌流”,系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率400Hz,扫描速度:1s/div。
图3-3& 仪器连接示意图
(2)MedLab系统:点击“实验”菜单,选择“常用生理学实验”或“文件”菜单“打开配置”中的“蛙心收缩”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:通道放大倍数200~500、下限频率DC、上限频率10Hz,采样间隔5ms。
观察项目:
(1)描记正常的蛙心搏动曲线,注意观察心搏频率、心室的收缩张力。
(2)把蛙心插管内的任氏液全部更换为0.65%NaCl溶液,观察心搏变化。
(3)把0.65%NaCl溶液吸出,用新鲜任氏液反复换洗数次,待曲线恢复正常时,再在任氏液内滴加2%CaCl2溶液1~2滴,观察心搏变化。
(4)将含有CaCl2的任氏液吸出,用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,在任氏液中加1%KCl溶液1~2滴,观察心搏变化。
(5)将含有KCl的任氏液吸出,用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,再在任氏液中加1:10 000的肾上腺素溶液1~2滴,观察心搏变化。
(6)将含有肾上腺素溶液吸出,用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,再在任氏液中加1:10 000的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察心搏变化。
(7)将含有乙酰胆碱溶液吸出,用新鲜的任氏液反复换洗,待曲线恢复正常后,换用0.2%CaCl2低钙溶液(制备心功能不全模型)。
(8)再在任氏液中加0.25g/L毒毛花苷K溶液0.2m1(观察强心作用),观察心搏变化。
(9)再加2%CaCl2溶液0.1m1(钙与强心苷有协同作用),观察心搏变化。
上述药液需用任氏液新鲜配制。
【注意事项】
1.制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦。
2.上述各实验项目,一旦出现作用应立即用新鲜任氏液换洗,以免心肌受损,而且必须待心搏恢复正常后方能进行下一步实验。
3.蛙心插管内液面应保持恒定,以免影响实验结果。
4.滴加药品和换取新鲜任氏液,须及时在记录纸上标记,以便观察分析。
5.吸新鲜任氏液和吸蛙心插管内溶液的吸管应区分专用,不可混淆使用,以免影响实验结果。
6.药物作用不明显时,可再适量滴加,密切观察药物剂量添加后的实验结果。
7.强心苷实验以青蛙心脏为好,蟾蜍心脏对强心苷较不敏感。
8.加入毒毛花苷K溶液的剂量要准确,以免过量引起心脏毒性反应。强心苷中毒时可出现房室传导阻滞(Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度)、早搏及心脏停搏。
【思考题】
1.正常蛙心搏动曲线的各个组成部分,分别反映了什么?
2.本实验中,蛙心插管内的液体高度实际上是构成了蛙心活动的前负荷还是后负荷,或者两者都是?
3.分析滴加各种离子后,蛙心搏动发生变化的机制。
4.强心苷和肾上腺素都有增强心肌收缩力的作用,而肾上腺素为什么不能用于治疗心力衰竭?
(张琦& 叶夷露)
实验二& 动脉血压的调节与休克
【实验目的】
1.学习动脉血压的直接测量方法,观察神经和体液因素对动脉血压的调节及其影响因素。
2.学习家兔急性失血模型的建立,了解家兔急性失血后的代偿反应及其机制。
3.通过实践操作学习生物信号采集处理系统的使用方法。
【实验原理】
&&& 在生理情况下,人和其它哺乳动物的血压相对稳定,这种相对稳定是通过神经和体液因素的调节而实现的,其中颈动脉窦-主动脉弓压力感受性反射起着重要作用。此反射既可在血压升高时降压,又可在血压降低时升压,反射的传入神经为主动脉神经与窦神经。家兔的主动脉神经为独立的一条神经,又称减压神经,易于分离和观察其作用。在人、犬等动物,主动脉神经与迷走神经混为一条,不能分离。反射的传出神经为心交感神经、心迷走神经和交感缩血管纤维。心交感神经兴奋,其末梢释放去甲肾上腺素,去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的β受体结合,引起心脏正性的变时变力变传导作用。心迷走神经兴奋,其末梢释放乙酰胆碱,乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合,引起心脏负性的变时变力变传导作用。交感缩血管纤维兴奋,其末梢释放去甲肾上腺素,去甲肾上腺素与血管平滑肌细胞膜上的α受体结合,引起阻力血管的收缩。
&&& 机体对一定量的急性失血有代偿能力。急性失血使动脉血压下降,血容量减少,在失血的瞬时,通过压力感受性反射和容量感受性反射,阻力血管和容量血管收缩、心脏活动增强以维持动脉血压。急性失血引起交感-肾上腺髓质系统兴奋,导致儿茶酚胺大量分泌,出现血管的明显收缩。静脉系统属于容量血管,可容纳血液总量的60%~70%。静脉的收缩可以迅速而短暂地增加回心血量。微动脉和毛细血管前括约肌比微静脉对儿茶酚胺更为敏感,导致毛细血管前阻力比后阻力升高更明显,毛细血管灌流不足,流体静压下降,使组织液进入血管,循环血量增加。抗利尿激素、血管紧张素Ⅱ、皮质激素的产生和分泌增加也参与急性失血的代偿。
&&& 休克指急性循环障碍致使组织血液灌流量严重不足,以致各重要器官机能代谢发生严重障碍的一个全身性病理过程。其发病迅速,若不及时抢救,死亡率极高。当机体快速失血量超过30%或大量失血时,有效循环血量急剧减少,超出机体的代偿能力,引起心输出量减少,血压降低和微循环严重和长时间缺血与缺氧,引起休克。失血性休克的抢救可采用多种药物,如血容量扩充药、抗胆碱药及拟肾上腺素药等。
&&& 本实验应用液压传递系统直接测定动脉血压。即由动脉插管、测压管道及压力换能器相互连通,其内充满抗凝液体,构成液压传递系统。将动脉套管插入动脉内,通过密闭的液压传递系统传递动脉内的压力及其变化,再通过压力换能器将压力变化转换为电信号,用微机生物信号采集处理系统记录动脉血压变化曲线。
【实验对象】
家兔,体重2.5~3kg,雌雄兼用。
【实验药品】
生理盐水,1%戊巴比妥钠溶液,肝素(1000u/ml),1:10000去甲肾上腺素溶液,1:100000乙酰胆碱溶液,1%硫酸阿托品溶液,中分子右旋糖酐,山莨菪碱,0.01%异丙肾上腺素。
【实验器材】
兔手术台,哺乳类动物手术器械一套(包括手术刀、粗剪、手术剪、眼科剪、止血钳),动脉夹,动脉插管,血压换能器,水银检压计,双凹夹,铁支架,保护电极,玻璃分针,有色丝线,注射器(50ml、20ml、2ml、1ml各一副),小烧杯,干燥小试管,放血瓶。
【实验方法和步骤】
1.仪器装置连接& 颈动脉血压测量记录装置见图3-4。
(1)将血压换能器固定于铁支柱上,其位置应与心脏在同一平面,并将换能器的输出端与生物信号采集处理系统的一个通道连接。
(2)安装好放血装置使动脉插管的侧管与放血瓶相连(瓶内预先盛60ml生理盐水),将螺旋夹松开将管道内的空气排出并充满生理盐水,然后关上测压系统的弹簧夹A,再关上放血系统中的螺旋夹。放血瓶内放入肝素溶液0.5ml,记下瓶内液体量,调节放血瓶高度,使瓶内液平面距离颈总动脉水平约65cm处,可使血压维持在6.67kPa(50mmHg)左右。
图3-4& 颈动脉血压测量
2.仪器参数设置
(1)生物信息采集处理系统:点击“实验”菜单,选择“循环”或“自定义实验项目”菜单中的“兔动脉血压调节”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:1通道时间常数为直流,滤波频率100Hz,灵敏度12Kpa,采样频率800Hz,扫描速度:500ms/div。连续单刺激方式,刺激强度5~10V,刺激波宽2ms,刺激频率30 Hz。
(2)MedLab系统:点击“实验”菜单,选择“常用生理学实验”或“文件”菜单“打开配置”中的“动脉血压记录”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:1通道放大倍数200、下限频率DC、上限频率30Hz,采样间隔1ms;串刺激方式,波宽2ms,刺激强度5~10V,时程1s,频率30 Hz。
(3)系统定标。
3.手术准备
(1)家兔称重后,按1ml/kg体重的剂量于耳缘静脉注射1%戊巴比妥钠溶液麻醉。注意麻醉剂不能过量,注射速度不宜过快。
(2)用套结绑缚四肢,将动物背位(仰卧)固定于兔手术台。注意前肢须交叉固定,再用棉绳钩住兔门齿,将绳拉紧并缚于兔台铁柱上。
(3)暴露颈部气管、颈总动脉、颈静脉、迷走神经和减压神经。用玻璃分针仔细分离右侧上述神经,各穿以不同颜色的细丝线以供识别。分离两侧颈总动脉和两侧颈静脉,各穿一线备用(图3-5)。
(4)给动物静脉注射肝素,剂量为1000u/kg体重。等1min后再进行下一步骤,以使肝素在体内血液中混合均匀。
图3-5& 颈部分离图
(5)左颈总动脉插动脉套管:颈总动脉远心端结扎,近心端用动脉夹夹住,并在动脉下面预先穿一丝线备用。用眼科剪在靠近结扎处动脉壁剪一V字形切口,将动脉套管向心方向插入颈总动脉内,扎紧固定。
除去动脉夹,可见血液由动脉冲入动脉插管,启动仪器记录按钮记录血压。
观察项目:
(一)动脉血压的调节
(1)观察正常血压波动曲线。记录正常血压、心率、呼吸和尿量。
(2)用动脉夹夹闭右侧颈总动脉5~10s,观察血压变化。
(3)用两细线在减压神经中部两处结扎。在两结扎间切断神经,以5~10V电压,30Hz频率,波宽2ms的电脉冲分别刺激减压神经中枢端和外周端,观察血压变化。
(4)将右侧迷走神经穿线结扎,在结扎上端切断该神经,刺激其外周端,观察血压变化。
(5)静脉注射1:10000去甲肾上腺素溶液0.3ml,观察血压变化。
(6)静脉注射1:100000乙酰胆碱溶液0.1ml/kg,观察血压变化。
(7)静脉注射1:1000阿托品溶液0.3ml/kg后注射1%氯化乙酰胆碱溶液0.1ml/kg,观察血压变化。
(8)待血压稳定后,打开放血装置上的三通开关,使动脉血放入放血瓶,使血压维持在50mmHg(6.67kPa)左右,持续失血3min后关紧三通,终止失血。连续观察放血过程中血压动态变化,于失血停止后10 min、20 min、30 min分别测定平均动脉压。
(二)家兔失血性休克
(1)由颈动脉快速放血,待血压稳定在40mmHg(5.33 kPa)左右后,可夹住动脉夹,停止放血,即失血性休克状态。记录血压、心率、呼吸和尿量的变化。
(2)失血性休克的抢救
1)颈外静脉输液:结扎颈外静脉远心端,在颈外静脉侧壁剪一小口。沿其向心端插入与输液装置相连的细塑料管(事先充满液体并排气),结扎固定,旋动输液装置中的调节开关,调节流速到合适的速度。
2)5%葡萄糖生理盐水,输液量自行确定。
3)去甲肾上腺素:2mg溶于25ml生理盐水,静脉滴注(30min输完),与放血前所测得的收缩压高度作比较。
4)山莨菪碱:2mg溶于25ml生理盐水中,静脉滴注(30min输完)。
5)中分子右旋糖酐:静脉滴入,输液量自行确定。
6)0.01%异丙肾上腺素1ml,静脉注射。
【注意事项】
1.室温低时打开手术台下电灯给动物保温,防止麻醉后体温下降。
2.每一项观察须有对照,并须待其基本恢复后再进行下一步骤。
3.实验中手术操作多,应尽量减少手术性出血。手术过程中失血过多时可先插颈外静脉输液。
【思考题】
1.正常血压的波动情况如何?何以会有各种波动?每心搏一次是否血压应波动一次?能否从所描曲线上看出来?若看不出,请说明原因。
2.未插管一侧的颈总动脉短时夹闭对全身血压有何影响?为什么?假使夹闭部位是在颈动脉窦以上,影响是否相同?
3.刺激减压神经的中枢端与外周端对血压的影响有何不同?为什么?
4.注射去甲肾上腺素后血压上升,为什么?此时心率如何变化?为什么?
5.失血为什么要持续3min,这对失血代偿的机制分析上有何意义?
6.失血停止后,血压为何能缓慢上升?
7.叙述各类抗休克药物的作用机制。
(朱一亮& 胡珏)
实验三& 几种常见的缺氧类型和药物对缺氧耐受性的影响
【实验目的】
1.学习复制不同类型缺氧的动物模型,观察不同类型缺氧中呼吸的反应和皮肤、粘膜及内脏的颜色变化,从而掌握缺氧的分类和特点,同时了解不同类型缺氧的解救方法。
2.观察低温及氯丙嗪、普萘洛尔等药物对动物耐缺氧力作用的影响。
【实验原理】
&&& 因组织供氧不足或利用氧障碍时,机体的代谢、功能和形态结构可发生异常变化的病理过程称为缺氧。缺氧是多种疾病共有的病理过程,许多原因都能使机体发生缺氧,不同类型的缺氧,机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。根据缺氧的原因和血氧变化的特点可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧四种类型。
&&& 将动物放置于密闭的容器内,使其吸入气中的氧分压逐步降低以复制低张性缺氧模型。低张性缺氧主要表现为动脉血氧分压降低,氧含量减少,组织供氧不足。正常毛细血管血液中脱氧血红蛋白浓度约为26g/L,低张性缺氧时动、静脉血中的氧合血红蛋白含量降低,脱氧血红蛋白浓度增高。当毛细血管血液中脱氧血红蛋白浓度达到或超过50g/L时,可使皮肤、黏膜呈青紫色,称为紫绀。
&&& 一氧化碳(CO)与血红蛋白的亲和力比氧与血红蛋白的亲和力高210倍,当吸入气中含有0.1%CO时,血液中的血红蛋白可能有50%为碳氧血红蛋白(HbCO)。HbCO不能与O2结合,同时还可抑制红细胞的糖酵解,使2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)生成减少,氧离曲线左移,HbO2中的O2不易释放,从而加重组织缺氧。当血液中的HbCO增至50%时,动物可迅速出现痉挛、呼吸困难、昏迷,甚至死亡。此时,动物的动脉血含过多的HbCO,其皮肤、黏膜呈HbCO的樱桃红色。
&&& 亚硝酸盐可使血红素中的Fe2+氧化成Fe3+,形成高铁血红蛋白(HbFe3+OH),导致高铁血红蛋白血症。高铁血红蛋白中的Fe3+因与羟基结合牢固而失去结合氧的能力,或者血红蛋白分子中的四个Fe2+中有部分氧化成Fe3+,剩余的Fe2+虽能结合氧,但不易解离,导致氧离曲线左移,使组织缺氧。低浓度美兰为还原剂,可抑制氧化剂的中毒反应。亚硝酸盐等氧化剂中毒时,如血液中的HbFe3+OH含量超过血红蛋白总量的10%,就可出现缺氧表现;当达到15g/L时,皮肤、黏膜可出现咖啡色或类似紫绀;当达到30%~50%时,则发生严重缺氧。
&&& 氰化钾(KCN)为剧毒,由于氰化物中的氰基与氧化型细胞色素氧化酶中的Fe3+结合,形成氰化高铁细胞色素氧化酶,阻碍其还原为Fe2+还原型细胞色素氧化酶,从而使整个呼吸链的电子传递无法进行,组织利用氧障碍,毛细血管中氧合血红蛋白高于正常,故皮肤、粘膜、肝脏呈玫瑰红色。
&&& 抑制动物中枢神经系统功能和降低体温,降低其代谢率可增强机体的缺氧耐受性。氯丙嗪对下丘脑体温调节中枢有很强的抑制作用,不但降低发热机体的体温,也能降低正常体温。配合物理降温(冰袋、冰浴)应用氯丙嗪,可使动物体温、基础代谢及组织耗氧量均降低,增强动物对缺氧的耐受力,减轻动物机体对伤害性刺激的反应。
&&& 异丙肾上腺素激动β1受体,对心脏的兴奋作用强大,可使心收缩力增强,心率加快,传导加速.心输出量增多,并明显增加心肌耗氧量,同时可促进糖原和脂肪分解,增加组织耗氧量。普萘洛尔可阻断心脏β1受体,使心率减慢,收缩力减弱,心输出量减少,传导减慢,心肌耗氧量下降,并可抑制糖原和脂肪分解,减少组织耗氧量。
【实验对象】
小白鼠,体重22~26g,雌雄兼用。
【实验药品】
5%亚硝酸钠溶液、0.1%氰化钾溶液、1%美蓝、10%硫代硫酸钠、0.25%氯丙嗪溶液(新鲜配制)、0.05%异丙肾上腺素、0.1%普萘洛尔、生理盐水、钠石灰、甲酸、浓硫酸。
【实验器材】
100、250ml广口瓶,缺氧瓶装置(图3-6);一氧化碳发生装置(图3-7);1、2、10ml注射器;冰块、烧杯、天平、手术剪、镊子、橡皮塞、细棉绳、滤纸。
图3-6& 缺氧瓶装置图&
图3-7& CO发生装置图
【实验方法和步骤】
(一)不同原因造成不同类型缺氧的动物模型的鉴别
1.低张性缺氧
取小白鼠一只,数正常呼吸频率(次/10s),注意深度及耳、尾巴尖部皮肤、口唇粘膜的颜色。将小白鼠放入含钠石灰(约10g)的100ml广口瓶内(如图3-6 ),待安静后塞紧瓶塞,开始记录时间,以后每隔3~5min数呼吸频率(次/10s)一次,并观察行为(如挣扎、痉挛等)和耳、尾、口唇的颜色变化,直至动物死亡,留待打开腹腔取下小块肝组织置滤纸片观察肝脏颜色。
2.血液性缺氧
(1)一氧化碳中毒
如图3-7 装好一氧化碳发生装置,将甲酸和浓硫酸按3:2(约6ml:4m1)容量放入试管内,塞紧试管,使之成为CO空间环境(必要时用酒精灯微微加热,可加速CO的产生)。取小白鼠一只,观察正常表现后,放入广口瓶内,开始记录时间,具体观察方法和指标同低张性缺氧实验。
(2)亚硝酸盐中毒
取体重相近的小白鼠2只,观察正常表现后,分别腹腔注射5%亚硝酸钠各0.3ml,然后立即向一只腹腔注射1%美蓝溶液0.3ml,另一只腹腔注射生理盐水0.3ml。具体观察方法和指标同低张性缺氧实验,并记录两鼠的表现及死亡时间的差异。
3.组织性缺氧
取体重相近的小白鼠2只,观察正常表现后,分别腹腔注射0.1%氰化钾溶液0.2ml,待动物出现四肢软瘫时,立即向一只腹腔注射10%硫代硫酸钠0.4ml,另一只腹腔注射生理盐水0.4ml。具体观察方法和指标同低张性缺氧实验,并记录两鼠的表现及死亡时间的差异。
注意:上述实验全部完成后,解剖小鼠,比较各鼠皮肤、粘膜和肝脏颜色有何不同。
观察项目:
低张性缺氧
皮肤、粘膜颜色
(二)探索中枢神经系统功能状态和温度对动物缺氧耐受性的影响
取体重相近的小白鼠2只,称重编号,观察正常表现后,随机分配为实验组和对照组。
实验组,腹腔注射0.25%氯丙嗪0.1ml/10g,放在冰浴的纱布上10~15min,使呼吸频率降为70~80次/分。
对照组,腹腔注射生理盐水0.1ml/10g,放置室温10~15min。
将2只小白鼠分别放入盛有钠石灰的100ml缺氧瓶中,观察动物一般表现,密闭后开始计时,待小鼠死亡后,记录存活时间T(min)。
在老师指导下,收集各组的原始数据,列表进行统计处理,求出存活时间T的均数(`x )及标准差(S),并对实验组和对照组的存活时间(T)均数差异作显著性测验(t测验)。
(三)普萘洛尔提高心肌耐缺氧力作用
取体重相近的小白鼠3只,称重编号,观察正常表现后,随机分配为甲、乙、丙三组,给药途径、剂量、时间和结果记录见下表:
15min0.2ml/10g
3min100mlTmin
【注意事项】
1.缺氧瓶和含CO瓶必须完全密闭不漏气。可用凡士林涂在瓶口。
2.小鼠腹腔注射部位应稍靠左下腹,勿损及肝脏,还应避免将药液注入肠腔或膀胱。
3.切忌CO产生过多过快,导致动物迅速死亡而影响血液的颜色变化。
4.为避免学生实验过程中一氧化碳(CO)的外漏,教师可提前将CO制好贮存在球囊中。实验时,用5m1注射器从球囊中抽取3~4m1直接注入缺氧瓶中即可。
5.氰化钾有剧毒,勿粘染皮肤、粘膜,特别是有破损处。实验后将物品洗涤干净。
6.行氯丙嗪处理的小鼠应在药液注射后放在冰浴的纱布上,待10min左右,呼吸频率约降为70~80次/分为宜。
【思考题】
1.各型缺氧的表现特点如何?阐明其发生机制。
2.密闭瓶内小鼠、一氧化碳中毒小鼠、亚硝酸钠中毒小鼠和氰化钾中毒小鼠分别属于何种类型缺氧?其发生机制有何不同?
3.为什么要在缺氧瓶内放入钠石灰?这对缺氧机制的分析有何意义?
4.中枢神经系统的机能状况不同和环境温度的改变,对缺氧耐受性有何影响?对临床有何指导意义?
&(张琦& 叶夷露)
实验四& 胃肠运动的调节及药物对胃肠运动的影响
【实验目的】
1.观察哺乳类动物消化道平滑肌的生理特性。
2.学习创建离体肠平滑肌活动的模拟内环境和哺乳类动物离体器官或组织灌流的实验方法。
3.观察肾上腺素、乙酰胆碱等药物对离体肠平滑肌的作用及其机制。
【实验原理】
&&& 消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样,具有肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低,收缩的潜伏期、收缩期和舒张期较长,造成其收缩缓慢并有伸展性。其中胃的伸展性变化尤其明显,这对于一个中空的容纳器官来说,能够适应食物容量的变化,具有重要的生理意义;消化道平滑肌处于一种微弱的持续收缩状态,即紧张性,这使消化道内经常维持一定的基础压力,有利于胃肠保持一定的形状和位置,使胃肠的容量和食物的容积相适应;对电刺激不敏感,但对温度变化、化学和机械或牵张刺激很敏感;许多部位消化道平滑肌具有自动节律性,但其节律性收缩比心肌缓慢且不稳定。
&&& 消化道功能是在神经、体液调节下完成的。支配消化道的神经包括外来神经系统和内在神经系统两大部分。
(一)中枢神经系统对消化道功能的调节作用
中枢神经系统通过两条途径调节消化道功能:①直接作用:通过交感、副交感神经(主要是迷走神经);②间接作用:通过体液途径即激素或神经内分泌途径,如下丘脑的生长抑素分泌细胞分泌的生长抑素具有明显的消化道兴奋作用;脑啡肽则对消化道有抑制作用。
(二)内在神经系统
又称肠神经系统,以往认为肠系统的神经递质为乙酰胆碱和去甲肾上腺素,近年的研究表明,肠神经系统的神经元内几乎存在所有中枢神经系统中的递质,肠内在神经系统的主要神经递质及其作用见表3-1。
表3-1& 肠内在神经系统的主要神经递质及作用
和电解质的分泌;也可见于中间神经元及某些抑制性肌肉运动神经元
(三)外来神经系统
包括交感神经和副交感神经。交感神经的节后纤维属肾上腺素能纤维(释放去甲肾上腺素),主要分布于内在神经元,或直接支配胃肠道平滑肌、血管平滑肌和胃肠道腺细胞。节后纤维支配肝、脾、肾、胰等器官及结肠左曲以上的消化道和盆腔内脏。交感神经兴奋时能抑制胃肠活动,减少腺体分泌,其作用途径有二:①小范围内通过去甲肾上腺素直接抑制平滑肌;②大范围内通过去甲肾上腺素抑制肠神经系统的神经元。
【实验对象】
家兔,体重2.5~3kg,雌雄兼用。
【实验药品】
20%氨基甲酸乙酯、生理盐水、台氏液、1∶100 000肾上腺素、1∶100 000乙酰胆碱、1∶10 000阿托品、1%酚妥拉明、1%氯化钙溶液、1mol/L NaOH溶液、1mol/L HCl溶液。
【实验器材】
哺乳类动物手术器械一套(包括手术刀、粗剪、手术剪、眼科剪、止血钳)、兔手术台、电子刺激器、保护电极、注射器、麦氏浴槽、MedLab生物信号采集处理系统、智能化药理生理监测仪、缝针、滴管、球胆或加氧泵、烧杯或培养皿、L型玻璃钩(中空)、张力换能器、铁支架、双凹夹、丝线。
【实验方法和步骤】
(一)在体实验
1.准备工作
(1)用20%氨基甲酸乙酯由兔耳缘静脉注射将其麻醉(剂量略低于1g/kg体重)。
(2)将家兔仰卧固定在手术台上,剪去颈部的毛,沿正中切开皮肤与肌肉,分离气管,做气管插管。
(3)剪去腹部的毛,自剑突下沿腹部正中线切开腹壁,暴露胃和肠。在膈下食管的前方找出迷走神经前支,分离穿线,套以保护电极。
(4)用温生理盐水浸湿的纱布将肠推向右侧,在左侧肾上腺上方分离出内脏大神经,穿线并套以保护电极。
(5)用温热生理盐水(38~40℃),浸浴胃肠(或以手术台加温),保持腹腔内温度约37~38℃,并防止胃肠表面干燥。
2.实验项目
(1)观察正常情况下的胃肠活动,包括胃、小肠的紧张性收缩、蠕动以及小肠的分节运动。
(2)用适宜频率和强度的电脉冲,刺激膈下迷走神经,观察胃肠运动的变化。可反复刺激直至出现明显反应。
(3)调节电刺激的频率、强度,刺激内脏大神经,观察胃肠运动的变化。
(4)在胃和小肠上各滴上3~5滴1∶100 000乙酰胆碱,出现反应后立即用温热生理盐水冲洗掉。
(5)在胃和小肠上各滴上3~5滴1∶100 000肾上腺素,观察胃肠运动的变化。
(6)先以电刺激膈下迷走神经,当出现明显反应时,从耳缘静脉注射阿托品0.5~1.0mg。观察胃肠运动的变化。再直接电刺激胃和小肠,观察其运动的变化。
(二)离体实验
1.准备工作& 麦氏浴槽及张力换能器固定在铁架台上,向浴槽内加入台氏液至浴槽高度的2/3处。麦氏浴槽中加水并通电加热,将温度控制器调至38℃,当水温升高至38℃时,打开电动泵电源,推动加温后的水循环流动,以保持麦氏浴槽中台氏液恒定在38℃。取一段橡胶管一端与浴槽侧管连接,另一端与增氧泵连接(图3-8)。把台氏液倒入烧杯放入恒温浴锅中预热,以备实验中使用。&&&&&&&&&&&& 图3-8& 离体肠肌实验装置
2.家兔离体小肠平滑肌标本的制备& 用木槌猛击家兔头耳后的枕骨使其昏迷,用普通剪刀剪除腹部的兔毛,沿腹部中央剪开皮肤,用手术剪沿腹白线剖开腹腔,找出胃,在幽门与十二指肠交界处,剪断十二指肠,用组织镊夹起十二指肠断端,沿肠缘剪掉与肠管相连的肠系膜,并取下十二指肠及其邻近小肠约20~30cm。把离体的肠管置于4℃左右的台氏液中轻轻漂洗,然后用注射器抽取台氏液注入肠腔以清洗肠腔内容物。用组织剪把肠管分成长约2~3cm数段,取一段肠管将一端挂在通气管的挂钩上,另一端夹在与张力换能器相连的蛙心夹上,放入装有38℃台氏液的平滑肌浴槽中。移动换能器,给予肠管一个合适的基础张力,调节螺旋夹以控制气体流量(以通气管中的气泡一个一个的溢出为宜)。&&&&&&&&&
3.仪器连接& 把张力换能器与MedLab生物信号采集处理系统连接,点击“文件”菜单“打开配置”中的“肠肌记录”项目,系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:通道放大倍数200~500、直流耦合(下限频率,DC)、采样间隔5ms。
4.实验项目
(1)描记肠平滑肌自动节律性收缩曲线:描记离体肠段在38℃台氏液中的收缩曲线,注意观察收缩的幅度和节律。收缩曲线基线的高低表示小肠平滑肌紧张性的高低,收缩曲线的幅度大小表示小肠平滑肌收缩活动的强弱。
(2)乙酰胆碱的作用:在药液管中加入1∶100 000乙酰胆碱1~2滴,观察收缩活动的改变,待作用明显后,先打开药液管的出口放弃含药的台氏液,再打开二通使预液管预温的台氏液通向药液管,重复冲洗2~3次,待肠管恢复正常收缩后,再进行下一步实验。
(3)肾上腺素的作用:在药液管中加入1∶100 000的肾上腺素1~2滴,观察收缩活动的改变,待作用明显后,按上述方法冲洗。
(4)阿托品的作用:在药液管中加入1∶10 000的阿托品2~4滴,2min后再加入1∶100 000乙酰胆碱1~2滴,观察肠平滑肌活动有何变化,并与实验(2)进行比较,冲洗方法同上。
(5)酚妥拉明的作用:在药液管中加入1%酚妥拉明3~4滴,2min后再加入1∶100 000的肾上腺素1~2滴,观察肠平滑肌活动有何变化,并与步骤(3)进行比较,冲洗方法同上。
(6)氯化钙的作用:在药液管中加入1%氯化钙1~2滴,观察肠平滑肌收缩活动的改变。作用明显后,按上述方法冲洗。
(7)酸碱的作用:在药液管中加入1mol/L HCl溶液3~4滴,观察肠平滑肌收缩活动的改变。在滴加HCl使肠平滑肌活动出现明显变化的基础上加1mol/L NaOH溶液3~4滴于药液管内,观察肠平滑肌的反应。冲洗方法同上。
(8)温度的影响:将药液管中台氏液全部换成25℃的台氏液,观察肠平滑肌活动有何变化。然后逐步加温至38℃,观察有何反应。
【注意事项】
1.在体实验中麻醉用药不宜过量,要求浅麻醉,电刺激时强度适中。实验过程中注意保温和防止器官干燥。
2.离体实验中:
(1)每次加药前,必须在预液管内准备好更换用的38℃台氏液。
(2)药液管内台氏液的量必须没过肠段,并保持药液管恒温为38℃,以免影响肠平滑肌的收缩功能以及药物的反应不稳定。
(3)各药液加入的量为参考数据,效果不明显可补加,但不可一次过多,以免引起不可逆反应。
(4)每个步骤出现作用后,必须立即放开出药管的弹簧夹,更换药液管内的台氏液,待肠段恢复正常运动后再观察下一项目。
【思考题】
1.分析实验中各项因素影响小肠平滑肌活动的作用机制。
2.哺乳类动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态需具备哪些基本灌流条件?
3.试比较肾上腺素、乙酰胆碱对小肠平滑肌和心肌的作用有何不同?
(郑鸣之& 俞月萍)
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浙江医学高等专科学校药理学教研室
电话:8, E-mail:yuyueping@}

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