做肺结核药检医院安全期会不会怀孕留底单

检验肺结核打试验针的地方变大了,像我这样的是不是已经是阳性了_百度知道
检验肺结核打试验针的地方变大了,像我这样的是不是已经是阳性了
com/zhidao/pic/item/3b292df5e0fe6536a85edf8db1711e,应该不太有事吧./zhidao/wh%3D600%2C800/sign=cb39dbc251c/3b292df5e0fe6536a85edf8db1711e.baidu://g.hiphotos.jpg" target="_blank" title="点击查看大图" class="ikqb_img_alink">挠过几下<a href="/zhidao/wh%3D450%2C600/sign=dcb3de043e93300cacafb/3b292df5e0fe6536a85edf8db1711e://g.hiphotos.jpg" esrc="http://g
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淋巴管炎等均为强阳性,再过48小时看结果;如果为阴性则再做第2次。强阳性人群结核病的发病率高,皮试液浓度为0;10-19mm为中度阳性、血沉等检查以确定诊断和治疗.1毫升含5个单位结核菌素。5-9 mm为一般阳性,注射后48小时由主管医生看结果,才能确定为阴性。②已受结核菌感染但并不意味着发病或患病,或反应强度从原来硬结直径&lt。④3岁内未接种卡介苗者提示体内存在结核病灶。(2)阳性,提示新近感染过结核菌:硬结平均直径≥5mm你应该在48小时后再看结果1阴性, 应及时进行结核菌检查:注射部位无硬结或硬结平均直径<5mm。如果两次试验均为阴性:阳性表示曾感染结核。3.如果2年内PPD试验结果由阴性(-)转为阳性(+);如果直径<20mm但有水泡、影像学检查:(1)结核病患者、双圈.1毫升含1个单位的结核菌素。第一次的皮试液浓度为0。③卡介苗接种所致变态反应。阳性的意义。(2)感染结核菌未发病者,在未找到病变时可作预防性治疗。2.强阳性;10mm,或可能存在活动性病灶,不一定现在患病、坏死:①结核病现症患者;10mm增至&gt;≥20mm(儿童≥15mm)为强阳性。1.一般阳性和中度阳性
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PPD试验临床意义本来就不大,而且稍微大点是正常的。说明您有过结核免疫了
具体的症状还不能做判断,建议去正规专业的医院检查一下较好。
是阳性了,可能是有结核病了。赶紧治疗吧。
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【检验视界】结核病实验室诊断技术进展
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王甦民结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病,其发病规律和流行特点决定了在今后相当长的时期内其危害将持续存在。结核病被列为我国重大传染病之一,是严重危害人民群众健康的呼吸道传染病。世界卫生组织的统计资料显示,约三分之一的世界人口曾经感染结核菌,亚洲地区感染者占全世界的三分之二。据WHO估计,2007年全球约有927万新发结核患者,175万人死于结核病,我国是全球22个结核病流行严重的国家之一,同时也是全球27个耐多药结核病流行严重的国家之一。目前我国三分之一左右的人口已感染了结核菌,受感染人数超过4亿。据研究,受结核菌感染的人群中,10%的人会发展为结核病。我国现有肺结核病人约500万,主要集中在25岁及以上人群;每年约有13万人死于结核病,死亡平均年龄为55.2岁。如果不采取有效的控制措施,在未来的10年,我国可能有近5000万的感染者发生结核病。历年来全国结核病流行病学调查结果显示,全国肺结核患病率继续呈现下降趋势。特别是传染性肺结核患病率下降尤为明显,由2000年的122/10万下降到66/10万,十年降幅近50%。结核分枝杆菌从分类上看是分枝杆菌科、分枝杆菌属中引起人类患病最多的致病菌。结核病实验室检查,尤其是细菌学检查是结核病诊断的最主要和最基本技术,也是选择治疗方案、考核疗效、评价防治效果的主要指标。目前结核病实验室检查技术包括:全菌体为基础的病原微生物学检测、细菌核酸为靶标的分子生物学检测和机体免疫相关反应及其产物的检测。一、全菌体为基础的病原微生物学检查技术与其它传染性疾病相同,从检测原理和临床检验目的上,结核病的病原微生物学检查,分为基于形态学的显微镜镜检、基于微生物表型的分离培养、药物敏感性实验和菌种鉴定实验。1. 分枝杆菌形态学检查——抗酸染色镜检:是结核病临床诊断最基本的方法之一,简单快速,在不考虑生物安全防护的前提下,2-4小时即可发报告,对于结核病的诊断、指导和评价临床用药具有重要意义。从玻片制备操作流程的角度,抗酸染色可分为直接涂片和集菌涂片两种,其中直接涂片应用最为广泛。按照抗酸染色使用染料的性质和镜下成像原理,抗酸染色可分为萋-尼氏染色(Ziehl-Neelsen staining)和荧光染色(fluorescent staining)。使用石碳酸复红染料的萋-尼氏染色镜检是经典的抗酸菌检测方法,目前国内外多数实验室仍然依靠此方法进行结核检测,但其灵敏度较低,仅20%~30%;以金胺O、罗丹明为代表的荧光染色法提高了镜检的灵敏度,并使读片时间大大缩短。但由于荧光显微镜昂贵的价格,限制了其在基层的应用。近年随着发光二极管(light emitting diodes,LED)与荧光显微镜技术结合,研发的发光二极管荧光显微镜较普通荧光显微镜有诸多优势:LED灯泡不需要定期维护,寿命约为50000h,光的强度容易调节,甚至可以转为荧光。LED的蓝光柔和背景与目标对比鲜明,不易产生视觉疲劳;使用LED不用担心汞蒸气对身体的伤害;无需提前打开光源预热,并且在读片的过程中显微镜没有热量产生。在对周围环境的要求上,LED没有光线及暗室的要求,在一个光线微弱的环境中就可以读片。鉴于LED显微镜操作简单,价格低廉,具有高敏感性和特异性,读片所用的时间及视野都较萋尼抗酸染色法有很大优势,WHO推荐LED荧光显微镜作为常规光学显微镜的代替。尽管涂片镜检具有简便、快速、成本效益比高等特点,但是作为活动性肺结核诊断的“标准”,其敏感性和特异性的差异却很大,特别是无法区分死菌和活菌。另外传统抗酸染色对于细胞壁缺失型(L型)结核分枝杆菌的检查效果不理想,虽然曾改良染色法检查,如IK(intensified Kinyouns)抗酸染色、三联染色法(FFCT)、米塔尼尔黄改良法等,但因检出率仅为26%~37.4%,且特异性不稳定,导致实际应用受到影响。基于形态学的检查除了用于肺结核的诊断外,显微镜观察药敏分析(microscopic observation drug susceptibility,MODS)也是一项低成本的药敏分析技术。该技术依据结核分枝杆菌在液体培养基中生长时形成索状结构,采用倒置显微镜观察索状结构可用于结核分枝杆菌的快速诊断,对比含有和不含有药物培养孔内的生长情况,即可得出“敏感”或“耐药”的结果。研究报道显示,MODS 对四种药物(异烟肼、利福平、吡嗪酰胺和乙胺丁醇) 的药敏试验结果,与现有分枝杆菌药敏实验检测系统得出的结果能很好地吻合。但是,有些结核分枝杆菌并不形成蜿蜒的索状微菌落,而且堪萨斯分支杆菌在营养培养基中也能形成类似的索纹结构,难以和结核杆菌区别开来。另外,在牛结核高流行国家,如何区分牛分枝杆菌和结核分枝杆菌,也是一个问题。此外,实施 MODS 和其它的培养鉴定新技术,主要的困难还在于生物安全性。痰液样本的消化、去污染与离心浓缩同时进行,而离心过程肯定会产生含菌气溶胶。另外,操作带菌的细胞培养板,也有潜在风险,必须在生物安全柜内进行。因而实施这种“便宜”的测试也必须在符合生物安全要求的实验室完成。2. 分枝杆菌传统培养(或称固体培养):由于分枝杆菌的生长繁殖对营养要求较高,多年来广泛使用的是罗氏鸡蛋培养基和Middlebrook 7H11琼脂培养基。结核分枝杆菌培养结果仍是目前诊断肺结核的金标准。尤其是分离培养结果与镜检方法结合,能够鉴定目标菌的活力程度,该特点在耐药性检测并指导临床用药等方面具有重要作用。但由于结核分枝杆菌的生物学特性,决定了传统的罗氏培养需要4~8周才能判定结核分枝杆菌是否生长,导致了检验结果无法满足临床诊疗活动实效性的矛盾。为解决传统固体培养检查检验结果实效性的问题,2000年后出现了变色培养基测定法。此方法具有培养和药物敏感性检测的双重功能。其原理是在固体培养基中加入氧化还原显示剂无色四氮唑盐(Tetrazole),当有分枝杆菌生长时,分枝杆菌氧化还原系统将培养基中的无色四氮唑盐还原成不溶于水的紫红色物质,并以颗粒形式分泌至细胞表面,从而使结核分枝杆菌菌落变成肉眼可观察到的红色或紫色菌落。变色培养基法阳性结果报告时间平均为10天左右;与罗氏培养基比较阳性率提高约10%~15%,且操作简便,不需要昂贵大型仪器设备,适于在发展中国家和贫困地区推广应用。在实际应用过程中,变色培养法存在阳性率不高,结果判断易带主观性,且变色存留时间较短,仅2~3天紫色即消失,需及时观察结果等问题。虽然培养法的敏感性、特异性高于抗酸染色镜检,但阳性率也只有30%~40%。同时,由于各种分枝杆菌均可生长,要确定培养阳性结果是否为结核菌,仍需结合分枝杆菌菌种鉴定和药物敏感性试验。以生物表型特性培养为基础的分枝杆菌药物敏感性试验和菌种鉴定实验,对于结核病人合理的药物选择、合适的药物剂量以及针对耐药病人的预防控制具有积极的作用。特别是结核病耐药性监测可以为评估制定国家结核病控制规划和控制策略提供科学依据。绝对浓度发药敏试验是60年代以来结核病实验室特别是医院的实验室用于结核分枝杆菌药敏试验的常用方法,其原理是接种同一浓度的菌液在两支不同浓度的含药中性改良罗氏培养基上,计数对照培养基和含药培养基上细菌生长菌落的数量,根据含药培养基上菌落生长的数量,确定测试菌株对该药的耐药性。比例法药敏试验是1996年世界卫生组织在我国开展耐药监测以来广泛在结核病实验室用于耐药性检测的方法。其原理是接种两种不同浓度的菌液在两支同一浓度的含药中性改良罗氏培养基上,计数对照培养基和含药培养基上细菌生长菌落的数量,计算耐药百分比,确定测试菌株对该药的耐药性。无论是比例法还是绝对浓度法,都需要1个月时间报告药敏结果。分枝杆菌菌种鉴定需要经过一系列生物表型实验,如:对硝基苯甲酸(PNB)生长试验、28℃生长试验、细菌的生长速度、菌落形态和菌落颜色,以及耐热触酶试验、硝酸还原等分枝杆菌酶学实验,待测菌株菌体高效液相色谱-质谱组分分析(HPLC-MS)来确定该菌株属于结核分枝杆菌。3. 分枝杆菌生长指示管(mycobacteria growth indicator tube,MGIT)系统:也被称为快速培养或液体培养。BD公司开发的MGIT-960系统、生物梅里埃公司BacT/ALERT 3D是第二代分枝杆菌快速培养、药敏检测系统。目前的检测系统解决了此前Bactec TB-460存在的放射性污染问题,并保留了其快速的优点,使结核病细菌学检查方法有了进一步发展。其基本原理是培养瓶底部含有包被于树脂上的荧光显示剂。由于该显示剂具有氧抑制性,当分枝杆菌生长消耗氧后,荧光显示剂被激活而发出荧光。通过检测系统定期连续测定培养管内荧光强度,判断管内分枝杆菌生长情况。该培养仪可用于痰、支气管灌洗液、胸水、腹水、脑脊液、尿液、脓液、关节液、病灶组织或干酪样块等各种临床标本的分枝杆菌培养、初步菌种鉴定和药物敏感试验。国内外应用结果表明,该系统用于分枝杆菌培养,在阳性率、阳性结果报告时间显著高于传统固体培养法,且自动化程度更高、操作更为简便。阳性标本检出时间平均为9天;结核分枝杆菌菌群鉴定、药敏试验时间平均为7天;阳性标本检出率比固体培养方法提高10.77%。4.噬菌体裂解试验:检测原理是结核分枝杆菌特异性噬菌体可进入活的结核分枝杆菌使其感染,随后加入杀毒剂灭活未进入感染菌体内的噬菌体。进入菌体内的噬菌体在感染菌体内大量增殖,并裂解菌体,释放出的子代噬菌体可感染并裂解随后加入的指示细胞,从而在琼脂平板上出现透亮的噬菌斑。因此,只要根据噬菌斑的有无及其多少就可判断待检标本中是否存在活的结核分枝杆菌。由于噬菌体及敏感细胞均能快速增殖,本法从标本采集处理到结果判定只需18~24小时,并具有较高的敏感性和特异性,用于肺结核诊断,方法学的敏感度是75.0%,特异度为95.2%,阳性检出率为75.0%,该方法敏感性高、特异性强、操作简便,对结核病临床诊断有较高的应用价值。但其测定结果可受许多测定因素的影响,如噬菌体浓度、结核分枝杆菌活性、指示细胞的配置以及杀毒剂灭活时间等。二、 分子生物学技术近年来核酸扩增技术和杂交分析技术的发展,为分枝杆菌的检测、鉴定和药敏实验提供了极大的方便,可将诊断时间从传统方法需要的几周降低到几天。目前已经投入临床使用的分枝杆菌基因诊断技术主要包括聚合酶链反应(PCR) 、核酸探针杂交、DNA序列测定、基因芯片、基因分型等。1. 核酸扩增试验(nucleic acid amplification tests,NAATs):一般称为PCR实验,主要是用于确定待测标本中有无结核分枝杆菌核酸。此类实验包括分子信标(Amplicor MTB)、链置换扩增技术(SDA)、连接酶链反应(LCR)等。这些技术基本都采用了实时定量PCR,对结核分枝杆菌核酸靶序列的确认都具有高特异性。但方法间敏感性差异较大,特别是对涂片抗酸染色阴性的标本。2. 结核分枝杆菌耐药性快速检查方法(1) 核酸线性探针检测(line-probe assay):通过对阳性培养物或含结核分枝杆菌较多标本实施扩增—杂交反应来检测结核分枝杆菌耐药基因位点突变状态,诊断耐药性结核菌。其原理是应用生物素修饰的特异引物扩增DNA,使PCR产物带有生物素标志,将PCR产物变性后与固定在一张膜上的特异寡核苷酸探针杂交,通过酶免疫显色法显示结果。该方法简便,快速,可信度高,但是受膜上探针的限制,不能检测出所有的突变类型。如HAIN公司GenoType MTBDR可以检测一线抗痨药物利福平、异烟肼耐药;GenoType MTBDRsl可检测二线药物氟喹诺酮、乙胺丁醇、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素的耐药。(2) 环介导的等温扩增(LAMP)环介导的恒温扩增(loopmediated isothermal amplification,LAMP)是用4条特异性引物分别识别目标DNA的6个特定区域,通过2个环状结构和链置换反应实现DNA的快速等温扩增。LAMP敏感性及特异性均较高,扩增快速、高效;其鉴别也很简便,只要用肉眼观察或浊度仪检测沉淀浊度就能判断扩增与否。不足之处是反应结果只有两种:扩增与不扩增,如产生非特异性扩增,则不易鉴别。该方法对于涂片阳性标本的敏感性较高而对涂片阴性标本的灵敏度较低。3. 多功能检测技术:2010年以后,多功能核酸检查进入临床应用。此类技术将快速分子检测整合在一个检测体系中。从而实现通过一次检测,实现判定待检标本中有无目标菌、目标菌鉴定、目标菌药物敏感性状态等多个检验目的。(1) 基因芯片技术:始创于90年代初,又称DNA芯片,是分子生物学前沿的高新技术。其原理是在支持物(玻璃、硅片等)上将探针分子固定,然后与待检标本进行分子杂交,通过检测杂交信号强度从而得出样品分子的数量和序列信息。此方法可一次性对样品序列进行高通量检测和分析,具有自动化程度高,操作序列数量多,检测效率高等优点,可用于分枝杆菌菌种的鉴定、耐药性的监测、基因组比较分析等多方面检查。缺点是设备昂贵,检测费用高。(2) Xpert MTB/RIF系统:Xpert MTB/RIF是美国Cepheid开发的全自动一体化荧光定量PCR仪,与之配套专用的结核分枝杆菌检测试剂盒,能在2小时内从患者新鲜痰液中直接检出是否含有结核分枝杆菌及该菌是否对利福平耐药。整个过程的手动时间不超过5分钟,而且它将样品的超声破碎、核酸提取、样品扩增、实时检测融于一体,都在一封闭系统中进行,对环境和操作者安全。检测敏感性和特异性高于现有检测方法。(3) 2012年11月,Veredus实验室推出VereMTB多路复用分子诊断芯片。该芯片能够在三小时内诊断并鉴定结核分枝杆菌复合群(MTBC)和耐药基因突变体,以及其它九种与临床有关的非结核分枝杆菌。且检验过程只需自然样本。4. 结核分枝杆菌DNA指纹图谱技术相关技术主要用于结核分枝杆菌流行病学研究,利用结核分枝杆菌的生物标志(biomarker)来确定基因型(Genotype),从而分析不同表型特征的结核分枝杆菌在分布情况和流行变异趋势。当前广泛应用的分型方法有: 限制性片段长度多态性分析(IS6110-RFLP)、随机扩增多态性DNA技术(RAPD)、数目可变的串联重复序列(VNTR)、分枝杆菌散在重复单位分型(MIRU)和单核苷酸多态性分析(SNPs)等技术。其中的IS6110-RFLP技术被认为是结核分枝杆菌基因分型的“金标准”,但是所需菌株量多,而结核分枝杆菌生长缓慢,并且低IS6110拷贝数的菌株则分析结果不可靠,因此该方法具有局限性。RAPD是继RFLP之后发展起来的检测基因组多态性的基因型分型方法,它是采用一系列随机引物对基因组DNA进行单引物扩增,简单、快速、模板要求不高和费用低廉,但是重复性较差。结核分枝杆菌基因组间随机重复序列一致性分析技术(MIRU-VNTR)是一种新的分型技术,和IS6110-RFLP相比,由于是建立在核酸扩增原理上的基因分型技术,因此具有检测时仅需少量DNA提取液,简单快速的特点,其实用性较高。三、免疫学检查结核病免疫学检查,目前仅能够用于是否感染结核分枝杆菌的诊断。限于传染性疾病的诊断标准和检查原理的限制,对于确定感染后是否发病,免疫学检查结果,无法替代病原学检查结果,仅能作为临床诊断的参考。但由于我国目前的结核病患者中,多数无法获得病原学诊断的直接证据,因此,结核病免疫学检查结果,仍然在结核病的诊疗活动中发挥“相当”的作用。1、体液免疫检测技术:或称为抗原/抗体检查。从20世纪70年代建立了酶联免疫吸附法后,形成了很多以检测结核抗体或结核抗原为主的免疫血清学检测方法,在现代结核病的快速诊断中发挥着重要作用。(1)酶联免疫吸附试验(ELISA):该方法主要用于检测结核病人血清中的特异性抗体。然而结核病患者经常因免疫应答低下,导致体液免疫检测或细胞免疫检测假阴性。且由于种属间共同抗原决定簇的存在,导致结核抗原检测的特异性和敏感性低下,致使此法难以取得实质性的进展。(2)结核分枝杆菌抗原检测:在结核病患者血清或标本中检出结核分枝杆菌抗原,可以作为病原菌存在的直接证据,也可以避免结核病患者因免疫应答低下导致的假阴性结果。近年来由于单克隆抗体制备技术的提高,可以制备高效价的特异性抗体,从而使得检测结核病患者血清中的结核杆菌抗原成为结核诊断的新方法。张周云等利用基因工程方法在体外表达结核分枝杆菌的desA蛋白抗原制备成单克隆抗体,利用该抗体采用ELISA双抗体夹心法检测了139 例临床已确诊的活动性肺结核患者血清中结核抗原,结果表明,其敏感性为84.17%,特异性为92.19%。(3)斑点免疫金渗滤试验(DIGFA):或称为金标法。该法比ELISA更为简便、快速,全程只需3~5min,并可单人份测定。由于操作简单,检测迅速,检出率高,不需要贵重仪器设备,能快速测定抗结核抗体,是一种较为理想的临床结核病辅助诊断方法,因此深受基层结核病诊疗单位欢迎。(4)免疫印迹技术(Western blot):或称为蛋白芯片检查。该技术是一类高特异性、高通量、高灵敏度且微型化的蛋白质分析技术,是蛋白组学研究近年来新兴起的一种方法。其原理是以微孔滤膜作为载体,将纯化的多种结核分枝杆菌抗原,利用微阵列技术固相于同一膜片上,并利用微孔滤膜的渗滤、浓缩凝集作用,在固相膜上快速进行抗原-抗体反应,最后在膜上以免疫金作为标记物直接显色。显色后将芯片放入芯片阅读仪,用专门软件对不同抗原点阵的灰度值进行分析,整个检测过程不超过30分钟。近年来,相关试剂盒用于检测痰菌阳性结核患者、痰菌阴性结核患者和肺外结核病的敏感性分别为93%、86%和89%,特异性超过95%。由于大幅度提高了诊断准确性,可做为结核病诊断,其参考价值得以大幅提高。但该法较上述几种测定方法繁琐且检测成本较高,临床常规检测应用相对较少,主要广泛用于科研实验。2、结核病细胞免疫检查:细胞因子检测主要用于结核分枝杆菌感染确认诊断与机体免疫功能评价。近年来,WHO推荐将γ-干扰素释放试验用于结核分枝杆菌感染诊断。Meta分析结果显示基于结核病特异性抗原刺激T淋巴细胞分泌γ-干扰素释放试验的QFT-IT(ESAT6、CFP10、TB7刺激)和T-Spot.TB(ESAT6、CFP10刺激)方法较结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test,TST)有较高的特异性和敏感性。由于目前报道的γ-干扰素释放试验用于诊断结核病的敏感性、特异性差异较大;结核分枝杆菌感染后的免疫反应与结核病的发生、发展和转归的关系尚未完全明了;人与人个体间免疫反应差异较大等诸多原因。导致至今所有的免疫学诊断方法包括γ-干扰素释放试验尚不能完全鉴别诊断潜伏性与活动性结核感染。四、结语由于结核分枝杆菌的特性、结核分枝杆菌感染发病过程的复杂性以及结核病流行程度的广泛性,决定了结核病实验室检查较其它传染性疾病的检验项目广泛,实验技术涉及的技术学科繁杂,检验结果的意义和目的,涵盖了临床诊断、治疗方案的确定和疗效评价、流行病学调查等多方面。因此,结核病实验室检查是目前医学诊疗和流行病学防控中较为独立的分支。多年来,直到现在结核病诊断一直依靠全菌体为基础的病原微生物学的实验室检测结果作为唯一的确诊用的金标准,其主要原因是:1、细菌核酸为靶标的分子生物学检测技术和机体免疫相关反应及其产物的检测技术出现较晚,尚不够成熟,人们更多的依赖于看到细菌的形态。2、与病原微生物学检测结果可能会有少量不一致,造成诊断误差等问题。笔者认为,作为一种细菌性传染病,病原微生物学检测技术是绝不会被淘汰的,但是由于结核分枝杆菌的生物学特性造成了结核病的病原微生物学诊断结果的敏感性、特异性较差;结果报告时间超长和相当一部分(细菌学检查阴性)病人得不到检测结果,造成诊断和治疗的困难或误差,同样会给病人带来伤害和痛苦。未来的结核病实验室诊断应在强调细菌学检验的标准化和规范化的同时加强研究、深入了解结核分枝杆菌的分子生物学特性及与宿主的相互关系;不断研究开发简便、快速、灵敏、特异的结核病实验室诊断新技术并进行大范围的验证,使之逐步完善,促进新的技术早日广泛进入实验室常规应用。明天精彩继续!检验人的医路视界期待您的关注检验世界网(.cn)“真诚服务中国检验医学”如果您喜欢本文,就点个吧!您的认可,是小编继续加油的动力!
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友情链接:临床医学的发展与实验医学的飞速前进密不可分,随着医学检验(实验医学)的迅猛发展,检验科在结核病诊断中的作用日益突出。现就其在结核病诊断与辅助诊断中的项目及意义向大家做一介绍。&
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一.结核病诊断项目及意
内容载入中...
临床医学的发展与实验医学的飞速前进密不可分,随着(实验医学)的迅猛发展,在结核病诊断中的作用日益突出。现就其在结核病诊断与辅助诊断中的项目及意义向大家做一介绍。&
一.结核病诊断项目及意义。&
1、涂片抗酸染色找抗酸杆菌:&
方法简单,快速,特异性较高,成本低廉,已广泛应用。阳性一般可确诊结核病,并证明其有传染性。但其灵敏度较低,每毫升标本中含量在条菌以上才可检出,故肺结核中约有2/3为菌阴肺结核,绝大部分肺外结核也为阴性。如用浓缩集菌抗酸染色或萤光染色可提高灵敏度,提高检出率。利用BALF检查-支气管肺泡灌洗液检查又称为&肺的液体活组织检查或肺的液性活检&,涂片平均阳性率为33.9%,培养阳性率为50.3%。
2、结核杆菌培养检查:&
结核杆菌培养检查是目前结核病诊断的&黄金标准&,如病人标本中检出结核菌,可100%确诊为结核病,并且具有传染性。培养出来的结核杆菌可用来进一步做药敏试验,为结核病流行病学及临床治疗提供用药依据。其理论上可检出一条菌,实际工作中只有约1/3肺结核病人为阳性,且用时较长,需30天左右,加上药敏试验需60多天。
3、结核杆菌快速培养:
我院引进的BACTEC960结核菌快速培养仪,利用萤光检测原理使结核菌培养与药敏实验总共只需20天左右时间,比传统结核杆菌培养法缩短了40多天时间,且阳性率提高10&20%以上,相对于BACTEC460来说,无放射性污染,实现了结核菌&快速培养&。其不足是费用较高。&
4、分子生物学诊断:&
TB-DNA-PCR检查即结核杆菌基因检测,其基本原理是利用DNA在体外反复&克隆&复制,在短时间内2&3小时,DNA可复制到原来的百万倍。以此来检查结核杆菌DNA诊断结核病,其方法具有快速、特异、灵敏度高的特点,但定性PCR易出现假阳性,限制了其临床应用。我院引进的opticon2实时萤光定量PCR仪,从某种意义上说,真正实现了结核病的快速诊断。它具有快速(3&4小时出结果)、灵敏(检出率可达到10条菌/毫升标本)、特异性高的特点,相对常规PCR定性,减少了许多中间操作环节,减少了交叉污染机会,利用萤光探针技术的高特异性和PCR扩增的敏感性相结合,杨长避短,同时内做标准曲线,实现了既定性又定量,阳性率达60%以上,为结核病的诊治提供了一个很好的标准。特别是对菌阴肺结核,肺外结核病的诊断更有价值。&
二.结核病辅助诊断项目及意义。&
在以上结核病病原学诊断中,约有1/3-2/3为阴性,对这部分病人,下列检查有助于其诊断。&
1、免疫学诊断:&
(1)细胞免疫学诊断--结素试验&
结核菌素试验简称结素试验,是常用的诊断与辅助诊断方法,其原理为IV型超敏反应。常用5TU标准结素(PPD-S)于前臂掌侧中央处皮内注射,72小时后观察结果。 &
①.注射部位有针眼大小的红点或稍有红肿,硬结直径小于5mm为阴性反应:未感染过结核菌,近期(4-8周)感染机体尚未产生反应,机体免疫反应受到抑制。&
②.注射部位硬结直径在5-9mm为+阳性,10-20为++阳性反应:机体接种过卡介苗或感染过结核菌已康复。&
③.注射部位硬结直径大于20mm(3岁以下婴幼儿大于或等于15mm)或可见水泡、丘疹、局部坏死者为强阳性反应:体内可能有活动性结核病灶存在,可能为抗酸杆菌感染,婴幼儿阳性或强阳性,且未接种过卡介苗,表示体内有活动性结核病灶。&
(2)体液免疫学诊断(血清学诊断)&
体液免疫学-血清学检测结核抗体的反应机制为结核菌侵入机体后刺激机体产生一系列体液免疫和细胞免疫反应,并且细胞免疫随者病情的加重而减弱,体液免疫随着病变的加重(或血行播散)而增加,这种细胞免疫与体液免疫分离的现象在结核病方面表现非常明显。&
①酶标法结核抗体试验(ELISA-TB-Ab)&
ELISA原理是将抗体或抗原吸附于固相载体上,加入检样和酶结合物反应后,再利用酶催化其底物呈色的反应来检测抗原或抗体的方法。本法测出的阳性对活动性结核有辅助诊断价值,但应结合临床观察,因有少数感染结核菌已治愈者也呈阳性反应。&
②金标法结核抗体试验(TB-DOT)&
该方法是应用现代生物技术提纯结核杆菌特异性外膜抗原,引进斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)原理,在定性检测的基础上,引进定量标准色谱卡技术,用于测定活动性结核患者IgG、IgA、IgM抗体的快速血清免疫学诊断,以及化疗后抗体滴定度动态跟踪观察,具有灵敏度高、特异性强等特点,能在数分钟内完成检测。由于胶体金本身为红色,不需引入底物显色试剂,阳性反应即出现红色斑点。同时反应省却了37℃孵育等步骤,具有简便、快速、不需特殊仪器等特点,得到临床广泛应用。其敏感度接近于酶标法,被称为&浓缩&的ELISA。&
此外,还可通过免疫比浊测定各种体液中的免疫球蛋白含量,以辅助诊断结核病:活动性结核病人血清IgA、IgG明显升高,IgM无差别,结脑时脑脊液(CSF)中IgG、IgA、IgM含量显著升高,尤以IgG升高为主。体液免疫学即血清学诊断的主要问题是如何提高特异性至95-100%,即将假阳性率降至0-5%。
2.生化诊断:&
结核病人与非结核病人之间生化代谢的不同,为结核病的诊断提供了一个新的途径。&
(1)酶学检查&
①腺苷脱氨酶(ADA)检查&
胸腹水ADA活性升高,按其高低顺序依次为结核性&癌性&非特异性。以ADA&40U/L为标准,诊断结核性胸腹膜炎的敏感性与特异性均在95%以上,但需与类风湿关节炎所致胸腹水相区别,因其ADA升高与结核性相似,但可以通过检测血液ADA来区别,结核性胸腹水ADA与血清ADA比值基本上都&1,而其它均<1。&
结脑与隐球菌性脑膜炎CSF中蛋白质、葡萄糖、氯化物和细胞数均呈相似性变化,而前者ADA活性升高,后者正常,以ADA&10U/L为标准诊断结脑,其特异性与敏感性均在90%以上。病毒性脑炎CSF中ADA升高,但可通过葡萄糖,氯化物含量加以区别:细菌性脑炎糖、氯化物降低。 &
②乳酸脱氢酶(LDH)检查 &
结核性胸腹水多为渗出性胸腹水,LDH检测可以用于漏出液与渗出液胸腹水的鉴别。胸腹水LDH含量/血清LDH&0.6为渗出液,胸腹水LDH含量/血清LDH<0.6为漏出液。脑脊液中LDH含量:化脑&结脑&病脑。&
(2)其它生化诊断&
结核性胸腹水总蛋白(TP)一般大于35g/L,胸腹水TP/血清TP&0.5,糖降低,正常CSF中氯化物比血清高,其机理为Donnan平衡,以维持CSF和血浆渗透压的平衡,结脑CSF中,氯化物降低,常小于106mmol/L。&
3.实验室常规检查:&
(1)血沉(ESR):活动性结核病人血沉常常加快,随着病情的好转,康复而逐渐恢复正常。&
(2)细胞计数和分类:结核性胸腹膜炎病人,其胸腹水有核细胞数常在1.0-10&109/L之间,其中以淋巴细胞为主,某些标本常在80%以上。在淋巴结涂片中,类上皮细胞(由网状内皮细胞、组织细胞、脱落肺泡上皮细胞等增生并吞噬结核菌后演变而成)成群出现,应首先考虑结核的可能,如其超过有核细胞总数10%以上,则更有诊断价值。朗罕氏巨细胞为结核病诊断中较为特异的细胞,具有较肯定的细胞学诊断价值。细胞直径达60-80um,核可达数十个,圆形或卵圆形,与类上皮细胞之核形状相似,通常排列于胞浆的周边,呈花环或马蹄铁状,间呈混乱而无秩序的排列,核染质较细致,胞浆灰红色,可含有空泡及小颗粒。 &
4.L型结核杆菌检查:
L型结核菌是结核杆菌生命周期中的一个重要环节,是结核杆菌为了适应不良环境的一种保护性反应,其细胞壁完全或部分缺失,导致细胞壁中分支菌酸也全部或部分缺失。L型结核杆菌可在结核病人各种标本中检出。菌阴结核病人痰标本L型结核杆菌检出率达18.2-45.5%,CSF中达17.0%。菌阳结核病人的痰和血清中85%存在L型结核菌。菌阳结核病人当治疗有效时,结核杆菌大量死亡,L型出现,但持续一段时间后,L型结核菌也相继消失。而机体状态不良、化疗不合理时,可使L型结核杆菌形成几率增加,并长期生存繁殖下去。所以L型结核杆菌在机体内潜伏,表现为机体病变愈合不理想,临床检验不能反应疾病的真实情况;也可引起结核病的复发和恶化。这是因为如果条件适宜,L型结核杆菌可复归为有较强毒力的结核菌,引起结核病加重或复发。故L型结核杆菌的检查对诊断菌阴结核病有极其重要意义。&
L型结核杆菌检查方法有细胞壁染色法和L型分支杆菌培养基培养法,细胞壁染色法有其缺陷,其只能证明标本内存在L-型菌,但不一定就是L-型结核菌,培养法还须经返祖才可确诊为L-型结核菌,其费时太长。如结合分子生物学方法来确诊是否为L型结核菌,将大大提高确诊的效率。&
如能在做细胞壁染色及培养的同时,结合分子生物学方法,将会使L-型结核杆菌检测更加快速,符合临床需要。加上传统的涂片与培养将会为结核病的诊断提供&确切&的&金标准&。&
其它方法如结核菌的动物实验比一般方法更为可靠,一般用豚鼠、小白鼠试验,感染动物后,经症状观察、解剖、病检及培养涂片等方法为临床结核病的诊断提供病原学依据。&
总之,结核病的实验室诊断,其各种方法存在着这样那样的不足,有待进一步完善,它们如能有机地结合在一起,将会对结核病的诊断提供有力的依据。&&
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