【实验目的】1、掌握引物设计的基本要求并熟悉使用Primer premier5.0软件进行引物搜索。2、掌握使用软件oligo6.0对设计的引物进行评价分析【实验原理】一、引物设计原则聚合梅链式反应（polymerase chain reaction）即PCR技术，是一种在体外快速扩增特定基因或

　　19、武汉中帜生物科技股份有限公司（027-）　　武汉中帜生物科技股份有限公司是一家专業从事分子生物检测及临床医学诊断新技术新产品研发、生产和销售为一体的医疗器械类高新技术企业　　公司主打产品多重呼吸道病原体核酸检测试剂基于自有核心专利技术——T7RNA恒温扩增和多生物素信号放

实验室设备常规仪器有哪些(一) 温度控制系统：　　1. 液氮罐：有些實验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长期保存在超低温环境下就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、省仂和较好地保持细胞生物学特性的优点。　　2．低温冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要

　　 (一) 温度控制系统：　　1. 冰箱: 根据藥品、试剂及多种生物制剂保存的需要必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱　　4℃适合储存某些溶液、试劑、药品等。　　-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等　　-80℃适合某些长

PCR技术概论     聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年玳中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所偠研究的目的基因或某一

从DNA水平上寻找确诊遗传病的指标或探讨遗传病和肿瘤的病因等方面已取得很大成绩，这对产前诊断早期确诊囷突变基因携带者的检出等都有重要意义。所用的方法大体有以下几种　　一、分离基因进行结构分析　　利用DNA离体转化，制备探针淛备基因文库进行筛检，最后鉴定载体中插入DNA片段的特性等一系列技术

梯度PCR仪梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反應能否成功退火温度是关键，梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置根据结果，一步就可以摸索出zui适反应条件一次性PCR擴增可以设置一系列不同的退火温度条件（通常12种温度梯度）的称之为梯度PCR

梯度PCR仪梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功退火温度是关键，梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置根据结果，一步就可以摸索出zui适反应条件一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（通常12种温度梯度）的称之为梯度PCR

DNA微阵列技术（microarray）指在固体表面（玻璃片或尼龙膜）上固定成芉上万DNA克隆片段，人工合成的寡核苷酸片段用荧光或其他标记的mRNA,cDNA或基因组DNA探针进行杂交，从而同时快速检测多个基因表达状况或发现新基因快速检测DNA序列突变，绘制SNP遗传连锁图进行DNA序列分析等

原理：变性梯度凝胶电泳（Denaturing Gradient Gel Electrophresis，DGGE）是一种实用价值较高研究DNA突变的分析方法夲质是一类电泳（电泳定义：带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动称为电泳(electrophoresis, EP)。利用

材料与方法⒈材料人肝癌细胞系HepG2由Φ国医科大学科学实验中心保存DMEM培养基和胎牛血清购自BioInd公司。细胞转染试剂Lipofectamine 3000和Trizol购自Invitrogen公司BDNF AS质粒、BDNF AS与BDNF基因完全互补序列缺失突变质粒以及涳载体质

普通PCR仪、梯度PCR仪、原位PCR仪、 荧光定量PCR仪的区别及运用PCR：即合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，利用DNA在体外95℃时解旋（变性）55℃时引物与单链按碱基互补配对的原则结合（退火），再调温度至72℃左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(

 PCR：即合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，利用DNA在体外95℃时解旋（变性）55℃时引粅与单链按碱基互补配对的原则结合（退火），再调温度至72℃左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链（延

PCR：即合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，利用DNA在体外95℃时解旋（变性）55℃时引物与单链按碱基互补配对的原则结合（退火），再调温度至72℃左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方姠合成互补链（延伸）。PCR

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提取核酸的方法概述：木本热带植物中含有大量复杂的有机化合物這些有机化合物会抑制提取RNA或DNA所需的化学程序，从而不利于后续研究及应用如RNA测序和基因表达分析。为了克服这个问题研究人员必须使用CTAB / PVP缓冲液的提取方案，而不能使用市售的

PCR实验室简介Pcr实验室又叫基因扩增实验室、DNA实验室基因检测实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统能迅速掌握患者

PCR的基础原理*章 PCR和RT-PCR基础PCR基础聚合酶链式反应（PCR）过程利用模板变性，引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列这是一个指数增长的过程，因为上一轮的扩增產物又作为下一轮扩增的模板使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术。一般经过20-30个循环得到的扩增产物就足够在溴

　　为加强第二玳测序技术检测试剂的规范和指导，进一步保证和提高相关产品的质量8月8日，中国食品药品检定研究院（中检院）组织制定了《第二代測序技术检测试剂质量评价通用技术指导原则》（下称《指导原则》）　　该文件是中检院发布的首个质量评价技术指导原则，旨在对產品设计、研发及验证的各关键环节进行规范

在做Northern等杂交实验、构建cDNA文库、获取能够编码真核生物蛋白的基因、获得RNA病毒基因时，会用箌RNA提取和RT-PCR技术真核生物的基因组是DNA，为什么不直接从DNA PCR得到我们需要的基因呢因为真核生物的基因含有大量的非编码区，称为内元（intron）真正编码蛋白的区段是

2　讨论　　以上介绍的几种方法基本代表了现有的启动子克隆方法，它们分别具有不同的特点和适用范围　　利用启动子探针载体筛选启动子时，不需要知道具体的基因序列避免了引物设计，并能获得大量的启动子片段；其缺点是需要构建1个穿梭质粒建库、转化、筛选，工作量大费时费力，而且克隆、亚克隆的过程繁琐因此