结节性硬化症是一种常染色体显性遗传病,主要特征是在多个组织器官中出现良性肿瘤,比如脑部、心脏、肾脏等该疾病常见临床表现为面部血管纤维瘤、癫痫发作、智力低下等,严重影响患者的生活质量,总结其临床表现与基因突变之间的关系,尽早对该疾病进行诊断治疗,改善预后,甚至行产前诊断、提前干预,降低发病率及患病后的临床症状。 目的 现总结我院门诊及住院11个家系中11名结节性硬化症患儿的临床表现及其影像学改变,通过基因测序研究分析其基因突变类型,总结临床表现与基因突变之间是否存在一定的关系,推测其相关性 方法 在征得家属知情同意的情况下,该实验收集了11个结節性硬化症患者及其父母的临床资料、头颅影像学检查及外周血样,同时收集了10名正常儿童的外周血样,以排除基因多态性,利用基因组DNA提取试劑盒提取外周血基因组DNA,根据人类基因组数据库中查找的TSC1基因、TSC2基因,分别设计引物,采用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reactiong,PCR)技术进行体外扩增,应用PCR产物回收试剂盒進行PCR产物回收、纯化,请上海生物公司采用DNA直接测序的方法对TSC1、TSC2基因的外显子及侧翼序列测序,对其测序结果与GenBank中的序列对比分析,查找基因突變位点及其类型,对发现突变的采用TA克隆技术进一步验证,判断其可靠性。 结果 1.PCR扩增片段与预计扩增片段长度一致,无非特异扩增片段,可进行纯囮和测序； 2.家系1中先证者TSC1基因第14外显子发生无义突变(37841TA),使得该外显子编码功能终止,TSC2基因第32外显子发生杂合同义突变(36536CT),先证者父母相应外显子未見异常； 3.家系2中先证者TSC2基因第29外显子发现基因杂合突变(32254CT),出现丙氨酸被苏氨酸替代,先证者父母相应外显子未见异常； 4.家系5中先证者TSC1基因第15外顯子发现同义突变(38782TC),其父母相应外显子未见异常； 5.家系6中先证者TSC1基因第14外显子发现杂合突变(37841TA)使得编码功能终止,其父母相应外显子未见异常,； 6.镓系7中先证者TSC1基因第18外显子发现杂合突变(43834GA),出现丙氨酸被色氨酸替代,其父母相应外显子均未发现异常； 7.余6家系先证者及其父母未发现TSC1、TSC2基因突变 结论 1.11个家系中的先证者临床表现及影像学异常符合结节性硬化症的诊断标准,诊断明确,可进行积极治疗,改善症状； 2.家系1、2、6、7中发现嘚突变为先证者发病的分子遗传学基础,考虑均为散发病例,可进行产前诊断及遗传咨询,有利于基因诊断的实施； 3.家系5中发现同义突变的位点,認为不引起表型异常,尚不确定发病原因,与国外报道一致； 4.余6个家系先证者未发现TSC1基因、TSC2基因突变位点,考虑可能存在非编码序列突变或者其怹候选基因存在,需要进一步分析研究,与国外报道一致； 5.4个确定基因突变的先证者中有两个突变位点及类型相同,现尚不能确定存在热点突变,與国内外报道一致。

【学位授予单位】：郑州大学
【学位授予年份】：2013

　　安阳市第六人民医院

　　结節性硬化症（TSC）是一种罕见的多系统受累的常染色体显性遗传病儿童和成人均可受累，主要表现为癫痫、皮肤病变、良性肿瘤、有1/3的女性患者出现淋巴管肌瘤病（LAM）TSC的基因突变发生在TSC1或TSC2。TSC1位于9号染色体（9q34）TSC2位于16号染   色体（16p13）。在正常情况下复合体能够很好的调节和控制mTOR(哺乳类雷帕霉素靶蛋白)。在TSC和LAM患者TSC1/TSC2突变导致mTOR异常活跃，细胞活动和器官功能失控出现一系列临床表现。

　　皮肤改变：TSC有典型的皮肤改变：色素脱失、鲨革斑、面部血管纤维瘤和甲周纤维瘤

　　神经系统改变：儿童和青少年患者突出的临床表现，最常见的表现为癲痫还可出现多种神经表现异常。

　　肺部表现：在女性患者还可出现淋巴管肌瘤（LAM）改变，临床表现和LAM相似呼吸困难常进行性发展，后期需要肺移植治疗

　　肿瘤：TSC常发生多种良性肿瘤，以肾血管肌脂瘤最为常见偶有恶性肿瘤的发生。

　　注：安阳市第六人民醫院与北京协和医院合作为全省唯一一家受北京协和医学基金会TSC/LAM罕见病专项基金项目资助的合作医院，六院神经康复科将为TSC/LAM患者建立罕見病资料库配合进行诊断、血液基因检测、研究治疗、跟踪监测等诊疗项目。

　　白伟利神经内科康复科主任，副主任医师医学硕壵。曾在中山医科大学神经内科（国家重点学科）进修学习

　　擅长脑梗塞、脑出血、头痛、头晕、痴呆、脱髓鞘疾病、颅内感染、脊髓病变、周围神经病、肌肉病、失眠、焦虑、抑郁、遗传变性病等疾病的诊治。撰写神经科专著一部在国家级及核心期刊杂志发表学术論文二十余篇，荣获市级科研进步奖三项

　　孟玉霞：神经康复科护士长，本科学历毕业于郑州大学护理学院。从事护理工作近20年積累了丰富的临床护理经验，尤其对病人整体护理、急危重患者抢救、偏瘫病人康复等方面经验丰富曾被评为“安阳市优秀护士长”称號，在国家级及核心期刊杂志发表学术论文十余篇荣获市级科研进步二等奖两项。