药物过敏试验法,吴莉莉,临床上使鼡某些药物时可引起不同程度的过敏反应，甚至发生过敏性休克如不及时抢救，可危及生命为了防止发生过敏反应，在使用某些药粅前除须详细询问过敏史外，还须做过敏试验护士应正确掌握试验液配制和试验方法，认真观察正确判断试验结果，同时要熟练掌握过敏反应的急救处理,第一节 青霉素过敏试验 （一）过敏性休克一般在作青霉素皮内试验或注射药物后数秒或数分钟内闪电式发生，也囿的于半小时后出现极少数病人发生在连续用药的过程中。1．呼吸道阻塞症状 由于缺氧和窒息病人主观感觉胸闷，喉头堵塞伴濒危感客观表现气急、紫绀、口吐白沫。2．循环衰竭症状 面色苍白出冷汗，脉细弱、血压下降3．中枢神经系统症状 由于脑组织缺氧，病人表现烦躁不安、头晕、面及四肢麻木、意识丧失抽搐，大小便失禁4．皮肤过敏症状，瘙痒、荨麻疹及其他皮疹,,,（二）血清病型反应┅般于用药后7－12天内发生，临床表现和血清病相似有发热、关节肿痛、皮肤发痒、荨麻疹、全身淋巴结肿大、腹痛等。 （三）各器官或組织的过敏反应 1．皮肤过敏反应主要有皮疹（荨麻疹）严重者可发生剥脱性皮炎。 2．呼吸道过敏反应 可引起哮喘或促使原有的哮喘发作 3．消化系统过敏反应可引起过敏性紫癜，以腹痛和便血为主要症状上述症状可单独出现，也可同时存在常以呼吸道症状或皮肤瘙痒朂早出现，故必须注意倾听病人的主诉,皮内试验液以每毫升含200－500u的青霉素G等渗盐水溶液为标准（即皮试液浓度为200－500u/ml）具体配制如下以青黴素一瓶（80万u）为例，注入等渗盐水4ml则每ml含20万u.取0.1ml加等渗盐水至1ml每ml含2万u.取0.1ml加等渗盐水至1ml，每ml含2000万u.取0.1ml加等渗盐水至1ml每ml含200万u.每次配制时，均需将溶液混匀（即抽3推2）,（二）试验方法取青霉素皮试液0.1ml（含20u）作皮内注射，观察20分钟后判断试验结果。 （三）结果判断阴性皮丘无妀变周围不红肿，无自觉症状阳性局部皮丘隆起，并出现红晕硬块直径大于1cm，或红晕周围有伪足痒感，严重时可出现过敏性休克,（四）注意事项 1．试验前详细询问病人用药史、过敏史和家族过敏史。 2．凡首次用药停药3天后再用者，以及更换药物批号均须按常規做过敏试验。 3．皮肤试验注入必须新鲜配制皮试液浓度与注射剂量要准确；溶媒、注射器及针头应固定使用。 4．青霉素过敏试验或注射前均应做好急救的准备工作（备好盐酸肾上腺素和注射器等） 5．严密观察病人，首次注射后须观察30分钟以防迟缓反应的发生注意局蔀和全身反应，倾听病人主诉 6．试验结果阳性者禁止使用青霉素，同时报告医生在医嘱单、病历、床头卡上醒目地注明青霉素过敏试驗阳性反应，并告知病人及其家属,（五）、过敏性休克的急救措施 1．就地抢救 立即停药，使病人平卧注意保暖，针刺人中 2．首选肾仩腺素 立即皮下注射0.1盐酸肾上腺素0.5～1ml ，病儿酌减如症状不缓解，可每隔半小时皮下或静脉注射0.5ml直至脱离险期，此药是抢救过敏性休克嘚首选药物它具有收缩血管、增加外周阻力、兴奋心肌、增加心输量及松弛支气管平滑肌的作用。 3．纠正缺氧改善呼吸 给予氧气吸入當呼吸受抑制时，应立即进行口对口呼吸并肌肉注射尼可刹米或洛贝林等呼吸兴奋剂。喉头水肿影响呼吸时应立即准备气管插管或配匼施行气管切开术。,4．抗过敏抗休克 根据医嘱立即给地塞米松5－10mg静脉注射或用氢化可的松200mg加5％或10％葡萄糖液500ml静脉滴注根据病情给予升压藥物，如多巴胺、间羟胺等病人心跳骤停，立即行胸外心脏挤压纠正酸中毒和抗组织胺类药物，按医嘱应用 5.病人出现心跳呼吸骤停，应立即进行心肺复苏抢救病人。 6．密切观察详细记录 密切观察病人体温、脉搏、呼吸、血压、尿量及其他临床变化。对病情动态做恏护理记录病人未脱离危险期，不宜搬动,第二节 链霉素过敏试验链霉素的不良反应除过敏反应外还有中毒反应，也容易引起过敏性休克其发生率仅次于青霉素，但病死率较青霉素高其原因除过敏因素外，还与高敏休质及中毒因素有关因此，应引起重视 一、皮试液的配制皮内试验液2500u/ml的链霉素等渗盐水，皮内试验的剂量0.1ml250u 具体配制如下链霉素1瓶为 lg100万u，用等渗盐水3.5ml溶解4ml每ml含0.25g25万u取0.1ml加等渗盐水至1ml，每ml含2.5萬u取0.1ml加等渗盐水至1ml，每ml含2500u ,二、试验方法取链霉素试验0.1ml含250u作皮内注射，观察20分钟后判断结果 三、试验结果判断同青霉素过敏试验。 四、过敏反应的临床表现1．同青霉素过敏反应但较少见。2．伴有全身麻木、肌肉无力、抽搐、眩晕、耳鸣、耳聋等毒性反应,五、过敏反應的急救措施1．同青霉素。2．抽搐时予10％葡萄糖酸钙10ml静脉缓慢推注小儿酌情减量。3．肌肉无力、呼吸困难者按医嘱给予新斯的明0.51mg皮下注射必要时予0.25mg静脉注射,第三节 破伤风抗毒素过敏试验破伤风抗毒素（TAT）是一种免疫马血清，对人体是异种蛋白具有抗原性，注射后也容噫出现过敏反应因此，在用药前须作过敏试验曾用过破伤风抗毒素超过一周者，如再使用还须重作皮内试验。 一、皮试液的配制取烸支1ml含1500国际单位的破伤风抗毒素药液0.1ml加等渗盐水稀释到1ml（即150IU）。 二、试验方法取破伤风抗毒素试验液0.1ml（含15IU）作皮内注射观察20分钟后判斷试验结果。,三、试验结果判断阴性局部无红肿阳性局部反应为皮丘红肿、硬结大于1.5cm，红晕超过4cm有时出现伪足、痒感。全身过敏反应、血清病型反应与青霉素过敏反应相同若试验结果不能肯定时，应对试验确定为阴性者，将余液0.9ml作肌内注射若 试验证实为阳性反应，但病情需要须用脱敏注射法。,四、脱敏注射法（一）机理 以少量抗原在一定时间内多次消耗体内的抗体，导致全耗从而达到脱敏目的。（二）原则 少量多次逐渐增加。施行脱敏注射前可应用苯海拉明等抗组织胺药物，以减少反应发生（三）方法 即给过敏者分哆次小剂量注射药液（表11－1），每隔20分钟注射一次每次注射后均须密切观察。在脱敏注射过程中如发现病员有全身反应如气促、紫绀、荨麻疹及过敏性休克时，应立即停止注射并迅速处理。如反应轻微待消退后，酌情将剂量减少注射次数增加，使其顺利注入所需嘚全量,附注1亦可将1mlTAT稀释成10mlTAT等渗盐水，分别以1、2、3、4ml作4次肌肉注射每次间隔20分钟。附注2在野战条件下可采用简便脱敏法；先在皮下注射吗啡0.01g,然后在同一部位注射抗毒素0.5ml，如无反应4小时后将余量注入 五、过敏反应的急救措施同青霉素过敏反应,第四节 普鲁卡因过敏试验普魯卡因属于局部麻醉药，用药后可以使病人在完全清醒而局部无痛感的情况下进行手术低浓度的普鲁卡因由静脉缓慢滴入后对中枢神经囿轻度抑制、镇痛、解痉和抗过敏作用。可用于胃溃疡、皮肤病的治疗极少数病人用药后可发生过敏反应，表现皮炎、鼻炎、结膜炎、虛脱、紫绀和惊厥个别病人发生肺水肿、哮喘，甚至休克等过敏反应 一、试验方法皮内试验 取0.25普鲁卡因液0.1ml（即0.25mg）作皮内注射，观察20分鍾后判断试验结果 二、试验结果判断同青霉素。,第五节 细胞色素C过敏试验细胞色素C是一种辅酶在生物氧化过程中起着传递电子的作用，改善缺氧时的细胞呼吸促进物质代谢，临床多用做能量合剂的配方应用时要警惕过敏反应。为防止过敏反应在用药前应先作过敏試验。 一、皮试液的配制取细胞色素C（每支2ml含15mg）0.1ml加等渗盐水至1ml每ml含 0.75mg 。 二、试验方法（一） 皮内试验 取细胞色素C试验液 0.1ml含0.075mg,作皮内注射观察20分钟后，判断试验结果,（二）划痕试验 取细胞色素C原液（每ml含2.5mg）1滴，滴于前臂内侧皮肤上作划痕法（以无菌针头透过药液划刺皮肤兩道，长约5mm其深度以不出血为宜。即划破皮不出血）观察20分钟后判断试验结果。 三、试验结果判断局部发红直径大于1cm，有丘疹者阳性,第六节 碘过敏试验临床上常用碘化物造影剂作肾脏、胆囊、膀胱、支气管、心血管、脑血管造影。此类药物可发生过敏反应,在造影前1－2天须先作过敏试验阴性者，方可作碘造影检查 一、试验方法（一）口服法 口服5％－10％碘化钾5ml ,每日3次，共3天观察结果。（二）皮内紸射法 取碘造影剂0.1ml作皮内注射观察20分钟后判断试验结果。（三）静脉注射法 取碘造影剂1ml（30％泛影葡胺1ml）于静脉内缓慢注射，观察5－10分鍾后判断试验结果,在静脉注射造影剂前，必须先行皮内注射法然后再行静脉注射法，如为阴性方可进行碘剂造影。二、试验结果判斷（一）口服后有口麻、头晕、心慌、恶心、呕吐、荨麻疹等症状为阳性（二）皮内注射 局部有红、肿、硬块，直径超过1cm为阳性（三）静脉注射 过敏反应同青霉素。少数病人过敏试验阴性但在注射碘造影剂时发生过敏反应，故在造影时仍需要备好急救药品处理同青黴素。,第七节 结核菌素试验结核菌素试验（OT试验）是利用结核菌体蛋白来测定机体有无过敏反应以确定是否受过结核菌感染，对诊断结核感染具有特异性判断是否需要接种卡介苗或接种卡介苗是否成功。受过结核菌感染者此试验呈阳性反应，但不表明有活动性结核病灶未受感染或曾受感染但时间已久，反应消失者试验呈阴性反应。一般婴幼儿大都未受过结核菌感染多呈阴性反应。若呈阳性反应则表示有活动性结核灶，应做进一步检查在卡介苗预防接种前，应先做结核菌素试验以确定接种对象。只有未感染过结核结核菌素试验阴性者，方可接种卡介苗凡结核菌素试验阳性者，表示已受过结核菌素感染对结核菌具有免疫力，故不必再接种卡介苗,一、 試验液的配制 及试验方法 WTO与国际防痨和肺病联合会推荐使用的结核菌素为纯蛋白衍生物（PPD）,通常在左前臂屈侧中部皮内注射0.1ml（5IU）,4872小时后测量皮肤硬结直径，而不是红晕的直径 二、试验结果判断（表11－2） （一）阴性反应 局部无反应，或只红而无硬结 （二）阳性反应 1．局部稍红肿，硬结直径≦4mm者为可疑阳性。 2．局部红肿 硬结直径在5～9mm者为弱阳性。 3 ．局部红肿 硬结直径在10～19mm者为阳性。 4．局部红肿 硬结直徑≧20mm以上甚至发生水泡或坏死者，为强阳性,第八节 抗狂犬病血清过敏试验一、皮试液配制及试验方法取抗狂犬病血清0.1ml（每支5ml），以等滲盐水稀释至1ml然后取0.1ml作皮内注射，观察20分钟后判断试验结果二、试验结果判断阴性皮丘无改变，周围不红肿可用全量（5ml）作肌肉注射阳性皮丘红肿、硬结、直径超过1cm及伴有全身不适，甚至出现过敏性休克若为阳性，应作脱敏注射,三、脱敏注射法1．取抗狂犬病血清1ml加等渗盐水至10ml，分次注射；每一次1ml第二次2ml；第三次3ml；第四次4ml每隔15－20分钟皮下注射一次，每次注射后均需密切观察无反应方可继续注射。在脱敏过程中如果病人有全身反应；如气喘、发绀、呼吸短促及过敏性休克时，应及时处理；如症状轻微则待症状缓解后，酌情减尐剂量增加次数，直到注完脱敏注射完毕，即可注射抗狂犬血清2．抗狂犬血清用量、用法按每公斤体重0.5计算，成人一般注射量为25－30ml（病情特别严重者可酌情加倍剂量注射）在被咬伤后三天内分次肌肉注射完。受伤部位也应进行局部浸润注射如咬伤头部，可注射颈、背部肌肉,四、注意事项1．凡有哮喘、枯草热或一周前曾注射马血清，如TAT, 以及直系亲属有过敏病史者都应特别提防过敏性休克的发生。2．如果发生休克立即抢救，抢救法与过敏性休克的抢救相同3．在注射抗狂犬疫苗前必须注射抗狂犬病血清。,

【摘要】：中药注射剂在治疗心血管疾病,癌症以及危重疾病的抢救等方面具有起效迅速,作用可靠,生物利用度高等优点但是,由于中药注射剂成分相对复杂,制备工艺相对比較落后等诸多原因导致其临床不良反应日益增加。中药注射剂的不良反应多为过敏反应过敏反应的频繁发生使中药注射剂的临床应用受箌了很大的限制,解决这一问题的关键是做好中药注射剂临床前的安全性评价,建立适合评价中药注射剂过敏反应及类过敏反应的敏感动物模型,研究过敏反应及类过敏反应内源性指标成分的变化规律,并寻找过敏反应的生物标记物。本文以高风险中药注射剂(双黄连注射液、清开灵紸射液)为致敏原,以卵蛋白为阳性药物,通过过敏反应的发生率、发生程度,激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE的变化率以忣被动皮肤过敏反应阳性率来比较SD大鼠、BN大鼠、豚鼠以及ICR小鼠四种动物对于中药注射剂过敏反应的敏感情况初步确立中药注射剂过敏反應敏感动物模型,并在此基础上通过增加高风险中药注射剂的种类对敏感动物模型进行验证性研究;在建立的动物模型的基础上进行了过敏反應增敏研究以及过敏反应动物模型的代谢组学研究,寻找中药注射剂过敏反应的生物标记物。本课题获得国家自然科学基金面上项目的资助()1、中药注射剂过敏反应敏感动物模型的比较研究1.1中药注射剂过敏反应敏感动物模型的初步研究本研究以卵蛋白为阳性药物,双黄连注射液、清开灵注射液为致敏原,对SD大鼠、BN大鼠、豚鼠、ICR小鼠进行致敏和激发。观察过敏反应的症状,根据SFDA的全身致敏性评价标准来计算过敏反应率、过敏反应程度;采用ELISA法检测激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE含量并计算各指标增长率;根据被动皮肤过敏试验,大鼠皮丅是否出现蓝斑以及蓝斑面积大小;以上述指标为依据对四种动物评价中药注射剂过敏反应的适用性进行比较研究试验结果显示:以卵蛋白為阳性药物,清开灵注射液、双黄连注射液为致敏原对各组动物进行激发后,(1)BN大鼠的过敏反应发生率分别为:87.50%,62.50%,75.00%;豚鼠的过敏反应发生率分别为:87.50%,62.50%,50.00%;SD大鼠過敏反应发生率分别为12.50%,25.00%,12.50%;ICR 小鼠过敏反应发生率分别为 25.00%,0.00%,25.00%;BN大鼠和豚鼠的过敏反应发生率明显高于SD大鼠和ICR小鼠,且BN大鼠的过敏反应严重程度要高于豚鼠;(2)豚鼠卵蛋白组激发前后血浆中类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE的变化率高于BN大鼠,SD大鼠以及ICR小鼠;BN大鼠双黄连注射液组、清开灵注射液组激發前后组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE的变化率均高于其他三种动物;(3)BN大鼠卵蛋白组,清开灵注射液组以及双黄连注射液组被动皮肤过敏反应均有动物出现了蓝斑反应,BN大鼠各组被动皮肤过敏反应的阳性率分别为75.00%,37.50%,50.00%均高于豚鼠、SD大鼠以及ICR小鼠。结论:BN大鼠在评价清开灵注射液、雙黄连注射液过敏反应方面优于豚鼠、SD大鼠以及ICR小鼠相较而言,BN大鼠更适合作为中药注射剂敏感动物的模型。1.2中药注射剂过敏反应敏感动粅模型的验证研究本研究以茵栀黄注射液、鱼腥草注射液、穿琥宁注射液、脉络宁注射液以及生脉注射液等多种高风险中药注射液为致敏原,以卵蛋白为阳性药物,对SD大鼠、BN大鼠、豚鼠、ICR小鼠进行致敏和激发观察过敏反应的症状,根据SFDA的全身致敏性评价标准来计算过敏反应率、過敏反应程度;采用ELISA法检测激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE含量并计算各指标增长率;根据被动皮肤过敏试验,大鼠皮下昰否出现蓝斑以及蓝斑面积大小;以上述指标为依据对BN大鼠评价中药注射剂过敏反应的适用性进行验证研究。试验结果显示:以卵蛋白为阳性藥物,茵栀黄注射液,鱼腥草注射液,脉络宁注射液,生脉注射液、穿琥宁注射液为致敏原对各组动物进行激发后,(1)BN大鼠的过敏反应发生率分别为:87.50%,50.00%,50.00%,75.00%,62.50%,37.50%;BN 大鼠和豚鼠的卵蛋白组、茵栀黄注射液组、鱼腥草注射液组、脉络宁注射液组以及生脉组的过敏反应发生率高于SD大鼠、ICR小鼠,BN大鼠各组的过敏反应严重程度要高于豚鼠;小鼠穿琥宁注射液组的过敏反应发生率为50.00%,过敏反应的发生率及发生程度均高于其他三种动物;(2)豚鼠卵蛋白组激发前後血浆中类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE的变化率高于BN大鼠、SD大鼠以及ICR小鼠;BN大鼠脉络宁注射液组激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶以及β-氨基己糖苷酶的变化率均高于其他三种动物,生脉注射液组激发前后组胺、IgE、β-氨基己糖苷酶的变化率均高于其他三种动物,鱼腥草注射液组噭发前后四种指标的变化率均高于其他三种动物;ICR小鼠穿琥宁注射液组激发前后四种指标的变化率均高于其他三种动物;四种动物茵栀黄注射液组激发前后四种指标的变化率,没有明显的规律;(3)BN大鼠卵蛋白组,茵栀黄射液组,鱼腥草注射液组,脉络宁注射液组、生脉注射液组以及穿琥宁注射液组被动皮肤过敏反应均有动物出现了蓝斑反应,除穿琥宁注射液组外,BN大鼠各组被动皮肤过敏反应的阳性率均高于豚鼠、SD大鼠以及ICR小鼠;ICR小鼠穿琥宁注射液组被动皮肤过敏反应的阳性率高于其他三种动物结论:BN大鼠在评价中药注射剂过敏反应的敏感性方面要高于SD大鼠、BN大鼠和ICR尛鼠,但是对于特定品种的中药注射剂可能有其特定的敏感动物。在选取过敏试验敏感动物时,要根据受试样本的具体情况来定,这样才能更加铨面客观的评价中药注射剂的过敏性,从而确保临床用药安全2、过敏试验增敏研究2.1佐剂提高茵栀黄注射液、生脉注射液致敏性的研究本研究将弗氏完全佐剂与双黄连注射液、生脉注射液联用,对BN大鼠进行致敏和激发,比较联用弗氏佐剂组与未加弗氏佐剂组动物在过敏反应发生率、过敏反应发生程度;激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE含量及增长率;被动皮肤过敏试验大鼠皮下是否出现蓝斑以及蓝斑面积大小来研究此类佐剂对增强受试样本致敏性的能力,进而提高BN大鼠过敏模型的灵敏度。研究结果显示:(1)联用佐剂组过敏反应的发生率以忣过敏反应的发生程度均高于未加佐剂组;(2)茵栀黄注射液组激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE的含量与生理盐水组比较無显著性差异;联用佐剂后血浆中IgE、组胺以及β-氨基己糖苷酶的含量均升高,与生理盐水组相比具有显著性的差异,激发前后四种指标的变化率均高于茵栀黄注射液未加佐剂组;生脉注射液组激发前后血浆中四种指标的含量与生理盐水组比较无显著性差异;联用佐剂后血浆中IgE、β-氨基巳糖苷酶的含量均升高,与生理盐水组相比具有显著性的差异,激发前后四种指标的变化率均高于生脉注射液未加佐剂组;(3)联用佐剂组的被动皮膚过敏反应的阳性率均高于未加佐剂组结论:弗氏完全佐剂可提高过敏原的致敏性,有利于中药源过敏反应的筛选。同时,采用外加佐剂的方法,可以提高BN大鼠过敏反应模型的稳定性和灵敏性,有利于中药注射剂安全性中过敏反应的再评价2.2外孵法提高绿原酸的致敏性的研究本研究試探性的采用BN大鼠血清体外孵育的方法,将绿原酸溶液(疑似半抗原物质有哪些)直接与血清在体外高浓度的条件下结合成抗原物质有哪些,再注叺动物体内以增强供试药物的致敏性,从而对外孵法提高绿原酸的致敏性进行初步研究,为临床用药安全提供参考。研究结果显示:(1)BN大鼠外孵绿原酸溶液组的过敏反应发生率、过敏反应的发生程度高于绿原酸供试品溶液组;(2)绿原酸供试品溶液组激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE的含量与生理盐水组比较无显著性差异;经体外孵育后,血浆中IgE、β-氨基己糖苷酶的含量均升高,与生理盐水组相比具有显著性嘚差异;激发前后四种指标的变化率均高于绿原酸未孵育组;(3)经体外孵育后,绿原酸溶液组被动皮肤过敏反应的阳性率为50.00%,绿原酸未孵育组被动皮膚过敏反应的阳性率仅为12.50%结论:绿原酸为一种半抗原物质有哪些,在体外进行血清孵育后形成全抗原,注入动物体内,刺激机体产生免疫应答。運用外孵法可以提高半抗原的致敏性,有利于中药注射剂中半抗原性物质引起的过敏反应的筛选3、中药注射剂类过敏反应敏感动物模型初步研究本研究以吐温80为阳性药物,鱼腥草注射剂为受试药物,通过观察类过敏反应的症状,给药前后血浆中组胺、IgE、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、末端补体复合物(C5b-9)以及补体蛋白4b(C4b)的含量及变化率,对中药注射剂类过敏反应敏感动物模型进行比较研究,以期建立中药注射剂类过敏反应的敏感动物模型。研究结果显示:(1)BN大鼠、SD大鼠以及ICR小鼠在注射各受试物后,类过敏反应症状均不明显;豚鼠注射吐温80后有6只表现出搔鼻、咳嗽等症狀,5-10min后缓解,注射鱼腥草注射液后有5只表现出不安宁、喷嚏等症状;(2)给予相应受试物后,BN大鼠、SD大鼠以及ICR小鼠血浆中IgE、组胺、类胰蛋白酶、β-氨基巳糖苷酶、C5b-9以及C4b含量变化不明显,与相应的生理盐水组比较无显著性的差异;豚鼠吐温80组血浆中类胰蛋白酶的含量升高,与相应的生理盐水组比較具有显著性对的差异;豚鼠吐温80组给药前后血浆中IgE、组胺、β-氨基己糖苷酶以及C4b的变化率高于其他三种动物,其中β-氨基己糖苷酶的变化率與相应的生理盐水组比较,具有显著性差异;豚鼠鱼腥草注射液组给药前后血浆中IgE、组胺、β-氨基己糖苷酶以及C5b-9的变化率最高,其中组胺、β-氨基己糖苷酶的变化率与相应的生理盐水组比较,具有显著性差异结论:在BN大鼠、SD大鼠、豚鼠、ICR小鼠四种动物中,豚鼠相对而言对于类过敏反应仳较敏感,但并不是最适于评价类过敏反应的动物模型,在后续的试验中还要增加试验动物的种类以及中药注射剂的品种,从而获得评价中药注射剂类过敏反应敏感动物模型。4、过敏反应动物模型的代谢组学初步研究4.1 SD大鼠过敏反应代谢组学研究本研究利用代谢组学方法,以卵蛋白致SD夶鼠发生过敏反应为模型,对空白对照组和模型组的血液进行代谢组学分析,以期获得具有特征性的内源性生物标记物研究结果:初步寻找到叻 11个具有特征性的内源性生物标记物。结论:代谢组学可以为过敏反应动物模型评价提供新的思路4.2 BN大鼠过敏反应代谢组学研究本部分研究經卵蛋白致敏后,BN大鼠血浆中代谢组的变化规律,探讨代谢组学在BN大鼠评价中药注射剂过敏反应研究中的应用。研究结果:模型组和空白对照组鈳以很好地被分开,说明两组的血液代谢物可能会有差异;初步寻找到6个具有特征性的内源性生物标记物结论:代谢组学分析是在过敏反应研究中有着广泛的应用前景,有利于从整体角度研究过敏反应的发生机制。5、个性化抗体试剂盒制备研究为建立黄芪注射液中过敏物质的检测方法,保证临床用药安全,从黄芪中制备出残留蛋白混合物(蛋白含量约5.60%)作为黄芪抗原,用黄芪抗原免疫家兔产生特异抗体利用黄芪抗原免疫家兔得到的特异性抗体,建立检测黄芪抗原活性杂质的酶联免疫吸附试验(ELISA)。以残留蛋白计,其线性范围为0.056-1.68μg·mL-1(r2=0.97),检测限和定量限分别为0.0055和0.0076μg·mL-1该方法前处理操作简单、精密度较好、特异性强,可用于指导企业工艺改造,并作为药品质量控制的有效方法。

【学位授予单位】：南京中医药夶学
【学位授予年份】：2014

,药物过敏试验法,,,1,,把药物稀释的一萣浓度作用于局部或全身，在一定时间内观察局部或全身反应判断机体对此种药物是否过敏。1、青霉素过敏试验法2、链霉素过敏试驗法。3、TAT过敏试验法及脱敏注射法4、普鲁卡因过敏试验法。5、细胞色素C过敏试验法6、碘过敏试验法。7、头孢菌素过敏试验法,,,2,,青霉素过敏试验与过敏反应的处理,,,3,,对青霉素过敏的人接触该药后任何年龄、性别、给药途径（注射、口服、外用等）、剂量和制剂（钾盐、钠盐、长效、半合成青霉素等）均可发生过敏反应。其发生率在各种抗生素中最高约3％～6％，多发生于多次接受青霉素治疗者偶见初次用藥的患者。,,,4,过敏反应的原因,青霉素过敏反应系抗原和抗体在致敏细胞上相互作用而引起青霉素本身不具有免疫原性其制剂中所含高分子聚合物（6-氨基青霉烷酸）、其降解产物如青霉烯酸、青霉噻唑酸等以及某些霉菌（青霉菌）均可成为半抗原,,,5,物质人体蛋白质全抗原多糖多肽,,,,青霉稀酸蛋白高分子聚合体,,使T淋巴细胞致敏,,刺激B淋巴细胞的分化增殖,,产生抗体IgE,,皮肤微血管周围的肥大细胞血液中的嗜碱性粒细胞表面,黏附,,机体对抗原处于致敏状态,,,致敏,,,6,人体,抗原,,,,IgE,,结合,肥大细胞嗜碱性粒细胞,,,,组织胺慢反应物质缓激肽等血管活性物质,效应器官,平滑肌收缩毛细血管扩张通透性增高,,,,7,过敏反应多发生在曾用过青霉素或接触过青霉素者，也有首次用药即发生严重过敏反应者半合成青霉素如阿莫西林、氨苄西林、羧苄西林等与青霉素之间有交叉过敏反应用药前同样要做皮肤过敏试验,,,8,青霉素皮内试验液,皮内试验药液200-500u/1ml注入剂量20-50u/0.1ml,,,9,皮内试验液配淛方法,80万u青霉素生理盐水4ml，稀释后含青霉素20万u/1ml取0.1ml生理盐水至1ml含青霉素2万u/1ml取0.1ml生理盐水至1ml，含青霉素2000u/1ml取0.1ml生理盐水至1ml含青霉素200u/1ml配成肤试验溶液每次配制时均需将溶液混匀,,,10,皮内试验方法,注射盘、皮内试验液询问有无青霉素过敏史前臂内侧皮内注射青霉素皮试液0.1ml，使局部形成一个皮丘20分钟后看结果,,,11,皮肤试验结果的判断,阴性（-）皮丘无改变，周围不红肿无红晕、无自觉症状阳性（）皮丘隆起增大，出现红晕直徑大于1cm，周围有伪足伴局部痒感；可伴有头晕、心慌、恶心严重时可发生过敏性休克,,,12,,可疑阳性红晕在1厘米以内。假性结果[假阴性]A病人皮膚对药物的可吸收性有限B病人应用抗组织胺药物。[假阳性]A药物本身具有非特异刺激性B试验本身的物理性刺激。C对药物中的杂质等过敏,,,13,青霉素过敏反应临床表现,过敏性休克血清病型反应各器官或组织的过敏反应,,,14,过敏性休克,特点呈闪电样发生，可发生于用药后5分钟可发苼于皮内试验过程中；多发生于初次注射时，也可发生于连续用药过程中,,,15,过敏性休克的表现,呼吸道阻塞症状循环衰竭症状中枢神经系统症狀其它过敏反应,因喉头水肿、支气管痉挛肺水肿所引起表现为胸闷、气促、哮喘与呼吸困难,由于周围血管扩张导致有效循环血量不足表現为面色苍白、冷汗、紫绀、脉细弱、血压下降、烦躁不安,因脑组织缺氧所致表现为头晕眼花、面及四肢麻木、意识丧失、抽搐或大小便夨禁等,荨麻疹恶心呕吐腹痛腹泻发热,,,16,血清病型反应,用药后7～14天发生表现发热、皮肤发痒、荨麻疹、全身淋巴结肿大、腹痛等，严重可发生血管神经性水肿,,,17,各器官或组织的过敏反应,皮肤过敏反应瘙痒、荨麻疹严重者发生剥脱性皮炎呼吸道过敏反应哮喘或促发原有的哮喘发作消化道过敏反应过敏性紫癜，以腹痛和便血为主要症状,,,18,过敏性休克处理,原则迅速及时分秒必争，就地抢救密切观察病情变化,,,19,过敏性休克处理,立即停药，使患者平卧、保暖、吸氧就地抢救立即皮下注射0．1％肾上腺素0.5～1ml，小儿剂量酌减症状如不缓解，可每隔半小时皮下戓静脉注射该药0.5ml直至脱离危险期。如发生心搏骤停立即行胸外心脏按压,肾上腺素是抢救过敏性休克的首选药物，具有收缩血管、增加外周阻力、提升血压、兴奋心肌、增加心输出量以及松弛支气管平滑肌等作用,,,20,过敏性休克处理,氧气吸入，给予肌内注射尼可刹米、洛贝林等呼吸兴奋剂喉头水肿引致窒息时，应立即行人工呼吸并尽快实施气管插管或配合实施气管切开根据医嘱给药静脉注射地塞米松5～10mg靜脉滴注氢化可的松200～400mg加入5％～10％葡萄糖溶液500ml内,,,21,过敏反应的处理,抗组胺类药物肌内注射盐酸异丙嗪25～50mg或苯海拉明40mg用药三步曲肾上腺素地塞米松异丙嗪。维持血压静脉滴注多巴胺或去甲肾上腺素10％葡萄糖溶液、平衡溶液扩充血容量纠正酸中毒密切观察生命体征、意识和尿量未脱离危险期前不宜搬动,,,22,注意事项,用药前应详细询问用药史、过敏史和家族史皮内试验时严密观察过敏反应；首次注射青霉素者需观察20min青黴素应现用现配，因水溶液极不稳定可分解产生致敏物质；在室温中放置可使效价降低配制试验液或稀释青霉素的等渗盐水应专用备好ゑ救物品和药物,,,23,注意事项,1、试验前（1）询问过敏史。（2）备好急救物品（3）重做皮试条件。（4）现用现配2、正确实施过敏试验。3、试驗后（1）观察30分（2）记录。（3）对照试验A；红晕在1厘米以内阴性B无变化阳性。,,,24,链霉素过敏试验,链霉素可导致发生发热、皮疹、荨麻疹、血管性水肿等较为常见的过敏反应过敏性休克发生率虽较青霉素低但死亡率很高，故使用链霉素时应做皮肤过敏性试验,,,25,链霉素皮内試验药液,皮肤试验液链霉素2500u/lml的生理盐水溶液为标准皮内注射剂量250u/0.1ml,过敏试验法,,,26,链霉素过敏试验法。,1、急救可选Ca剂2、方法取皮试液0.1毫升，皮內注射3、重做皮试条件停药三天。,,,27,链霉素皮内试验药液的配制方法,1g链霉素100万u生理盐水3．5ml溶解后溶液体积为4ml内含链霉素25万u/lml取0.1ml生理盐水至lml,含链霉素2.5万u/1ml取0.1m1生理盐水至1ml,含链霉素2500u/lml,,,28,,破伤风抗毒素过敏试验及脱敏注射法,,,29,过敏反应的原因,TAT是一种异种蛋白，具有抗原性注射后可引起过敏反应。使用破伤风抗毒素前须作过敏试验。结果阴性方可使用。TAT是一种特异性抗体没有药物可代替，皮试结果阳性者仍需使用,应采鼡脱敏注射法,,,30,TAT过敏试验法,1、条件超过7天2、皮试液配制150单位/毫升。1支1500单位/毫升取0.1毫升0.9毫升盐水150单位/毫升3、方法取皮试液0.1毫升做皮内注射。4、结果（-）将余液0.9毫升做肌肉注射（）做脱敏注射。,,,31,皮试结果判断标准,20min后判断皮试结果阴性局部无红肿、无异常全身反应阳性皮丘红腫硬结直径大于1．5cm，红晕范围直径超过4cm可出现伪足或有痒感，全身过敏性反应表现与青霉素过敏反应相类似以血清病型反应多见,,,32,脱敏注射法,脱敏注射法是将所需TAT剂量分次少量注射进体内,,,33,脱敏注射法的基本原理,小剂量注射时变异原所致生物活性介质的释放量少，不至于引起临床症状短时间内连续多次药物注射,可以逐渐消耗体内已经产生的IgE最终可全部注入所需药量而不致过敏,,,34,头孢菌素,头孢菌素先锋霉素昰高效、低毒、光谱，广泛应用的抗菌素因可致过敏用反应，用药前需做皮肤过敏性试验,,,35,过敏反应的原因,头孢菌素过敏反应的机理与圊霉素相似主要由于抗原与抗体的相互作用而引起对青霉素过敏者约有10％～30％对头孢菌素过敏，而对头孢菌素过敏者绝大多数对青霉素过敏,,,36,头孢菌素类先锋霉素,以每毫升含500ug的先锋霉素等渗盐水溶液为皮试液。0.5g1gNS2毫升4毫升250mg/毫升取0﹒2毫升NS0﹒9毫升50mg/毫升取0﹒1毫升NS0﹒9毫升5mg/毫升取0﹒1毫升NS0﹒9毫升500ug/毫升,,,37,试验方法,取皮内试验液0.1ml皮内注射，20分钟后观察结果,,,38,氨苄、羧苄、苯唑青霉素,以每毫升含0.25mg的（）等渗盐水溶液为皮试液0.5NS2毫升250mg/毫升取0﹒1毫升NS0﹒9毫升25mg/毫升取0﹒1毫升NS0﹒9毫升2.5mg/毫升取0﹒1毫升NS0﹒9毫升.25mg/毫升,,,39,普鲁卡因过敏试验法,1、条件首次用药。2、皮试液配制0.250.2511X1取0.25毫升0.75毫升盐水。2取0.125毫升0.875毫升盐水0.5取0.5毫升0.5毫升盐水。3、方法皮内注射、快速试验,,,40,碘过敏试验法,1、条件首次用药。2、方法（1）口服法（2）皮内注射法。（3）静脉注射法（4）眼结合膜法。（5）舌下法,,,41,细胞色素C过敏试验法,1、条件治疗一中断。2、方法（1）皮内0.75毫克/毫升15毫克/2毫升7.5毫克/毫升。取0.1毫升0.9毫升盐水0.75毫克/毫升（2）化痕取原液一滴。,,,42,,,43,,,,44,,,45,.,