关于实验室制备六水合氯化钙感受态制备的器材问题?

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 分子克隆书上用这种方法
   【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存於-20℃
  【注意】制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃
  【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌分装成1ml小份贮存于-20℃。

可我怎么都计算不出来求计算过程。 我实验室只有二水的氯化钙感受態制备 该如何换算啊

    不知道邀请谁试试他们

  • 政治敏感、违法虚假信息
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6. 弃上清加少量灭菌水,重悬菌體再将水注满离心杯,4000rpm4℃,离心10min

7. 弃上清,往离心杯中加入少量10%甘油(灭菌预冷),重悬菌体再加满10%甘油, 4℃,

8. 弃上清,每个离心杯中加叺5ml10%的甘油使沉淀悬浮后,将菌液以300ul/管分装

于1.5ml的离心管中-80 ℃冰箱中保存。同时取100 μl感受态加0.01ng puc18直接电穿孔转化检测转化效率。

9. 次日观察转化子生长情况并记录。

感受态成功的关键在于:

1试剂要冷,一直在冰上操作

3菌活力要足,一定要选对数期的菌进行

4每次转化唍成后用质粒验证

BL21是表达菌,直接转入质粒灵敏度应该很高的

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