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不知道邀请谁试试他们
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6. 弃上清加少量灭菌水,重悬菌體再将水注满离心杯,4000rpm4℃,离心10min
7. 弃上清,往离心杯中加入少量10%甘油(灭菌预冷),重悬菌体再加满10%甘油, 4℃,
8. 弃上清,每个离心杯中加叺5ml10%的甘油使沉淀悬浮后,将菌液以300ul/管分装
于1.5ml的离心管中-80 ℃冰箱中保存。同时取100 μl感受态加0.01ng puc18直接电穿孔转化检测转化效率。
9. 次日观察转化子生长情况并记录。
感受态成功的关键在于:
1试剂要冷,一直在冰上操作
3菌活力要足,一定要选对数期的菌进行
4每次转化唍成后用质粒验证
BL21是表达菌,直接转入质粒灵敏度应该很高的
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