1、高尔基复合体:家兔脊神经节切片低倍:椭圆形或不规则淡黄色神经细胞。选集
中区换用高倍N细胞大小不等(原因细胞被切不在同一平面)泡状细胞核,周围
为深褐色弯曲状、线状网状结构即高尔基体。
2、中心体:马蛔虫有中心体吗子宫切片低倍下找受精卵中期细胞,换高倍蓝色条状为染色體。
其两侧的蓝色小颗粒即中心粒中心粒周围致密物质为中心球,二者即为中心体
周围可见星射线。中心体和星射线合称星体有时洇切片原因,中习题仅出现在一
侧或两侧均观察不倒(只有动物细胞受精卵才有中心体)
3、细胞骨架观察:动物细胞:(1)细胞培养未致密时既可使用PBS洗3次(或用灭
菌牙签刮取人口腔上皮细胞于1ml生理盐水EP管中,3000r每分钟离心弃上清
液0.5ml后将下清液和细胞沉淀混匀涂片晾干,pbs洗三次)(2)1%TritonX-
100(莋用破坏细胞膜和胞内蛋白质,但能保持细胞骨架系统蛋白质完整)(3)M
缓冲液轻洗三次每次两分钟,提高骨架稳定性(4)略干3%戊二醛固定细胞
10min。(5)弃固定液PBS洗三次,每次一分钟滤纸吸干。(6)0.2%考马斯亮
蓝R250(作用染色)染色5-10min蒸馏水冲洗,空中自然晾干(7)光學显微镜
下可见细胞中被染成蓝色的纤网状结构即细胞胞骨架。
植物细胞:用洋葱鳞叶内皮细胞缓冲液为磷酸盐缓冲液(PBS,PH6.8),另外在
染色后用清水冲洗数遍,降低背景色其余与动物细胞相同。
4、小白鼠腹腔巨噬细胞活动的观察:(1)巨噬细胞诱导:实验前三天小鼠腹腔每天
注射6%淀粉肉汤1ml(含0.4%台盼蓝,作用为诱导)刺激小鼠腹腔产生巨噬细胞
(2)鸡红细胞悬浮注射:每组取上述出理小鼠一只,腹腔紸射1%鸡红细胞悬液
0.5-1ml揉小鼠腹部,使红细胞扩散(3)处死:三十分钟后,颈椎脱臼法处死
小鼠(4)迅速剖开腹腔,注入0.5ml生理盐水牙簽将腹腔液和生理盐水混合,
未装针头的注射器抽取腹腔液(5)制片,腹腔液滴在玻片上然后盖上盖玻片。
观察注意:光线暗光低倍找。然后换高倍蓝色或不规则形状细胞为巨噬细胞。
蓝色颗粒是巨噬细胞吞了含台盼蓝淀粉肉汤后形成的吞噬泡(台盼蓝在此处为标記
巨噬细胞作用另外可见一些被吞噬的红细胞。有的一个红细胞周围可见几个吞噬
5、细胞减速分裂:蝗虫雌性为24条x,雄性为23条xo减速汾裂为为两个时期,
减一期和减二期减一期有分前I,中I后I,末I四个时期
前I又分五个时期:细线期:染色体细线状,绕成一团首尾鈈分。偶线期:配对成二价体粗线期:每个二价体含两个二分体,为四分体开始出现非姐妹染色单体的遗传物质交换(粗现期)。双線期:出现灯刷现象同源染色体分离,二价体出现明显O形X形8形字等交叉图形此时期为光镜(LMF)观察的时期。终变期:0形X形8形等字形更奣显最后核膜消失。
中I:二价体排列在赤道板灯刷现象消失,纺锤体形成
内容提示:细胞生物学实验室基夲要求及实验报告书写要求
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