?６０?中华医学遗传学杂志２０１４年２月第３１卷；
?６０?中华医学遗传学杂志２０１４年２月第３１卷第１期ＣｈｉｎＪＭｅｄＧｅｎｅｔ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０１４，Ｖ０１．３１，Ｎｏ．１临床遗传学论著精子ＤＮＡ损伤在男性不育中的诊断价值费前进黄航金建远黄学锋【摘要】目的探讨精子ＤＮＡ损伤（ｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ＳＤＦ）在男性不育症中的诊断价值。方法将本院生殖中心就诊的２９９例男性分为两组：原发性不育患者１５７例及正常生育对照组１４２人。根据世界卫生组织标准（１９９９年）对其进行常规精液参数（精子浓度、精子活动力和精子形态）测定，采用精子染色质扩散试验检测其ＳＤＦ水平，即精子ＤＮＡ碎片指数（ＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ，ＤＦＩ）。结果原发性不育组和正常生育对照组的精子ＤＦｌ分别为（１７．１±９．３）％和（１４．２±９．０）％，两者相比差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１），两组男性的年龄、配偶年龄及精液常规参数比较差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。精子ＤＦＩ诊断男性不育的受试者工作特征曲线下面积为０．８６１，９５％可信区间为０．８１４～０．９０７，诊断阈值为１５．１％，敏感性为８１．８％，特异性为８８．２％。根据精子ＤＦＩ对男性不育的诊断阈值，将２９９例男性分为ＤＦＩ≥１５．１％（Ａ组）１２０例和ＤＦＩ＜１５．１％（Ｂ组）１７９例，两组不育男性的百分率分别为７９．２％和３４．６％，两者比较差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１），两组男性发生不育的优势比为７．２（９５％可信区间为４．２～１２．３）。结论高水平ＳＤＦ可降低男性的生育能力，精子ＤＦＩ对男性不育有重要的诊断价值。【关键词】精子；ＤＮＡ损伤；男性不育ＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｆｏｒｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙＦｅｉＱｉａｎｊｉｎ１，ＨｕａｎｇＨａｎｇ２，ＪｉｎＪｉａｎｙｕａｎｌ，ＨｕａｎｇＸｕｅｆｅｎ９１．（１ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏＪ’ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，２ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＵｒｏｌｏｇｙ．ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＷｅｎｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｗｅｎｚｈｏｕ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ３２５０００，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎｎ）Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＨｕａｎｇＸｕｅ知ｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｅｆｈｕａｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｒｎａｓｓｅｓｓ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ（ＳＤＦ）ｆｏｒｍａＩｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ．ＭｅｔｈｏｄｓｐｒｉｍａｒｙｉｎｆｅｒｔｉｌｅｃａｓｅｓＴｗｏｈｕｎｄｒｅｄａｎｄｎｉｎｅｔｙ－ｎｉｎｅｍａｌｅｓａｔｔｅｎｄｉｎｇｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙｃｌｉｎｉｃｗｅｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｅｄｉｎｔｏ１５７ａｎｄ１４２ｆｅｒｔｉｌｅｃｏｎｔｒｏｌｓ．ＳｅｍｅｎａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｓｐｅｒｍｃｈｒｏｍａｔｉｎａｓｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄｂｙｔｈｅＷｏｒｌｄＨｅａｌｔｈＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ（ＷＨＯ）．ＳＤＦｗａｓａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄａｓｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ（ＳＣＤ）ａｓｓａｙ，ａｎｄｔｈｅｗａｓＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ（ＤＦＩ）．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅＤＦｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｉｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍａｌｅｓｔｈａｎｔｈａｔｉｎｆｅｒｔｉｌｅｃｏｎｔｒｏｌｓ［（１７．１±９．３）％ｖｓ．（１４．２±９．ｏ）％］（Ｐ＜０．０１）．Ｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎｔｈｅａｇｅｏｆｍａｌｅａｎｄｆｅｍａｌｅｐａｒｔｎｅｒｓ，ｓｅｍｉｎａｌｖｏｌｕｍｅ，ｓｐｅｒｍｃｏｕｎｔ，ｍｏｔｉｌｉｔｙａｎｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｂｅｔｗｅｅｎｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍａｌｅｓａｎｄｆｅｒｔｉｌｅｃｏｎｔｒｏｌｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｃｕｒｖｅ（ＡＵＣ）ｗａｓａｒｅａｕｎｄｅｒｔｈｅｒｅｃｅｉｖｅｒｏｐｅｒａｔｉｎｇＳＤＦ．０．８６１［９５％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌ（ＣＩ）＝０．８１４―０．９０７］ｆｏｒ１５．１％ｏｆａｓＴｈｅｔｈｒｅｓｈｏｌｄｌｅｖｅｌｏｆ１５．１％ｗａｓｄｅｒｉｖｅｄｃｕｔ―ｏｆｆｖａｌｕｅｔｏｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｅｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍｅｎｆｒｏｍｆｅｒｔｉｌｅｃｏｎｔｒｏｌｓ．Ｂｙｔｈｉｓｔｈｒｅｓｈｏｌｄ，ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｗａｓ８８．２％ａｎｄｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｗａｓ８１．８％．Ｔｈｅ２９９ｍｅｎｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｇｒｏｕｐＡ（聍一１２０）ｗｉｔｈＤＦＩ≥１５．１％ａｎｄｇｒｏｕｐＢ（ｎ一１７９）ｗｉｔｈＤＦＩ＜１５．１％ｂａｓｅｄｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｎｔｈｅｃｕｔ―ｏｆｆｖａｌｕｅ．ＴｈｅｏｆｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍｅｎｉｎｇｒｏｕｐＡｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｇｒｏｕｐＢ（７９．２％ｖｓ．３４．６％）ｉｎ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅｏｄｄｓｒａｔｉｏ（ＯＲ）ｆｏｒｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓｃａｎｗａｓ７．２（９５％Ｃ１＝４．２－１２．３）．ｃａｎＳｐｅｒｍｓｗｉｔｈｈｉｇｈ―ｌｅｖｅｌｏｆＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｍｐａｉｒｍａｌｅｆｅｒｔｉｌｉｔｙ．ＤＦＩｂｅｕｓｅｄａｓａｇｏｏｄｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｍａｒｋｅｒｆｏｒｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ；ＤＮＡｄａｍａｇｅ；Ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ男性不育的诊断是一个较为棘手的问题。目前主要根据世界卫生组织（ＷｏｒｌｄＨｅａｌｔｈＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，形态）标准来诊断男性不育［１。２］。但研究表明，常规精液参数对男性不育的诊断存在一定的局限性，对男性生育能力不能进行准确评估口］。近年来开展的一种从ＷＨＯ）的常规精液参数（精子浓度、精子活动力和精子分子水平上检测精子遗传物质的指标――精子ＤＮＡＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００３―９４０６．２０１４．０１．０１４损伤（ｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ＳＤＦ），不但能独立作者单位：３２５０００浙江省温州医学院附属第一医院生殖中心（费前进、金建远、黄学锋），泌尿外科（黄航）的评价精子的质量［４］，评估男性的生育能力睁引，而且能对男性的生育能力有重要的预测价值［８。１３｜。本研究中我们通过检测１５７例原发不育和１４２名正常生育男通信作者：黄学锋，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｅｆｈｕａｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｉｎ万方数据生堡区学婆传学杂志２０１４年２月第３１卷第１期ＣｈｉｎＪＭｅｄＧｅｎｅｔ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０１４，Ｖ０１．３１，Ｎｏ．１性的ＳＤＦ水平，探讨ＳＤＦ对男性不育的诊断价值，为ＳＤＦ在男性不育的临床应用提供参考。１对象与方法１．１洗掉染液，风干。２００倍光镜下观察。大晕环和中晕环表示精子ＤＮＡ完整无损伤，小晕环、无晕环表示ＤＮＡ损伤。计算ＤＮＡ损伤精子数和精子总数的比例，即精子ＤＮＡ碎片指数（ＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ对象选择２００９年４月至２０１１年１０月来我院ｉｎｄｅｘ，ＤＦＩ）。生殖中心行生殖健康检查和辅助生殖技术治疗的２９９例男性，年龄２０～４２（３２．２±３．７）岁，配偶年龄１８～３５（３０．３±３．３）岁。根据其配偶妊娠或生育与否分为原发性不育组１５７例，正常生育对照组１４２名。研究对象按参考文献［１４―１６］标准纳入：（１）原发性不育组为至少１年未避孕从未使其配偶妊娠的男性，不育年限１～４年。每例进行详细的病史采集和男科生殖专科检查，排除引起男性不育的因素，如隐睾、尿道下裂、精索静脉曲张、性腺发育不全等。女性配偶检查正常，排除其相关的不育因素，包括妇科检查、女性生殖内分泌激素的检测、Ｂ超和子宫输卵管造影检查，必要时行腹１．３统计学分析采用ＳＰＳＳ１３．０统计学软件。计量资料数据用ｚ±ｓ表示，组间的比较采用独立样本的ｔ检验。计数资料以率表示，组间的比较采用Ｙ２检验。精子ＤＦＩ对男性不育的诊断采用受试者工作特征（ｒｅｃｅｉｖｅｒｏｐｅｒａｔｉｎｇｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ，ＲＯＣ）曲线分析。不同参数诊断男性不育的ＲＯＣ曲线下面积（ａｒｅａｕｎｄｅｒＲＯＣｃｕｒｖｅ，ＡＵＣ）的比较采用相关文献中的配对资料的ｚ检验［１…。优势比（ｏｄｄｓｒａｔｉｏ，ＯＲ）和９５％的可信区间（９５％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌ，９５％ＣＩ）采用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析。Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。２腔镜和宫腔镜检查。（２）正常生育对照组为男性生殖专科检查正常、其配偶在近３年有过正常妊娠或生育过健康小孩的男性，排除自然流产、胚胎停育等异常妊娠。（３）研究对象均根据ＷＨＯ标准行２次或以上常规精液分析［１ｊ，且精子数量≥２０×１０６／ｍＩ。。（４）女性配偶年龄＜３６岁。所有研究对象签署知情同意书。１．２方法１．２．１结果入选的２９９例研究对象禁欲时间为２．１基本特征（４．５±１．２）天，精液量（３．０±１．０）ｍＩ。，精液ｐＨ值７．４－０．２。根据ｗＨ（）标准。１。，２９９例男性中精子活动力（ａ＋ｂ）和精子形态２项指标均正常者８２例，其中原发性不育组３２例，正常生育组５０例；精子活动力或精子形态２项指标中的任一项异常者１１８例，其中原发性不育组７０例，正常生育组４８例；精子活动力和精子形态２项指标均异常者９９例，其中原发性不育组５５例，正常生育组４４例。原发性不育组和正常生育对照组男性及其配偶各项参数的比较结果见表１。两精液常规检查研究对象禁欲３～７天后手淫法获取精液标本，按照ＷＨＯ标准进行检测［１］，检测指标包括精液量、ｐＨ值、精子浓度、精子活动力（ａ＋ｂ）和精子形态。１．２．２ＳＤＦ检测采用精子染色质扩散（ｓｐｅｒｍ组男性的年龄、配偶年龄及精液常规参数比较差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。２．２ｃｈｒｏｍａｔｉｎｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ，ＳＣＤ）法［４Ｉ，Ｈａｌｏｓｐｅｒｍ＠试剂盒购自西班牙Ｈａｌｏｔｅｃｈ公司，步骤如下：新鲜精液用磷酸盐缓冲液将精子浓度调至（１～１０）×１０６／ｍＩ。，取出６０肛Ｉ。加入溶解的低熔点琼脂糖凝胶６０弘Ｌ中，温度３７℃下混匀，加２０肚Ｉ．精子凝胶混合液于预处理载玻片上，盖上盖玻片，４℃放置５ｍｉｎ。移去盖玻片，放人酸性ＤＮＡ变性液中，室温避光孵育７ｍｉｎ。取出玻片浸泡于裂解液中，避光孵育２３ｍｉｎ。在蒸馏水中５ｍｉｎ洗去残余裂解液。常规乙醇脱水。晾干后玻片用染色液（Ｗｒｉｇｈｔ’Ｓ染色剂和磷酸盐缓冲液等比例混合）覆盖于样本表面，曝光ｌｏ～１５ｍｉｎ。用自来水冲表１原发性不育组和正常生育对照组精子ＤＦＩ的比较２９９例研究对象的精子ＤＦＩ为３．１～５９．６（１５．７±９．２）％，原发性不育组精子ＤＦＩ为（１７．１±９．３）％，正常生育对照组精子ＤＦＩ为（１４．２±９．０）％，两组比较差异有统计学意义（ｔ一２．７２８，Ｐ一０．００７）。两组ＳＣＤ的实验图片见图１。２．３精子ＤＦＩ对男性不育的诊断精子ＤＦＩ诊断男性不育的ＡＵＣ为０．８６１（９５％Ｃ１０．８１４～０．９０７），诊断阈值为１５．１％，敏感性为８１．８％，特异性为８８．２％，阳性预测值为８２．５％，阴性预测值为８７．７％。２９９例男性及其配偶的临床基本资料（ｊ±ｓ）万方数据华ｌ廷学遗传学杂志２０ｌ４年２月第３ｌ卷第１期ＣｂｉｎＪＭｅｄ（；ｅｎｅｔ．Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０１４．Ｖ０１．３１，Ｎｏ■０六。：，．一．－◆．ｈｏ■‘一．．．．．－●●．◆，。≯．．Ｉ．。◆一．瓤一。．◆ｏ。～．，，．。◆：．●．，：：－０，．－：、一：－?ｔｉｐ●■●．．．．二．。多！．ｋ０ｊ■，’◆●．‘●’々，分ｏ．．：，－一’≯．气’◆．．．，’．ｌ。ｒ．●！?‘，ｒ’?：．①图１ＳＣＤ实验检测男性精子ＤＮＡ的光镜照片ａ：正常生育男性；ｂ：不育男性，１：大晕环精子；２：中晕环精子；３：小晕环精子；４：无晕环精子表２各检测指标对男性发生不育的诊断价值比较删例数僻僦吞蘑瑟揣瓣％不毫戛尹率精子ＤＦＩ与精子浓度、精子活动力和精子形态诊断男年的实践表明，常规精液参数本身波动性大口州，检测性不育的ＡＵＣ比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。时影响因素较多（如禁欲天数、高热、精神紧张、采精方常规精液参数（精子浓度、活动力和形态）对男性不育式）［１５。，易受检验人员的主观影响，检验者自身和检验均无诊断价值（表２）。者之间的差异较大［１…，这些给其在ｌ｜缶床上的应用带来２．４ＤＦＩ≥１５．１％和ＤＦＩ＜１５．１％各指标的比较根一定的干扰。更为重要的是，Ｏｕｚｉｃｋ等［３１研究表明，据精子ＤＦＩ诊断男性不育的阈值，将２９９例男性分为常规精液参数对男性不育的诊断价值有限，因为不育ＤＦＩ≥１５．１％（Ａ组）１２０例和ＤＦＩ＜１５．１％（Ｂ组）１７９和生育男性的常规精液参数数值有“重叠”部分，即不例，Ａ组和Ｂ组各项指标的比较结果见表３。Ａ组中育和生育男性的常规精液参数都可表现为正常或异不育男性９５例，不育男性的百分率为７９．２％，Ｂ组不常。本研究结果也证实了这一点，１５７例原发性不育育男性６２例，不育男性的百分率为３４．６％，两者比较和１４２名正常生育男性的精子浓度、精子活动力和精差异有统计学意义（Ｙ２―５７．１２４，Ｐ一０．０００），两组男子形态结果差异均无统计学意义，表明常规的精液参性发生不育的ｏＲ为７．２（９５％ＣＩ：４．２～１２．３），两组数无法有效区分不育和正常生育男性，对男性不育的各常规精液参数（精液量、精子浓度、精子活动力和精诊断存在一定的局限性。子形态）比较差异均无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。已有许多研究表明，ＳＤＦ是评估男性生育能力的３讨论一个有价值的指标［２Ｊ８。２４｜。一些学者采用精子染色质结构分析（ｓｐｅｒｍｃｈｒｏｍａｔｉｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｓｓａｙ，男性因素约占不育夫妇病因的５０％，因此男性不ＳＣＳＡ）［９］、末端脱氧核苷酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口育的诊断是男性不育诊疗中的重要和关键环节。目末端标记法（ＴｄＴ―ｍｅｄｉａｔｅｄ―ｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ，前，对男性不育的诊断主要依据ＷＨＯ的常规精液参ＴＵＮＥＬ）［１２｜，以及ＳＣＤ对ＳＤＦ检测时证实［４］，与常规数标准［１］，然而，据此诊断标准有１５％的男性不育患精液参数相比，同一个体的ＳＤＦ水平波动性小、重复者的常规精液分析结果正常，病因仍不明确［１８。…。多性好［９］，检测时受检验人员主观性的干扰较小［１２｜，而万方数据中华医学遗传学杂志２０１４年２月第３ｌ卷第１期ＣｈｉｎＪＭｅｄＧｅｎｅｔ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０１４，Ｖ０１．３１，Ｎｏ．１且与常规精液参数弱相关［４］，ＳＤＦ是评估男性生育力的一个独立的指标［２＇４’９’１１｜。更重要的是，与描述精子的一些特性（浓度、活动力、形态等）的常规精液参数不同，ＳＤＦ代表的是精子遗传物质的完整性，而这是精子的受精能力所必需的［１０’１８｜，且与胚胎质量和胚胎种植相关ｕ８｜。因此，ＳＤＦ是一个客观的反映精子质量的指标，是诊断男性不育的一个重要的工具瞳］。对男性不育的诊断是基于对男性生育能力的评估，而判断男性生育力的金标准是使其配偶获得妊娠的能力。许多学者应用不同的方法如ＳＣＳＡ、彗星实验（Ｃｏｍｅｔ）、ＴＵＮＥＬ对生育和不育男性的ＳＤＦ检测后证实，不育男性的ＳＤＦ水平显著高于正常生育者［９’１１。”Ｊ５’１９］，表明ＳＤＦ水平高的男性的生育力低于ＳＤＦ水平低的男性，ＳＤＦ水平与男性的生育能力密切相关。Ｓａｌｅｈ等ｎｎｌ９１采用ＳＣＳＡ对常规精液参数正常男性的ＳＤＦ检测后进一步发现，常规精液参数正常的不育男性和特发性不育男性的精子ＤＦＩ显著高于正常生育男性，表明即使男性的常规精液参数正常，其精子同样可能存在高水平的ＤＮＡ损伤。因此，ＳＤＦ能很好的评估男性的生育能力，能进一步揭示男性不育的病因，能对男性不育进行较为准确的诊断。本研究中，我们对１５７例原发性不育男性和１４２名正常生育男性进行了严格的标准筛选，排除与男性生育力相关的干扰因素，尽量满足研究和对照样本的均一性，结果发现，虽然不育男性和生育男性的年龄、配偶年龄及精液常规参数无显著差异，但不育男性的精子ＤＦＩ显著高于正常生育男性，表明ＳＤＦ比常规精液参数更能反映男性的生育能力，同时也表明，ＳＤＦ与常规精液参数无相关，是一个独立的评价男性生育能力的指标。Ｓｅｒｇｅｒｉｅ等口叫应用ＴＵＮＥＬ检测ＳＤＦ的结果证实，精子ＤＦＩ诊断男性不育的阈值为２０％，ＡＵＣ为０．９３，敏感性和特异性分别为９６．９％和８９．４％。Ｖｅｎｋａｔｅｓｈ等ｎ３］应用ＳＣＳＡ检测精子ＤＮＡ碎片的研究也得出类似的结果。这些研究认为根据ＳＤＦ水平可以区分不育和正常生育男性，对男性不育有重要的诊断价值和预测价值。在Ｓｉｍｏｎ等［１ｕ的研究中，他们应用Ｃｏｍｅｔ法检测男性的ＳＤＦ后发现，当精子ＤＦＩ≥２５％时，男性发生不育的危险度显著增加。在Ｇｉｗｅｒｃｍａｎ等ｐ１的研究中，应用ＳＣＳＡ对ＳＤＦ进行检测的结果表明，当精子ＤＦＩ≥１０％时，男性发生不育的危险性就开始增加，并且随着ＤＦＩ值的升高而进一步增加。本研究结果进一步证实了这一点，２９９例常规精液参数均无差异的不育和正常生育男性中，精子ＤＦＩ诊断男性不育的阈值为１５．１％，ＡＵＣ为０．８６１，且显著高于常规精液参数（精子浓度、精子活动力和精万方数据子形态）的ＡＵＣ，其敏感性为８１．８％，特异性为８８．２％，阳性预测值为８２．５％，阴性预测值为８７．７％，精子ＤＦＩ≥１５．１％时男性发生不育的危险度为７．２，９５％ＣＪ为４．２～１２．３，表明ＳＤＦ能克服常规精液参数评估男性生育力的不足，对男性不育能进行较为准确的诊断和预测。目前，男性ＳＤＦ的病因尚未完全清楚。吸烟、放疗、化疗、精索静脉曲张、泌尿生殖系感染及男性的年龄都可能与ＳＤＦ相关［２卜２２卫５。。此外，糖尿病、农药和空气污染等因素也可导致ＳＤＦ水平增加。这些病因导致ＳＤＦ的机制主要包括精子形成过程中染色质包装异常、氧化应激和精子凋亡异常。研究表明，ＳＤＦ对男性生育能力有重要影响，对男性而言，精子ＤＮＡ的完整性对其生育能力是至关重要的，精子ＤＮＡ的任何损伤都可造成其不育。研究发现，高水平的ＳＤＦ导致编码Ｎａ＋－ＫｔＡＴＰ酶的基因发生改变，造成ＡＴＰ酶变性，不能水解释放能量，使精子活动力下降，降低男性的生育力［２６｜。辅助生殖技术的发展，则进一步揭示ＳＤＦ对男性生育能力的影响。体外受精过程中，受精时ＤＮＡ缺陷的精子也不易被卵子的透明带自然识别，造成受精率低下。ＤＮＡ损伤的精子进人卵子后，其染色质去致密化过程出现障碍，妨碍雄性原核的形成，可导致受精失败。在胚胎发育过程中，精子ＤＮＡ缺陷可引起胚胎基因变异，影响胚胎的正常发育和着床，造成胚胎发育停止或流产。但目前这些结论仍存在争议［２７｜，ＳＤＦ对男性不育影响的机制有待进一步阐明。相信随着对ＳＤＦ研究的深入，ＳＤＦ在男性不育的诊断中会显示出越来越大的应用价值。参考文献［１］ＷｏｒｌｄＨｅａｌｔｈＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ．ＷＨＯｌａｂｏｒａｔｏｒｙｍａｎｕａｌｆｏｒｔｈｅｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｓｅｍｅｎａｎｄｓｅｍｅｎ―ｃｅｒｖｉｃａｌｍｕｃｕｓｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ［Ｍ］．４ｔｈｅｄ．Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ：ＣａｍｂｒｉｄｇｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ，１９９９．［２］ＢｕｎｇｕｍＭ，ＢｕｎｇｕｍＩ。，ＧｉｗｅｒｅｍａｎＡ．Ｓｐｅｒｍｃｈｒｏｍａｔｉｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｓｓａｙ（ＳＣＳＡ）：ａｔｏｏｌｉｎｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ３．ＡｓｉａｎＪＡｎｄｒｏｌ。２０１１。１３：６９―７５．［３］ＧｕｚｉｃｋＤＳ，Ｏｖｅｒｓｔｒｅｅｔｊｗ，Ｆａｃｔｏｒ＿ｌ。ｉｔｖａｋＰ，ｅｔａ１．Ｓｐｅｒｍｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｍｏｔｉｌｉｔｙ，ａｎｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｆｅｒｔｉｌｅａｎｄｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍｅｎ［Ｊ］．ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ，２００１，３４５：１３８８―１３９３．［４］ＨｕａｎｇＸＦ，ＪｉｎＪＹ，Ｆｅｉ０３，ｅｔａ１．ＳｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅ：ａｎｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐａｒａｍｅｔｅｒｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｓｐｅｒｍｑｕａｌｉｔｙ［Ｊ］．ＪＷｅｎｚｈｏｕＭｅｄＣｏｉｌ，２０１０，４０：２３９―２４２．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）黄学锋，金建远。费前进，等．精子ＤＮＡ损伤：独立的精子质量评价指标［Ｊ］．温州医学院学报，２０１０，４０：２３９―２４２．［５］ＱｉｕＹ，ＷａｎｇＬＧ，ＺｈａｎｇＬＨ，ｅｌａ１．ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｓｐｅｒｍｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓａｎｄｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍａｌｅｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎＪＭｅｄＧｅｎｅｔ，２００８，２５：６８１―６８５．（ｉｎ?６４?中华医学遗传学杂志２０１４年２月第３１卷第１期ＣｈｉｎＪＭｅｄＧｅｎｅｔ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０１４，Ｖ０１．３１，Ｎｏ．１Ｃｈｉｎｅｓｅ）邱毅。王磊光，张丽红，等．男性不育患者精子染色体畸变及精子ＤＮＡ完整性分析［Ｊ］．中华医学遗传学杂志，２００８，２５：６８１―６８５．［６３ＷａｎｇＶＪ，Ｉ。ｉＤＷ，ＺｈａｎｇＷＩ。，ｅｔａ１．ＣｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｏｆｒｅｃｕｒｒｅｎｔｐｒｅｇｎａｎｃｙｌｏｓｓｗｉｔｈｓｐｅｒｍｐａｒａｍｅｔｅｒｓａｎｄｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｉｎＪＭｅｄＧｅｎｅｔ，２０１２，２９：６０２―６０５．＜ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）王英俊，李大文，张唯力，等．主要精浪参数及精子ＤＮＡ完整率与不明原因习惯性流产的相关性［Ｊ］．中华医学遗传学杂志。２０１２，２９：６０２－６０５．［７］ＧｕＬＪ，ＣｈｅｎＺＷ，Ｉ．ｕＷＨ，ｅｔａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｂｎｏｒｍａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｓｐｅｒｍｅｈｒｏｍａｔｉｎｏｎｔｈｅｏｕｔｃｏｍｅｏｆｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｅｍｂｒｙｏｔｒａｎｓｆｅｒ［Ｊ１．ＣｈｉｎＪＭｅｄＧｅｎｅｔ，２０１１，２８：１５６―１５９．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）谷龙杰，陈振文，卢文红，等．精子染色质结构异常对体外受精一胚胎移植结局的影响［Ｊ］．中华医学遗传学杂志，２０１ｌ，２８：１５６－１５９．［８］ＦａｎｇＩ。，ＬｏｕＩ．Ｊ，ＹｅＹＨ，ｅｔａ１．ＡｓｔｕｄｙｏｎｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｄｅｘａｎｄａｇｅｏｆｍａｌｅ，ｖａｒｉｏｕｓｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｓｐｅｒｍａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｕｔｃｏｍｅ［Ｊ］．ＣｈｉｎＪＭｅｄＧｅｎｅｔ，２０１１，２８：４３２―４３５．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）方力，楼丽君，叶英辉，等．精子ＤＮＡ碎片率与男性年龄、精子活动力和体外受精结局关系的研究［Ｊ１．中华医学遗传学杂志。２０ＩＩ，２８：４３２－４３５。Ｌ９］ＧｉｗｅｒｃｍａｎＡ，ＬｉｎｄｓｔｅｄｔＩ．，ＬａｒｓｓｏｎＭ，ｅｔａ１．Ｓｐｅｒｍｃｈｒｏｍａｔｉｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｓｓａｙａｓａｎｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｅｄｉｃｔｏｒｏｆｆｅｒｔｉｌｉｔｙｉｎｖｉｖｏ：ｆｌｃａｓｅ－ｃｏｎｔｒｏｌｓｔｕｄｙ［Ｊ］．ＩｎｔＪＡｎｄｒｏｌ，２０１０，３３：ｅ２２１―２２７．Ｍ，ＬａｆｏｒｅｓｔＧ。ＢｕｊａｎＩ。，ｅｔａ１．ＳｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ：ｔｈｒｅｓｈｏｌｄｖａｌｕｅｉｎｍａｌｅｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２００５，２０：３４４６―３４５１．１３ＳｉｍｏｎＩ．，ＬｕｔｔｏｎＤ，ＭｃＭａｎｕｓＪ，ｅｔａ１．ＳｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｔｈｅａｌｋａｌｉｎｅＣｏｍｅｔａｓｓａｙａｓａｎｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｅｄｉｃｔｏｒｏｆｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｓｕｃｃｅｓｓ［Ｊ］．Ｆｅｒｔｉ［Ｓｔｅｒｉｌ，２０１１，９５：６５２―６５７．ＲＫ，ＳａｂａｎｅｇｈＥ，ＭａｈｆｏｕｚＲ，ｅｔａ１．ＴＵＮＥＩ．ａｓａｔｅｓｔｆｏｒｓｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅｉｎｔｈｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．Ｕｒｏｌｏｇｙ，２０１０，７６：１３８０―１３８６．Ｓ，ＳｉｎｇｈＡ，ＳｈａｍｓｉＭＢ．ｅｔａ１．ＣｌｉｎｉｃａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅｔｈｒｅｓｈｏｌｄｖａｌｕｅｉｎｔｈｅａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．ＲｅｐｒｏｄＳｃｉ，２０１１，１８：１００５―１０１３．４１ＺｉｕｉＡ，ＦｉｓｃｈｅｒＭＡ，ＳｈａｒｉｒＳ，ｅｔａ１．ＰｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆａｂｎｏｒｍａｌｓｐｅｒｍＤＮＡｄｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎｉｎｆｅｒｔｉｌｅａｎｄｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍｅｎ［Ｊ］．Ｕｒｏｌｏｇｙ，２００２，６０：１０６９―１０７２．５］ＳａｌｅｈＲＡ，ＡｇａｒｗａｌＡ，ＮｅｌｓｏｎＤＲ，ｅｔａ１．ＩｎｃｒｅａｓｅｄｓｐｅｒｍｎｕｃｌｅａｒＤＮＡｄａｍａｇｅｉｎｎｏｒｍｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉｃｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍｅｎ：ａｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｓｔｕｄｙ［Ｊ］．ＦｅｒｔｉｌＳｔｅｒｉｌ，２００２，７８：３１３―３１８．ＥｒｅｎｐｒｅｉｓｓＪ，ＥｌｚａｎａｔｙＳ，ＧｉｗｅｒｅｍａｎＡ．ＳｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅｉｎｍｅｎｆｒｏｍｉｎｆｅｒｔｉｌｅｃｏｕｐｌｅｓ［Ｊ］．ＡｓｉａｎＪＡｎｄｒｏｌ，２００８，１０：７８６―万方数据７９０．［１７］ＨａｎｌｅｙＪＡ，ＭｃＮｅｉｌＢＪ．Ａｍｅｔｈｏｄｏｆｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅａｒｅａｓｕｎｄｅｒｒｅｃｅｉｖｅｒｏｐｅｒａｔｉｎｇｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｃｕｒｖｅｓｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｔｈｅｓａｍｅｃａｓｅｓ［Ｊ］．Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ，１９８３，１４８：８３９―８４３．［１８３ＳｈａｍｓｉＭＢ，ＩｍａｍＳＮ，ＤａｄａＲ．ＳｐｅｒｍＤＮＡｉｎｔｅｇｒｉｔｙａｓｓａｙｓ：ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｃｈａｌｌｅｎｇｅｓａｎｄｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｎｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．ｊＡｓｓｉｓｔＲｅｐｒｏｄＧｅｎｅｔ，２０１１，２８：１０７３―１０８５．［１９３ＳａｌｅｈＲＡ，ＡｇａｒｗａｌＡ，ＮａｄａＥＡ，ｅｔａ１．ＮｅｇａｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅｉｎｒｅｌａｔｉｏｎｔｏｓｅｍｉｎａｌｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｍｅｎｗｉｔｈｉｄｉｏｐａｔｈｉｃａｎｄｍａｌｅｆａｃｔｏｒｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ３．ＦｅｒｔｉｌＳｔｅｒｉｌ，２００３，７９：１５９７―１６０５．［２０３ＣｕｒｔｉＧ，ＣｄｎｅｐａＭ，Ｃａｎｔｆｌｌ。，ｅｔａ１．Ｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ：ａｎｅｅｄｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎｄｃｈｒｏｍａｔｉｎｅｖａｌｕａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｃｔａｓＵｒｏｌＥｓｐ，２０ｔ３．３７：ｉ００―１０５．［２１３ＷａｎｇＤＭ．ＡｄｖａｎｃｅｍｅｎｔｏｎｓｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅｉｎｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．ＣｈｉｎＪＡｎｄｒｏｌ，２０１２，２６：６９―７２．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）王大明．精子ＤＮＡ损伤在男性不育中的研究进展［Ｊ］．中国男科学杂志，２０１２，２６：６９―７２．［２２３ＹａｎｇＹ，ＪｉａｎｇＨ．ＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｓｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅａｎｄｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．ＣｈｉｎＪＡｎｄｒｏｌ，２０ｔｌ，２５：６７―６９．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）杨译，姜辉．精子ＤＮＡ损伤与男性不育的关系［Ｊ］．中国男科学杂志，２０１１，２５：６７―６９．［２３］ＺｈａｎｇＳ，ＺｈａｎｇＹＳ．ＴｈｅｒｅｃｅｎｔｓｔｕｄｙｏｎｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．ＳｈａｎｘｉＭｅｄＪ，２０１２，４１：１００５―１００７．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）张帅，张云山．精子ＤＮＡ碎片化在男性不育中的研究进展［Ｊ］．山西医药杂志，２０１２，４ｌ：１００５―１００７．ＢａｉＸＨ，ＭｉＲＲ．ＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｏｆｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｎｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ／ｒａｍＰｌａｎ，２００７。２６：２６１－２６３．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）白晓红，糜若然．精子ＤＮＡ碎片化检测对男性不育诊治的价值［Ｊ］．国外医学（计划生育／生殖健康分册），２００７，２６；２６１―２６３，ＲＴ，ＯｈｌＤＡ，ＳｉｇｍａｎＭ，ｅｔａ１．ＳｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅｉｎｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ：ｅｔｉｏｌｏｇｉｅｓ，ａｓｓａｙｓ，ａｎｄｏｕｔｃｏｍｅｓ［Ｊ］。ＪＡｓｓｉｓｔＲｅｐｒｏｄＧｅｎｅｔ，２０１０，２７：３－１２．ＭＹ，ＨｕａｎｇＧＮ，ＷａｎｇＹＰ，ｅｔａ１．ＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎａｎｄｏｕｔｃｏｍｅｓｏｆｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＲｅｐｒｏｄＣｏｎｔｒａ，２０１０，３０：７３２―７３７．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）陈泯燕，黄国宁，王亚平，等．精子ＤＮＡ碎片与体外受精结局的关系［Ｊ］．生殖与避孕，２０１０，３０：７３２―７３７．Ｆｅｉ０３，ＨｕａｎｇＸＦ，ＪｉｎＪＹ，ｅｔａ１．Ｓｐｅｒｍｄｅｏｘ’ｒｆｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎａｎｄｏｕｔｃｏｍｅｓｏｆａｓｓｉｓｔｅｄｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ口］．ＺｈｅｊｉａｎｇＭｅｄＪ，２０１２，３４：９－１１．（ｉｎＣｈｉｎｅｓｅ）费前进．黄学锋，金建远，等．精子脱氧核糖核酸损伤对辅助生殖技术治疗结局的影响［Ｊ］．浙江医学，２０１２，３４：９－１１．（收稿日期：２０１３―０３～１２）（本文编辑张谦）［２４１［１０］Ｓｅｒｇｅｒｉｅ［１［２５］Ｓｃｈｕｌｔｅ［１２］Ｓｈａｒｍａ［２６］Ｃｈｅｎ［１３］Ｖｅｎｋａｔｅｓｈ［２７３［１［１［１６３三亿文库包含各类专业文献、中学教育、文学作品欣赏、各类资格考试、幼儿教育、小学教育、专业论文、18精子DNA损伤在男性不育中的诊断价值等内容。　
　在这些繁冗的检测项目中究竟哪些最具诊断价值 以及...对于男性不育患者而言,以血清抗精子抗 体作为免疫性...(2) 精子发生候选基因 迄今为止,除 Y 染色体无... 　精子 DNA 完整性检测对妊娠结局的预测作用是目前男性不育诊疗中的研究热点之一。目前众多研究已公 认:精子 DNA 损伤降低自然妊娠及人工授精的成功率、增加流产率,... 　因此, 通过口服药物合理增加精液中锌和硒的含量, 控制铅和镉的含量可能会起到降低精子 DNA 损伤的作用。 中医药在男性不育临床上发挥了重要作用, 口服中药或体外... 　结论长期大量吸烟可导致男性精液质 量下降和精子 DNA 的损伤,从而影响男性生育。 [关键词] 吸烟;男性不育症;精液质量;精子 DNA 完整性 [中图分类号] R446.1... 　龙源期刊网 .cn 精子 DNA 碎片率对男性不育及早期复发性 流产的影响 作者:史海跃 郑娟 周黎明 等 来源:《中国现代医生》2015 年第 26... 　精子 DNA 损伤检测可更好地衡量男性生育能力以及 ...的完整性 对不育患者精子质量的评估具有极大的价值...虽然精子 DNA 碎片在自然妊娠和试管婴儿治疗中,对... 　2014年南方医科大学华银病理诊断中心不育症检验项目名称...的不育男性; 11、存在精子 DNA 损伤的不育男性。...由于睾丸血睾屏障的存在,因此检测男性 血液中的抗... 　WHO男子不育症标准检查与诊断手册手册第二稿_临床医学...Young 氏综合症中的鞭毛不动综合症、内脏移 位或者...最近资料显示,发热也可 以引起精子 DNA 损伤。引起...}