内源性 氧化氮合酶过氧化物酶为什么引起非特异性染色

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【求助】过氧化氢消除内源性过氧化物酶的作用
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这个帖子发布于10年零305天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
如题,在免疫组化中用过氧化氢来消除内源性过氧化物酶的作用是什么,原理又是什么? 谢谢!
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为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色因为加的二抗可能是辣根过氧化物酶
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过氧化氢是过氧化物酶的底物,它可以耗竭内源性过氧化物酶,消除非特异染色,因为桥抗上联的是过氧化物酶,开始要耗尽内源性的,最后显色时起作用的都是桥抗上的过氧化物酶了.
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哦,知道了,谢谢两位
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冰冻切片免疫组化是否一定要有过氧化氢灭活内源性过氧化物酶的步骤?求大神指点
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小弟目前正在研究揣摩冰冻切片(肿瘤组织)免疫组化实验,正纠结是否一定要有过氧化氢灭活内源性过氧化物酶的步骤以排除非特异性染色,还是只是在肝肾等含过氧化物酶多的组织才用,或者说用了总比不用好?请大神指教!谢谢!
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我先顶起来!
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如果是做免疫荧光的话,灭活内源性过氧化物酶的步骤可以不做。对于过氧化物酶法显色(过氧化物酶会参与显色,催化H2O2,例如DAB显色。SP法,ABC法试剂上会标记HRP)最好是加上这个步骤,避免在显色过程中发生非特异染色。当然很多内源性过氧化物酶含量很低的组织,这种影响很弱的,甚至观察不到影响。但也需要验证后才能不做灭活的步骤。所以个人认为加一步骤也费不了多大事,最好还是做
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Justin001 如果是做免疫荧光的话,灭活内源性过氧化物酶的步骤可以不做。对于过氧化物酶法显色(过氧化物酶会参与显色,催化H2O2,例如DAB显色。SP法,ABC法试剂上会标记HRP)最好是加上这个步骤,避免在显色过程中发生非特异染色。当然很多内源性过氧化物酶含量很低的组织,这种影响很弱的,甚至观察不到影响。但也需要验证后才能不做灭活的步骤。所以个人认为加一步骤也费不了多大事,最好还是做谢大胜指点!
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