凝胶过滤法提取蛋白质凝胶电泳的洗脱图谱为什么只出现一个相对较大的峰值?

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血红蛋白先被洗脱下来血红蛋白的分子量是67000,肌红蛋白的分子量是17000凝胶过滤法分离原理是分子量越大的蛋白在流动相中的速度越快,所以会先被洗脱下来。
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凝胶过滤层析法分离纯化蛋白质
&&提供了一种分离纯化蛋白质的有效方法
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  凝胶过滤法又称分子排阻法, 这是一种高效的方法。原理是不同的蛋白质分子对固定化在载体上的特殊配基具有不同的识别和结合能力。选择与待纯化蛋白质具有特殊识别和结合作用的配基,然后应用化学方法将该配基与载体共价链接。将这种有配基的载体装入层析柱中,当含有待纯化的蛋白质溶液通过层析柱时,该蛋白质即与配基发生特异性结合而被吸附在层析柱上,而其他蛋白质则流出柱外。被特异性结合在层析柱上的蛋白质,可以用适当的配体洗脱液洗脱。
  缺点:从凝胶过滤的原理可知,蛋白质分子通过凝胶柱的速度(即的大小)并不直接取决于分子的质量,而是它的半径,利用凝胶过滤法测定蛋白质分子量时,标准蛋白质(已知分子量和斯笃克半径)和待测蛋白质必须具有相同的分子形状(接近球体),否则不能得到比较准确的分子量。分子形状为线形的或与凝胶能发生吸附作用的蛋白质,则不能用此方法测定分子量。而且柱子成本比较高,整个实验过程耗时很长。
  凝胶过滤法所用的介质为凝胶珠,其内部为多孔网状结构。一定型号的凝胶网孔大小一定,只允许相应大小的分子进入凝胶颗粒内部,大分子则被排阻在外。洗脱时,大分子随洗脱液从颗粒间隙流下来,洗脱液体积小,小分子则在颗粒网状结构中穿来穿去,历程长,后洗脱下来,洗脱体积大。
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凝胶过滤法分离蛋白质实验报告
畜牧养殖专业学生|
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&&凝胶过滤法分离蛋白质实验报告:结果:1、颜色:开始时为无色透明,但时间过去,试管中收集的红褐色开始变深,到最后,试管的颜色为深褐色,接着溶液的颜色开始变浅……(分析),1.利用凝胶层析后分离混合物时,怎样才能得到较好的分离效果?2.凝胶过虑法在蛋白质分析中还有何应用?(分为三小点)
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