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凝胶层析法
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你可能喜欢凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别，这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？(多肽,液相,凝胶过滤色谱,分离纯化) - 食品 - 生物秀
标题: 凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别，这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？(多肽,液相,凝胶过滤色谱,分离纯化)
摘要: 凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？网友回复凝胶过滤是通过分子量大小来进行分离的，跟HPLC用的柱子不一样，好像应该先过凝胶柱然后再上液相吧，我也是新手，最近也在分离纯化多肽，可以一起讨论哇:D网友回复 引用内容:凝胶过滤是通过分子量大小来进行分离的，跟HPLC用的柱子不一样，好像应该先过凝胶柱然后再上液相吧，我也是新手，最近也在分离纯化多肽，可以一起讨论哇:D ……
凝胶过滤色谱与高效的区别
这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？网友回复凝胶过滤是通过分子量大小来进行分离的，跟HPLC用的柱子不一样，好像应该先过凝胶柱然后再上液相吧，我也是新手，最近也在分离纯化多肽，可以一起讨论哇:D网友回复 引用内容:
凝胶过滤是通过分子量大小来进行分离的，跟HPLC用的柱子不一样，好像应该先过凝胶柱然后再上液相吧，我也是新手，最近也在分离纯化多肽，可以一起讨论哇:D 如果凝胶是通过分子量进行分离，那超滤可以代替凝胶了吧，我超滤后直接进行液相也行了呗，是这个意思吗？网友回复 引用内容:
如果凝胶是通过分子量进行分离，那超滤可以代替凝胶了吧，我超滤后直接进行液相也行了呗，是这个意思吗？... 凝胶比超滤分的更细吧，超滤是初分，我也用超滤分了，然后上离子交换柱，不过目前离子交换柱分的效果不太理想，还在摸索阶段，如果超滤后直接进行液相，可能杂质会比较多吧，我也不是很懂啦网友回复 引用内容:
凝胶比超滤分的更细吧，超滤是初分，我也用超滤分了，然后上离子交换柱，不过目前离子交换柱分的效果不太理想，还在摸索阶段，如果超滤后直接进行液相，可能杂质会比较多吧，我也不是很懂啦... 你的离子交换柱是什么样的？用什么填料啊？网友回复 引用内容:
你的离子交换柱是什么样的？用什么填料啊？... 我的柱子比较大诶，是4*40cm的，填料用的是SP Sephadex C-25网友回复 引用内容:
我的柱子比较大诶，是4*40cm的，填料用的是SP Sephadex C-25... 凝胶过滤色谱需要特殊的设备吗？怎么控制流速啊？网友回复 引用内容:
凝胶过滤色谱需要特殊的设备吗？怎么控制流速啊？... 这个我没做过诶，我也不清楚，控制流速我用过恒流泵，如果做液相什么的，流速在电脑上设置一下就行了网友回复 引用内容:
这个我没做过诶，我也不清楚，控制流速我用过恒流泵，如果做液相什么的，流速在电脑上设置一下就行了... 我就在想这个凝胶过滤怎么做呢，最近要做，也没有人指导我，不用恒流泵的话，简单调一下流速，用标样先走一次，每隔几分钟一收集，用紫外检测器检测，绘制曲线，找到峰值，记住出峰时间，再进行上样，再相应出峰时间进行收集，是这样的吗？网友回复 引用内容:
我就在想这个凝胶过滤怎么做呢，最近要做，也没有人指导我，不用恒流泵的话，简单调一下流速，用标样先走一次，每隔几分钟一收集，用紫外检测器检测，绘制曲线，找到峰值，记住出峰时间，再进行上样，再相应出峰时 ... 嗯，应该是这样，但是不用恒流泵怎么控制流速？网友回复 引用内容:
嗯，应该是这样，但是不用恒流泵怎么控制流速？... 我听说用蛋白纯化仪也能做，呵呵网友回复 引用内容:
嗯，应该是这样，但是不用恒流泵怎么控制流速？... 蠕动泵也可以的网友回复 引用内容:
蠕动泵也可以的... 我现在就在用蛋白质纯化仪做网友回复 引用内容:
我现在就在用蛋白质纯化仪做... 你们的蛋白质纯化仪对外开放吗，我想花钱测样可以吗网友回复设备运作原理差不多，柱子和填料不填，液相相对精度压力之类的大些，分离方式也都分好多种，分子筛、离子交换、极性大小网友回复凝胶柱是个初分高效液相特别纯的，一般都是先凝胶后液相呢吧网友回复凝胶过滤色谱无论从定量定性还是多肽分子量测定上应该都不如高效精确。凝胶分辨能力比较弱，可简单的用于初步分离、分子量测定。
对于寡肽的分离定性及分子量测定还是液相，当然在分离纯化多肽时还要考虑到分子量的大小而选择不同孔径凝胶与柱子。
所以个人觉得，大的，粗的用凝胶，小的，精的用液相。两者互补用。
而对于多肽方面还是比较靠前，当前没什么标准，我只见过有个大豆肽国标，分子量测定方面是用液相的。
知识有限，仅供参考。:)网友回复 引用内容:
凝胶过滤色谱无论从定量定性还是多肽分子量测定上应该都不如高效液相色谱精确。凝胶分辨能力比较弱，可简单的用于初步分离、分子量测定。
对于寡肽的分离定性及分子量测定还是液相，当然在分离纯化多肽时还要考虑到 ... 当然，你在跑液相时，要选对柱子，有专门分析多肽的肽柱或氨基柱
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凝胶层析是利用被分离物质的分子大小进行分离。较快通过凝胶柱的是A．大的溶质分子B．带电荷的分子C
悬赏：0&答案豆
提问人：匿名网友
发布时间：
凝胶层析是利用被分离物质的分子大小进行分离。较快通过凝胶柱的是A．大的溶质分子B．带电荷的分子C．形态不规则的分子D．小的溶质分子E．亲和力较小的分子请帮忙给出正确答案和分析，谢谢！
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