水族箱中放硝化细菌是什么时候放一次放多少
水族箱中放硝化细菌是什么时候放一次放多少
10-01-10 &匿名提问
硝化细菌都在内过滤器上面。没有过滤，硝化细菌只会存活几个小时，建议把内过滤器放回去。参考资料：a href=&tieba.baidu/f?ct=&tn=&rn=&pn=&lm=&cm=0&kw=%BD%F0%D3%E3&rs2=0&sc=&un=&rs1=&rs5=&sn=&rs6=&myselectvalue=0&word=%BD%F0%D3%E3&tb=on& target=&_blank&tieba.baidu/f?ct=&tn=&rn=&pn=&lm=&cm=0&kw=%BD%F0%D3%E3&rs2=0&sc=&un=&rs1=&rs5=&sn=&rs6=&myselectvalue=0&word=%BD%F0%D3%E3&tb=on/aa href=&tieba.baidu/f?ct=&tn=&rn=&pn=&lm=&cm=0&kw=%C8%C8%B4%F8%D3%E3&rs2=0&sc=&un=&rs1=&rs5=&sn=&rs6=&myselectvalue=0&word=%C8%C8%B4%F8%D3%E3&tb=on& target=&_blank&tieba.baidu/f?ct=&tn=&rn=&pn=&lm=&cm=0&kw=%C8%C8%B4%F8%D3%E3&rs2=0&sc=&un=&rs1=&rs5=&sn=&rs6=&myselectvalue=0&word=%C8%C8%B4%F8%D3%E3&tb=on/a
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材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录 1。贮存液稀释至适当浓度。考马斯亮蓝染色溶液或银染溶液参见附录 8。1XSDS 凝胶加样缓冲液不含 DTT 的 1xSDS 凝胶加样缓冲液室温保存，1mol/LDTT 贮存液现用现加于上述缓冲液。L-色氨酸（10 mg/ml)凝胶SDS-聚丙烯酰胺凝胶（10%)用于分离蛋白的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备参考附录 8。核酸和寡核苷酸靶基因或 cDNA 片段培养基LB 琼脂平板LB 培养基根据所用载体在培养基中加入不同的抗生素。加热到 65°C 的 LB 培养基备选，参见步骤 13。M9 基本培养基灭菌后补加 0.5%(m/V) 葡葡糖，0.2%(m/V) 酪蛋白酸水解物和所需抗生素，用于色氨酸诱导的表达载体。离心机和转头SorvallGSA 转头或相当的转头特别配备沸水浴设定为 30°C 和 40°C 的振荡培养器只有使用λ噬菌体 cI 基因的温度敏感型等位基因时才需要。补充试剂本方案步骤 1 需要第 8 章方案 7 中所列试剂。本方案步骤 2 需要第 1 章方案 17 或 19 中所列试剂。本方案步骤 3 需要第 1 章方案 23~26 中所列试剂。本方案步骤 4 需要第 12 章方案 3 中所列试剂。载体和细菌菌株带有λ噬菌体 cI 基因的 cIts857 等位基因或野生型等位基因的大肠杆菌菌株在 M5219 菌珠中是热诱导的 clts857 等位基因，在 GI724 菌珠 (ATCC55151cI 基因）中是色氨酸诱导的野生型 cI 基因。PL 表达载体（如 pHUB,pPLc,pKC30,pASl,pCQV2,pAL-781 和 pTrxFus)阳性对照质粒（表达已知大小融合蛋白的 PL 表达载体）方法含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建1.PCR 修饰（第 8 章方案 7) 或限制性内切酶消化分离 DNA 片段，片段 5'端和 3'端带有与 PL 表达载体对应的限制酶位点。必要时可在 cDNA/基因的 ATG 上游置入强的核糖体结合位点。为确定扩增反应没有引入错误突变，应对 PCR 产物进行序列分析。2. 靶 cDNA/基因的 DNA 片段与表达载体连接（第 1 章方案 17 或 19)。3. 连接产物转化含有 cIts857 等位基因或野生型 cI 基因的大肠杆菌菌株。将转化体铺于含相应选择抗生素的 LB 平板（通常为 50ug/ml 的氨苄青霉素），于 30°C(含有cIts857 等位基因）或 37°C(含有色氨酸诱导的野生型 cI 基因）过夜培养。空的表达质粒转化相同的大肠杆菌菌株作阴性对照。4. 通过菌落杂交和/或小量制备质粒的限制酶切分析、寡核苷酸杂交或序列分析筛选带有插入片段的转化体（请参见第 12 章方案 3)。诱导靶蛋白表达的优化许多研究表明细胞生长速率严重影响外源蛋白的表达，因此必须对接种细菌量、诱导前细胞生长时间和诱导后细胞密度进行控制。生长过度或过速都会加重细菌合成系统的负担，导致形成包涵体。5. 通过提髙温度或加入色氨酸，下调 cI 阻抑蛋白，诱导靶蛋白表达，筛选最佳表达条件。影响诱导表达的因素请参见方案 1 步骤 8 的注解。对于溫度诱导系统a. 对照菌和重组菌分别挑取 1~2 个菌落，接入 1 ml 含所需抗生素的 LB 培养液，30°C 培养过夜。编码己知大小蛋白的表达载体作阳性对照。b. 取 50ul 接入 10 ml 含抗生素的 LB 培养液，在 50 ml 摇瓶中于 30°C 培养至对数中期（A550=0.5?1.0)。c. 吸出 lml 未经诱导的培养物放在一个微量离心管中，按下面步骤 6 和 7 所述进行处理。d. 调整温度至 40°C, 诱导剩余培养物。继续步骤 6。尽管在本书其他章节中采用 42~45°C 灭活λ噬菌体 cIts857 阻抑物，但此处采用40°C 以便减少热激蛋白的诱导并使细菌能够继续生长。对于色氨酸诱导系统a. 含空载体和重组表达载体的大肠杆菌（带有 cI 野生型等位基因）分别挑取 1~2个菌落，接入 1ml 补充 M9 培养液，37°C 培养过夜。编码已知大小蛋白的表达载体作阳性对照。b. 取 50ul 接入 10 ml 补充 M9 培养液，在 50 ml 摇瓶中于 37°C 培养至对数中期(A550=0.5~1.0)。c. 吸出 1 ml 未经诱导的培养物放在一个微量离心管中，按下面步骤 6 和 7 所述进行处理。d. 剩余培养物中加入色氨酸至终浓度 100ug/ml,37°C 继续培养。6. 诱导不同时间（如 1、2、4 和 6 h) 后取 1ml 样品放于微量离心管中，测定A550, 室温高速离心 1 min。7. 沉淀悬于 100ul 1XSDS 凝胶加样缓冲液，100°C 加热 3 min, 室温高速离心lmin，冰上放置，待全部样品处理完后上样。8. 样品加热至室温，取 40ug 或相当于 0.15 OD550 培养物的悬液上样于 10%SDS 聚丙烯酰胺凝胶。9.8~15V/cm 电泳，至溴酚兰迁移到分离胶底部。10. 考马斯亮蓝染色或银染，或免疫印迹，观察表达产物条带（见附录 8)。未转化的大肠杆菌细胞和转化了空载体的细胞，蛋白质带形应该没有区别。诱导一定时间的重组菌应有一条与预计大小一致的带。大量表达靶蛋白11. 挑取一个重组大肠杆菌菌落接入 50 ml 含抗生素的 LB 培养液或补充 M9 培养液,在 250 ml 摇瓶中于 30°C 或 37°C 过夜培养。12. 取 50 ml 过夜培养物接入 450 ml 含抗生素的 LB 培养液或补充 M9 培养液，在 2L 摇瓶中于 30°C 或 37°C 振荡培养至对数中期（A550=0.5~1.0), 按步骤 13 或 14 进行诱导。13. 加入 500 ml 加热至 65°C 的 13 培养基，诱导带 cIts857 等位基因的大肠杆菌。40°C培养预试验确定的最佳时间。或者于室温以 12000 g(8600r/min Sorvall 转头）离心 5 min 收集细胞，沉淀重悬于 500 ml40°C 的LB 培养基，40°C 继续培养预试验确定的最佳时间。14. 加入色氨酸至终浓度100ug/ml, 诱导带 cI 等位基因的大肠杆菌。37°C 继续培养预试验确定的最佳时间。15. 诱导适当时间后，于 4°C 以 5000 g(5500r/min Sorvall GSA 转头）离心 15 min 收集细胞，继续后面的纯化方案：o 如果表达的是 GST 融合蛋白，继续方案 5o 如果表达的是麦芽糖结合蛋白融合蛋白，继续方案 6o 如果表达产物带有组氨酸标签，继续方案 7
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问题：酵母菌是生物科学研究中一种重要的生物材料，在高中生物教材中多...
问题详情 : 酵母菌是生物科学研究中一种重要的生物材料，在高中生物教材中多个地方涉及到酵母菌，如图所示，请回答有关问题：
在①中，酵母菌与醋酸菌的共同点是_______________________________。
在②③的实验中，如何测定酵母菌有氧呼吸无酒精产生，而进行无氧呼吸过程中有酒精产生？测定步骤如下，请补全。
取3支干净的试管编上号A、B、C，在A、B两支试管中分别加入2 mL有氧呼吸、无氧呼吸的发酵液，在C试管中加入_____________________做对照。在3支试管中分别滴加0.5 mL重铬酸钾的浓硫酸溶液并轻轻震荡，观察溶液是否变&&&&&&&&&色。
在④的实验中，如要连续7 天测定恒定体积和浓度的培养液中酵母菌种群数量的变化，需要用7支试管来培养并持续分别测定的原因是______________&&&&&&_______。
其中操作正确的有&&&&&&&&&&&&。
A．将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的试管中，在适宜条件下培养
B．静置一段时间后，用吸管从试管中吸取培养液
C．在血球计数板中央滴一滴培养液，盖上盖玻片
D．用滤纸吸除血球计数板边缘多余培养液
E．将计数板放在载物台中央，待酵母菌沉降到计数室底部，在显微镜下观察、计数
在制作葡萄酒的过程中，假设某同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该错误操作是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。
在⑧操作中最关键的步骤是________&&&&&&&&&&______。
难易度：一般&&
更新时间： 03:01:43.0
（1）都有细胞壁、细胞膜、核糖体
（2）2 mL酒精&&灰绿色
（3）避免了前一次吸取酵母菌培养液对以后测定酵母菌数量的影响&&&&&& ADE
（4）未及时排气
（5）海藻酸钠溶液的配制
试题分析：
（1）酵母菌是真核生物，醋酸菌是原核生物，共同结构特点有细胞壁、细胞膜和核糖体。
（2）由于A、B两支试管中分别加入2 mL有氧呼吸、无氧呼吸的发酵液，C试管中应加入2ml酒精溶液做对照；重铬酸钾可以用来鉴定酒精，观察溶液是否变成灰绿色。
（3）调查酵母菌种群数量的变化实验中，用7支试管来培养并持续分别测定的原因是避免前一次吸取酵母菌培养液对以后测定酵母菌数量的影响；培养酵母菌时，将适量干酵母放入一定浓度的葡萄糖溶液的试管中，置于适宜条件下培养，故A正确；每次吸取培养液时，要振荡均匀后再吸取，故B错误；抽样检测法步骤是：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，故C错误，D正确；将计数板放在载物台中央，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后计数，故E正确。
（4）制作葡萄酒时，由于酵母菌进行无氧呼吸产生二氧化碳，因此瓶中压强增大，发酵过程中需要及时排气，否则发酵平瓶塞可能被冲开。
（5）⑧为固定化细胞技术，最关键的是海藻酸钠溶液的配制。
考点：本题考查酵母菌的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。
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