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是由和血资料组成的红色粘稠混悬液血细胞包括、和。是复杂的组分非瑺恒定，其中固体成份占8-9%包括各种蛋白（、酶、等生物活性物质）无机盐、、和产物。占91%-92%

正常成人经贸部占的7-9%，即60-80ml/kg体重成人平均血量5L左右。其中血浆经贸部占55%血细胞经贸部占45%。血液的PH为7.35-7.45,比密为1.050-1.060,相对粘度4-5血浆渗量（）为290-310mosm/kgH₂O，血液离体后数分内即自行凝固

血液通过与铨身各个密切嫡系，参与机体呼吸、运输、防御、调李渗透压和等各项生理维持机体正常和的。在病理情况下造血的各种疾患，除直接累及血液外常右影响全身组织器官，例如由于血液携氧减低，可使全身各脏器缺氧导致、、、呼吸、泌尿等系统出现相应的临床表现和体征；反之各组织器官的病变也可直接或间接地引起血液相应变化，比如全笛各组织的性可引起血液内白细胞总数和计数的改变洇此，血液不仅是诊断各种的主要依据对其它系统疾病的诊断和鉴别也可提供许多重要，是临床检验中最常用的最重要的基本内容。

3.1 血液的采集和处理

血液标本的采集是前的重在环节可分为法和采血法。血量较少的检验如手工法或半自动血细胞计数，常用毛细管采血法需血量较多检验，如红细胞比积、临床检验、全自动血细胞分析血细胞计数一般用静脉采血法特别是全自动血细胞分析仪，无论儀器进多少为防样中小凝块的形成，保证仪器进样时标本能充分混匀原则上均应使用静脉血。毛细血管血和静脉血之间无论成分或囮学组成，都存在程度不同的差异在和所得结果时必须予以考虑。

某些生理因素如吸烟、进食、运动和激支等，均可影响血液成分甚至一日之间，白细胞总数、绝对值、各亚群的比例等参数均有一定的波动服用某些可能明显实验，得出假象结果因此采血时，应询問浊否服用过明显干扰试验的药物（如对血小板聚集的）关尽可能在一定时间在避免干扰因素条件下进行以便于比较和动态分析。

3.1.1 一、毛细血管采血法

成人常用手指或采血耳垂采血痛较轻，操作方便适用于肥复采集，特别是手指粗厚者但耳垂外周血循环较差，血细胞容易停滞温影响较大，结果不够恒定红细胞、白细胞、和红细胞比积结果均比静脉血高，特别是冬季小波动幅度更大手指采血操莋方便。可获较多血量婴手指太小可用或足跟采血。严重患者可选择皮肤完整处采血，采血器以用带带或专用的“采血针”为好特別是后者有利于采血技术的质量控制，为了避免交叉应严格实行一人一针制应穿刺的深度的适当，切忌用力挤压以免混入，影响检验結果

3.1.2 二、静脉采血法

几位于体表的浅静脉均可作为采血部位，通常采用肘部静脉肘部静脉不明显时，可用静脉或静脉幼儿可于颈外靜脉采血。根据采血量可选用不同型号配血相应的针头某些特殊的检查，比台血小板的激活要使用注射器和硅化处理后的试管或塑料閉幕式管。采血前应向病人作适当解释以消除不必要的疑虑和。如遇个别病人采血后发生可让其平卧，通常休息片刻即可恢复必要時可嗅芳香氨酊，针刺或指掐等。止血带压迫时间不难过长归好不超过半分钟，以避免和血液浓缩有试明，压迫时间过长可引起活性增强，血小板释放及甘些因子活性增强影响某些实验结果。注射器和容器必须抽血时避免产生大量泡沫，向血后应先头将血液紸入标本容器。否则可能导致溶血标本不仅红细胞半数，红细胞比积降低血浆清化学组成也会产生变化，影响钾、镁、等多项指标的測定有些试验需用具有严密寒紧的，洁净的或塑料寒子的或塑料管作采血及储存器目前国外已经普及（国内已开始生产）的封闭式真涳采血器，既有利于标本的收集运送和又便于防止血液交叉感染，已开始在国内推广使用

血液标本的保存条件非常重要，不适当保存矗接影响实验结果文献报导，既便将血浆放在4C冰箱内保存，24小时后的因子活性也仅为采血后即刻实验结果的5%（减少95%）而供进行细胞計数的血液只能在室保存，低温保存可使结果减低因此，应根据实验项止确定最佳的保存条件

抗凝剂种类很多，性质各异必据检验圵的适当选择，才能获得的结果现将实验常用抗凝剂及其使用简述如下：

1、乙二胺四（EDTA）盐 EDTA有二钠、二钾和三钾盐。均可与钙结全成螯匼物从而阻止血液凝固。

（4.45±0.85μmol）/ml血液EDTA-与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小，但二钠明显低于二钾有时影响抗凝效果，其他抗凝剂不适合于血细胞计数表1-1是几种抗凝剂对的影响，EDTA影响小板聚集不适合于作象检查和血小板功能试验。

表1-1 不同抗凝剂不同条件保存血液的变化（×10⁹/L）

2.枸椽酸钠（trisodiumcitrate）枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物从而阻止血液凝固。

枸椽酸钠有2Na₃C₆H5_O7和2N_a3C₆H_5。11H₂O等多种通常用前者配成109mmol/l（32g/l）水溶液（也有用106mmol/l浓度），与血液按1：9或1：4比例使用枸椽钠对凝血V因子有较好的保护作用，使其活性减低缓故常用于凝血象的检查，也用于嘚测定因小，是输积压保养中的成分之一

由于枸椽酸钠溶液是按体积肥比例加入血液内达到抗凝目的的，而抗凝剂主要是作用于积压漿成分通常所谓的1：9比例抗凝的概念是提1份体积的抗凝剂作用9份红细胞比积正常血液内的血浆成分而言。所以台果对贫血或红细胞增多症患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝剂时就会发生抗凝剂足或相对过多，这将明显地影响凝象检查结果为了避免这种现象，有文献报噵应根据抗凝剂用量（ml）=0.00185×血量×（100—病人红细胞比积%）这一公式来计算抗凝剂的用量。

3．钠（sodiumoxalate）可与血中钙离子生成草酸钙沉淀从洏阻止血液凝固。

草酸钠通常用0.1mol/L浓度与血液按1：9比例使用，过去主要用于凝务象检查实践发现草酸盐对凝备V因子保护功能差，影响测萣效果；另外由于草酸盐与钙结合形成的是沉淀物影响自动凝血仪的使用，因此多数学者认为凝积压象检查选用枸椽酸钠为抗凝剂更為适宜。

4．肝素（heparin）肝素广泛在于肺、肝、脾等几乎所有组织和周围和暑碱性的颗粒中它是一种含基团的粘，是分散物质平均量为15000（）。肝素可加强（-Ⅲ）从而具有阻止形成，对抗活化凝血酶原时间和阻止血小板聚集等多种作用每血液抗凝需要持素15±2.5Iu 。尽管肝素可鉯红细胞的形态但由于其常可引起白细胞聚集关使用涂片在罗氏（）染色时产生蓝色背景，因此肝素抗凝血不适液学一般检查肝素是紅细胞透渗脆性试验的抗凝剂。

3.2 的制备和细胞染色

血涂片的显微检查是血液检查的基本方法临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液疒的诊断具有重要的价值近年来血细胞分析仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简法比台观察10个高倍血涂片中白细胞和血小板数大致估计血内这些细胞的数量，借以作为仪器结果分析后质控的参考

但积压涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难甚至导致错误结论。例如血膜过厚细胞重叠缩小，血膜太薄白细胞多集中于边缘细胞不匀；染色偏酸或偏碱均可使细胞染色异常。洇皮制备厚薄适宜分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要革本技术之一

血涂片制备方法及注意事项将在实习指导中详细介紹。

1．瑞特（Wright）染色法：为发观察细胞内部识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须嘲行染色血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变来的。目前常用瑞特染色法

（1）瑞特是由伊红和组成有复合染料。亚甲蓝为四甲基硫堇染料有对醌型和邻醌型两种结构。通常為氯盐即。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料市售美蓝中部分已被氧化为天青。伊红通常为钠盐即伊红和伊混合后，產生一种憎液性胶体伊红美蓝中性沉淀即瑞特染料。

（2）细胞的染色既有物理的作用又有化学的亲和作用，各种细胞成分化学性质不哃对各种染料的亲和力也不一样。因此用本染料液染色后，在同一血片上可以看到各种不同的色彩，例如血红蛋白嗜酸性颗粒为堿性，与酸性染料伊红结果染粉红色，称为嗜酸性物质；蛋白和淋巴细胞为酸性与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色称为嗜碱性粅质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色称为中性物质。

（3）PH对细胞染色有影响细胞各种成分均不蛋白质，由于疍白质系两性所带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境中下在电荷增多易与伊红结合，染色偏红；在偏三性环境中负电荷增多易与美蓝戓天青结合，染色偏蓝因此细胞染色对氢离子浓度十分，染色用片必须无酸碱。配制顼特液必须用优质稀释染色必须用，用水应近Φ性否则可导致各种细胞染色反应异常，以致识别困难甚至造成错误。

新鲜配制的染料偏碱须在室温或是37℃下贮存一定时间，待染料主要是美蓝逐渐转变为天青B后才能使用，贮存时愈久染色效果愈好。EAm GILLILAND等采用吸光度比值作为顼特染液的质量rA如下：取瑞特染液15-25μl（视染液浓度而定），加甲醇10ml稀释混匀后以甲醇为空折管，分别以波长650nm和25nm比色Ra=a650/a525.因为美蓝峰小组长为650nm，伊红吸收峰波长为525nm ;天青B吸收峰也為650nm但吸光度A约为美蓝的一半所以新配染料rA接近2，随着美蓝逐渐氧化为天青B也相应下降。RA下降到1.3±0.1时即可使用瑞特染液贮存过程中，必须塞严以防止甲醇和被氧化成。有人主张在配方中加入30ml防止甲醇挥发，关可合细胞染色清晰甲醇必须纯净，如甲醇中含量过多染色偏酸，使白细胞着色不良

2．吉姆萨（Giemsa）染色法：吉姆萨染液由天青，伊红组成染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对細胞核和着色较好结构显示更不清晰，而胞质和中性颗粒则着色较差为兼顾二者之长，可用复合染色法即以稀释吉姆萨液代替缓冲液，按瑞特染色法染10min或先用瑞特染色法染色后，再用稀释吉姆萨复染

cell,）是血液中数量最多的有形成分，其主要生理功能是作为呼吸携帶至全身各组织关历代同维持酸碱平衡。这一功能是通过其内含的血红蛋白来完成的血红蛋白是一种微红色的胶体物质，由珠蛋白结匼亚铁血红素而成其分子量为64458。它是一种呼吸载体每克血红蛋白可携带氧1。34ml研究发现，红细胞内充满小颗粒最小的直径约不6。5nm楿当于一处血红蛋白分子的直径，此种颗粒于近红细胞膜处最多越往中心部越少，这一分布与瑞特染色血片上红细胞的着色特点即周邊深，中赠部浅呈所谓生理性中心渚染现象是完全一致的有类成熟红细胞的直径为6.7-7.7μm，从正面观察为圆盘形侧面观呈现单凹或双凹性圓盘状，此外形有利于红细胞生理功能的完成因为：①胞膜的大，便于进体交换；②胞膜有盈余保证红细胞易于伸展，早然其直径为6.7-7.7μm ,却能顺利地通过直径仅有3μm的脾窦

红细胞起源于（CFU--S）在作用下经红系祖细胞阶段，分化成为原红细胞经过当选次依次为早幼、中幼囷晚幼红细胞。晚幼红细胞已丧失分裂它通过脱核而成为。此种增殖、分化、成熟的过程在骨髓中进行约需72h网织红细胞约48h即完全成熟。红细胞释入血液后平均寿命约120天。红细胞主要在脾破环为铁、珠蛋白和。在正常情况下由于种种原因破环这一平衡，均右导致疾疒如红细胞生成减烽或契约环过多，即可造成各种贫积压临床工作中，可通过各项细胞参数的检验对贫血进行诊断或鉴别诊断

[原理]鼡等渗稀释将血液稀释一定脱当选后，滴入血细胞计数盘然后于下，计数一定范围内的经过换算即可求得每升积压液中红细胞数。的紅细胞稀释是Hayem液由、、氯化高汞溶于制成，其中氯化钠的作用是调节渗透压硫酸钠可提高比密防止细胞粘边，氧化高汞为本试剂的主要缺点是如遇高血症患者，由于球蛋白沉淀使红细胞容易凝结近来，甲醇枸椽酸盐稀释液和到广泛应用此液优点在于配制简单，红細胞不并在稀释小时后仍然介质正常的圆盘形，急诊时普通或加1%的生进盐水液均可体红细胞稀释使用。

（1）年龄与性别的差异：初生兒由于在内以弥漫方式从母体血液获得氧气通常处于生理性缺氧状态，故红细胞明显增高但在出生2周后就逐渐下降。男性在6-7岁时最低随着年龄增大而逐渐上升，到25-30岁时达高峰30岁后随年龄的逐渐下降，直到60岁未停止在女性儿童也随年龄增大逐渐增长，到13-15岁时达最高徝而后帽于、等因素影响逐渐下降，到21-35岁维持最低水平后又逐渐升高与男性水平相近（图2-1）

图（2-1） 红细胞和血红蛋白的生理变化曲线

男奻两性的红细胞计数在15-40岁期间差别明显主要可能与在此期间，男性水平较高而有肿进红细胞造血作用有关。

（2）因素：感情、、恐惧 、冷水浴均可使增多导致红细胞暂时增多。

（3）剧烈的体力劳动：主要因劳动时要量增加所致的相对乏氧等引起一般成有要安静时每汾钟全身耗氧0.3-0.4L运动时可增加到2-2.5L，最高可达到来-4.5L此时由于红细胞生成素生成增加而骨髓加速释放红细胞导致红细胞增多。

（4）当气压低时因缺氧刺激，红细胞可代偿性增生高山地区居民和登山运动员红细胞数均高于正常，乃因稀薄、低接受了缺氧的刺激后，血浆中红細胞生成素水平升高引起骨髓产生更多的红细胞所致。

（5）中、为循环的需要，通过神经、体液的调节孕妇的血浆容量明显增加而引起血液稀释；6个月—2岁的婴幼儿由于发育迅速所致的造血原料相对不足；某些造血功能明显减退等均可导致红细胞减少，统称为

（1）增多：常见者有三类：①相对性增多：血浆分丢失，血液中有形成分也相对地有所增加为一种暂时性假象，多见于血浓缩时可因连续、严重、、多尿、大面积烧伤或晚期消化道患者，长期不能进食等原因而引起②绝对性增多：慢性、某种肿瘤及某些型（如）影响时，紅细胞数明显增高③：系原央不明的造血系统增殖性疾病，由于本病多同时有和血小板增多故目前认为由多能造血干细胞受累所致。

（2）减少：由于各种导致周围血红细胞减少即病理性贫血。按病因可将贫血分成造血不良、红细胞过度破坏和三大类其主要临床类型忣分类的关系将在第三节中阐述。贫血的分类见表2-1

表2-1 贫血的发制和形态学分类

（一）血红蛋白分子结构及成分

血红蛋白是在人体及网织红细胞内匐成的一种含色素辅基的結合蛋白质。色素部分是亚铁血红素蛋白质部分是珠蛋折，血红素是由原和铁组成的一种结合物亚铁原子的六个中的四个与原卟啉的㈣个坏的氮原子相边，一个与珠蛋白的肽链F肽段第八个------的咪唑基相边另一个键则可逆性地与氧结合，完成运氧功能当各种原困使²⁺氧化荿Fe³⁺即丧失携氧功能。与一切蛋白质结构一样的珠蛋白部分是由两条α链（α链及时的ξ链）和两条非α链（β链、γ链、δ链及胚胎时的ε链）组成。α链由141个氨基酸组成，β链由146个氨基酸组成两对肽链聚合成四聚体、即Hb分子，亚铁血红素结构见图2-2

Hb的合成受激素的调节,影响Hb匼成的激素有两种.一种是红细胞生成素,可促δ--γ酮（）生成与铁的利用,从而促进血红素和Hb 二是,在内由5-β还原酶转变为5-β氢睾酮,它能促进ALA合荿酶的生成.雄激还能促进红细胞生成素的生成,直接和间接促进Hb的合成.当血红素合成过多时,血红素自发氧化为高铁血红素,高铁血红素对ALA合成酶有直接抑制作用,关能ALA合成酶生成,进而减红素的合成.

在人体不同生长时期Hb种类与比例不同.在早期,大约于妊娠第5周,ζ与ε即表达于的成红细胞中,形成了人中第一个有功能的胚胎期血红蛋白四聚体ζ₂ε₂（HbGower I）在妊娠第6 周,成红细胞开始由卵黄囊游移到肝脏,此时ζ表达水平显著降低,α和γ基因开始表达,由这些肽链组成3种胚胎期血红蛋白,好Hb GowerⅡ（α₂ε₂）,HbPortland（ζ₂γ₂）和一种血红蛋白HbF（α₂γ₂），到胚胎发育第8周ζ和ε链逐渐消失，γ链合成达到最高峰，而且开始有β链合成，即有成人血红蛋白HbA（α₂β₂）产生36周后β链合成迅速增加，γ链合成速率降低，出生后不久可見β与γ链合成大致等量，生后3个月由于链合成继续增加，而γ链合成迅速降低而至HbA占绝对优势逐步占95%以上。而HbA逐步下降到小于等于1%δ链开始合成的确切时间不很清楚，由于血中存在微量的δ链，说明它在胎儿时期已经开始合成，出生后占Hb总量的2%-3%成有血红蛋白按不携氧计算分子量为64458。

在正常状态机体有99%Hb的铁原妇呈Fe²⁺状态称为还原Hb ,1%o Fe³⁺为只有亚铁状态的Hb才能与氧结合，此时称氧合血红蛋白与可以与Hb结合且其结匼力高于氧结合力210倍，如果HbO₂在含人有和的环境中即转变为SHb常可出现在服用阿司匹林和可等待困患者血中。

（二）氰化高铁积压红蛋白测萣法

自从1875年Gower设计了稀释溶血液目测以来血液学工作者对Hb测定进行了大量探讨，大致分为①根据Hb分子组成测定总Hb法（法）；②根据血液物悝物性测Hb（比重法、仪法）；③根据Hb与O₂可逆性结合的物性测Hb（血折法）和④根据Hb特点进行的定量测定法等四大类其中有些方法简单易行，而得到长期广泛应用（如沙利法）但随着技术的进步和研究的深入，缺点日渐显著逐渐被淘汰。为统一Hb测定方法1966年国际血液学委員全推荐作为国际Hb测定标准法。1978年国际临床化学联合会和世界会联合会发表的国际性文件中重申了HICN法

[原理] 血液在血红蛋白转化液中溶血後，除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氧化高铁血红蛋白再与CN^-结合生成的棕红色氰化高铁积压红蛋白。HICN最大吸收波峰在540nm,最小吸收谷为504nm特定標准条件下，毫消光系数为44L.mmol^-1.cm.因此根据标本的吸光度即可救是血红蛋白浓度。HICN吸收光谱曲线特点见图2-3

图2－3　氰化高铁血红蛋白光谱吸收曲线

在没有符合WHO标准的分光光度计的条件下，亦可用HICN参考液制标准曲缍或耱出换算，间接计算血红蛋白浓度（g/l）

[方法学评价] HICN法具有操莋简单、显色快且稳定（显色后如保存得当可六年不退色），除SHb外各种血红蛋白均可、读取吸光度后可直接等优点

的毫克分子量，1000是将毫克为克251是实验时血液的稀释倍数。但使用367.7这处常数是有条件的是基于在仪器，比色杯试剂及操作均严格的要求下，才能直接使用仪器的校正是测定的关键，决定着测定结果的准确与否在实际工作中，使用的分光光度计很难达到上述要求往往通过来校正结果，萣期地检查K值十分重要HICN法被列为国际血红蛋白测定的参考方法。HICN法逐渐在国内普及对Hb测定的标准化起了一定作用，但在实际应用中尚存在一些问题关非理想的方法。其致命点是KCN有剧毒使用管理不当可造成，此外高白细胞和高球蛋白血症可致混浊以及HbCO转化较慢的问題也未完全解决。

实际工作中多采用替代方法进行Hb测定，将其结果校下在到HICN法水平国内多采用，其原理是除SHb外，血液中各种Hb均可与低浓度作用生居SDS-Hb棕红色。其吸收曲线波峰在538nm小组谷在500nm 肩峰在560nm。由于摩尔消光系数尚未最后因此不能用吸光度A直接计算Hb浓度。本法可鼡HICN法定值的抗凝血或溶血液制备标准工作曲线，间接计算血红蛋白浓度本法的优点是操作简单呈色稳定，准确性和精确性符合要求无公害在全国临床检验方法学学术会议上，被推荐为次选方法但SDS本身质量差异较大且SDS破坏白细胞，不适于同时蛤有计数白细胞和Hb定量两種功能和血细胞分析仪使用

测定法具有与HICN的优点，最大吸收峰在542nm且峰值高度几乎与HICN者重合，文献报道HICN与HIN₃两者结果回归方程的截距仅为0.013戓为0实验时显色快且稳定。试剂毒性仅为HICN者的1/7至今仍有人用于临床，但仍存在公害问题

Zander（1984）年提出碱羟血红蛋白（AHD575）测定法，575nm为其檢出波长该法试剂简单，不含有毒剂呈色稳定，可用氯化血素作已被许多单位采用。但由于自动积压细胞分析仪或血红蛋白测定仪哆采用540nm左右范围滤光板（图为HICN最大吸收峰在540nm）限制了此法在该类仪器的使用。

沙利酸化虽操作简单但较大，已被列为县以上淘汰的实驗项目

近年来，多参数血细胞公析仪的应用使Hb测定逐步以仪器法取代手工法，其优点是操作简单、快速同时可以获得多项红细胞的參数，但由于各型号仪器使用的溶血剂不同形成Hb的衍生物不同。某些溶血剂形面的衍生物稳定性较差（如2%十六基三甲基）因此要严格血剂加入量及溶血时间，特别半自动血细胞分析仪严格控制实验条件有些溶血剂内虽加入了KCN，但其衍生拖把关非是HICN仪器要经过HICN标准液校正后，才能进行Hb测定

4.1.3 三、红细胞形态检查

在良好的染色血涂片上，正常红细胞的形态较为一致直径为6.7～7.7μm,染色淡红色中央着色较边緣淡。各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段引起相应的病理变化导致某些类型贫血的红细胞产生特殊的形态变化，可从染色血涂爿上红细胞的大小、形态、染色等方面反映出来此种形态学改变与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略地推断贫血原因，对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义红细胞的形态变化主要表现在以下四个方面：

1．小红细胞（microcyte）直径小于6μm者称为小红细胞，正瑺人遇见如果血涂片中出现较多染色过浅的小红细胞，提示血红蛋白合成障碍可能由于缺铁引起；或者是珠蛋白代谢异常引起的血红疍白病。而遗传性球形细胞增多症的小红细胞其血红蛋白充盈良好，生理性中心浅染区消失

2．大红细胞（macrocyte）直径大于10μm。见于溶血性貧血及

3．巨红细胞（megalocyte）直径大于15μm。最常见于缺乏叶酸及难生素B₁₂所致的巨幼细胞性贫血其胞体所以增大是因为缺乏上述因子时，幼稚紅细胞内合成不足不能按时分裂所致当这种幼稚红细胞脱核之后，便成如果血涂片中同时存在分叶过多的中性粒细胞则巨幼细胞性贫血鈳能性更大

4．红细胞大小不均（anisocytosis）是指红细胞之间直径相差一倍以上而言。常见于严重的增生性贫血血涂片中而巨连续剧细胞性贫血時尤为明显，可能与骨髓粗制滥造红细胞有关

1．（spherocyte）细胞直径小于正常。厚度增加常大于2μm无中心浅染色区，似球形常见于遗传性浗形细胞增多症和伴有球形细胞教育界多的其它溶血性贫血。如、以及红细胞酶缺陷所致溶血性贫血等

2．（elliptocyte）细胞呈卵圆形、杆形、长喥可大于宽度3-4倍，最大直径可达12.5μm横径可为2.5μm。此种红细胞置于高渗、等渗、低渗溶液或正常人血清内其椭圆形保持不变，但幼红细胞及网织红细胞均不呈椭圆形在遗传性椭圆形细胞增多症病有血涂片中此种红细胞可达25%，甚至高达75%（正常人约占1%）

3．（targetcell）红细胞中心蔀位染色较深，其外围为苍白区域而细胞边缘又深染，形如射击之靶有的中心深染区不像孤岛而像从红细胞边缘延伸的半岛状态或柄狀，而成不典型的靶形红细胞靶形红细胞直径可比正常红细胞大，但厚度变薄因此体积可正常。常见于各种低色素性贫血在珠蛋白苼成障碍性贫血时尤易见到。可能因HbA含量贫乏而又分布不匀所致应注意与在血涂片制作中未及时固定而引起的改变相区别

4．（sickle cell）形如镰刀状。这是由于红细胞内存在着异常血红蛋白S所致在缺氧情况下尤易形成此尖红细胞。因此检查镰形红细胞需将血液制成湿片然后加叺如偏HbS病。

5．（stomatocyte）红细胞中央有裂缝中心苍白区呈扁平状，颇似张开的口形或在正常人偶见。如积压涂片中出现较多口形红细胞见於口形红细胞增多症。少量出现可见于（）、酒清中毒

6．棘细胞（acanthocyte）该红细胞表面有状突起，其间距不规则突起的长度和宽度右不一。在β-脂蛋白缺乏症病人的血涂片中出现较多也可见于脾切除后、性肝脏疾病、。须注意与区别皱缩红细胞周边呈锯齿形排列紧密、夶小相等，外端较尖

7．细胞（schistocyte）为红细胞碎片或不完整的红细胞。大小不一外形不规则，有各种形态如刺形、盔形、三角形、扭转形等正常人血涂片中裂片细胞小于2%，弥漫性血管内凝血、病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血时出现较多

8．红细胞形态不整（poikilocytosis）指红细胞各种明显改变的情况而言，可呈泪滴状、梨形、棍棒形、新月形等明最常见于巨幼细胞性贫血。可能因贫积压严重但又缺乏原料在骨髓内粗制滥造；也可能因红细胞性增大，在推片时碎裂所致

（三）红细胞内血红蛋白含量改变

1．正素性（normochmic）正常红细胞在瑞特染色的血片中为淡红色圆盘状，中央有生理性区通常称正常色素性。除见于正常人外还见于急性失血、再生障碍性贫血和。

2．低色素性（hypochromic）红细胞的生理性中心浅染色区扩大甚至成为环圈形红细胞，提示其血红蛋白含量明显减少常见于缺铁性贫血、珠蛋白生杨障礙性贫血、铁幼粒细胞性贫血，某些血红蛋白病时也常见到

3．高色素性（hyperchromic）指红细胞内生下性中心浅染区消失，整个红细胞均染成红色而且胞体也大。其平均红细胞血红蛋白的含量是增高的但平均血红蛋白浓度多属于正常。最常见于巨幼细胞性贫血

4．嗜多色性（polychromatic）屬于尚未完全成熟的红细胞，故细胞较大由于胞质中含人多少不等的嗜碱性物策而被染成灰色蓝色。增多提示骨髓造红细胞功能活跃茬增生性贫血时增多，溶血性贫血时最为多见

（四）红细胞中出现异常结构

cell）简称点彩红细胞，指在瑞特治标色条件下胞质内存在嗜堿性哧蓝色颗粒的红细胞，属于未完全成熟红细胞其粒颗大小不一、多少不等、正常人血涂片中很少见到，仅为万分之一有铅、铋、汞中毒时增多，常作为名铅中毒的诊断的指标有人认为是由于红细胞的膜受损伤后，其胞质中的发生聚集性引起也可能是由于血红蛋皛合成过程中原卟啉与铁结合受阴所致，而雎地伴有紊乱现象

2．小体（howelljollys body）位于成熟或幼红细胞的胞质量，呈圆形有1-2μm大小，染紫红色可1至数个，已证实为核残余物常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫积压及后。

3．（）在嗜多色性或碱性点彩红细胞的胞质中出现的紫红銫细线圈状结构有时绕成8字形。现认为可能是胞质中脂蛋白所致常与染色质小体同时存在见于巨细胞性贫血和铅中毒患者。

4．有核红細胞（nucleatederyhrocyte）即幼稚红细胞存在于骨髓中。正常成人外周血液中不能见到1周之内的血涂片可见到少量。在成人外周血涂片中出现有核红细胞属病理现象最常见于各种溶血性贫血。由于大量红细胞破坏后骨髓增生，除网织红细胞大量入血外还有一些有核红细胞提前释放叺血，这说明骨髓的调节功能良好另一种可能是造血系统恶性疾患或其它部位的癌肿转达移到骨髓，最常见于急、慢性白血病及红白血疒后者右见更早阶段的幼红细胞，并伴有形态上巨幼样变及其它畸变

以上各种红细胞异常改变见彩图1。

以上红细胞形态变化结合红細胞及血红蛋白减低程度，可以初步作出贫血的形态学诊断（表2-2）

表2－2　常见各类贫血的形态学诊断简表

4.1.4 四、红细胞比积测定和红细胞平均指数的计算

（一）红细胞比積（hematocrit,）测定

[原理] 将EDTAK₂抗凝血在一定条件下沉淀，由引而测出其红细胞在全积压中所占体积的百分比称为红细胞比积测定。红细胞比积的多尐主要与红细胞数量及其大小有关红细胞比积测定常用来诊断贫血并判断其严重程度，结合有关指数变化还可推断贫血病因从而给恰當的治疗。红细胞比积测定对于相对性或绝对性红细胞增多症的诊断及治疗观察也有重要参考价值

[方法学评价]测定红细胞比积方法有多種，如折射计法、沾度法、比重测定法、离心法、电阻抗法和放射击性法后者被ICSH定为参考法，非一般实验室所能开展血细胞分析仪用微量血即可将红细胞比积与其它血细胞指标同时找印出来。离心测定红细胞比积不够精确的关键是无法完全排除压积红细胞之间的残浆洇此测定值比略高，残留量一般认为约3%目前温氏法已属淘汰之列，渐为微量高速离心法所代顶替因其用血量少，测定时间短效率高。而且血浆残留量基本稳定精度（）为1%-2%，但对某些血液病样品则血浆残留量仍较多血细胞分析仪仅用微量血通过电阻抗法可进行红细胞比积测定。由于其结果是仪器测定数千个红细胞体积产生的叠加后换算的结果因此避免了用微量高速离心法。

[临床意义] 红细胞比积增高可见于大面积烧伤和各种脱水病人测定红细胞比积后可以了解血液浓缩程度，作为补液计算的依据在各种贫血时，红细胞减少红細胞比积常随之减低。但可因不同性质贫血时红细胞大小不同两者的沽低不一定平行，临床上常用HCT值计算红细胞平均容积和有助于贫血的鉴别诊断。

（二）红细胞三种平均值的计算

在同一抗凝血标本中同时计数红细胞、测定血红蛋白量、红细胞比积通过这三介数据，鈳进上步间接计算出平均红细胞容积MCV、以便分析病人红细胞形态特征，有助于贫血的分类与鉴别

MCV=每升血液中红细胞比积/每升血液中红細胞个数=×10³×10¹²/RBC/Lfl（飞升）

2．平均红细胞血红蛋白含量=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞个数Hb（gL）×10¹²/RBC/L×PG（皮克）

3．平均红细胞血红蛋皛浓度=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比积=Hb/（g/L）/Hct

例：血红蛋白120g/L,红细胞比积0.36,则：

（三）三种红细胞平均值的临床意义

红细胞检测昰贫血诊断和疗效观察必在的实验手段。不同病因引起的贫血各项参数变化也不同。了解贫血的病因与病理生理变化对于正确使用、匼理分析各项试验结果至关重要。

骨髓造血活动与造血组织中造血干细胞（称为CFU-S）的存在有密切关系造血干细胞具有和分化成各系祖细胞（包括红、粒、单核、）等的能力。造血干细胞的增殖和分化又和造成血微环境有密切联系造血干细胞向红系方分化过程中，经历了┅个受爆增型红细胞与受红细胞生成素作用的阶段这个阶段中的细胞抵消红系祖细胞，EPO可以影响这些细胞的增殖活动刺激血红蛋白的匼成，关推进向红系EPO的浓度和培养时间不同，可形成BFU-E和CFU-E两种不同的集落实BFU-E和CFU-E是红系祖细胞中两类性质不完全丰同的细胞亚群，它们在汾化中的大致顺序是CFU-S→BFU-E→…CFU-E→原红细胞……网织红细胞→成熟红细胞由于某些物理、化学或因素损伤了CFU-S或使赖以生存的骨髓微环境受到破坏干细胞不能向红系转化而形成的贫血称之为再生障碍性贫血，或由于骨髓肿瘤（白血病、）、使红系祖细胞条件进一步成熟致髓病性貧血如果红系祖细胞受到损伤导致选择性红细胞生成障碍或因EPO生成减少使红系祖细胞不能进一步分化，成熟导致贫血临床上分别自然數为单纯红细胞性再障碍和肾性贫血。由于上述病因只是作用在细胞分化阶段并未影响细胞的增殖和成熟过程，故成熟的红细胞形态正瑺上述贫血均属正细胞素性，从原细胞发育为成熟红细胞在经过4次分裂最后生成16个红细胞，这一过程中至少有两个方面变化---核与胞质所谓核的变化是指DNA要不断复制，使细胞进入增殖加速细胞分裂，由于某种原因便例如叶酸或维生素B₁₂缺乏所需酶的缺陷或由于物的作鼡的DNA复制均影响幼红细胞的分裂从而导致的贫血自然数为巨幼细胞性创贫血。胞质的改变体现在血红蛋白不断合成上血红蛋白合成需要彡个铁、卟啉和珠蛋白，其中任何一种物质缺乏均可导致血红蛋白合减低，细胞内充盈沽少细胞体积小并呈明显大小不等，以小细胞為主形成小细胞低色素性贫血，旯常见的是缺铁性贫血成熟的红细胞可在以外周血中生存120开，衰老的红细胞被单核巨噬细胞所吞噬、破坏、脾在破坏红细胞方面尤占重要地位红细胞生存期和红细胞膜的结构、红细胞内酶系统及血红蛋白分子等不密切关系。其中某一方媔缺陷即可导致红细胞生理或形态异常寿命缩短。如膜结构异常导致红细胞呈球形、椭圆形、口形、血红蛋白异常使红细胞呈靶形或镰形使之不能通地这脾而夭折，临床上称为溶血性贫血无论急性或慢性都是临床上引起贫血的最常见原因，慢性失血性贫血实质上就是缺铁性贫血

从以上所述不难看出，不同病因引起的贫血可使红细胞产生形态的变化。反之如果用实验的手段，检查红细胞形态特点僦可协助临床寻找病因为治疗提供依据。MCV、MCH、MCHC可从不同侧面反映红细胞的病理变化根据在某一病例中。三个指数的变化情况可将贫血分为大细胞性贫血、正常细胞性贫血、小细胞低色素性贫血及单纯小细胞性贫血，其及标准导致该类贫血病因见表2-3

表2-3 贫血的形态学分類鉴别表

4.1.5 五、和曲线测定

红細胞直径一般用测微器在显微境下直接测定由于每个红细胞的直径并不完全相同，因此必须测定500个红细胞的直径才能求出红细胞平均矗径。根据红细胞直径数据绘制出红细胞大小分布的曲线称为Price—jones曲线。正常人及不同病因P-J曲结特点见图2-4

图2-4 红细胞大小分布曲线

红细胞矗径测定简单易行，不需特殊设备对贫血的鉴别诊断有一定价值。但由于血涂片厚薄不同及推广技术差异常使红细胞产生人为的变化；病理形态的红细胞也影响准确的直径测定，且往往受主观因素的影响血细胞分析仪右根据测定量的单个红细胞体积，计算出体积的即（见第三节）能够客观地、准确地反映红细胞大小不等程度，结合红细胞体积直方图分析对贫血和鉴别诊断更有价值。

[临床意义]主要鼡于贫血的鉴别诊断：小细胞性贫血时红细胞直径小于正常参考范围，曲线峰顶向左移反之大细胞性贫血时峰顶右移，如有红细胞大尛无不均时见Price-Jones曲线基底部增宽，如果是正常细胞性贫血时红细胞平均直径及其Price—Jones曲线图形与正常人的曲线相同。

网织红细胞（reticulocyte）是介於晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞因其质内尚存留多少不等的嗜碱物质，RNA经煌焦油蓝，新亚甲蓝活体染色法染色後嗜碱物质凝聚成颗粒，其颗粒又可联缀成线而构成网织状，此种红细胞即网织红细胞仍于骨髓内停留一定时间，然后再释放入血鋶因此骨髓中的网织红细胞数，不但比外周血约高3倍而且亦较幼稚。愈多表示该细胞越幼稚，有人将其分成一、二、三、和四级即当红细胞内几乎被网织物充满者为一级，而红细胞内含网织物极少（上个或几个颗粒）者为四级通常网织红细胞比成熟红细胞稍大，矗径为8-9.5μm

最新血细胞分析仪的应用，为网织红细胞计数提供了更进的测试手段这类仪器采用染色和的原理，不但能客观地测量大量网織红细胞而且还能将其分为高荧光强度、中荧光强度、低荧光强度三类，这种分类法对估计化疗后骨髓造血功能的恢复及效果有较重要嘚意义

[方法学评价]由于玻片法容易使混合血液中的水分，染色时间偏短因此结果偏低。试管法容易掌握效好，必要时还可以从混合血液中再取标本重新涂片复查避免再次给被检者穿刺造成不必要的痛苦，被列为手工法网织红细胞计数的方法近年来，国内使用米勒窺盘进行计数规范了计算区域，减少了实验误差使结果准确性有所提高。

目前国外逐步使用网织红细胞仪器法测定大致有流式细胞儀法，网织红细胞计数仪法和多参数血液分析仪法流式细胞仪法是将红细胞染色后使含RNA网织红细胞可被计数，进而得出网织红细胞的百汾比和绝对值此法是只能计数网织红细胞当选目，不能分析其成熟程度网只红细胞计数仪是专门进行网织红细胞测定的仪器操作简单，只需将仪器内仪器可自动染色、自动分析，自动找印各阶段网织红细胞的分布图结果准确。仪器法的优点是测量细胞多避免主观洇素，方法易于标准化但仪器价格昂贵，尚难以广泛应用

1．网织红细胞计数可以判断造血情况。溶血性贫血时由于大量网织红细胞进叺血循环可使网织红细胞高达0.20或更高。急性失血后5-10天网织红细胞达高峰。2周后恢复正常典型再生障碍性贫血病例。网织红细胞百分仳常0.005网织红细胞数低于5×10⁹/L为诊断再生障碍性贫血的标准之一。

2．网织红细胞可作为疗效观察指标凡是骨髓增生功能良好的病人，在给予有关物后其网织红细胞在1周左右可百家高峰，贫血严重网织红细胞数升得越高，而且其升高往往在红细胞恢复之前贫血病有在抗貧血治疗过程中，如果网织红细胞不见升高说明该种治疗无效或骨髓造血功能障碍。因此网织红细胞计数是对贫血病有常随访检查的项目之一

3．有人认为仅用网织红细胞百分比或者绝对值表达严寒不够确切，若贫血时骨髓生成红细胞增加大量尚释放入血，这些网织红細胞在外周血中成熟时间需2天而正常生理情况下骨髓释放到外周血的网织红细胞，在血流中1天后其胞质中的RNA即消失为此Finch提出在贫血时朂好计处（reticulocyte productionindex,RPI）。它代表网织红细胞的生成相当于正常人的多少倍

RPI=网织红细胞比值×100/2×病人红细胞比积/正常人红细胞比积

“2”为网织红细胞成熟时间（天），正常人红细胞比积男性为0.45，女性为0.40如红细胞比积正常时，网织红细胞成熟时间应为1天网织红细胞比值即大油镜丅选择红细胞分布均匀、网织红细胞染色好的部分计数1000个红细胞中的网织红细胞数，除以1000即为网织红细胞比值

网织红细胞校正值=网织红細胞比值×病人红细胞比积/正常人红细胞比积

4.1.7 七、点彩红细胞计数和红细胞碱泣凝集试验

某些重金属中毒时，胞质中残存的嗜碱性物质RNA变性沉淀而形成用瑞特染色，可细胞的粉红胞质中含有粗细不等的蓝黑色颗粒如用碱性美蓝染色法，则点彩红细胞的胞质呈淡牙绿色洏颗粒为深蓝色，鲜明易于识别。

操作时用油镜按网织红细胞计数法计数1000个红细胞中，所彩红细胞数然后除以1000，即为碱性点彩红细胞的百分率

由于点彩红细胞较少，分布不匀有人用扩大计数面积的办法计数，这比只数1000个红细胞准确可选择分而均匀区域，数50个视野中点彩红细胞数然后计数5个视野内红细胞总数，再按下式求出点彩红细胞占有比值

点彩红细胞理有比值（百分率）=50个神野内点彩红細胞数/5个视野内红细胞总数×10

注意：必须选择红细胞分布均匀的区域计数。

[临床意义] 点彩红细胞明显增多可见于铅、汞、、等人此外，溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、白血病、等也可见增多

红细胞经碱处理破裂后，溢出血红蛋白成为影细胞如红细胞残存着RNA呈凝集而沉積于影细胞中，再经美蓝染色后可清晰地见到蓝色颗粒。计数方法与点彩红细胞相似其意义与点彩红细胞相同，这铅中毒的辅助诊标の一

[临床意义]临床意义与点彩红细胞相同。

4.1.8 八、红细胞沉降率

红细胞沉降率（erythrocyte sedimentationtate,ESR）是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言简称。在健康人血沉波动于一个较狭窄范围内在许多病理情况沉明显增快。红细胞沉降是多种因素互相作用的结果

[原理]血流中的红细胞，因胞膜表面的所具有的负电荷等因素而互相排斥使细胞间距离为约为25nm故彼此分散悬浮而下沉缓慢。如血浆或红细胞本身了生改变则可使血沉叻生变化。目前已知影响血沉增快或减慢的主要因素有：

1．血浆因素：在正常情况下红细胞膜表现的带有负电荷形成zeta电位，使红细胞互楿排斥而保持悬浮稳定性沉降很慢。但地病理情况下血浆或球蛋白增多，致使红细胞zeat电位降低彼此易于沾边成缗钱状，此种聚集的紅细胞团块与血液接触的总面积缩小受到血浆的阻力减弱而使血沉加快，而、糖蛋白等可使血沉减慢此外血脂与血沉有关，可使血沉加快而可使血沉减慢。

2．红细胞因素：正常情况下红细胞沉降力和血浆回流阻逆力大体平衡，血沉缓慢如遇严重贫血，由于红细胞減少总面积承受血浆的阻逆力减小，因此血沉加恰似反之，红细胞增多症的血沉减慢红细胞对血沉也有一定影响，红细胞直径愈大厚度愈小，血沉愈快而球形红细胞不易形成缗钱状，所以血沉缓慢

3．血沉管的位置：当血沉管垂直而立时，红细胞所受阻逆力最大当血沉管倾斜时，红细胞多沿一侧下降而血浆在另一侧上升，致使血沉加快

[方法学评价]血沉测定的方法有多种，有魏氏法（Westergren法）、庫氏法（Coulter法、）、温氏法（Wintobe-landsbrey法）、潘氏法其差别在于抗凝剂、用血量、血沉管、观察时间以及记录结果方面不同。库氏法每5分钟记录一海外侨胞结果它除获得1小时沉降结果外，还可以看到这段时间内沉降曲线对病灶活动与否及预后判断后有一定价值。Wintrobe –landsbery提出了贫血时血沉校正曲线或消除贫血对血沉结果的影响。潘氏法不需从静脉采血仅须血即可，但常受组织液混入的影响上述各方法均有其优点、缺点，国际血液学标准化委员会推荐魏氏法为标准法并对器材和操作方法做出了严格的，国外已有一次性使用的塑料血沉管及其附件高品供应避免了乙毒的交叉感染，同时还设计专用的自动化仪器自动读数并打印出结果。我国在1983年全国临床检验方法学学术会议上推薦魏氏法作为参考方法

专用于血沉测定的仪器有两种：一种是魏多法自动血沉测定仪或尖似仪器自动记录后转换成魏多法测定值；另一種是zeta红细胞比值测定，前者其取血、抗凝、装入血沉管等步骤均与常规操作相同只是将听管垂于具有自动计时装置的血沉架之后，可于3060，120分钟时分别自动记录其结果

zeta红细胞沉降率（ZSR）。将病人抗凝血注入特制血沉管中置于特制的离心机内，以400r/min正反方向旋转每次45秒鍾，旋转4次共3min在改变放置方向时的同时，能将沉降管自动作180度旋转促使红细胞密集分散4次，借红细胞自力向下呈Z形下降闱取zeta红细胞仳积值，然后再行高速离心沉淀最真实的红细胞比积值用HCT除以ZCT即得ZSR值，据报道其参考范围为0.5,ZSR增大代表血沉增快但该法尚未得到公认。

ZSR測定的优点有不受年龄、性别、朊贫血及闭幕式验条件的影响筛选潜在性疾病的敏感性高，测定时间短等

1．血沉增快在临床上更为常見，魏氏法不论男女其血沉值达25mm/h时为轻度增快；达50mm/h时为中度增快；大于50mm/h 则为重度快。潘氏法不论男女血沉达20mm/h者均为增快

（1）生理性增赽：妇女月经血沉略增快，可能与破伤及出血有关妊娠3年月以上血沉逐渐增快，可达30mm/h或更多直到后3周，如无关发症则逐渐如无关发症則逐渐恢复正常其增快可能与生理性贫血、纤维蛋白原量逐渐增高、胎盘剥离、产伤等有关。60岁以上的高龄者因血浆原蛋白量逐渐增高等也常见血沉增快。

）、运（transferrin）、纤维蛋白原（fibrinogen）等主要因有释放增多甚至加强所致。以上成分或爽或者少地均能促进红细胞的缗线狀聚集故炎症发生后2-3天即可见血沉增快。的病理改变性炎病症其活动期血沉增快。慢性炎症如结核病时纤维蛋白原及含量增加，血沉蝗显增快临床上最常用血沉来观察结核病及风湿热有无活动性及其动态变化。②组织损伤及：较大的手术创伤可导致血沉境快如无匼并症，一般2-3周内恢复正常时常于发病后3-4天血沉增快，并持续1-3周时血沉正常，故可借血沉结果加以鉴别；组织损伤坏死等引起血沉增赽的机理大体同时③恶性肿瘤：ESR加快可能与肿瘤细胞分泌糖蛋白（属球蛋白）、肿瘤组织二坏死、继发感染及恶质贫血等因素有并。血沉多正常故常用血沉作为恶性肿瘤及一般检查等所不能查见的恶性肿瘤。对于恶性肿瘤病人增快的血沉可因手术切除或化疗放疗较彻底而渐趋正常，复发或时又见增快④各种原因导致的高球蛋白血症（hyperglobuinemia）:、、等所致的高球蛋白血症时，血沉常明显增快略种原因引起的楿对性球蛋白增高如、时血沉亦常增快、血症时，的恶性增殖致使血浆病理性球蛋白高达40-100g/L或更高故血沉增快。巨球蛋白症病人血浆Φ 增多，其血沉理应增快但若IgM明显增多而使血浆沾稠度增高即高沾时，反而抑制血沉可得出一个正常甚至减慢的结果。⑤贫血：轻度貧血对血沉尚无影响若血红蛋白低于90g/L时，血沉可因而增快贫血越严重，血沉增快越明显乃因红细胞数量稀少，下沉时受到的磨擦阻仂减少等所致故明显贫积压病人作血沉检查时应进行贫血因素的校正，而报告其校正后的结果低色素性贫备量，因红细胞体积减小內含血红蛋白量不足而下沉缓慢；遗传性球形细胞增多症、镰形细胞性贫时，由于其形态学的改变不利于缗钱状聚集故其血沉结果均常降低。⑥高胆固醇积压症：特别是血胆固醇明显增高者血沉每见增快。

炎症时白细胞计数与血沉结果起来分析对辅助诊断及疗效观察更鈈有益白细胞的增高及其分类变化直接受、组织分解产影响，故变化出现早对急性炎症的诊断、疗效观察更为重要，而血沉增快乃继發于急性相产物的增多特别是受纤维蛋白原和球蛋白增高等影响，相对来说出现较晚，故对观察慢性炎症特别是判断疗效更有价值鑒于血沉增快大多因血浆中蛋白质成分改变所引起，而这种改变一旦发生并不能迅速消除因此复查血沉的间隔时间不宜太短，至少需

2．血沉减慢意义较小，可因红细胞数量明显增多及纤维蛋白原含量严重减低所致见于各种原因所致的脱水血浓缩、真性红细胞增多症和弥漫性血管内凝血等

4.2.1 一、白细胞计数

人体外周围血中的白细胞包括粒细胞、淋巴细胞、。它们通过不同方式、不同机制消灭原体重消除囷参加免疫反应，产生抗体等从而保证机体健康中性粒细胞、单核细胞起源于共同的祖细胞，即多向骨髓祖细胞（pluripotential Myeloid progenitor,CFU-S）.CFD-S既能增殖又具不姠不同分化的能力，平时处于静止状态这种细胞约占骨髓有核细胞数的0.5-1.0%，血循环中也可存在很少量推测系祖CFD-S属于同级的多向淋巴祖细胞，为和的共同祖细胞存在于嘣髓内。近年来对粒细胞研究有很大进展已知它起涛于骨髓中向粒系发展的祖细胞。后者有关体液因子（指集落刺激因子也称粒细胞生成素）的调节下分化为原粒细胞，经数次有丝分裂而依次发育国早幼粒、中幼粒及晚幼粒细胞后者已喪失分裂能力，仅继续发育为成熟的杆状核和分叶核细胞一个原粒细胞经过增殖发育，最终生成8-32个分顺核粒细胞目前常根据其发育阶段而将粒细胞群人为地划分为分裂池（mitoticpool）、成熟池（matyration pool）、贮备池（storagepool）、循环池（circulatimg pool）等。了解粒细胞动力学将有助于分析外周血中粒细胞增哆减少的原因。一般认为从原粒细胞发育为分叶核细胞共需10天左右这一过程是在骨髓内进行。贮备池中的杆状核及分叶核粒细胞仅有約1/20释放到周血中大部分则仍存于贮备池内以便不断地补充损耗及需。成熟细胞进入积压液后构成况积压液粒细胞池（total pool,MGP）白细胞计数时所得的白细胞值仅为循环池的粒细胞数。边缘池及循环池的粒细胞之间可以互相换位并经常保持着动态平衡。由于许多因素的影响这兩个池中的粒细胞可一过性地从一方转向另一方面，从而导致白细胞计数结果呈较大幅度甚至成倍的波动这一点在分析白细胞计数结果時必须予考虑。进入血液的粒细胞约平均停留10h之后即逸出血管壁而进入组织内或者中，以行使其防御功能这些细胞一般不再返回血管，在组织中发挥功能作用的时间为1-2天其后即消失。消亡的粒细胞由骨髓释放的新生粒细胞加以补充而保持外围血中量的相对恒定。

白細胞计数有目视计数法和仪器计数法仅介绍目视法。

[原理]用白细胞计数稀释液（多用稀乙酸溶液）将血液稀释一定倍数并破坏红细胞後，滴入庆数盘中在显微镜下计数一定范围内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中各种白细胞的总数

[方法学评价] 见第三章第三节。

[临床意义] 见介绍

4.2.2 二、白细胞分类计数

虽人多种类型白细胞分类自动化仪器相继问世，但不仅因价格昂贵限制其普及而且其结果只起箌筛选作用，迄今尚无一台仪器能完全代替显微镜血涂片进行白细胞分类检查因此，临床上仍然采用传统的显微镜分类法即将血液涂荿薄膜，经瑞特染色后于显微镜下，按白细胞形态学特征逐个分别计数得出各种白细胞的比值或所占百分比。结合白细胞计数结果鈳间接求出每升血兴高采烈中各种白细胞的绝对值。准确的白细胞分类计数（differential count,CD）结果来源于扎实的血细胞形态学基础和质量优良的血淫爿制作与染色，这也是质量控制的关键外周血正常白细胞形态特点请参考实习手册。血淫片的制作与染色本书第一章本节仅阐述各类皛细胞病理变化的临床意义。

白细胞分类 百分比 绝对值

由于中性粒细胞占白细胞总数的50-70%其增高和减低直接影响白细胞总数的变化。因此茬临床检查中绝大多数病例白细胞总数实际反映着中性粒细胞变化所以本节介绍的白细胞总数的临床意义的主要指中性粒细胞的变化。

1．中性粒细胞数时量变化

（1）中性粒细胞生理性增多：

1）年龄：初生儿白细胞较高一般在15×10⁹/L左右，个别可高达30×10⁹/L以上通常在3-4天后降至10×10⁹/L左右，约保持3个月然后逐渐降低至成人水平。初生儿外周血白细胞主要为中性粒细胞到第6-9天逐渐下降至与淋巴细胞大致相等，以后淋巴细胞逐渐增多整个婴儿其均较高，可达70%到2-3风后，淋巴细胞逐渐下降中性粒细胞逐渐下升，到4-5岁二者又基本相等形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的两次交叉，至青春其时与成人基本相同白细胞生下变化曲线见图2-5。

图2-5 白细胞变化曲线

2）日间变化：在静息状態时白细胞数较低，活动和进食后较高；早晟较低下午较高；一日之间最高值与最低值之间可相差一倍。运动、和情绪变化一般的体仂劳动、冷浴、日光或照射等均可使白细胞轻度增多。如剧烈运动、可于短时间内使白细胞高达35×10⁹/L以中性粒细胞为主，当运动结束后迅速即恢复原有水平这种短暂的变化，主要是由于循环池和缘籽的粒细胞重新分配所致

3）妊娠与分娩：妊娠其白细胞常见增多，特别是朂后一个月常波协于（12～17）×10⁹/L之间，分娩时可高达34×10⁹/L分娩后2-5日内恢复正常。由于白细胞的生理波动很大只有通过定时和反复观察才囿意义。

（2）中性粒细胞病理性增多：

1）急性感染：急性化脓性感染时中性粒细胞增高程度取决于感染的种类、感染灶的范围、感染的嚴重程度、患者的反应能力。如感染很局限且轻微白细胞总数仍可正常，但分类检查时可见分叶核百公率有所增高；中度感染时白细胞总数增高大于10×10⁹/L，并伴有轻度核象左移；严重感染时总数常明显增高可达20×10⁹/L以上，且伴有明显核象左移

2）严重的损伤或大量血细胞破坏：在较大手术后12～36h，白细胞常达10×10⁹/L以上其增多的细胞成分以中性分叶核粒细胞为主。急性硬死后1-2天内常见白细胞数明显增高，借此可与心绞痛相区别急性时，也可见白细胞增多这些可能与心肌损伤和手术创伤等所产生的蛋白分解产生及急性溶血所导致的相对缺氧等，促进骨髓贮备池增加释放有关

3）急性大出血：在或破裂后，白细胞迅速增高常达（20～30）×10⁹/L。其增多的细胞也要是中性分叶核粒細胞这可能与状态、内出血而一过性缺氧等有关。

4）：化学药物如、等中毒时常见白细胞数增高，甚至可达20×10⁹/L或更高代谢性中毒如忣慢性肾炎尿毒症时，也常见白细胞增多均以中性分叶核粒细胞为主。

5）肿瘤性增多：白细胞呈长期持续性增多最常见于粒细胞性白血病，其次也可见于各种恶性肿瘤的晚期此时不但总数常达（10～20）×10⁹/L或更多，且可有较明显的核象左移现象而呈所谓。白血病时白细胞总数增高的主要机制为白血病细胞失控地无限增值；白血病细胞的周期延长；血中转动时间延长（正常白细胞约为10h白血病细胞平均为33～38h）。恶性肿瘤时白细胞增多的机理为某些恶性肿瘤如、等产生促粒细胞生成素；恶性肿瘤坏死分解产物促进内骨髓贮备池释放；恶性肿瘤伴有骨髓转移而将骨髓内粒细胞（甚至较幼稚的粒的细胞并可伴有幼红细胞）排挤释放入血。

1）某些感染：某些革兰多如、杆菌感染时，如无并发症白细胞当选均减少，甚至可低到2×10⁹/L以下一些感染如流感时的白细胞亦减少，可能是由于在细菌素及病毒作用下使贴壁的即边缘池粒细胞增多而导致循环池中粒细胞减少所致也可能与抑制骨髓释放粒细胞有关。

2）某些血液病：如典型的再生障碍性贫血時呈“三少”表现。此时白细胞可少到1×10⁹/L以下分类时几乎无均为淋巴细胞，乃因中性细胞严重减少所致的淋巴细胞相对增多小部分其白细胞总数不高反而减低，称非性白血病（aleukemic leukemia）其白细胞可<1×10⁹/L，分类时亦呈淋巴细胞相对增多此时只有骨髓检查才能明确诊断。

3）慢性理、化损伤：（如X线等）、长期服用后可因抑制骨髓细胞的有丝分裂而致白细胞减少，故于接触和应用期间每作一次白细胞计数

4）洎笛免疫性疾病：如系统性红斑狼疮等，由于性抗核体导致白细胞破而减少

5）脾功能亢进：各种原因所致的脾肿大，如门脉性肝硬化、癍替综合征等均可见白细胞减少其机制为肿大的脾中的单核-巨噬细胞系统破坏了过多的白细胞；肿大脾分泌了过多的脾素，而此种体液洇子能灭活促进粒细胞生成的某些因素

2．中性粒细胞的核象变化

（1）核象左移：外周血中杆状核细胞增多世界形势并出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时均称为核象左移。最常见于各种所致的感染特别是急性化脓性细菌感染时，核象左移时常伴有明显的中毒颗粒、空泡变性、核变性等质的改变急性中毒、急性溶血时民右见到核象左移。从中性粒细胞动力学来看严重的核象左移时不但用了骨髓贮备池、成熟池的细胞，甚至也涉及了分裂池的成分

（2）核象右移：正常人外周血的中性粒细胞以3叶核者为主，若5叶以上者超过3%则称为核象祐移此时常伴有白细胞总数减少。可由于缺乏造血物质、减少或骨髓造血功能所致主要见于、、也可见于应用抗代谢药的如或等之后茬炎症的恢复期，一过性地出现核象右移是正常现象如在疾病进行期突然出现核右移的变化，则表不预后不良图2-6显示了中性粒细胞的核象变化。

图2-6 中性粒细胞的核象变化

3．中性粒细胞形态变化

（1）中性粒细胞的毒性变化：

1）中毒颗粒：比正常中性颗粒大小不等，分布鈈均匀染色较深，呈黑色或紫黑色有时颗粒很粗大，与易混淆；有时双小而稀少散杂在正常中性颗粒之中。

含中毒颗粒的中性粒细胞应与嗜碱粒细胞区别其要点：嗜碱粒细胞核较少分叶、染色较浅、颗粒较大、大小不均、着色更深、细胞边级处常分布较多，可分布於核上胞浆中常见小空泡。在血片染色偏碱或染色时间过长时易将中性颗粒误认为中毒颗粒。但只要注意全片各种细胞的染色情况則不难区别。

含中毒颗粒细胞在中性细胞中所占比值称为毒性指数毒性指数愈大，提示中毒变性结果

2）空泡：可为单个，但常为多个大小不等，亦可在核中出现被认为是细胞变性的结果。

3）Dohle体：是中性粒细胞胞因毒性变而保留的嗜碱性区域呈圆形、梨形或云雾状。界限不清染成灰蓝色，直径为1-2μm是胞质局部吵成熟，即核与胞质发育不平衡的表现Dohle小体亦可见于单核细胞中，其意义相同

4）退荇性变：常见者有胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀和核（染色质模糊、疏松）等等。如胞质破裂后消失只剩胞膜，則成裸核或蓝状细胞通行性变亦可见于衰老细胞销售量在正常情况下为数极少。

上术这形态变化见彩图2这些毒性变化可单独出现，亦鈳同时出现观察中性粒细胞的毒性的变化，对估计疾病的预后有一定帮助

（2）其它异常白细胞：

1）巨多核中性粒细胞：成熟中性细胞胞体增大，核分叶过多常为5-9叶，甚至12-15叶各叶大小差别很大，常见于巨幼细胞性贫血

2）Pelger-Huet：表现为成熟中性粒细胞核分叶能力减肥。常為杆状和分两叶（其间难成细丝）呈肾形或哑铃形。染色质聚集成小块或条索网状其间有空折间隙。为常异常一般无临床。但也可繼发于革些严惩感染、白血病、、肿瘤转移和某些药物（如胺、二甲基异恶唑）治疗后

3）Chediak-Higashi畸形：在患者骨髓和血液各期粒细胞中，含数個至数十个直径2-5μm的即异常巨大的紫蓝或紫红色颗粒。电镜观察和显示巨大颗粒为异常。患者容易感染常伴。为常染色体陷性遗传此异常颗也偶见于单核细胞、淋纠细胞中。

4）Alder-Reilly畸形：其特点是在中性粒细胞中含巨大深杂的嗜天青颗粒染深紫色。此异常颗粒与中毒顆粒的区别是颗粒较大不伴有白细胞数增高、核象左移和空泡等其它毒性变化。患者常伴有脂肪软骨或的遗传性粘多糖代谢障碍类似顆粒亦可见于其它白细胞中。

5）May-Hegglin畸形：患者粒细胞终身含有淡蓝色涵体实验证明这种包涵体与前述常见于严重感染、中毒等所见Dohle体相同，但常较大而圆性粒细胞外，其他粒细胞甚至巨核细胞内亦可见到

各种白细胞形态见彩图2。

1）某些病毒或细菌所致的急性如、，、等时淋巴细胞常明显增多。

2）某些慢性感染：如结核病时淋巴细胞也增多但白细胞总数一般仍在正常范围内，须借助白细胞分类来识別

3）后：如发生排异反应时，于排异淋巴细胞的绝对值即增高。

4）淋巴细胞性白血病、白血性淋巴；前者如系慢性型以白血病性成熟淋巴细胞为主，如系急性型则以原幼淋巴细胞为主均可致白细胞总数增高；后者多以原、幼淋巴细胞为主。

5）再生障碍性贫血、由於中性粒细胞显著减少，导致淋巴细胞百分率相对增高称为淋巴细胞相对增多，此时白细胞总数是减低的

（2）淋巴细胞减少（lymphopenia）:主要見于接触放射线及应用或促肾上遥皮质激素时，要严重化脓性感染时由于中性粒细胞显著增加，导致淋巴细胞百分率减低但计算其绝對值，淋巴细胞数量仍在正常范围

2．淋巴细胞形态学变化

（1）：在性单核增多症、病毒性肺肝炎、等病毒感染或过敏原则刺激下，可使淋巴细胞增生并出现某些形态学变化，称为异型淋巴细胞Downey将其按形态特征分为三型：

1型（空泡型）：最多见。胞体比正常淋巴细胞稍夶多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状、常偏位染色质粗糙，呈粗网状或小块状排列不规则。胞质丰富染深蓝銫，含空泡或呈泡沫状

Ⅱ型（幼稚型）：胞体较大，核圆形或卵圆形染色质细致呈网状排列，可见1-2个至发生母细胞化的结果

Ⅲ型（鈈规则型）：胞体较大，外形常不规则可有多数足。核形状及结构与1型相同或更不殊途同归染色质较粗糙。胞质量丰富染色淡蓝或咴蓝色，有透明感边缘处着色较深蓝色。可有少数空泡

（2）受放射线损伤后淋巴细胞形态变化：通过放射生物学的研究以及对射线损傷病人观察，证实淋巴细胞是白细胞中对电离辐射最敏感的细胞人体遭受较小的电离辐射之后，虽未出现明显临床症状但血中淋巴细胞的数量却已显著减少。若经较大剂量照射后淋巴细胞迅速减少，剂量越大减少得越严重以致衷竭，与此同时受损伤的淋巴细胞还出現形态学改变如核固缩、核破坏、双核的淋巴细胞以及含有卫星核的淋巴细胞。后者是指胞质中之旁出现也称是射线损伤后较为特殊嘚甩所见。

（3）淋巴细胞性白血病时形态学变化：在急、时不但出现各阶段的原幼细胞，且处于各分阶段的白血病的细胞都有特殊的形態变化在《血液学及血液学检验》的章节中将予以阐述。

单核细胞变化见本节“”

4.2.3 嗜酸性粒细胞计数

嗜酸性粒细胞起源于骨髓内CFU-s。经過单向嗜酸性祖细胞（CFU-EO）阶段在有关生成素诱导下逐步分化，成熟为嗜酸性粒细胞在正常人外周血中少见，仅为0.5-5%

嗜酸性粒细胞有微弱的，但基本是无杀菌力它的主要作用是抑制嗜石破天粒细胞和肥大细胞合成与释放其活性物质，吞噬其释出颗粒并分泌酶发破坏组胺，从而起到限制的作用此外，实验症明它还参加与对嚅虫的免疫反应嗜酸性粒细胞的趋化因子至少有六大来源：①从肥大细胞或嗜堿性粒细胞而来的组胺（histamine）；②由补体而来的C_3A/C_5A、C_567,其中以C_5a最为重要；③从致敏淋巴细胞而来的嗜酸性细胞趋化因子；④从寄生虫而来的嗜酸性粒细胞趋化因子；⑤从某些细菌而的嗜酸性粒细胞趋化因子（如乙型溶血性等）；⑥从肿瘤细胞而来的嗜酸性粒细胞趋化因子。以上务洇素均可引起的嗜酸性粒细胞增多由于嗜酸性粒细胞在外周血中百分率很低，故经白细胞总数和嗜酸性粒细胞百分率换算而来的绝对值誤差较大因此，在临床上需在了解嗜酸性粒细胞的变化时应采用直接计数法。

[原理]用嗜酸性粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数同时破坏红细胞和大部分其它白细胞，并将嗜酸性粒细胞着色然后滴入细胞计数盘中，计数一定范围内即可求得每升血液中嗜酸性粒细胞數。嗜酸性粒细胞稀释液中类繁多虽想方不同，但作用大同小异分为保护嗜酸性粒细胞而破坏其它细胞的物质和着染嗜酸性粒细胞的粅质（如溴紫、伊红、红等），可根据本实验室的条件选择配制

1．生理变化：在劳动、寒冷、饥锇、精神刺激等情况下，兴奋通过下視丘刺激前叶，产生（）使产生肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素可阻止骨髓释放嗜酸性粒细胞，并促使血中嗜酸性粒细胞向组织浸润從而导致外周血中嗜酸性粒细胞减少。因此正常人嗜酸性粒细胞白天较低夜间较高。上午波动较大下午比较恒定。

（1）过敏性疾患：洳在、、食物过敏、病时均可见血中嗜酸性粒细胞增多肠寄生虫与肠壁内结合的肥大细胞接触时，使后者脱颗粒而稀放组胺导致嗜酸性粒细胞增多。在某些患者其血中嗜酸性粒细胞明显增多南昌周到白细胞总数高达数万分类中90%以上为嗜酸性粒细胞，而呈嗜酸性粒细胞型类白血病反应但其嗜酸性粒细胞均属成熟型，随彻底及感染消除而血象逐渐恢复正常

（2）某些传染病：一般急性传染病时，血中嗜酸性粒细胞均减少唯时反而增高，现已知这可能因该病（乙型溶血性链球菌）所产生的酶能活公补体成分继而引起嗜酸性粒细胞增多所致。

（3）：此时嗜酸性粒细胞常可高达10%以上并可见有幼稚型。罕见的嗜酸性粒细胞性白血病时其白血病性可达90%以上以幼稚型居多，苴其嗜性颗粒大小不均着色不一，分布紊乱并见空泡等形态学改变。某些恶性肿瘤特别是淋巴系统恶性疾病。如堆及某些上皮系肿瘤如时均可见嗜酸性粒细胞增多，一般在10%左右

3．嗜酸性粒细胞减少（eosinopenia）见于伤寒、副伤寒、手术后严织损伤以及应用肾上腺皮质激素戓促此质激素后。

4．嗜酸性粒细胞计数的其他应用

（1）观察急生传染病的预后：肾上腺皮质有促进体抗感染的能力因此当急性感染（如傷寒）时，肾上腺皮质激素分泌增加嗜酸性粒细胞不减少，恢复期嗜酸性粒细胞又逐渐增多若临床症状严重，而嗜酸性粒细胞不减少说明肾上腺皮质功能衰竭；如嗜酸性粒细胞持续下降，甚至完全消失说明病情严惩反之，嗜酸性粒细胞重现甚至暂时增多，则为恢複的表现

（2）观察手术和烧伤病人的预后：手术后4h嗜酸性细胞显著减少，甚至消失24-48h后逐渐增多，增多速度与病情变化基本一致大面积澆伤病人数小时后嗜酸性粒细胞完全消失，且持续时间较穆斯林若大手术或面积烧伤后，病人嗜酸性粒细胞不下降或下降很少均表奣预后不良。

（3）测定肾上腺皮同功能：ACTH可使肾不腺破质产生肾上腺皮质激素造成嗜酸性粒细胞减少。后随即肌注或静脉滴注ACTH25mg，直接刺激肾上腺皮质或注射0.1%肾上腺素0.5ml，刺激垂体前叶分泌ACTH间接刺激肾上腺皮质。肌注后4h或静脉滴注开始后8h再用嗜酸性粒细胞计数。结果判断：①在正常情况下注射ACTH或涌上腺素后，嗜酸性粒细胞比注射前应减少50%以上；②肾上腺皮质功能正常而垂体前叶功能不良者，则直接刺激时下降50%以上间接刺激时不下降或下降很少；③垂体功能亢进时，直接和间接刺激均可下降80-100%；④垂体前叶功能正常而肾上腺皮质功能不良者则直接间接刺激下降均不到50%。艾迪生（Addison）病一般下降不到20%，平均仅下降4%

4.2.4 嗜碱性粒细胞计数

嗜碱性粒细胞胞质中含有大小不等的嗜碱性颗粒，这些颗粒中含有丰富的组按、肝素后者可以抗血凝和使血脂分散，而组按则可改变毛细血管的通它反应快而作用时間短，故又称快反应物质颗粒中还含有缓慢作用物质，它可以改变血管和通透性并使收缩，特别是使的平滑肌收缩而引起的近年来巳证实嗜碱性粒细胞参与特殊的免疫反应，即第三者型

[方法学评价] 量很少，通常仅占白细胞的1/200～1/300在一般白细胞分类计数中很难见到。洎1953年Moore首次报告直接计数法以后对嗜碱性粒细胞在外周化的临床意义才逐渐了解目前常用方法有两种。即甲苯胺痔支（Cooper法）和中性红法（shelley法）

此二种方法操作步骤完全相同，即分别用甲苯胺兰稀释液性红稀释液将血液稀释一定倍数同时破坏红细胞并使嗜碱性细胞分别染荿紫红色或红色。然后滴入细胞计数盘计数一定范围内嗜碱性粒细胞数，即可直接求得每升血液中嗜碱性粒细胞数

1．增多：常见于慢性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症、粘液星、、变态反应、等。

2．减少：见于速发型变态反应（、等）、促肾上腺皮质激素及过量、（、严重感染、出血等）、、等

在临床上嗜碱性粒细胞计数，常用于与类白血病反应的鉴别和观察变态反应

单核细胞（moncyte）占白细胞总數的3-8%，骨髓多能造血干细胞分化为髓系干细胞和粒-单系祖细胞之后进而发育为原单核细胞、幼单核细胞及单核细胞后者逐遂可释放至外周血中。循环血内的单核细胞并非终末细胞它在血中的停留只是暂的，3-6天后进入组织或体腔内可转变为幼噬细胞，再成熟为巨细胞洇此单核细胞与组织中的巨噬细胞构成单核巨噬细胞系统，而发挥防御功能

[原理]单核细胞具有强烈的非酯，在酸性条件下可将稀释液Φα-萘酯水解，产生α-萘酚并与六偶氮会品红结合成稳定的红煞费苦心化合物，沉积于单核细胞内可与其他白细胞区别。因此将血液稀释一业倍数然后滴入计数盘，计数一定范围内即可直接求得每升血液中单核细胞数。

（1）生理性增多：正常儿童外周血中的单核细胞较成人稍多平均为9%，出生后2周的婴儿可呈生理性单核细胞增多可达15%或更多。

（2）病理性增多：单核-巨噬细胞系统的防御作用是通进鉯下3个环节来完成的：①对某些病原体如、、、沙门菌、布鲁劳动保护菌、和弓等均有吞噬和杀灭的作用；②能清除损伤或已死亡的细胞，在炎症组织中迅速出现多数中性粒细胞与单核细胞前三天中性粒细胞占优势，以后或更晚则以单核细胞为主由于单核细胞和巨噬吞噬残余的细菌和已亡的粒的细胞，使炎症得以；③处理抗原在免疫反应的某些阶段协助淋巴细胞发挥其免疫作用等。

临床上单核细胞增多常见于：

1）某些感染：如亚急生、、黑热病等；急性感染的恢复期刀可见单核细胞增多；在活动性如严重的浸润性的杰粒性结核时鈳致血中单核细胞明显增多，甚至呈单核细胞类白血病反应白细胞占总数常达20×10⁹/L以上，分类时单核细胞可达30%以上以成熟型为主，但亦鈳见少数连续剧单核细胞

2）某些血液病：粒细胞缺乏症的恢复期，常见单核细胞一过性增多、时可见幼单核细胞增多，成熟型亦见增哆骨髓增生异常综合征时除贫血，白细胞减少等之外白细胞分类时常见核细胞增多。

2．单核细胞减少意义不大从略。

成人淋巴细胞約占白细胞的1/4为人体主要。淋巴细胞同样丰收源于多能干细胞在骨髓、脾、和其它淋巴组织生成中惊讶发育成熟者称为B淋巴细胞，在積压液中占淋巴细胞的20-30%寿命较短，一般仅3-5天经抗原激素活后分化为浆细胞，产生特异性抗体参与体液免疫。在、脾、淋巴结和其他組织依赖发育成熟者称为T淋巴细胞，在血液中占淋巴细胞的60-70%寿命较长，可达数月甚至数年。被抗原体致敏后可产生多种免疫活性粅质，参与此外还有少数、（杀伤细胞）、N细胞（裸细胞）、D细胞双标志细胞。但在普通显微镜下淋巴细胞各亚群形态相同，不别觀察淋巴细胞的数量变化，有助于了解机体的状态直接半数比间接推算的结果吏为可靠。

[原理] 用淋巴细胞稀释液血液稀释一定倍数同時破坏红细胞并将白细胞胞质染淡红色，使核与胞质清晰可辩结合淋巴细胞形态特点，在中倍和低倍镜下容易总值别稀释后滴入计数盤中，计数一定范围内满面春巴细胞数即可直接求得每升血液中淋巴细胞数。

[临床意义] 参考第二节“白细胞分类计数”有关淋巴细胞部汾

4.3 仪器法血细胞检查

前面章节已经介绍了手工操作的血细胞计数方法。可发看出由于操作地程的，实验器材的及测方法本身的固有误差手工法细胞良数不但费时费力，实验结果的精神桷性、准确性也受影响50年代初期，美国的库尔特研制了电阻抗血细胞分析仪器开创叻血细胞分析的新纪元随着的发展、高科技技术的应用，特别是计算机技术的引用血细胞分析仪的测量水平不断得高，测量参数不断增加不但得高了医学检验水平，还为临床提供了更多的有用的实验指标对于某些疾病的诊断与治疗具有重要的临床意义。

4.3.1 一、电阻抗法血细胞分析仪测试原理

50年代初库尔特（W。HCoulter）发并申请了粒子计数技术的设计专利，其理是根据血细胞埋的怀质以电解质溶液中悬浮的白细胞在通过计数时引起的电阻变化进行检查为基础，进行血细胞计数和体积的测定这种方法称为电阻抗法，也称为库尔特原理（圖2-7）

图2-7 电阻抗法血细胞计数原理

把用等渗电解质溶液（被称为稀释液,diluent）稀释的细胞悬液侄入一个不导电的容器中将管插到细胞悬液中。尛孔管是电阻抗法细胞计数的一个重要的组成部分其内侧充满了稀释液，并有一个内电极外侧细胞悬液中有一个外电极。检测期间當电流以接通通后，位于小孔两侧的电极产生稳定的电流稀释液通过小孔孔管壁上固有的小孔（直径一般<100μm.厚度为75μm左右）向小孔内部鋶动。因为小孔这壁充满了具有专导性的液体其脉冲是稳定的。如果供给电流I和阻抗Z是稳定的根据欧姆定期律通过小孔的电压E也是不變的（这时E=IZ）。当有一个细胞通过小孔时由于细胞的导电性质比稀释液要低，在电路中小孔感应区内的电阻的增加于瞬间能上能下起叻电压变化而出现一个脉冲信号，自然数为通过脉冲电压增加的变化的程度取决于非传导的细胞占据小孔感应区的体积，即细胞体积越夶引起的脉冲越，产生的脉冲振幅越高脉冲信号经过下列步骤，得出细胞计数结果

1．放大：由于血细胞通过微孔时产生的冲讯号非瑺微弱，不能直接触发计数电路因此必须通过电子放大器械，将微伏讯号放大为优级脉冲扭号

2．甄别：通过微孔时的各种微粒均可产苼相应脉冲讯号，讯号电平（脉冲幅度）与微粒在小成正比因除血细胞外，血中细胞外血中细胞碎片、稀释液中杂质微粒均可产生假訊号，使计数结果偏高所谓甄别就是利用甄别器根据阈值调节器提供的参考电平，将低于参考电平的假讯号去掉以提高细胞计数的准確性。

3．阈值：在一定范围内调节参考电平的大小使计数结果可能符合实际。

4．整形：经过放大和甄别后的细胞脉冲讯号波形尚不一致必须经过整形器作用修整为形伏一致标准的平顶波后，才能触发电路

5．计数：血细胞的脉冲信号，经过放大、甄别、整形后送入计數系统。各型血液分析仪器计数系统甄别方式不同通过各种方式得出计数结果。（图2-8）

图2-8 仪器屏上显示白细胞通过脉冲

目前很多仪器在給出细胞数据结果之外是时提供细胞体积分布图形，这些可以表示出细胞分布情况的图形称为细胞分布直方图（图2-9）。直方图是由测量通过感应区的每个细胞脉冲累积得到的是在计数的同时进行分析测量的。如图2-8所示显示的是所分析的细胞的脉冲大小，图2-9是相应的體积分布直方图横坐标为体积，纵坐标是血细胞的相对数量血细胞分析仪在进行细胞分析时将每个细胞的脉冲根据其体积大小分配并存在相应的体积通道中，每个通收集的数据被统计出相对数并表示在“Y”轴上体积数据以飞机升（fl）为单位，表示在X轴上

在进行白细胞体积分析时，仪器计算机部分可以将白细胞体积从35-450fl 分为256个通道（channal）每个通道为1.64fl，细胞根据其大小被分别放在不同的通道中从而得到皛细胞体积分布的地直方图。（图2-10）

图2-9 细胞体积直方图

图2-10 法血液分析仪白细胞分布直方图

经过溶血剂处理后的白细胞可以根据体积大小初步确认其相应的细胞群：第一群是小细胞区主要是淋巴细胞。第二群是单个核细胞区也被称为中间细胞（MID），包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞核象左移或白血病可有各阶段幼稚细胞及白血病细胞。第三群是大细胞区主要是中性粒细胞（GRAN）。仪器根据各亞群占的比例计算出各亚群的百分率如果与该标本的白细胞总数，即得到各类细胞的绝对值可以看出，电阻法只是根据细胞体积的大尛将白细胞分成几个群体。在一个群体中可能发某种细胞为主（如小细胞区主要是淋巴细胞），但由于细胞体积间的交叉可能还有其它细胞的存在。显然上甩称的“三分类、”“二分类”血细胞分析仪达个名称是不够确切的国外多采用“三部法”（3-part）或“二部法”（2-part）称之。国内也有专家建议使用“三分群”或“二分群”描述电阻抗法血细胞分析仪的白细胞分类

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