为什么树枝状大分子有优良的细胞摄取葡萄糖测定

树枝状大分子的新进展--《化学通报》1995年10期
树枝状大分子的新进展
【摘要】:对新型特种结构大分子──树枝状大分子近几年的研究进展做了全面的回顾。
【作者单位】:
【关键词】:
【分类号】:O63【正文快照】:
树枝状大分子的新进展陈永明,陈传福,习复(中国科学院化学研究所,北京100080)摘要对新型特种结构大分子──树枝状大分子近几年的研究进展做了全面的回顾。关键词特种结构大分子,树枝状大分子研究特种结构的大分子(WellDefinedpolymers)是
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京公网安备75号树枝状高分子
含油污水处理中有良好的应用前景树枝状高分子(PAMAM)在
含油污水处理中有良好的应用前景,磁性纳米材料改性的树枝状分子几乎可以处理所有种类的
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dendrimers
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奈米高分子(Nanopolymers)
树枝状高分子(Dendrimers)
奈米结晶(Nanocrystals) ...
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PAMAM dendrimer
据说目前国外在印染废水处理方面,有加入一种叫做树枝状高分子(PAMAM dendrimer)的东西作为辅助,可以有效的去掉高色度和高COD。在网上了查了些资料,看的不是太明白。
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dendritic macromolecule
树枝状高分子
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dendritic crystalline macromolecule
polyamidoaminedendrimers
Polyamidoamine(PAMAM) dendrimers
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Therefore, our work makes the original design by synthesizing of theG5 cyclotriphosphazene-core PAMAM dendrimer of high superficialfunctional group density used as the medicine release carrier.
因此,本课题组首创性的设计合成高表面官能团密度的G5代三聚膦腈核PAMAM树枝状高分子,以达到可作为药物控释载体应用的目的。
参考来源 - 多功能化多层次三聚膦腈核树枝状大分子的合成、结构与性能研究
- 引用次数:2
TG, IR, 1H-NMR, 13C-NMR were used to characterize the PAMAM dendrimers. The results indicate that PAMAM dendrimer is a class of tree-like compound constructed by repeated units starting from an initiator core.
利用TG、IR、~1H-NMR、~(13)C-NMR等分析手段对合成的PAMAM树枝状高分子进行了表征,结果表明,PAMAM树枝状高分子是一种从核心出发,有规律地重复支化生长,逐步构筑起来的类似树枝状的化合物。
参考来源 - PAMAM树枝状高分子的合成及其在介孔氧化铝中的模板作用
&2,447,543篇论文数据,部分数据来源于
采用发散合成法合成了以乙二胺为核的1.0~3.0代的系列树枝状高分子聚酰胺胺(PAMAM)。
A series of 1.0~3.0 G dendrimers (PAMAM) have been synthesized by divergent method with ethylenediamine as core.
噻唑蓝法检测结果表明,改性后的树枝状高分子载体及其DNA复合物作用于293T细胞较未改性树枝状载体产生的细胞毒性低;
MTT showed the modified dendrimer vector and DNA compound system produced lower cell toxicity on 293T cell than that of the unmodified ones.
树枝状大分子是一类具有规则的、高度支化的三维结构的高分子,含硅的树枝状大分子是以硅原子作为两代之间的支化点的树枝状大分子。
Dendrimers are macromolecules with a regular and highly branched three-dimensional architecture. Silicon-based dendrimers are dendrimers with Si-atoms as branching point between two generations.
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树枝状大分子的合成及其阻垢性能
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温度敏感型树枝状大分子衍生物的合成及药物控制释放您当前的位置: & 生物材料
&&&&&& 树枝状大分子(Dendrimer)是聚合物合成科学上第一次不采用生物技术合成的结构精确的大分子,被称为是继线形、交联形、支链形聚合物后的第4种结构类型的高分子。树枝状大分子是一类新型的高分子材料,是通过多官能团逐步重复的一系列基团反应而成(非传统的聚合方法),这种方去可以保证其具有很高的单分散性。从树枝状大分子诞生开始发展到现在,虽然只有短短的二十几年时间,但是由于其新奇的结构、独特的性能和潜在的应用前景而格外受到人们青睐,被广泛应用于生物医学、催化剂载体、膜材料等领域,尤其是生物医学领域中的药物递送方面。
&&& 树枝状大分子是由中心核、内层重复单元以及外层端基三部分组成。其合成方法主要有发散法(由Vogtle等始创)和收敛法(由Frechet等提出,随后Miller和 Neenan也对此进行了研究),后来又发展了发散收敛结合法、活性自由基聚合、固相法合成、光引发合成等合成方法。
&&& 聚酰胺-胺(PAMAM)树枝状大分子是迄今为止研究最为成熟的树枝状大分子之一,1985年Tomalia等首次合成了这种高度支化、对称、呈辐射状的聚酰胺-胺树枝状大分子,并称其为星射状树形大分子。PAMAM树枝状大分子是第一个被报道的具有三维立体球形结构的树枝状分子,其合成是以乙二胺或氨为核心,采用经典的Micheal加成反应和酯氨解反应经逐步发散法得到的。到目前为止,PAMAM树枝状大分子已合成到第11代(G11),其直径变化范围为1~13 nm(GO&G10),G11的直径约为17.5 nm,由此可见 PAMAM是一种纳米级的分子。
PAMAM具有很好的反应活性及包容能力,在分子中心和分子末端可以引入大量的反应性及功能性基团,即可以同时键合上药物、靶向基团及各种修饰基团。通过选泽不同的重复单元可以使PAMAM树枝状大分子的内部形成不同尺寸的疏水空间,可以用来包合疏水性的药物,而其表层结构是亲水性的基团,则可以用来增加药物的溶解度。又因其具有很好的生物相容性,无免疫原性,末端带功能化基团,可用来结合靶向或客体分子,也可通过对其表面进行修饰得到更多功能化的药物载体分子,所有这些优点都为其作为药物载体提供了得天独厚的条件,它可以实现真正意义上的纳米给药。本文将详细介绍PAMAM主要的两种载药机制和 PAMAM及其复合物在药物载体领域的研究进展,然后简要介绍其在基因载体方面的研究进展.最后展望其未来的发展趋势,旨在为其他研究者在这两方面的研究提供一些参考。
1&PAMAM树枝状大分子的载药机制
&&& PAMAM具有巨大的内部疏水空间和高密度的表面官能团,疏水空间内部结构中的氮、氧原子可通过氢键或质子化与药物分子形成复合物,而其高密度的表面功能基团则可与药物分子的功能基团通过静电、共价结合形成复合物,或先与具有增溶作用的分子或配体偶联,再与难溶性药物结合,以更好地增加难溶性药物的水溶性,并达到控制药物的释放及介导药物靶向输送的目的。PAMAM与难溶性药物的作用方式主要有物理包埋作用、静电和共价作用等。
1.1 物理包埋载药
&&& PAMAM的球形结构及其内部的疏水空腔使其能够直接包合客体分子。药物分子可通过氢键、范德华力或静电引力等物理作用进入其内部疏水空腔形成复合物。PAMAM包合药物分子的能力主要取决于客体分子的尺寸以及PAMAM内部疏水空腔的大小及性质。随着PAMAM代数的增加,其内部的疏水空腔也将增大,包合客体分子的数目也将增多。
&&& Cheng等将磺胺甲恶唑(SMZ)作为模型药物,以PAMAM作为载体进行了研究,结果发现SMZ分子与PAMAM中的叔胺基团是通过氢键作用形成复合物,且其体外释放实验和抗菌活性实验表明了在合适的条件下,PAMAM是一种可以让SMZ在体外进行持续释放的潜在药物载体。冯丽娜等自制了PAMAM-Ac-FITC-LCTP药物靶向载体后,采用物理包埋法将其与阿霉素进行连接,实验结果表明该载体对阿霉素的最大包埋率为7.46 %。
1.2 静电作用和共价作用载药
&&& PAMAM具有高密度的表面多功能基团,可与多种活性分子或配体通过静电、共价结合形成PAMAM复合物。PAMAM与药物分子的静电共价结合能力主要取决于PAMAM表面的功能基团与药物分子间的相互作用。与物理包埋载药方式相比.共价结合载药形成的PAMAM-药物复合物具有更好的稳定性,且改变了部分聚合物与药物的药动学特性,能更好地控制药物的释放及介导药物靶向输送。
&&& 陆君等探讨了PAMAM树枝状大分子与灯盏花素可能的增溶机制,结果表明其增溶机制为灯盏花素的羧基与PAMAM树枝状大分子的伯胺和叔胺发生静电结合作用。Zhang等以酮洛芬为模型药物,研究了PAMAM与酮洛芬的作用机制,计算机模拟结果表明PAMAM与酮洛芬主要靠静电作用力结合。
&&& Kolhe等节洛芬为模型药物,制备了PAMAM布洛芬复合物,并研究了其和无载体时布洛芬的体外释放情况。傅里叶红外和核磁共振光谱研究表明,PAMAM末端的氨基-NH2与布洛芬的羧基-COOH相互作用形成酰胺键,致使PAMAM-布洛芬复合物的体外释放速度比无载体时要慢很多,表现出了较为明显的缓释效果。
Cheng等采用H-NMR和2D-NOSEY谱研究了 PAMAM与带有负电荷的药物分子苯巴比妥和磺胺甲恶唑的外在相互作用和内在相互作用,谱图数据表明PAMAM与药物分子的主要相互作用来自于外在的静电作用,只有少部分的药物分子进入到疏水空间。
2 &PAMAM树状大分子对药物的增溶及缓控释作用
2.1 对药物的增溶作用
&&& 很多药物特别是抗肿瘤药物,由于水溶性很差而难以得到有效的应用。当前临床上使用的难溶性抗肿瘤药物注射剂是由传统方法制成,多采用复合溶媒、增溶剂等以增加药物的溶解性,这无疑会增加处方的刺激性或毒性,临床应用时会引起过敏反应甚至引起抗药性。
&&& PAMAM具有很好的生物相容性,无免疫原性,毒性较低,代谢物质可通过尿和粪便排出体外,且末端带功能化基团,可与药物分子的功能基团相互作用,内部具有巨大的疏水空间,可以包容难溶性药物分子,这些特殊性质使之极有希望成为新一代的药物载体和亲脂性药物的增溶剂。
&&& PAMAM树枝状大分子是聚电解质,在水中末端基的一级胺和内腔中的三级胺均可质子化,质子化的程度取决于溶液的pH值。聚电解质的质子化强烈地影响其构象。Chen等用荧光光谱法研究了G 6.0 PAMAM树枝状大分子与探针分子DNS(5-二甲胺基l-茶酚磺酸)结合的机理,发现带正电荷的树枝状大分子与带负电的DNS之间靠静电作用结合,在5.5< pH <10.0时,PAMAM树枝状大分子与探针分子(DNS)发生静电作用。利用这种静电作用,Milhem等将树枝状大分子(G 4.O)用作脂溶性弱酸性药物布洛芬的增溶剂,研究发现其与传统的增溶剂十二烷基硫酸钠(SDS)相比具有更好的增溶效果。
&&& 巴洛沙星是一种难溶于水的药物,在水中溶解度约为1.5 g/L。唐杨等以巴洛沙星为模型药物,检测不同代数不同浓度的PAMAM树枝状大分子对巴洛沙星的增溶作用,结果发现其增溶能力随着PAMAM代数的增加和溶液浓度的增大而增大(2~5.25 g/L),尤其是G 4.0时巴洛沙星的溶解度显著增加,可见PAMAM对巴洛沙星具有较显著的增溶作用。
&&& 陆君等以灯盏花素为模型药物,研究了PAMAM树枝状大分子对灯盏花素的增溶性能。结果表明灯盏花素、灯盏花素-PAMAM口服给药的Cmax分别为(119.65&9.36) ng/mL和(518.17&17.07)ng/mL,AUC0~8h分别为(370.09&63.08) ng&h/mL和(.87) ng&h/mL,两者具有极显著性差异(P < 0.01)。由此说明PAMAM树枝状大分子能显著提高灯盏花素在水中的溶解度,大大改善灯盏花素口服给药的生物利用度。
Zhang等以酮洛芬为模型药物,采用紫外光谱法测定了不同代数的PAMAM树状大分子在不同溶度和不同pH值下对酮洛芬的增溶量。实验结果表明,酮洛芬的溶解度陡溶液pH值的变化而变化,pH=4.0~6.0时,PAMAM树状大分子对酮洛芬的增溶量随着PAMAM的代数和溶液浓度的增加而增大,整代和半代都具有增溶作用。其增溶机理可能是酮洛芬的羧基与PAMAM的伯胺和叔胺发生静电作用。
2.2 对药物的缓控释作用
&树枝状大分子在与药物分子的作用过程中,不仅能够增加其溶解度,并且通过静电力等非键合力或键合力与其相结合,可以对药物起到缓释和控释作用。
&姚文军以葛根素(Puerarin,PUE)为模型药物,制备了不同代数PAMAM-PUE复合物,同时对复合物体外释放行为进行考察。实验结果表明,每分子G 3.5 PAMAM、 G 4.0 PAMAM、G 4.5 PAMAM、G 5.0 PAMAM分别最多可复合36、56、125、170个PUE分子,随溶液pH值的增加,半代 PAMAM对PUE的复合量无明显增加,而整代PAMAM对 PUE的复合量随pH值的增加而增多。PAMAM-PUE复合物在不同释放媒介中表现出不同的释放特性。随着PAMAM代数的增加,其缓释效果越明显。整代的PAMAM PUE复合物较半代的缓释效果明显。水媒介中PUE从复合物中释放最慢,随溶液pH值的增加、离子浓度的降低,PUE从复合物中释放减慢。
&&& Filipowicz等以维生素B2为模型药物,以PVDF和 PES为渗透膜,研究了不同代数的PAMAM对B2渗透作用的影响,实验表明在各代数PAMAM存在的情况下,B2从膜中扩散出来的速度是无PAMAM存在时的2~3倍,扩散速度加快最多的是G 2.O &PAMAM,说明各代数的PAMAM对 B2的扩散速度具有一定的控释效果。
&&&&&&& Dong等以FD4(Fluorescein isothiocyanate-labeled dextran,Mw=4400)、胰岛素和降血钙素为模型药物,研究了 G O-G 3.0 PAMAM对鼠鼻腔吸收模型药物的影响。结果表明各代数PAMAM对鼠鼻腔吸收药物的增强效应大小为 G 3 >G 2> G 1 > G O。对于同代数的PAMAM而言,吸收增强效应与其溶液的浓度有关。实验结果表明浓度为1 %的 G 3.O &PAMAM对鼠鼻腔吸收药物FD4的增强效应影响最大,此浓度下对鼠鼻腔吸收其他药物(FD 10 (Mw=9100)、 FD 70 (Mw=71600)、胰岛素和降血钙素)也起到了增强效应,且不会伤害鼻腔膜。
Lin等研究了G O & G 3.O PAMAM在鼠小肠中对 CF、FDs、胰岛素和降血钙素等难溶性药物吸收的影响,结果表明PAMAM可增强鼠小肠对CF、FDs、胰岛素和降血钙素等难溶性药物的吸收,增强吸收的效果与PAMAM的代数和浓度有关。G 2.0 &PAMAM浓度为O.5 %时,鼠小肠对CF的增强吸收效果最好。而G 2.O &PAMAM几乎不会影响鼠小肠对难溶性药物FD 1O和降血钙素的吸收,也不会影响鼠大肠对这些难溶性药物的吸收。众多实验证实了低浓度下的PAMAM可提高鼠小肠对难溶性药物的吸收效果。
3 &PAMAM-复合物对药物的增溶及缓控释作用
PAMAM树状大分子具有超支化结构、表面高密度的氨基基团和单分散性,具备包裹药物的能力,可改变药物分子的理化性质,增加难溶性药物的溶解度、稳定性及生物利用度。目前,PAMAM树状大分子在药物载体、基因转染、磁共振成像造影等领域的研究已取得了令人鼓舞的进展。然而由于整代PAMAM大分子表面具有大量氨基基团,在生理 pH值下易质子化带正电,具有一定的细胞毒性和溶血毒性。采用无毒性水溶性好的大分子聚合物(如PEG、叶酸等)对 PAMAM表面进行修饰后,可以有效降低其细胞毒性,再与难溶性药物相连接,能有效地增加难溶性药物的溶解度和稳定性,进而可提高其生物相容性和药物在体内的滞留时间,提高其药效。
3.1&对药物的增溶作用
&&& 喜树碱(CPT)是从中国特有珙桐科植物喜树中分离得到的一种生物碱,因其水溶性差、见光易分解、毒性较大等不足,限制了其临床应用。马丽芳等合成了新型树状大分子聚酰胺胺-泊洛沙姆(PAMAM-Poloxamer)后,通过体外增溶实验研究该药物载体对难溶性抗癌药物喜树碱的增溶作用,以及pH值对其增溶作用的影响,结果显示经修饰后的 PAMAM对喜树碱有较好的增溶作用。通过噻唑蓝(MTT)研究表明其细胞毒性比PAMAM有所降低。
戴华胃等合成了PEG化的G 3.0 &PAMAM(PE G 350-G 3.O PAMAM),以难溶性药物喜树碱为模型药物研究其对 CPT的溶解和释放性能,实验表明PEG化的PAMAM较其同代的PAMAM对喜树碱具有更强的增溶作用和更快的释药速度,具有明显的增溶作用。唐国涛等以CPT为模型药物,研究了G 4.0 PAMAM和G 5.O PAMAM对其在水中的溶解性和在PBS中的缓释效果影响,结果表明CPT在 G 4.0 PAMAM和G 5.O PAMAM的水溶液中内酯环开环,溶解度增大,具有增溶效果,但在PBS缓冲液中并无明显的缓释效果。
3.2 对药物的缓控释作用
&&& 李金娜等利用胆酸对1代聚酰胺-胺树枝状大分子进行修饰,得到两亲性树枝状大分子(PAMAMl-CA 6),并以抗癌药物氨甲喋呤为模型,考察了其对氨甲喋呤的释放行为。结果显示在碱性条件下(pH=10),PAMAMl-CA 6对氨甲喋呤的释放较为缓慢;随着溶液pH值的降低,药物的释放速率明显加快,说明PAMAMl-CA 6对氨甲喋呤具有缓控释作用,且释放能力与释放介质的pH值有关。
&&& Goldberg等制备了PAMAM复合物G 3.5 &Glycine- SN 38和G 3.5-&Alanine SN 38,并研究了此复合物对肠癌细胞的吸收和毒副作用,实验结果表明PAMAM复合物可延长抗癌药物SN 38在肠癌细胞中的滞留时间,从而可提高药物的生物利用度。
&&& 冯丽娜等采用自制的药物靶向载体PAMAM-Ac- FITC-LCTP对阿霉素进行包埋载药,通过体外透析实验观察载体对药物的缓释功能,结果表明该载体对药物具有明显的缓释作用,且离子浓度、pH值和温度对药物的释放具有影响,说明PAMAM-Ac-FITC-LCTP主要是通过静电作用与阿霉素结合。
&&& 王寅用修饰过的多功能树状大分子G 5.0 NHAc-FI- FA物理包裹抗癌分子 2-甲氧基雌二醇(2-Me)和阿霉素(DOX)。体外释放试验表明.G 5.0 NHAc-FI-FA/药物复合物可以降低药物2-Me和DOX的释放速率,可见经修饰后的 PAMAM对药物具有一定的缓控释作用,释放速率与释放介质的pH值有关。
刘丹等利用聚乙二醇-聚磺胺二甲氧嘧啶(PEC-b-PSD)和PAMAM树状大分子制备了具有pH敏感性的复合物,并以DOX为模型药物,考察了其在不同pH值缓冲液和血浆中的释放行为,结果显示大多数复合物胶束稳定.且具有明显的缓释作用。
&&& 陈阳娟等将合成的修饰产物(G 2.O &PAMAM-DB)与甲基丙烯酸酐化癸二酸(MSA)用二甲基亚砜(DMSO)溶解后,在光引发剂存在下通过紫外光照射得到具有一定生物相容性的凝胶,再用其对药物氧氟沙星进行包埋,制备了包埋氧氟沙星凝胶。降解实验表明,通过改变聚酸酐的含量可以控制降解时间和药物释放量。4 基因载体
&&& 与病毒载体相比,非病毒载体的PAMAM树状大分子因具有良好的稳定性、溶解性、无免疫原性、相对安全性和使用简易等优点而被广泛使用,是一类很有潜力的基因转染载体。其端基官能团中的氧基在生理条件下易质子化而带正电荷,能够与带负电荷的DNA通过静电作用结合,形成稳定的PAMAM DNA纳米级复合物。由于该复合物是通过胞内吞作用进入细胞,DNA要对抗溶酶体的降解,树状大分子内部的多级胺具有良好的缓冲能力,可保护DNA,并在酸性条件下释放DNA达到转染的目的。然而其转染效率并不高,与颗粒的尺寸、表面电荷、颗粒形状、细胞类型、生理条件、进入细胞的方式等因素有关。通过对其表面基团进行修饰来改变颗粒的尺寸、表面电荷、形状等影响因素,提高其转染效率和复合物的稳定性,进而可提高其生物利用度。
&&& 刘军安等合成了十八碳酰长链修饰G 3.0 &PAMAM端基的新型树状大分子.考察其作为基因载体的转染效率,结果表明经十八碳酰长链修饰过的G &3.O PAMAM,在基因转染过程中能够更好地结合DNA,提高其基因转染效率。
&&& Mojarad等用2种不同的树状大分子(PAMAM G 2和PAMAM-COOH)合成了PAMAM复合物(G 2-G 2),采用绿色荧光进行分析.结果表明G 2-G 2复合物能够将DNA导入到MCF-7和HEK 293的细胞系中。
&&& Pan等用G 1.0 &PAMAM、苄氧羰基-赖氨酸和Lys(Z)-NCA(benzyloxycarbonyl lysine N-carboxyanhydride)合成了多臂的复合物G 4.0 &PAMAM-g-PLL。经MTT测试,证实了G 4.0 &PAMAM-g-PLL的毒性低于G 4.0 &PAMAM和PLD-15 k。体外转染测试表明在相同的N、P比下,复合物 G 4.0 PAMAM-ELL-3.8的转染效率要明显高于G 4.0 &PAMAM和PLL-15 k,表明G 4.O PAMAM-PLL-3.8是一类具有低毒性、高转染率和抗血清能力的潜在基因载体。
Shakhbazau等研究了G 3.0-G 6.O &PAMAM、G 4.O OH、G 4.0-25 %和G 4.0-50 %及其与基因pGFP的复合物对 HEK 293 T细胞和成人间质干细胞(hMSC)的转染效率。实验表明G 4.0 &PAMAM对HEK 293 T细胞的转染效率最高,为(78&6.8)%(mean&S.D.);G 3.0 &PAMAM转染效率次之,G 4.0-OH的转染效率最低(为0)。G 4.0/pGFP复合物对HEK 293 T细胞的转染效率亦最高(为80 %),而G 4.O PAMAM的修饰物(G 4.0-OH、G 4.O-25 %和G 4.O-50 %)无法转染hMSC。
&&& PAMAM树状大分子已被广泛用于生物医学领域的各个方面,且表现出了极其诱人的发展前景,如作为药物、基因、疫苗的载体时,可用于药物缓释以及靶向释药;还可用于体外诊断、体外基因转移、基因治疗、核磁成像等方面。在其它领域,PAMAM大分子可被用作表面活性剂、稳定剂、絮凝剂、催化剂载体.且由于其是一种典型的纳米材料,在电子传感器、纳米复合物、分子模板方面也具有很好的应用价值。虽然其在生物医学领域方面已表现出了很好的应用前景,但是还是有些问题亟待解决。笔者结合自身的研究情况,对其发展现状提出了以下几点看法:(1) 因在合成中使用了过量的乙二胺,而乙二胺在提纯过程中很难被完全除去,影响了产物的纯度,难以被工业化生产,故仍需对其制备工艺继续研究,以期能寻找到简便高效的提纯方法。若采用收敛法合成的话,虽可简化其提纯步骤,但是相对发散法来说,其反应次数要多很多,且产率也较低。(2) 由于其整代含有大量的氨基基团,在生理pH值下易质子化带正电,具有一定的细胞毒性和溶血毒性.且载药量不高,故需对其进行表面修饰后再进行载药,以期降低其细胞毒性和提高其载药量。(3) 对载体携带药物如何进入细胞的机制尚在研究之中。虽然 PAMAM大分子尚有以上不足,但在药物和基因载体、基因治疗、核磁成像等生物医学领域方面已表现出了极好的应用前景,是一类非常有前途的生物大分子材料。}

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