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新生儿脐带低位结扎体会
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分娩时的脐带并发症及其防治
脐带是连接于胎儿与胎盘之间条状索结构,长约40-60cm,粗约1.5-2.0cm,含一脐静脉、两条脐动脉,血管周围为华通氏胶,通过脐血管将氧及营养物质送入胎儿体内,同时又将胎儿产生的二氧化碳及代谢物质自脐血管经胎盘渗出体外由母体排出.在分娩期若脐带血管受压,血管受阻,或因其他因素使胎儿循环发生障碍,可致胎儿窘迫或国产儿死亡.
作者单位：
上海市浦东医院妇产科,上海浦东新区,201399
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经尾静脉注射移植人脐带间充质干细胞治疗大鼠缺血性脑卒中的实验研究
目的:体外培养原代人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells，hUMSCs)，并对其进行传代扩增，观察及鉴定其生物学特性，经尾静脉注射移植hUMSCs治疗缺血性脑卒中，探讨其作用机理并且提供理论依据及实验基础。　　方法:取足月妊娠健康新生儿脐带，PBS充分冲洗，剔除脐带血管及羊膜，将华通胶（Wharton's jelly）剪碎至1mm3大小，将组织植入培养皿中，在含有10％胎牛血清(fetal bovine senun，FBS)、10ng/ml碱性成纤维生长因子的DMEM/F12中培养，观察细胞形态变化，细胞融合至80％～90％后原代细胞培养完成，进行消化传代。　　收集P5代细胞，流式细胞仪检测细胞表面表型，包括FITC-CD29、FITC-CD44、FITC-CD34、FITC-CD45、FITC-CD105、CD106、FITC-HLA-DR等，并以FITC标记的二抗IgG作为同型对照。　　动物模型:选取左侧大脑中动脉栓塞再灌注模型(Middle CerebralArtery Occlusion，MCAO)，选取重量250～2809之间的雄性成年SD大鼠作为实验动物，待麻醉后取颈部正中切口，从颈总动脉结扎远端插入0.26mm尼龙线头约1.8cm，末端置于左侧大脑中动脉开口处，2小时后拔出尼龙线再灌注，同时设立对照组，对照组不插入尼龙线。术后24小时行改良神经功能评分(modified neurological severityscore，mNSS)，并进行MRI检查及TTC染色，观察梗死的情况。选取mNSS评分在7～12分的大鼠随机分组:(1)hUMSCs移植组n=17，细胞移植量3×106;(2)磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline，PBS)对照组，n=13。　　造模后24小时进行移植，经大鼠尾静脉注入CM-Dil标记的hUMSCs细胞悬液，术后1、7、14、21、28天对所有大鼠进行mNss评分，并将大鼠处死，行全脑连续冰冻切片，检测CM-Dil标记的移植细胞在缺血梗死脑组织中存活情况。采用SPSS统计学软件对实验数据进行统计分析。　　结果:组织块接种5天左右可见少量梭型成纤维样细胞爬出，7天可见小细胞集落形成，12至14天细胞可见大量生长，达到90％汇合程度，原代细胞培养完成。P1代细胞按1∶1细胞传代，以后细胞可根据细胞数量1∶2～1∶3传代。传代后数十分钟后可见细胞迅速贴壁，2至3天可见细胞80～90％左右达到融合，并可见细胞呈旋涡状生长。　　流式细胞检测显示细胞强表达表达CD29、CD44、CD105，不表达CD34、CD46、CD106及HLA-DR。　　MCAO移植后神经功能评分证明PBS组大鼠在移植后1至14天主要在反应性、平衡感较MSC组差，神经功能评分有统计学差异(P＜0.05)，而14至28d神经功能评分未见明显差异(P＞0.05)。实验组移植后7天行大鼠大脑冰冻切片，能在缺血区域找到红色荧光标记的移植细胞。　　结论:本实验证实了人间充质干细胞在脐带中含量丰富，且能在体外进行分离及大规模扩增培养，经尾静脉移植后能在大鼠脑内存活，并改善MCAO大鼠的神经功能。
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40 Hz听觉稳态诱发反应电位指数对静脉全麻诱导镇静水平的评价作用
选择听力正常(ASA Ⅰ级)、择期行腹腔镜胆囊切除术的患者30例,麻醉时采用咪哒唑仑与异丙酚静脉联合诱导,每隔1 min顺次记录脑电双频指数(BIS)、40 Hz听觉稳态诱发反应电位指数(40 Hz ASSRindex)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和Ramsay镇静评分,取不同镇静深度下的数据进行统计分析.结果显示,患者意识消失时,BIS降至60以下,40 Hz ASSR index降至20以下,与意识消失前相比,P均＜0.05;40 Hz ASSRindex的变化较BIS快,P＜0.05;40 Hz ASSR index和BIS与Ramsay镇静评分呈正相关,r分别为0.787和0.793,P均＜0.01.认为40 Hz ASSR index可以反映患者镇静水平.
作者单位：
首都医科大学附属北京同仁医院,北京,100730
北京易飞华通科技开发有限公司
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