folin吴宪法测血糖浓度测定实验报告实验中如果a值超过百分之百怎么办

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是血糖实际上比较低而已。如果您觉得正确或者采纳的话,麻烦给我好评哦,谢谢。
血液中的糖称为血糖,绝大多数情况下都是葡萄糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖,所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。
基本信息...
大家还关注一,酪蛋白的制备
等电点沉淀(选择性沉淀)
利用蛋白质在等电点时溶解度最低的性质。
调节溶液到蛋白质等电点时,可以使蛋白质溶解度最低,但是并不意味着蛋白质会沉淀出来。
40℃水浴预热10分钟(HAC缓冲液同时 预热)用滴管加入HAC缓冲液约2ml (pH4.8)离心,3000转/分,15分钟
用4ml蒸馏水洗涤离心, 3000转/分,15分钟
95%乙醇洗涤离心,
2500转/分,10分钟
乙醚2ml洗涤离心,
2500转/分,10分钟
0.1NNaOH2ml
加水至10ml
蒸馏水洗涤离心:出去沉淀中的可溶部分
95%乙醇洗涤离心,2500转/分,10分钟:除去沉淀中的脂类物质
乙醚2ml洗涤离心,2500转/分,10分钟:脱水
0.1NNaOH2ml加水至10ml:酪蛋白是酸性蛋白质,溶解于碱性溶液中,方便下次双缩脲法测定
二,分光光度计的使用
“方式设定”键(MODE):用于设置测试方式
“100%T/0ABS”键:用于自动调整100.0%T(100.0透射比)或0ABS(零吸光度)
“0%T”键:用于自动调整零透射比
“波长设置”旋钮:用于设置分析波长
① 打开电源开关,使仪器预热20分钟
② 用“波长设置”按钮将波长设置在您将要使用的分析波长位置上
③ 打开样品室盖,将挡光体插入比色皿架,并将其推或拉入光路
④ 盖好样品室盖,按“0%T”键调透射比零
⑤ 取出挡光体,盖好样品室盖,按“100%T”调100%透射比
⑥ 按“方式键”(MODE)将测试方式设置为吸光度方式(A)
⑦ 将参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中
⑧ 打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖
⑨ 将参比溶液推入或拉入光路中,按“100%T”调零A
⑩ 将被测溶液拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的吸光度参数
实验完成后,关闭电源,洗净比色皿,并盖好盖布
三,Folin-吴宪法测血糖
葡萄糖 + Cu(OH)2
钼蓝的蓝色深浅与葡萄糖的含量成正比
用比色法可测定血糖的含量
1给试管编号1,2,3分别为标准管、测定管、空白管
2标准管加葡萄糖溶液,测定管加无蛋白滤液,空白管加蒸馏水
3混匀,在沸水中准确煮沸8min,取出勿摇,置冷水浴中冷却
4向三支试管中2ml磷钼酸试剂,混匀放置3min
5最后向三支试管均加入3ml蒸馏水定容,摇匀
6试管摇匀后,在620nm波长下,以空白管校零点,比色
四,质粒DNA的提取
1. LB液体培养基(1L)
胰蛋白胨 10g
酵母提取物 5 g
加去离子水至800ml 搅拌,使溶质完全溶解,用NaOH调节pH值至7.0,加入去 离子水至总体积为1升,高压蒸汽灭菌20 分钟。
LB固体培养基(1L)
在上述LB液体培养基(1L)中加入琼脂粉15g
2. SolutionⅠ
50 mmol/L 葡萄糖
25 mmol/L Tris.?Cl (pH 8.0)
10 mmol/L EDTA (pH 8.0)
高压灭菌后,4℃保存备用。
3. SolutionⅡ(现用现配制)
0.2 mol/L NaOH
4. Solution Ⅲ(100 ml)
冰醋酸 11.5 ml
水 28.5 ml
配制成的溶液Ⅲ含3 mol/L钾盐、5 mol/L醋酸
(pH 4.8)。
5. 氨苄青霉素(Amp)
用无菌水配制成100 mg/ml 溶液,置-20℃冰箱保存备用。
6. 胰RNA酶
将胰RNA酶(RNA 酶 A)溶于10 mmol/L Tris.Cl (pH 7.5)、15 mmol/L NaCl中,
配成10 mg/ml的浓度,于100℃加热15分钟,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃。
7. 氯仿,乙醇 ,70%乙醇。
8.TE缓冲液
10mM Tris.HCl (pH7.4)
1mM EDTA (pH8.0
实验步骤 :
1. 用灭菌的牙签挑取单菌落放入50ml LB液体培养基(含Amp
0.1 mg/ml )中,37℃振荡培养过夜。
2. 将菌液倒入1.5 ml Eppendorf管中,12,000 rpm离心2min,去掉上清液。将EP管口朝下,用滤纸吸干水分。
3.沉淀悬于100μL SolutionI 中, 涡旋使充分悬浮,盖子打开,室温放5分钟。
4. 加入200μL SolutionII,混匀(注意动作轻),冰浴5分钟。
5. 加入1μL RNase和150μL SolutionIII,上下颠倒5-10次,冰浴10分钟。
6. 12,000rpm,离心5min,将上清移至1个新EP管中,注意所取体积。
7. 加入2倍体积无水冰乙醇混匀(注意动作轻),-20℃沉淀 10min。
8. 12,000 rpm离心3 min,加入1ml 70%乙醇振荡漂洗一次,再10000 rpm离心,去上清。
9.沉淀于-20℃保存备用。
五,PCR技术
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
1、模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
2、模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
3、引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原
料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。
1. 在0.2ml Eppendorf管内配制20μl反应体系
10x PCR buffer:
dNTPs(2.5mM):
引物1 (2uM):
引物2 (2uM):
Taq聚合酶(置于冰盒上)应最后加入,尽量减少室温接触机会。加酶时吸头深入不可过深,酶量不能过多。
2按下述循环程序进行扩增
94℃ 5分钟,1个循环; (预变性)
94℃ 30秒(变性),52℃ 30秒(退火),72℃ 30秒(延伸),30个循环;
72℃ 延伸10 分钟(延伸)。
六,a―互补与蓝白筛选
?-互补现象:
因为许多载体都带有一个β半乳糖苷酶(LacZ)基因的调控序列和头146个氨基酸的编码信息,编码?-互补肽,该肽段能与宿主编码的缺陷型?-半乳糖苷酶实现基因内互补( ?-互补)。当这种载体转入可编码?-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞中时,在异丙基-?-D硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下,宿主可同时合成这两种肽段,虽然它们各自都没有酶活性,但它们可以融为一体形成具有酶活性的蛋白质。所以称这种现象为?-互补现象。
由互补产生的?-半乳糖苷酶(LacZ)能够作用于生色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-?-D-半乳糖苷(X-gal)而产生蓝色的菌落,所以利用这个特点,在载体的该基因编码序列之间人工放入一个多克隆位点,当插入一个外源DNA片段时,会造成LacZ(?)基因的失活,破坏?-互补作用,就不能产生具有活性的酶。所以,有重组质粒的菌落为白色,而没有重组质粒的菌落为蓝色。
七,琼脂糖凝胶电泳
影响泳动率的四大因素:分子大小,电荷多少,颗粒形状,空间结构
不同构型DNA的移动速度次序为:共价闭环DNA>直线DNA>开环的双链环状DNA
1, 用胶带将洗净,干燥的制胶板的两端封好,水平放在工作台上
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这个没有什么后果的
 流鼻血的原因及症治的方法
  患者平时应注意在饮食上,多选择一些“清肺凉血”类食物,特别是在夏季更应如此。药物以具有能杀灭清除内外毒,清凉血热,清除肺内燥火功...
不可能血练出来的 灵媒和主法宝不一致是不能血练的 所以所谓的放XX法宝灵媒 就有一定几率血出XX法宝是不可能的
血液中的糖称为血糖,绝大多数情况下都是葡萄糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖,所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。
基本信息...
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