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地高辛(DIG)产品选择指南――选择检测方法_机械百科_中国百科网
地高辛(DIG)产品选择指南――选择检测方法
    &&&&&&&&地高辛(DIG)产品选择指南--选择检测方法&&&&&&&& &&&&&&&&检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测,我们通常使用碱性磷酸酶(AP)耦联的抗体,采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中,我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测,NBT/BCIP用于显色法检测。同时,对于膜杂交中的化学发光信号的检测,建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 &&&&&&&&检测底物 &&&&&&&&即用型CDP-Star 碱性磷酸酶作用于CDP-Star底物,产生的光信号被X胶片(例如:Lumi-Film)曝光或是图像设备采集。与CSPD相比较,CDP-Star的主要特点在于光信号产生的速度更快(10倍于CSPD)同时强度更强,可大量缩短曝光时间。其信号的释放可以持续大概两天的时间,因此可以进行多次曝光。化学发光的底物仅仅适用于尼龙膜。 &&&&&&&&即用型CSPD &&&&&&&&碱性磷酸酶作用于CSPD底物,产生的光信号可被X胶片(例如:Lumi-Film) 曝光或是图像设备采集。由于其同样具有持续的发光过程,因此也可以进行多次曝光。在尼龙膜上使用CSPD或CDP-Star底物的杂交,还可进行探针的拨离和重探。 &&&&&&&& NBT/BCIP
使用类似NBT/BCIP显色底物的好处就在于,检测的过程中不需要X胶片,既可以使用尼龙膜也可以是使用硝化纤维素膜。然而,如果想要获得高灵敏度的检测结果,可能就需要较长的时间了(几个小时)。这种方法也有其不足之处:首先这种方法只能一次性获得信号,不能多次检测;在探针拨离前,需要使用二甲基甲酰胺先将膜上沉淀的颜色去除。 &&&&&&&&& &&&&&&&&其他的底物和抗体 &&&&&&&&在整个DIG系统中,还有其他的一些底物和多种荧光抗体,例如Fast Red Tablets, BM Purple, HNPP Fluorescent Detection Set 和DAB POD Substrate ;供不同研究的需要。 &&&&&&&&& & &&&&&&&&检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测,我们通常使用碱性磷酸酶(AP)耦联的抗体,采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中,我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测,NBT/BCIP用于显色法检测。同时,对于膜杂交中的化学发光信号的检测,建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 &&&&&&&&检测底物 &&&&&&&&即用型CDP-Star 碱性磷酸酶作用于CDP-Star底物,产生的光信号被X胶片(例如:Lumi-Film)曝光或是图像设备采集。与CSPD相比较,CDP-Star的主要特点在于光信号产生的速度更快(10倍于CSPD)同时强度更强,可大量缩短曝光时间。其信号的释放可以持续大概两天的时间,因此可以进行多次曝光。化学发光的底物仅仅适用于尼龙膜。
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DIG标记及检测Kit I
DIG标记及检测 Kit II
12LR;24DR 
DIG高效DNA标记及检测Starter Kit 1
DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit 1:Kit for color detection with NBT/BCIP
Roche公司现为用户提供一种新的DIG标记及检测试盒DIG High Prime DNA Labeling and Detection Kit I。与原有的DIG DNA Labeling and Detection kit(Cat.No.1093657)比较,本产品有以下特点:
●能对10&10cm印迹膜作12个标记反应及24个显色检测反应,是DIG DNA Labeling and Detection Kit(Cat.No.1093657)份量的一半,所以特别适合初用者及需处理较少量样品的用户使用。
●试剂盒采用的是DIG高效标记试剂(Cat.No.1585606),其标记效率是标准DIG随机引物标记法的3-10倍,而且预混了标记需要的所有试剂,即开即用,令操作更简单和方便。
●试剂盒中还包括了DIG定量/对照试纸条,令您能在30分钟内只用小量试剂便可估计DIG标记探针的浓度,方便您取得理想的信噪比。
●用于显色的NBT/BCIP底物为预混的浓缩度,而封闭液则以10倍浓度形式供应,简化了操作程序。
Kit:1 kit (12 labeling reactions and 24 detection reactions)
DIG高效DNA标记及检测StarterKit 1 说明书
DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I
Application
DIG-High Prime labeled probes can be used in Southern-, northern- and dot-blot analysis, as well as colony and plaque hybridizations. This kit offers random-primed labeling of DNA templates with DIG-11-dUTP, alkali-labile, and color detection of the DIG-labeled hybrids. This kit was assembled with convenience in mind, offering a ready-made blocking solution, combined stock solution of NBT/ BCIP, and DIG Easy Hyb granules. The DIG-High Prime mixture includes stabilized Klenow enzyme, nucleotides, primers, and reaction buffer, all in one convenient reagent.
The High Prime method of labeling offers many benefits. Plasmid, cosmid, and lambda phage DNA have all been used as templates. We have achieved equal efficiency when labeling 10 ng to 3 &g of template DNA, which may be linear or supercoiled.
Product Description
Sensitivity and specificity: The standard assay uses 1 &g of linearized pBR328. It is usual to expect 0.8 &g labeled DNA after 1 hour of labeling, and 2.3 &g labeled DNA after a 20-hour reaction. In a dot-blot hybridization, 0.1&pg of homologous DNA is detectable after a 16-hour color development (probe concentrations at 20 ng/ml). A single-copy human gene (tPA) is detectable in a Southern blot, loading 1 &g of digested placenta DNA.
1.&&&&&& DIG-High Prime, 5x conc., 50 &l
2.&&&&&& DIG-labeled Control DNA, 20 &l, (5 &g/ml), pBR328 (linearized with Bam HI)
3.&&&&&& DNA Dilution Buffer, 3 x 1 ml
4.&&&&&& Anti-digoxigenin-AP Conjugate, 100 &l
5.&&&&&& NBT/BCIP Stock Solution, conc., 6 x 1 ml
6.&&&&&& Blocking Solution, 10x conc., 4 x 100 ml
DIG Easy Hyb Granules, 4 x 100 ml
DIG高效DNA标记及检测Starter Kit II说明书
DIG高效DNA标记及检测Starter Kit II
DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit II:Kit for chemiluminescent detection with CSPD, ready-to-use
对于需要使用化学发光法检测的用户,我公司现提供了此新的DIG标记及检测试剂盒。
与上述的StarterKit I不同,此新的StarterKit II所含的底物为CSPD,但它同样有以下特点:
●能对10&10cm印迹膜作12个标记反应及24个检测反应,所以特别适合初用者及需处理较少量样品的用户使用。
●包含DIG高效标记试剂,令标记效率更高,操作更方便。
●包括DIG定量/对照试纸条及NBT/BCIP浓缩液,令您更易估计探针浓度,从而取得理想的信噪比。
Kit:1 kit (12 labeling reactions and 24 detection reactions)
DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit II
Application
DIG-High Prime labeled probes can be used in northern, Southern-, and dot-blot analysis, as well as colony and plaque hybridizations. This kit offers random-primed labeling of DNA templates with DIG-11-dUTP, alkali-labile, and chemiluminescent detection of the DIG-labeled hybrids. This kit was assembled with convenience in mind, offering ready-to-use CSPD supplied with a dripping device for easy application, ready-made blocking solution, and DIG Easy Hyb granules. The DIG-High Prime mixture includes stabilized Klenow enzyme, nucleotides, primers, and reaction buffer, all in one convenient reagent.
The High Prime method of labeling offers many benefits: in addition to the optimized labeling efficiency, plasmid, cosmid, and phage DNA, linearized or supercoiled can be used as templates, yielding the same labeling efficiency.
Product Description
Sensitivity and specificity: Standard assay uses 1 &g of linearized pBR328. It is usual to expect 0.8 &g labeled DNA after 1 h of labeling, and 2.3 &g labeled DNA after 20 h reaction. In a dot blot hybridization, 0.03 pg of homologous DNA is detectable with chemiluminescence (probe concentrations at 20 ng/ml). A single copy human gene (t-PA) is detectable in a Southern blot, loading 1 &g of digested placenta DNA.
1.&&&&&& DIG-High Prime, 5x conc., 50 &l
2.&&&&&& DIG-labeled Control DNA, 20 &l, (5 &g/ml) pBR328 (linearized with Bam HI)
3.&&&&&& DNA Dilution Buffer, 3 x 1 ml
4.&&&&&& Anti-digoxigenin-AP Conjugate, 50 &l
5.&&&&&& CSPD, ready-to-use, 50 ml
6.&&&&&& Blocking Solution, 10x conc., 4 x 100 ml
7.&&&&&& DIG Easy Hyb Granules, 4 x 100 ml&&
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3秒自动关闭窗口高效DNA地高辛标记和检测试剂盒I
品牌Roche型号规格12次标记和24次检测/盒
所在地:上海市闵行区都庄路4226号福克斯商务大厦3幢2楼201室
联系电话:023- 请说明来自顺企网
联系人:李小清
在线咨询:
180.173.155.38
更新时间: 17:23:49
产品编号:
高效dna地高辛标记和检测试剂盒i
厂家:roche罗氏
品牌:roche
市场价格:¥4750
订购咨询:021- 客服qq:
产品应用:
dna/rna印迹、点杂交、原位杂交等
中国俗称:
地高辛标记dna检测试剂盒
中国简称:
dig标记dna检测试剂盒
注册品牌:
生产厂家:
订购货号:
保存温度:
规格型号:
12次标记和24次检测/盒
产品种类:
产品英文名称:dig high prime dna labeling and detection starter kit i for color detection with nbt/bcip
产品中文名称:高效dna地高辛标记检测试剂盒i(第一代试剂盒采用显色检测方法,以nbt/bcip作为发光底物)
罗氏roche dig high prime dna labeling and detection starter kit i
(罗氏 roche& 高效dna地高辛标记检测试剂盒i )检测原理
高效dna地高辛标记检测试剂盒i是用地高辛(地高辛:英文名digoxigenin,简称dig;又称异羟基洋地黄毒甙元,是一种类固醇半抗原分子)标记的dna探针,应用于分子杂交和随后的显色反应检测。罗氏公司的该试剂盒检测主要分三阶段进行:
1. dna标记:根据随机引物标记技术,生成dig地高辛标记的dna探针。
2. 杂交:按照标准杂交方法进行,将地高辛标记的dna探针用于核酸点杂交,可选择带正电的尼龙膜或纯硝酸膜作为杂交膜。
3. 免疫学检测:首先将标记有ap的地高辛抗体与杂交探针免疫结合;通过检测碱性磷酸酶与nbt/bcip底物进行显色反应的数值,从而达到免疫检测的目的。
罗氏 roche& 高效dna地高辛标记检测试剂盒i
罗氏应用科学部(roche applied science)是最早致力于向用户提供非放射标记技术的公司之一,让更多的科研工作者们可以避免使用危险的放射性同位素。自1995年地高辛dig high prime dna labeling and detection starter kit i(第一代)产品上市以来,尽管有定量pcr技术的应用,dig系统仍然是非放射性高效地高辛标记检测技术的首选,被广泛地应用于各种膜杂交及原位杂交技 术中。
(dig-labeled)地高辛标记的dna探针可应用于:
1、所有类型的滤膜杂交。
2、基因组dna中的单个拷贝基因的检测,甚至可以检测到高度复杂的dna基因组的生物体,例如:人类、大麦、小麦来源的生物材料。
地高辛标记的dna样品材料:
1、100bp以上的dna片段
2、线性质粒、柯斯质粒(cosmid)和&dna
3、超螺旋dna(supercoiled dna)
产品英文名称:dig high prime dna labling and detection starter
产品中文名称:地高辛标记dna和检测试剂盒
罗氏 roche& 高效dna地高辛标记检测试剂盒i
地高辛标记dna和检测试剂盒 产品介绍:
高效地高辛(dig)标记探针可应用于rna杂交,dna杂交,点杂交分析等,同时也可用于克隆和噬菌斑杂交。试剂盒使用dig-11-dutp(碱不稳 定性)随机引物标记dna模板并对dig标记杂交物进行显色检测。试剂盒备有结合储存液nbt/ bcip,现有的封闭液和dig易杂交颗粒。高效dig混合物包含稳定klenow enzyme(克列诺酶),核苷酸,引物和反应缓冲液。
罗氏 roche& 高效dna地高辛标记检测试剂盒i 检测原理: 高效dna地高辛标记检测试剂盒i是用地高辛(digoxigenin,简称dig;又称异羟基洋地黄毒甙元,是一种类固醇半抗原分子)标记的dna探针,应用于分子杂交和随后的显色反应检测。罗氏公司的该试剂盒检测主要分三阶段进行:1)dna标记:根据随机引物标记技术,生成dig地高辛标记的dna探针。2)杂交:按照标准杂交方法进行,将地高辛标记的dna探针用于核酸点杂交,可选择带正电的尼龙膜或纯硝酸纤维素膜作为杂交膜。 3)免疫学检测:首先将标记有ap的地高辛抗体与杂交探针免疫结合;通过检测碱性磷酸酶与nbt/bcip底物进行显色反应的数值,从而达到免疫检测的目的。
罗氏 roche& 高效dna地高辛标记检测试剂盒i 灵敏度和特异性:标准检测使用 1&g线状pbr328。通常需要0.8&g标记dna(标记1小时后)和 2.3&g标记dna(20小时反应后)。在点杂交过程中,16小时显色后(探针浓度20ng/ml)可以检测到0.1pg同源dna。dna印迹中,加 载1&g消化胎盘dna可检测到单拷贝基因(tpa)。
地高辛引物标记优点:质粒、柯斯质粒和&噬菌体dna均可作为模板,模板dna(线状或超螺旋)标记10ng-3&g引物都具有同样的标记效率。
罗氏 roche& 高效dna地高辛标记检测试剂盒i 产品组成成份:
& dig-high prime, 5x conc., 50 &l
& dig-labeled control dna, 20 &l, (5 &g/ml) pbr328 (linearized with bam hi)
& dna dilution buffer, 3 x 1 ml
& anti-digoxigenin-ap conjugate, 100 &l
& nbt/bcip stock solution, conc., 6 x 1 ml
& blocking solution, 10x conc., 4 x 100 ml
& dig easy hyb granules, 4 x 100 ml
罗氏地高辛标记dna和检测试剂盒(第一代,nbt/bcip显色检测)产品说明书
注册品牌 roche,订购货号 ,
罗氏地高辛标记dna和检测试剂盒(第一代,nbt/bcip显色检测)
roche罗氏高效dna地高辛标记检测试剂盒i说明书 请向上海华雅思创生物公司索要
上海华雅思创生物在中国代理销售的高效dna地高辛标记检测试剂盒i(第一代)是从欧洲进口的,由世界著名的roche罗氏公司生产,由于 roche罗氏公司在非放射性地高辛标记检测领域具有世界一流的技术和产品,因此我们选择此款高效dna地高辛标记检测试剂盒i(第一代)产品推荐给中国 广大科学研究工作者。在上海仓库备有少量现货,并严格按照产品的最佳储存条件进行储存与管理,我们的一贯宗旨是:更用心地为 中国广大科学研究工作者提供更安全、更放心、更便捷的服务。在中国地区,roche罗氏中国代理商上海华雅思创生物起着重要的传递科学价值,服务科学研 究。
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roche作为全球最大的生物技术公司,罗氏在抗肿瘤、抗病毒、炎症、代谢和中枢神经系统等领域拥有一流的差异化药物。罗氏在全球体外诊断和基于组 织的肿瘤诊断市场中享有领导地位,同时也是糖尿病管理领域的先驱者。roche公司生产的dig标记dna检测试剂盒在dna、rna和核酸点杂交等实验 应用中有出色表现,特别是第二代试剂盒使用cspd化学发光检测具有更高的准确度和灵敏性。上海华雅思创生物技术有限公司在中国代理销售roche公司生 产的地高辛标记dna检测试剂盒,产品保证原装进口并按说明材料严格运输和存储,发货迅速,售后保障。同时公司还提供相产品的价格、性能和使用说明等信息 咨询,我们秉承卓越服务理念为中国广大科研工作者提供最优质的产品和服务。
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非放射性核酸标记和检测
地高辛DNA标记(DIG DNA Labeling Kit)
地高辛DNA标记试剂盒是用来合成带DIG标记的DNA探针。所谓探针,实质上是一段已知的基因片段,应用这一基因片段即可与待测样品杂交。如果靶基因和探针的核苷酸序列相同,就可按碱基配对原则进行核酸分子杂交,从而达到检查样品基因的目的。
DIG DNA标记试剂盒:通过PCR反应将地高辛-dUTP 掺入DNA探针的快速标记方法,通过加入cDNA 模板和引物合,将DIG-dUTP掺入到PCR产物中,可以合成高灵敏度的cDNA探针(0.1-1ug/每次反应) ,标记后的探针可于-20℃稳定存放12个月。本试剂盒提供除模板和引物外的PCR所需的所有试剂,包含
Beta-Actin 对照cDNA和引物。本试剂盒DIG标记混合物中标记核苷酸的浓度,可以确保在与DIG标记的探针杂交后,能够在基因组的核酸印迹膜中检测到单拷贝基因。可用于: ,,等。更多详细信息:
随机引物法地高辛标记试剂盒:
随机引物法地高辛标记试剂盒
是基于随机引物的DNA标记方法。在此方法中,随机引物退火到变性了的模板DNA上,随后在DIG-dUTP存在的情况下,通过Klenow片段(3’→5’
exo–)DNA聚合酶的作用,合成其互补的DNA链。DIG标记的DNA探针可以使用任何抗地高辛-碱性磷酸酶结合物检测系统进行检测。地高辛-dUTP在Klenow酶的作用下,经随机引物引发,可掺入到新合成的DNA分子中,从而完成DNA探针的标记。在延伸反应中,每20-25个核苷可有一个地高辛-dUTP分子掺入到新合成的DNA链中。本试剂盒包含合成DNA探针所需的除DNA模板外的所有试剂。并包含Beta-Actin 对照DNA和
标记的对照DNA标准膜条。标记后的探针可于-20℃稳定存放12个月,可用于多种DNA模板:线性化质粒、cosmids、超螺旋DNA、DNA片段等。可用于: ,,等。更多详细信息:
地高辛标记
DIG DNA标记试剂盒
(PCR, 10T)
随机引物法DIG标记试剂盒 (10T)
地高辛标记和杂交检测试剂盒I (NBT-BCIP法,10次标记+20次检测)
¥3,680.00
地高辛标记和杂交检测试剂盒II (化学发光法,10次标记+20次检测)
¥3,680.00
地高辛核酸检测试剂盒(DIG Nucleic acid Detection Kit )
地高辛杂交检测试剂盒I (NBT/BCIP法):是通过DIG-AP 酶结合物和化学显色底物NBT/BCIP检测核酸探针杂交信号,可以在1mg人基因组DNA中检测到单拷贝基因。 所有试剂足够检测10 Blots (约800-1000cm2 膜)。应用领域:;,;
;。本品不含和杂交膜,需要另外购买。详细信息请查看说明书。
地高辛杂交检测试剂盒II (CDP-STAR法):是通过DIG-AP 酶结合物和化学发光底物CDP-STAR检测核酸探针杂交信号,可以在1mg人基因组DNA中检测到单拷贝基因。 所有试剂足够检测10 Blots (约800-1000cm2 膜)。应用领域:;,; ;。本品不含和杂交膜,需要另外购买。详细信息请查看说明书。
地高辛核酸检测试剂盒
地高辛杂交检测试剂盒I (NBT-BCIP法)
¥1,280.00
地高辛杂交检测试剂盒II (化学发光法)
¥1,280.00
地高辛标记和杂交检测试剂盒I (NBT-BCIP法,10次标记+20次检测)
¥3,680.00
地高辛标记和杂交检测试剂盒II (化学发光法,10次标记+20次检测)
¥3,680.00
生物素核酸标记与检测(BIOTIN DNA Labeling
and Detection Kit)
原理与地高辛核酸标记与检测完全相同
¥1,180.00
随机引物法BIOTIN标记试剂盒
¥1,180.00
NBT-BCIP法
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生物素杂交检测试剂盒II
化学发光法
¥1,280.00
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