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报春花的花色表现为白色(只含白色素)和黄色(含黄色锦葵色素)，这对相对性状由两对等位基因(A和a，B和b)共同控制，显性基因A控制以白色素前体物合成黄色锦葵色素的代谢过程，但当显性基因B存在时可抑制其表达(生化机制如下图所示)。
据此回答：(1)开黄花的报春花植株的基因型可能是___________。(2)现有AABB、aaBB和aabb三个纯种白色报春花品种，为了培育出稳定遗传的黄色品种，某同学设计了如下程序：Ⅰ．选择基因型为_____________的两个品种杂交，得到F1种子；Ⅱ．F1种子种下得F1植株，F1随机交配得F2种子；Ⅲ．F2种子种下得F2植株，F2自交，然后选择开黄花植株的种子混合留种；Ⅳ．重复步骤Ⅲ若干代，直到后代不出现性状分离为止。①．补充完善以上程序。②．F1植株能产生比例相等的四种配子，原因是____________。③．报春花的雌蕊与雄蕊不等长，自然状态下可以进行异花传粉。为了让F2自交，应该怎样处理？________________。④．F2植株中开黄花的占______，在这些开黄花的植株上所结的种子中黄色纯合子占_______。⑤．有同学认为这不是一个最佳方案，请你在原方案的基础上进行修改，以缩短育种年限。你的方案：___________________________________。
题型：读图填空题难度：偏难来源：吉林省模拟题
(1)AAbb或Aabb(2)Ⅰ．AABB和aabb&& ②．A和a、B和b分别位于3号和1号染色体上，产生配子时，非同源染色体上的非等位基因自由组合&& ③．从花蕾期开始套袋直到受精结束&& ④．3/16&&& 1/2⑤．方案一：对F2中开黄花植株分开留种和播种，后代不出现性状分离的即为纯种方案二：取F1的花药进行离体培养，用秋水仙素处理幼苗，成熟后开黄花的植株即为纯种方案三：对F2中开黄花的植株进行测交，判断是否纯合，对纯合的进行标记，下一年再留种。(任选一种方案)
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据魔方格专家权威分析，试题“报春花的花色表现为白色(只含白色素)和黄色(含黄色锦葵色素)，这..”主要考查你对&&自由组合定律，基因型和表现型&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
现在没空？点击收藏，以后再看。
因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
自由组合定律基因型和表现型
&基因的自由组合定律与应用：1．自由组合定律：控制不同性状的遗传因子的分离和组合是互不干扰的；在形成配子时，决定同一性状的成对的遗传因子彼此分离，决定不同性状的遗传因子自由组合。 2. 实质 (1)位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的。 (2)在减数分裂过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。3．适用条件 (1)有性生殖的真核生物。(2)细胞核内染色体上的基因。(3)两对或两对以上位于非同源染色体上的非等位基因。 4．细胞学基础：基因的自由组合定律发生在减数第一次分裂后期。5．应用 (l)指导杂交育种，把优良性状重组在一起。 (2)为遗传病的预测和诊断提供理沦依据。 两对相对性状的杂交实验：1．提出问题——纯合亲本的杂交实验和F1的自交实验(1)发现者：孟德尔。 (2)图解： 2．作出假设——对自由组合现象的解释(1)两对相对性状（黄与绿，圆与皱）由两对遗传因子（Y与y，R与r）控制。(2)两对相对性状都符合分离定律的比，即3:1，黄：绿=3：1，圆：皱=3：1。 (3)F1产生配子时成对的遗传因子分离，不同对的遗传因子自由组合。 (4)F1产生雌雄配子各4种，YR：Yr：yR：yr=1:1:1:1。(5)受精时雌雄配子随机结合。 (6)F2的表现型有4种，其中两种亲本类型（黄圆和绿皱），两种新组合类型（黄皱与绿圆）。黄圆：黄皱：绿圆：绿皱=9：3：3：1 (7)F2的基因型有16种组合方式，有9种基因型。3.对自由组合现象解释的验证 (1)方法：测交。(2)预测过程： (3)实验结果：正、反交结果与理论预测相符，说明对自由组合现象的解释是正确的。 自由组合类遗传中的特例分析9：3：3：1的变形：9：3：3：1是独立遗传的两对相对性状自由组合时出现的表现型比例，题干中如果出现附加条件，则可能出现9：3：4、9：6：1、15：1、9：7等一系列的特殊分离比。特殊条件下的比例关系总结如下：
注：利用“合并同类项”巧解特殊分离比 (1)看后代可能的配子组合，若组合方式是16种，不管以什么样的比例呈现，都符合基因自由组合定律。(2)写出正常的分离比9：3：3：1。(3)对照题中所给信息进行归类，若后代分离比为 9:7，则为9：(3：3：1)，即7是后三种合并的结果；若后代分离比为9：6：1，则为9：(3：3)：1；若后代分离比为15:1 则为(9：3：3)：1等。 表解基因的分离定律和自由组合定律的不同：
易错点拨：&1、F2共有16种组合方式，9种基因型，4种表现型，其中双显（黄圆）：一显一隐（黄皱）：一隐一显（绿圆）：双隐（绿皱）=9：3：3：1。F2中纯合子4种，即YYRR、YYrr、yyRR、yyrr，各占总数的 1/16；只有一对基因杂合的杂合子4种，即YyRR、Yyrr、 YYRr、VyRr，各占总数的2/16；两对基因都杂合的杂合子1种，即YyRr，占总数的4/16。 2、F2中双亲类型（Y_R_十yyrr）占10/16。重组类型占6/16(3/16Y_rr+3/16yyR_)。3、 减数分裂时发生自由组合的是非同源染色体上的非等位基因，而不是所有的非等位基因。同源染色体上的非等位基因，则不遵循自由组合定律。&4、用分离定律解决自由组合问题 （1）基因原理分离定律是自由组合定律的基础。 （2）解题思路首先将自由组合定律问题转化为若干个分离定律问题。在独立遗传的情况下，有几对基因就可以分解为几个分离定律问题。如AaBb×Aabb可分解为：Aa× Aa，Bb×bb。然后，按分离定律进行逐一分析。最后，将获得的结果进行综合，得到正确答案。 知识拓展：
1、两对相对性状杂交试验中的有关结论（1）两对相对性状由两对等位基因控制，且两对等位基因分别位于两对同源染色体。（2）F1减数分裂产生配子时，等位基因一定分离，非等位基因（位于非同源染色体上的非等位基因）自由组合，且同时发生。（3）F2中有16种组合方式，9种基因型，4种表现型，比例9：3：3：1。2、自由组合定律的实质：减I分裂后期等位基因分离，非等位基因自由组合。3、孟德尔成功的原因分析 (1)正确选择实验材料豌豆适合作杂交实验材料酌优点有：①具有稳定的、易于区分的相对性状。 ②严格自花传粉，闭花受粉，在自然状态下均是纯种。③花比较大，易于做人工杂交实验。(2)精心设计实验程序 ①采取单一变量分析法，即分别观察和分析在一个时期内的一对相对性状的差异，最大限度地排除各种复杂因素的干扰。 ②遵循了由简单到复杂的原则，即先研究一对相对性状的遗传，再研究多对相对性状的遗传，由此从数学统计中发现遗传规律。 ③运用了严密的假说—演绎法。针对发现的问题提出假说，并设计实验验证假说，在不同的杂交实验中分别验证假说的正确性，从而使假说变成普遍的规律。（3）精确的统计分析通过对一对相对性状、两对相对性状杂交实验中子代出现的性状进行分类、计数和数学归纳，找出实验显示出来的规律性，并深刻的认识到比例中所隐藏的意义和规律。（4）首创了测交的方法巧妙地设计了测交方法，证明了假说的正确性。这种以杂交子一代个体与隐性纯合子进行测交的方法，已成为遗传学分析的经典方法。 4、遗传规律的再发现(1)1909年，丹麦生物学家约翰逊把“遗传因子”叫做基因。 (2)因为孟德尔的杰出贡献，他被公认为“遗传学之父”。例& 下列哪项不是孟德尔选用豌豆作实验材料并获得成功的原因(& )A．豌豆具有稳定的、容易区分的相对性状 B．豌豆是严格闭花受粉的植物 C．用统计学的方法引入对实验结果的分析D．豌豆在杂时，母本不需去雄思路点拨：孟德尔获得成功的原因有：①正确选择实验材料；②精心设计实验程序；③精确的统计分析； ④首创了测交方法。孟德尔的杂交实验中，母本是必须去雄的。所以D选项错误。答案D 基因型和表现型：1、表现型：指生物个体表现出来的性状，如豌豆的高茎和矮茎。2、基因型：与表现型有关的基因组成，如高茎豌豆的基因型是DD或Dd，矮茎豌豆的基因型是dd。3、等位基因：控制相对性状的基因。4、纯合子：由两个基因型相同的配子结合而成的合子，再由此合子发育而成的新个体。如基因型为 AAbb、XBXB、XBY的个体都是纯合子。纯合子的基因组成中无等位基因，只能产生一种基因型的配子（雌配子或雄配子），自交后代无性状分离。&5、杂合子：由两个基因型不同的配子结合而成的合子，再由此合子发育而成的新个体。如基因型为 AaBB、AaBb的个体。杂合子的基因组成至少右一对等位基因，因此至少可形成两种类型的配子（雌配子或雄配子），自交后代出现性状分离。 表现型与基因型的相互推导：1、由亲代推断子代的基因型与表现型（正推型）
2、由子代推断亲代的基因型（逆推型）①隐性纯合突破方法：若子代出现隐性性状，则基因型一定是aa，其中一个a来自父本，另一个a来自母本。 ②后代分离比推断法
3、用配子的概率计算(1)方法：先算出亲本产生几种配子，求出每种配子产生的概率，再用相关的两种配子的概率相乘。 (2)实例：如白化病遗传，Aa×Aa1AA:2Aa:laa，父方产生A、a配子的概率各是1/2，母方产生A、a配子的概率也各是1/2，因此生一个白化病(aa)孩子的概率为1/2×1/2=1/4。3、亲代的基因型在未确定的情况下，如何求其后代某一性状发生的几率例如：一对夫妇均正常，且他们的双亲也都正常，但双方都有一白化病的兄弟，求他们婚后生白化病孩子的几率是多少？解此题分三步进行： (1)首先确定该夫妇的基因型及其几率。由前面分析可推知该夫妇是Aa的几率均为2/3，是AA的几率均为1/3。(2)假设该夫妇均为Aa，后代患病可能性为1/4。(3)最后将该夫妇均为Aa的几率2/3×2/3与假设该夫妇均为Aa情况下生白化病忠者的几率1/4相乘，其乘积1/9即为该夫妇后代中出现百化病患者的几率。 知识点拨：1、基因型相同，表现型不一定相同；表现型相同，基因型也不一定相同。表现型是基因型与环境共同作用的结果。2、显隐性关系不是绝对的，生物体内在环境和所处的外界环境的改变都会影响显性性状的表现。 常考比例：分离定律比例：3：1；自由组合比例：9：3：3：1 （1）配子类型问题& 如：AaBbCc产生的配子种类数为2×2×2=8种 （2）基因型类型&& 如：AaBbCc×AaBBCc，后代基因型数为多少？ 先分解为三个分离定律：Aa×Aa后代3种基因型（1AA：2Aa：1aa）Bb×BB后代2种基因型（1BB：1Bb）Cc×Cc后代3种基因型（1CC：2Cc：1cc）所以其杂交后代有3x2x3=18种类型。（3）表现类型问题& 如：AaBbCc×AabbCc，后代表现数为多少？先分解为三个分离定律：Aa×Aa后代2种表现型& Bb×bb后代2种表现型 Cc×Cc后代2种表现型 所以其杂交后代有2x2x2=8种表现型。（4）遗传病的基因型和表现型比例例：人类多指基因（T）对手指正常基因（t）为显性，白化基因（a）对正常肤色基因（A）为隐性，两对非等位基因遵循基因的自由组合定律遗传，一家庭中，父亲多指，母亲正常。他们有一个白化病但手指正常的孩子，则下一个孩子正常或同时患有此两种疾病的几率分别是3/8、1/8
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1077769651873928100976108577100682基因的表达
基因指导蛋白质的合成（答案）
一、遗传信息的转录
1、用概念图表示DNA与RNA在化学组成上的区别
磷酸 核糖 脱氧核糖 腺嘌呤A
DNA RNA 鸟嘌呤G
胸腺嘧啶胞嘧啶C U
2、RNA分为三种：和
3、遗传信息的转录过程：
DNA对，以氢键结合形成一条mRNA链 合成的mRNA从DNA链上释放。而后，DNA双链恢复。
4、转录的概念：在细胞核中，以的过程。
二、遗传信息的翻译
1、遗传信息的翻译过程：
(2)mRNA基酸的位置确定携带其他氨基酸的tRNA依次与mRNA的碱基互补配对，将对应氨基酸的位置确定氨基酸之间通过肽键连接形成肽链。
2为模板，以有一定氨基酸顺序的蛋白质的过程。
3、翻译的实质：将 4、遗传信息、密码子、反密码子的区别
(1)存在位置不同
遗传信息：在DNA上，是基因的脱氧核苷酸的排列顺序。
密码子：在mRNA上，是载有DNA遗传信息的mRNA上核糖核苷酸的排列顺序。
反密码子：在转运RNA上，是与密码子互补配对的三个碱基。
(2)作用不同
遗传信息：决定氨基酸的排列顺序，是间接作用。
密码子：直接控制蛋白质的氨基酸的排列顺序。
反密码子：识别并搬运由信使RNA所决定的特定的氨基酸。
三、基因指导蛋白质合成过程中的相关数量关系
DNA（基因）
氨基酸数目
有关计算的关系式可总结为：
蛋白质中肽链数+肽键数=氨基酸数=1/3mRNA碱基数=1/6基因碱基数
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【原创】表达载体的选择及构建方法
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表达载体的构建方法及步骤
一、载体的选择及如何阅读质粒图谱
目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。
一个合格质粒的组成要素：
（1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而
真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。
（2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+
（3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段
（4） P/E 启动子/增强子
（5）Terms 终止信号
（6）加 poly（A）信号可以起到稳定 mRNA 作用
选择载体主要依据构建的目的，同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点。如果构建的目
的是要表达一个特定的基因，则要选择合适的表达载体。
载体选择主要考虑下述3点：
【1】构建 DNA 重组体的目的，克隆扩增/基因表达，选择合适的克隆载体/表达载体。
【2】.载体的类型：
（1）克隆载体的克隆能力－据克隆片段大小（大选大，小选小）。如&10kb 选质粒。
（2）表达载体据受体细胞类型－原核/真核/穿梭，E.coli/哺乳类细胞表达载体。
（3）对原核表达载体应该注意：选择合适的启动子及相应的受体菌，用于表达真核蛋白质时注意克服4个困难和阅读框错位；表达天然蛋白质或融合蛋白作为相应载体的参考。
【3】载体 MCS 中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异，适应目的基因与载体易于链接，不能产生阅读框架错位。
综上所述，选用质粒（最常用）做载体的5点要求：
（1）选分子量小的质粒，即小载体（1－1.5kb）→不易损坏，在细菌里面拷贝数也多（也有大载
（2）一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束，一般 10个以上的拷贝，而严谨型质粒&10个。
（3）必需具备一个以上的酶切位点，有选择的余地；
（4）必需有易检测的标记，多是抗生素的抗性基因，不特指多位 Ampr（试一试）。
（5）满足自己的实验需求，是否需要包装病毒，是否需要加入荧光标记，是否需要加入标签蛋白，是否需要真核抗性（如Puro、G418）等等。
无论选用哪种载体，首先都要获得载体分子，然后采用适当的限制酶将载体 DNA 进行切割，获得线性载体分子，以便于与目的基因片段进行连接。
如何阅读质粒图谱
第一步：首先看 Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核/穿梭质粒）
第二步：再看筛选标记，如抗性，决定使用什么筛选标记。
（1）Ampr 水解β－内酰胺环，解除氨苄的毒性。
（2）tetr 可以阻止四环素进入细胞。
（3）camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物，使之失去毒性。
（4）neor（kanr）氨基糖苷磷酸转移酶使 G418（长那霉素衍生物）失活
（5）hygr 使潮霉素β失活。
第三步：看多克隆位点（MCS）。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些酶切位点以外有外源基因的插入，会导致某种标志基因的失活，而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。
第四步：再看外源 DNA 插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb 的外源 DNA 片段。一般来说，外源 DNA 片段越长，越难插入，越不稳定，转化效率越低。
第五步：是否含有表达系统元件，即启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体，还是要以实验目的为准绳。
第六步：启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号
（1）启动子－促进 DNA 转录的 DNA 序列，这个 DNA 区域常在基因或操纵子编码序列的上游，是 DNA 分子上可以与 RNApol 特异性结合并使之开始转录的部位，但启动子本身不被转录。
（2）增强子/沉默子－为真核基因组（包括真核病毒基因组）中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。/沉默子－负增强子，负调控序列。
（3）核糖体结合位点/起始密码/SD 序列（Rbs/AGU/SDs）：mRNA 有核糖体的两个结合位点，对于原核而言是 AUG（起始密码）和 SD 序列。
（4）转录终止序列（终止子）/翻译终止密码子：结构基因的最后一个外显子中有一个 AATAAA的保守序列，此位点 down－stream 有一段 GT 或 T 富丰区，这2部分共同构成 poly（A）加尾信号。结构基因的最后一个外显子中有一个 AATAAA 的保守序列，此位点 down－stream 有一段GT 或 T 富丰区，这2部分共同构成 poly（A）加尾信号。
质粒图谱上有的箭头顺时针有的箭头逆时针，那其实是代表两条 DNA 链，即质粒是环状双链DNA，它的启动子等在其中一条链上，而它的抗性基因在另一条链上 .根据表达宿主不同，构建时所选择的载体也会不同。
二、目的基因的获得
一般来说，目的基因的获得有三种途径：
调取基因：根据目的基因的序列，设计引物从含有目的基因的cDNA中通过PCR的方法调取目的基因，链接到克隆载体挑取单克隆进行测序，以获得想要的基因片段，这种方法相对成本较低，但是调取到的基因往往含有突变，还有不同基因的表达丰度不同，转录本比较复杂，或是基因片段很长，这些情况都很难调取到目的基因。
全基因合成：根据目的基因的DNA序列，直接设计合成目的基因。此方法准确性高，相对成本会高一些，个人操作比较困难，需要专业的合成公司完成。优点是可以合成难调取及人工改造的任何基因序列，同时可以进行密码子优化，提高目的基因在宿主内的表达量。
三、克隆构建
目前，克隆构建的方法多种多样，除了应用广泛的酶切链接以外，现在还有很多不依赖酶切位点的克隆构建方式。下面具体说一下双酶切方法构建载体的步骤。
载体pCDNA3.1
大肠杆菌菌株DH5α
限制性内切酶
质粒DNA小,大量抽提试剂盒
凝胶回收试剂盒
DNA ladder
Fermentas （2）X基因慢病毒载体的构建X基因基因由Transheep全基因合成，构建于载体PUC57中。PUC57-X基因 EcoRI/BamHI酶切结果：
酶切完成后进行胶回收2. 载体用pCDNA3.1双酶切，酶切体系如下。20ul酶切体系
37度3小时4ul
pCDNA3.1载体（500 ng/ul）1ul
10×buffer 12 ul
H2O酶切完成后胶回收（见附录）
处理好的目的片段与载体连接反应体系：6ul
PCR 酶切回收片段（约50ng/ul）1ul
酶切好的载体（约50ng/ul）2ul
ligase buffer1ul
T4ligase10ul
H2O以上连接液在16℃过夜。
转化 (感受态细胞: DH5a),具体步骤见附录转化部分。抗性: A 37℃，培养过夜
转化后X基因分别平板挑菌, 37℃ 250转/分钟摇菌14小时，PCR鉴定后，将阳性菌液送上海权阳生物技术有限公司测序。X基因慢病毒载体单克隆菌落PCR鉴定（使用载体通用引物,PCR条带大小应比实际大200bp左右）：
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( ^_^ )不错嘛~学习了~感谢楼主分享~~赞一个！
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不错,挺详细的,谢谢楼主分享啦...
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我做了很多次都没有成功，可能方法不对，学习完再去做一次试试，谢谢美女楼主！
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权阳生物基因合成ORF区，免费亚克隆，算下来不要几个钱，所以的事情都省了
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貌似应该配图的楼主有配图的版本吗？
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非常好！很有用！
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怎么没有图？？载体构建图最重要？！
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原来真没有图……我还以为是我网络问题。对！我也是想看图。刚进门菜鸟一只，急需海量知识。
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谢谢!对我很有帮助
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比较详细，赞一个
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