人EB病毒衣壳抗原IgA EB.VCA ELISA试剂盒
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人EB病毒衣壳抗原IgA EB.VCA ELISA试剂盒
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公司名称：上海贝曼生物科技发展有限公司
所&在&地：上海松江
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本公司长期经营各大国际知名品牌Elisa试剂盒 采集标本 代测等服务。价格实惠，质量有保证。详细价格请咨询在线人员。全国统一订购热线：021- 全国统一售后服务热线：021- 订货邮箱：
产品详细信息
本试剂仅供研究使用试验原理：试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知AGEs浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型塑料膜板盖 1块 半块 即用型标准品：800ng/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型生物素标记的抗AGEs抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型标本稀释液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型自备材料1． 蒸馏水。2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3． 振荡器及磁力搅拌器等。安全性1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000&g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000&g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液---1000&g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000&g离心10分钟，取上清液5、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：800 ng/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400 ng/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200 ng/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100 ng/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50 ng/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25 ng/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0 ng/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。2． 洗涤缓冲液(50&)的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案&标准品浓度(ng/ml) A 800 800 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品B 400 400 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品C 200 200 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品D 100 100 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品E 50 50 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品F 25 25 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。试剂盒性能1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2. 特异性：不与其它细胞因子反应。3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结 果 判 断 与 分 析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y)，相应的AGEs标准品浓度为横坐标(X)，做得相应的曲线，样品的AGEs含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-800ng/ml4、敏感度： 1.0 ng/ml&&
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EB病毒早期抗原IgA抗体(EB—阴性(—)IgA) EB病毒衣壳抗原IgA抗体(EB病 阳性(+)毒衣壳抗原IgA抗体)
EB病毒早期抗原IgA抗体(EB—阴性(—)IgA) EB病毒衣壳抗原IgA抗体(EB病 阳性(+)毒衣壳抗原IgA抗体)
基本信息：男
病情描述：
EB病毒早期抗原IgA抗体(EB—阴性(—)IgA) EB病毒衣壳抗原IgA抗体(EB病 阳性(+)毒衣壳抗原IgA抗体)
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擅长：回答内科及外科常见病、多发病的诊治相关问题。
EA-IgA 是EB病毒的早期抗原，说明你感染过EB病毒，但并不是一定会发玻EB病毒的感染发生率很高，唾液也是感染的其中一种途径，如果VCA-IgA 的滴度高，建议到门诊做一个鼻咽部的检查。鼻咽癌与EB病毒关系较密切
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两种检测EB病毒衣壳抗原IgA抗体的酶联免疫吸附试验试剂盒性能比较
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人EB病毒衣壳抗原IgA（EBV-VCA-IgA） 试剂盒
让ELISA实验不失败的经验&ELISA检测系统是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在操作过程中总是会出现或大或小的问题，比如说花板、假阳性、全显色、信号值比空白还低等等。下面就由我抛砖引玉地来说一下，做的经验总结：1、有的包被原可能不是蛋白，对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，我把方法扼要的列出如下：①亲和素生物素：先亲和素先包被载体，加入生物素化的DNA，这种包被方法平均、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。②小分子必需依赖和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以被其识别，所以保留抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。③脂类物质：可将其在有机溶剂（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，开盖置冰箱过液或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质天然干固在固相表面。2、应留意以下原理：因为蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附长短特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸人EB病毒衣壳抗原IgA（EBV-VCA-IgA）ELISA&试剂盒人EB病毒衣壳抗原IgA（EBV-VCA-IgA）ELISA&试剂盒附到固相载体表面。包被液的选择，一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时因为试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。详细的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下终极可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液，还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。　　3、但终极选用什么，要依据试验详细来实践。常用封锁剂有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使用（5%－10％）；还有一些稀有用到的各种动物血清（主要为了排除相似蛋白干扰）和酪蛋白等等。封锁就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲，从而排斥ELISA试剂盒后的步骤中干扰物质的再吸附。封锁：继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。4、&在洗板时会有一定误差，人为因素很大（当然有前提的用洗板机除外），洗的不彻底或串了孔，对如斯敏捷的ELISA系统可是不小的影响。由于聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的，清除残留在板孔中游离的物质，以及非特异性地吸附人EB病毒衣壳抗原IgA（EBV-VCA-IgA）ELISA&试剂盒的干扰物质，在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。洗涤板：可以说在ELISA操纵中，洗涤是最主要的枢纽技术。5、加抗体标本(和二抗)：注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用pbs稀释，也可用封闭液去稀释。如需加二抗，还要注意二抗的工作浓度，太高浪费，太低则着色浅。6、显色：显色系统又很多，我们一开始做的时候，要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵，AP结合物可加叠氮钠。7、每次做尽量要把阴阳空三个对照做好，人EB病毒衣壳抗原IgA（EBV-VCA-IgA）ELISA&试剂盒如出现问题也好分析。&hz-E10024人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒Human Leptin Soluble Receptor,sLR ELISAkithz-E10025人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISAkithz-E10026人转化生长因子&2(TGF&2)ELISA试剂盒Human transforming growth factors &2,TGF&2 ELISAkit&hz-E10027人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISAkit&hz-E10028人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒Human leukotriene D4,LT-D4 ELISAkithz-E10029人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)ELISA试剂盒Human Neural-Cadherin, N-Cad ELISAkithz-E10030人红细胞刺激因子(ESF)ELISA试剂盒Human erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISAkithz-E10031人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA试剂盒Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISAkithz-E10032人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒Human growth hormone relasing factor,GH-RF ELISAkithz-E10033人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒Human macrophage chemotatic factor,MCF ELISAkithz-E10034人&/&干扰素受体(IFN-&/&R)ELISA试剂盒Human Interferon &/&Receptor,IFN-&/&R ELISAkithz-E10035人B细胞生长因子(BCGF)ELISA试剂盒Human B cell growth protein,BCGF ELISAkithz-E10036人B细胞分化因子(BCDF)ELISA试剂盒Human B cell differetiation factor,BCDF ELISAkithz-E10037人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA试剂盒Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM ELISAkithz-E10038人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒Human soluble adhesion molecules,Sam ELISAkithz-E10039人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISAkithz-E10040人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISAkithz-E10041人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒Human thymic stromal lymphopoietin,TSLP ELISAkithz-E10042人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒Human Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISAkithz-E10043人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒Human pleiotrophin,PTN ELISAkithz-E10044人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒human soluble cluster of differentiation 28,sCD28 ELISAkit&hz-E10045人淋巴细胞因子ELISA试剂盒Human lymphocyte factor ELISAkithz-E10046人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒Human thymus activation regulated chemokine,TARC ELISAkit
（来源：上海沪震生物科技有限公司）
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哪些肿瘤与EB病毒抗体（EBV-VCA）有关？
全网发布： 12:56:23
发表者：肖健存
(访问人次：4870)
EB病毒阳性、鼻咽癌家族史、鼻咽癌的高发区、身体免疫力低下，都可能是患鼻咽癌的高危因素。从理论上讲，如EB病毒检查阳性者，仅是代表患者以前曾经受过EB病毒感染，但它是否是鼻咽癌发病的直接原因，目前尚无定论。但临床实践，科学研究表明，阳性者患鼻咽癌的机会比阴性者大得多。&&& 鼻咽癌是最常见的EBV感染的上皮性肿瘤，几乎100%的非角化性鼻咽癌都有EBV感染。因此，在鼻咽癌要与鼻咽部的其他癌进行鉴别时，EB病毒血清学检测可帮助诊断。另外，当发现颈部淋巴结出现转移癌时，如果EB病毒血清学检测呈阳性，提示原发肿瘤很可能是鼻咽癌&&& 鼻咽癌的筛查应以临床检查和EB病毒血清学检测为主，如临床鼻咽镜下有可疑变化，应送病理科活检，最好在鼻咽纤维镜下作细致观察，看有无微小病灶；若鼻咽镜下无异常发现，但EB病毒血清学检查滴度较高或抗体检测阳性时，则应定期随防观察，建议进--步请专科医生检查，早诊断、早治疗。&&& EBV在感染过程中形成的病毒特异抗原可以区分为早期抗原（EA）、病毒衣壳抗原（VCA）、核相关肿瘤抗原（EBNA）和膜抗原（MA）。检测这些抗原的相应抗体反应，有助于EBV相关疾病的诊断和治疗。&&& VCA抗原具有很强的免疫原性，最初感染EBV的患者血清中可检测到VCA-IGM，之后IGM抗体逐渐减少到无法检出的水平（正常情况下，IgM抗体持续不超过10周。滴度下降，有时起伏。任何急性感染的慢性过程是罕见的），几乎同时VCA-IGG逐渐增加，并可在正常人体内终生存在。若此试验阴性，可以排除EBV感染。&&& EBNA可分为六种，其中EBNA1是唯一一种在所有EBV 相关肿瘤细胞中都表达的病毒蛋白，出现在所有持续受感染细胞的核中，其免疫原性表达相对迟些，仅数周或数月后形成抗EBNA-1抗体。一个明显阳性试验结果（第二滴度阶段）显示曾有过感染。若VCA试验阳性，滴度为1：160或更高，结合阴性或弱阳性的抗EBNA-1试验，就表示一种急性、新的或复发感染。&& &EA是受感染细胞早期产生的抗原，比VCA的免疫原性要弱，因此它们诱导的抗体在原发性感染出现得较迟，然而在复发感染抗体通常可早期检出。&&& 鼻咽癌刺激IgA类的EBV抗体合成，特别是抗VCA抗体。但这些抗体水平在正常EBV感染和复发时增加，所以仅高滴度有诊断价值（VCA-IgA&1：80），经治疗好转后抗体滴度可下降。VCA-IgM通常阴性，VCA-IgG滴度增高。多年实践证明IGA/VCA诊断鼻咽癌的特异性低于IGA/EA，但后者敏感性差。除IGA之外，早期EBV复制周期中特殊的非结构抗原─DNA多聚酶、DNA核酸酶、DNA主要结合蛋白质亦被推荐作为血清学诊断指标。&&& EBV-VCA抗体临床意义：VCA-IgA≥1:10为阳性，说明感染过EB病毒（多在半年前或很久很久前），临床上与鼻咽癌、胸腺淋巴上皮癌、胃癌、直肠癌、性、非甲非乙型、红斑痕疮、干燥综合症、Burkitt氏淋巴瘤、免疫缺陷宿主的淋巴瘤等疾病有关。；VCA－IgM≥1:5为阳性，说明有近期感染，（感染后多在2－3周该抗体升高，在体持续时间不等）临床上与不明原因的发焼、乏力、传染性单核细胞增多症、紫癜、抽风、川畸病、口腔脱皮等自身免疫病有关；VCA－IgG≥1：80以上者，说明EBV被激活或激活了其它病毒基因及某些细胞基因，可作为EBV或其它病毒感染的参考招标。
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