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细胞培养的基本原理与技术 体外培养的概念
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实验操作技术规范编写.doc48页
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细胞生物学实验操作规范
一、显微操作技术： 3
二、细胞培养技术： 3
第一章 细胞培养基础 3
1.细胞培养基本概念： 3
2.细胞培养的环境 3
3.细胞培养设施和基本条件 4
无菌操作技术要领 5
4.培养用品的清洗与消毒 6
第二章 细胞培养液 11
第一节 水与平衡盐溶液 12
第二节 细胞培养基的基本要求 12
第三节 天然细胞培养基 13
第四节 干粉培养基的配制 18
第五节 无血清技术及其培养基 18
第六节 其他细胞培养用液 21
第三章 细胞培养的基本方法 23
第一节 培养细胞的细胞生物学 23
第二节 细胞分离技术 30
第三节 细胞的冻存与复苏 32
第四节 细胞计数及活力测定 35
第五节 培养物的污染及防止 36
三、制片技术： 40
1.载玻片和盖玻片的使用 40
2.切片技术（徒手切片）： 41
3.压片技术： 42
4.涂片技术： 42
5.滴片技术： 43
6.装片技术 44
四、染色技术 44
一、线粒体和液泡系的超活染色与观察 44
二、DNA-Feulgen染色 46
三、台盼蓝染色 47
四、DAPI染色 47
五、参考文献 47
一、显微操作技术：
二、细胞培养技术：
第一章 细胞培养基础
1.细胞培养基本概念：
细胞培养是指从体内组织取出细胞模拟体内环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。
在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤成纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋巴细胞培养具有时间短、技术简便、可重复取材等优点，它在临床染色体分析中使用最广泛。体外培养细胞株可在培养过程中发生自发的或在外界作用下的转化，成为永久细胞系，也可直接建成永久细胞系，永久细胞系能在
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