有谁知道,糖蛋白抗原1259_9(a19-9)高97.79,正常指数是37.00,是啥病呢?

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H粪日sl S828s
四川农业大学
硕士学位论文
饲粮不同蛋白水平对早期断奶仔猪生产性
能、血液生化指标及免疫机能的影响
指导教师 睦岱立 越援
学科专业——j削出生羞当坦魁整坐—一
研究方向—————蕴盟萱差————一
本试验通过研究饲粮不同蛋白水平对早期断奶仔猪生产性能、血液生化指标
及免疫机能的影响,确定仔猪在最佳生产性能和最佳免疫状态时饲粮蛋白质的适
宜水平。试验采用单因子试验设计,设5个处理,其饲粮粗蛋白水平分别为14%、
17%、20%、23%、26%;5个处理的饲粮均为等能(14.38MJ/kg)、等氨基酸模
式(Dlys:DS-AA:DThr:DTrp=100:57:62:18)的玉米一小麦一豆粕型饲粮。选用80头
21±1日龄断奶、体重6.45±0.16kg的健康DLY[杜洛克×(长白×大约克)]杂交
仔猪,随机分为5个处理,每个处理4个重复,每个重复4头猪,公母各半。试
验期为28天。
试验结果如下:
1、仔猪的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)
都随饲粮蛋白水平增加呈二次曲线变化。以不同的生产性能指标作为评定指标,
仔猪饲粮蛋白质的需要量不同。从ADG来看,仔猪断奶后的1.2W饲粮蛋白质的
适宜水平为20.4%;3.4W饲粮蛋白质的适宜水平为20.1%;1-4W饲粮蛋白质的适
宜水平为20.2%。从ADFI来看,仔猪断奶后的1—2W饲粮蛋白质的适宜水平为
19.6%;3-4W饲粮蛋白质的适宜水平为19.5%;1-4W饲粮蛋白质的适宜水平为
19.5%。从F/G来看,仔猪断奶后的1—2W饲粮蛋白质的适宜水平为21.9%;3-4W
饲粮蛋白质的适宜水平为21.2%;1-4W@q粮蛋白质的适宜水平为21.4%。饲粮蛋
白水平为20%组的腹泻率、腹泻频率、腹泻指数最低,当饲粮蛋白水平超过20%
时,随着饲粮蛋白水平的增加,仔猪的腹泻率、腹泻频率、腹泻指数都增加,饲
粮蛋白水平为26%组的腹泻率、腹泻频率、腹泻指数都极显著的高于其他各组
(p<O.01)。
2、饲粮不同蛋白水平影响仔猪血液中的总蛋白、白蛋白含量、白蛋13/球蛋
白的值以及谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)的活性。随着饲粮蛋白水
平增加,仔猪血液中的总蛋白、白蛋白含量、白蛋白/球蛋白的值先增加后下降,
饲粮蛋白水平为23%时其含量最高:饲粮蛋白水平为26%时GPT、GOT的活性
最高,其OPT的活性分别比蛋白水平为14%、17%、20%、23%组提高了114.31%
(p<0.01)、53.56%(p<0.05)、111.79%(p<O.01)、137.97%(p<O.01);GOT的
活性分别提高了96.34%(p<O.01)、27.44%(p<0.05)、81.58%(p<O.01)、60.46%
(pO.05)。
3、饲粮不同蛋白水平显著影响仔猪机体的细胞免疫机能(pO.05)。饲粮蛋白水平为23%组的T淋巴
细胞转化率㈣比蛋白水平为14%、17%、20%、26%组的分别提高了9.25%
(p<O.05)、5.66%(p<0.05)、5.64%(pO.05),而饲粮蛋
白水平为14%、17%、20%组之间、23%与26%组之间的m差异不显著(p>0,05);
饲粮蛋白水平为23%、26%组的活性E.玫瑰花环形成百分率(Ea%)显著高于其
他各组(pO.05),23%组的Ea%高于
26%组。试验各组仔猪血清艳G、血清溶血素的含量差异不显著(p>O.05),从免
疫球蛋白的总量来看,各处理之间差异不显著(p>o.05)。
综合本试验的研究表明:21日龄断奶DLY仔猪,以ADG作为评定指标,在
断奶后的1.4w饲粮蛋白质的适宜水平为20.2%;以F/G作为评定指标,仔猪断奶
后的1.4W饲粮蛋白质的适宜水平为21.4%。仔猪免疫机能最佳时的饲粮蛋白质适
宜水平高于生产性能最佳时的饲粮蛋白质水平,就本试验所设蛋白水平来看.仔
猪免疫机能最佳时的饲粮蛋白质的适宜水平为23%。
关键词:蛋白水平 早期断奶仔猪 生产性能 血液生化指标 免疫
EffectsofDifferentDie aryP oteinLevelsonGrowingPerformance,
BloodBiochemicaIPar metersandImmuneFunctionof
Early-weanedPiglets
LuoHongming(AnimalNutr tionandFeedScience)
DirectedbyProfChendaiwen
Thissin【glefactorialdesignedexperimentwasconductedt0 stablishthe
appropriated e aryproteinlevelsforoptimalgrowingperformanceandoptimal
immunefunctionviastudyingtheffectofdifferentdie aryp oteinlevelsongrowing
performance.bloodbiochemicalpar metersandimmunefunctionofearly-weaned
piglets.Inthisstudy,dietsw thfivegradedl velsofcrudeproteinwere14%,17%,
20%,23%,26%respectively.Theexp rimentwasbasedoncoru.soybeanmeal.wheat
diet.Theenergyandaminoacidpatterninfivedietswerekepthesame.
Dlys:DSAA:DThr:DTrp=100:57:62:18.Eighty21_+ld,6.45±o.16kgDLY[DurocX
(LandraceXYorkshire)1crossbredpigletswererandomlya locatedintofive
treatments,4replicationspertreatment,4pigletspereplication,halfmaleandhalf
female.Thewholexperimentalperiodlastedfor28days.
Theexperimentalresultswereasfollows:
1、Averaged ilygain(ADG)andaveragedailyfeedintake(ADFI)andF,Gchanged
withthelevatedproteinlevelsquadratically.Theestablishedproteinrequirementof
Digletswasnothesalnewhenusingdifierentevaluationindex.Theoptimalprotein
levelwas20.4%forhighestADGforthefirsttwoweeks.20.1%forthelattertwo
wccksand20.2%forthewholeperiod.theoptimalproteinlevelwas19.6%for
highestADFIforthefirsttwoweeks.19.5%forthelatterwoweeksand19.5%for
thewholeperiod.Theoptimalproteinlevelwas21.9%forlowestF/Gforthefirsttwo
weeks.21.2%forthelatterwoweeksand21.4%forthewholeperiod.Thediarrhea
incidence.diarrheafrequencya diarrheaindexwerethelowestin20%proteindiet.
Whendietaryproteinco tentexceeded20%,thediarrheaincidence,diarrhea
打equencyandiarrheaindexofpigletsincreasedwiththelevateddietaryp otein
level,allthethreediarrheaindexesin26%dietweresignificantlyhi叠herthanthosein
Otherg oups(p<0.01).
2、SerumTP,ALB,ALB/GL0andtheactivityofGOT'GPTwereaffectedbydietary
proteinlevels.ⅡALB.AU3/GLOincreasedwiththelevatedprotein1evelsfirstly
andthendecreasedwiththehighestvaluesoccurredin23%proteindietgroup.
Amongallthegroups.boththeactivitiesofGOT,GPTinCP26%groupwerethe
highest.TheGPTactivityn26%proteingroupwashigherthanthatin14%,17%,
20%and23%groupby114.31%(p<0.01)、53.56%(p<0.05)、iii.79%(p<0.01、and
137.97%(p<O.01)respectively.TheGOTactivityn26%proteingroupwashigher
thanthatin14%,17%,20%and23%groupby96.34%(p<O.01)、27.44%0<0.05)、
81.58%(p<O.01)and60.46%(p0.05).
3、Dietaryproteinlevelsaffectedpigletcellularimmunefunctionwhilethehumoral
immunewasnotinfluencedbydietaryproteinlevels(P>0.05).T-lymphocyte
transformationrate(LTI’)in23%proteingroupwashigherthanthatin14%、17%、
20%and26%proteingroupby9.25%(p<O.05)、5.66%O<O.05)、5.64%(pO.05)respectively.DiffefenceofIJTbetween23%and26%proteingroup
andU丌betweenanytwogroupsof14%、17%and20%proteingroupswerenot
significant伸>0.05).Theactiverosetteformingrate(Ea%)in23%and26%protein
groupwerebothhigherthaninanyotherg oup(PO.05).BoththedifferencesofIgG
andhemolysininanytwogroupswerenotsignificant.
Basedonthecomprehensiveconsiderationof he xperimentalresults:The
optimaldietaryp oteinlevelforpigletsweanedatd21was20.2%forthefourweeks
post.weaningforbestADQand21.4%forlowestF/GTheoptimaldietaryp otein
leveltoguaranteebestimmunefunctionwas23%.whichwasigherthanthatforbest
growingperformance.
Keywords:Proteinlevels,Early—weanedpiglet,Growingperformance,Blood
biochemicalpar meters,Immunity
本文缩写符号
血清白蛋白
平均日增重
平均目采食量
可消化赖氨酸
可消化含硫氨基酸
可消化苏氨酸
可消化色氨酸
可消化亮氨酸
可消化异亮氨酸
可消化精氨酸
可消化苯丙氨酸与酪氨酸
可消化缬氨酸
可消化组氨酸
脱氧核糖核酸
总数E.玫瑰花环
活性E.玫瑰花环
毫摩尔/升
血清球蛋白
谷草转氨酶
谷丙转氨酶
免疫球蛋白G
免疫球蛋白M
免疫球蛋白A
免疫球蛋白
理想氨基酸模式
理想蛋白模式
国际单位/升
淋巴细胞转化率
植物血凝素
血清尿素氮
绵羊红细胞
血清总蛋白
甘油三酯叽鹏咖咖∽蛉舭黔培Ⅲ一肿毗m啪删眦言|一口w他
论文独创性声明
本人郑蘑声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作
所取得的成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,学位论
文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得
口q川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作
的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢
研究生签名: 留良嚼
关于论文使用授权的声明
弘才年<月;。日
本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权
保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借
阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业
大学呵以用刁i同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。
研究生签名 字】炙鲷
导师签名:’w协
弘巧年‘月如日
≯卅晦6月j一日
蛋白质在动物的生命过程中具有重要营养作用。蛋白质是构成动物肌肉、皮
肤、毛发等的基本成分,起传导、运输、支持、保护等多种功能。在动物的生命
和代谢活动中起催化作用的酶、某些起调节作用的激素、具有免疫和防御机能的
细胞因子和抗体等,都是以蛋白质为主体构成的。组织器官的新陈代谢需要蛋白
质不断更新与修补损伤组织。机体能量供应不足时,蛋白质可分解供能,维持机
体的正常代谢活动;摄入蛋白质过多或氨基酸不平衡时,多余的部分也可转化为
糖、脂肪或分解产热【”。蛋白质占动物机体固形物总量的50%左右,肌肉、肝、
脾、肾等实质器官的蛋白质含量可离达80%以上;因此,饲料中蛋白质的供应
对畜禽生活和生产具有重要的作用。
蛋白质营养是早期断奶仔猪营养的核心。一方面,饲粮蛋白有不同的抗原性,
可以导致小肠发生暂时性的过敏反应,引起小肠形态结构的损伤性变化,这是早
期断奶仔猪食欲差、腹泻、生长受阻(所谓“仔猪早期断奶综合征”)的根本原因
f2埘;另一方面,饲粮蛋白水平既是制约早期断奶仔猪生长成绩的主要因素,也
是影响腹泻程度的重要因素[4.5,61。早期断奶仔猪腹泻是一个极复杂的问题,它的
原因是多方面的。病原可以引起仔猪腹泻16】,然而Miller(1985)认为除非有外因,
如肠道损伤、轮状病毒感染,大肠杆菌自身并不能引起腹泻,饲粮抗原引起的过
敏反应是断奶仔猪腹泻的最根本原因n蛋白水平过低,不能满足生长需要,生
长受阻;蛋白水平过高,引起氨基酸氧化供能,造成浪费;而且进入后段肠道的
蛋白质腐败作用增强,引起有害菌群的增殖,破坏了肠道内的微生态平衡,降低
机体抗病力,增加了仔猪腹泻的机会18】。因此选择适宜蛋白来源,并有针对性地
确定适宜的蛋白水平是早期断奶仔猪最大限度发挥生长潜力和降低腹泻率的保
选择饲喂早期断奶仔猪饲粮的蛋白质水平时,要考虑蛋白质的消化率、氨基
酸的平衡、适口性以及能否为仔猪提供一定的免疫力。猪对蛋白质的需要实际上
是对氨基酸的需要,因此合理使用氨基酸,可减少饲料蛋白水平丽不影响仔猪的
生产性能[9,10,111,从而减少环境污染,节约蛋白质原料。
仔猪经历了断奶应激,饲粮中营养素的充足和平衡是它恢复生长的决定性因
素,它对营养素的变化相对较敏感。因此,研究饲粮中不同蛋白质水平对早期断
奶仔猪生产性能的影响、相应的血液生化指标变化及免疫功能的影响,可以为更
有效的养猪生产提供理论指导,同时更加深入了解蛋白质的营养代谢规律。
2、文献综述
2.1猪理想蛋白质模式的研究进展
2.1.1理想蛋白质
理想蛋I刍(Idealprotein,IP)的概念起源于人们用氨基酸组成来衡量蛋白质的
营养价值。Howard(1958)首次提出“理想蛋白质”的概念,其基本含义指能在动物
体内实现最大沉积率的饲料蛋白质。所谓理想蛋白质是指这种蛋白质的氨基酸在
组成和比例上与动物所需蛋白质的氨基酸的组成和比例一致,包括必需氨基酸之
间及必需氨基酸与非必需氨基酸之间的组成和比例,动物对该蛋白质的利用率为
100%t”。ARC(1981)首次提出了理想氨基酸模式0AAP),并给出了体重15—50kg
生长猪的理想蛋白质模式{121。之后,理想蛋白质研究不断深入,较有代表性的
模式是:Yen等(1986)分别推荐的体重25.55堍和50-90kg生长猪的理想蛋白质
模式:NRC(1988)推荐的3-5kg、5.10kg、10—20kg、20-50kg等不同生长阶段猪的
理想蛋白质模式【131。但鉴于上述推荐的理想蛋白质模式是以总氨基酸含量为基
础表示,因猪对不同来源氨基酸的消化率有较大的差异,以致在生产中应用效果
差异较大。因此,Chung和Baker(1992)、Wang和Fuller()以可消
化氨基酸为基础标定了理想蛋白质模式114,15l。随后,NRC(1998)总结了理想蛋
白质的研究结果,给出了5-10kg、20·50kg、50一110kg体重猪的最新理想蛋白质
模式(见表1),是目前以可消化氨基酸为基础标出的较全面的理想蛋白质模式。
迄今为止,猪的理想蛋白质模式研究最多的是生长肥育猪,近几年逐渐向两端延
目前,畜禽蛋白质研究,理论上已经从经典的粗蛋白质和总氨基酸(TAA)营
养向可利用氨基酸营养、小肽营养及理想蛋白质模式凹P)方向发展,生产上也
将以可消化氨基酸和IPP为基础配制饲粮;以IPP为基础评价饲料蛋白质质量的方
法,克服了用以化学评分、必需氨基酸指数及生物学效价评价蛋白质质量时缺乏
可加性的缺点。运用理想蛋白质技术,不但可以提高蛋白质的利用率,也能够减
少畜禽氮排泄的污染。对于提高动物生长速度,降低料重比,减轻环境污染,缓
解蛋白质饲料资源短缺具有十分重要的意义。因此,IPP的建立和完善具有重要
理论价值和实践意义。
2.1.2理想蛋白质模式的研究方法
理想蛋白质模式的研究方法有以下4种:(1)综合法。总结以往测定的各种
氨基酸的需要量,建立其间的比例关系: (2)梯度氨基酸饲粮法。以低蛋白饲
粮为基础,固定除待测氨基酸以外的其它氨基酸的浓度,变换待测氨基酸的浓度,
通过氮平衡试验筛选出最佳的饲粮氨基酸浓度; (3)氨基酸部分扣除法。是由
Wang和Fuller(∞创立的,目前公认是较理想的一种方法。其基本原理
是:在理想蛋白中,每一种氨基酸都是限制性的,且限制性的顺序相同;去除非
限制性氨基酸对氮沉积无影响。因此,就可以用去除某一氨基酸的一部分对氮沉
积的影响来确定氨基酸的模式:尽管该法采用的数学模型(简单线性)还有待改
进,但在适宜的氮摄入量变化范围内(0.25.2.09/l砸科)l,0‘75/d),氮沉积与氮摄入的
关系,不会明显的偏离线性【15l。Chung和Baker(1992)的比较研究也证明了用该法
所得的IPP明显优于NRC(1988);(4)分析动物体氨基酸组成的方法。分析畜禽
躯体或肌组织的氨基酸成分,作为建立理想蛋白氨基酸平衡的依据。
在计算氨基酸比率时,可用绝对含量(单位理想蛋白中各种氨基酸的含量)
和相对含量两种方式来表述。相对含量是采用与某一氨基酸的比例来表示.目前
多采用将赖氨酸定为100,计算其它各种氨基酸对赖氨酸的比率(见表1)。
表l 5-lOkg体重仔猪理想蛋白模式
Table1Idealproteinpatternof5—10kgpiglets
理想蛋白质体系是完全按照猪维持和生长需要提供等量的各种氨基酸。它不
仅可完全反映整个生命周期中体组织氨基酸组成的动态变化,还可以反映猪种、
性别、年龄、成熟程度、环境及其它因素对体组织氨基酸组成的影响。因而在养
猪生产中应用理想蛋白质体系的最大优势性就是配制的饲粮既能使猪进行氮的
最大量沉积,充分发挥猪的生长潜力,又使饲粮成分在改变时仍然可使蛋白质的
质量保持恒定,从而可使猪的生产性能保持在所要求水平。所以,随着饲料及发
酵工业的迅速发展,限制性氨基酸的商业化供应量增加和养猪业向瘦肉型化发展
以及理想蛋白质模式的不断完善,理想蛋白质体系将会得以迅速普及应用。
2.2仔猪饲粮蛋白水平的研究现状
2.2.1仔猪蛋白质的需要量
仔猪饲粮适宜的蛋白水平既有利于克服高蛋白水平对仔猪的不良作用,又要
能满足仔猪对氨基酸的需要和保证仔猪正常的生产性能。NRC(1988)推荐5.10kg
体重的仔猪的蛋白质需要量为20%;10—20kg体重的仔猪的蛋白质需要量为
18%113】;NRC(1998)推荐5.10妇体重的仔猪的蛋白质需要量为23.7%,lO.20kg体
重的仔猪的虽白质需要量为20.9%【9l;分别提高了18.5%,16.1%。陈代文(1995)
推荐3周龄断奶仔猪玉米.豆饼饲粮中适宜的蛋白质水平为24%,豆饼的比例为
60%1161。Hays等(1972)提出体重5—14kg的断奶仔猪,饲粮粗蛋白质需要量为
20%117】。Meade等()、Young$1]Jamieson(1970)研究表明,饲粮中蛋白
质含量超过18%时,体重5.23kg的断奶仔猪的生产性能不能褥到显著提高[17381。
Komegy等(1974)的试验结果表明,在玉米一豆粕一乳清粉饲粮中,体重5kg以上的
断奶仔猪蛋白质需要量为18%。Heugten等(1994)指出,低蛋白质饲粮(为对照组
的60%)和高蛋白质饲粮r为对照组的120%)显著降低仔猪的生产性能,试验所用
对照组饲粮的蛋白质含量为20.6%,消化能水平为14.7MJ/kgll9】。董国忠等(1995a)
报道,断奶仔猪采食含消化能14.5MJ/kg、粗蛋白质18%的饲粮时,表现出良好
的生产性能和较低的腹泻等【8】。董国忠等(1995b)又报道,断奶仔猪饲粮类型和蛋
白质水平之间存在着显著交互作用。饲粮类型不同,蛋白质适宜水平也不同,当
饲粮能量水平为14.5MJ/kg时,全植物性蛋白质饲粮的适宜蛋白质水平为18.9%,
复合蛋白质饲粮的适宣蛋白水平为19.9%【2啊。董国忠等(1997)研究了饲粮蛋白质
水平与早期断奶仔猪氮代谢的关系,结果表明,随着饲粮粗蛋白质水平的提高,
进入大肠的蛋白质含量增加,结肠内蛋白质的腐败作用增强,血中含氮代谢产物
增多。当饲粮能量水平为14.5MJ/kg时,断奶仔猪(体重为4。5k移饲粮中的蛋白质
含量以不超过20.4%为宜1”】。
林映才等(2001a)报道,在满足氨基酸需要的条件下,3.4—9.5kg早期断奶
仔猪生长所需饲粮粗蛋白水平为20%口1。侯永清等(1999)对早期断奶仔猪饲靛
中适宜蛋白质及氨基酸水平的研究表明25—35日龄、体重6.78-8.92kg仔猪适宜的
蛋白质水平为20%,赖氨酸水平为1.3%;36—53日龄、体重8.95—17.52kg仔猪适宜
的蛋白质水平为18%,赖氨酸水平为1.0%1矧。陈晓春等(1999)研究了饲粮能量、
蛋白质水平及赖能比对早期断奶仔猪生产性能影响结果表明,28.60日龄仔猪达
最佳生产性能的消化能为3.80Meal/kg、赖能比O.969.Lys/DE、粗蛋白质水平为
饲粮蛋白质水平是影响仔猪生长的主要因素。Menge等(1976)报道,21同龄
断奶仔猪断奶后第一周蛋白质需要是关键,无论能量高低,低蛋白饲粮均降低仔
猪生长速度陋1。而Sewdl等(1961)、Manners等(1963)认为,21日龄断奶仔猪,
饲粮能量浓度增加,其蛋白质水平应随之升高。Menge等(1976)指出,21日龄断
奶仔猪饲粮适宜蛋白质水平为20%.24%,适宜能量蛋白比为15.18(能量单位
Mcal)1251。
早期断奶仔猪(3w)饲粮蛋白质适宜水平到底是多少还没有定论,因为影
响仔猪饲粮蛋白质需要量的因素很多,其主要因素有品种、性别、饲养水平、饲
粮类型、饲粮能量浓度以及所使用的指标等。因此,还有待进一步的研究早期断
奶仔猪适宜蛋白质的需要量。
2.2.2仔猪低蛋白氨基酸平衡饲粮研究
仔猪对饲料的粗蛋白含量不敏感,低蛋白饲粮在满足猪对赖氨酸的需求和保
持必需氨基酸平衡的原则之下,其生产性能一般不会受到影响(见表2、图1)【26】。
降低蛋白质水平的幅度和添加到饲料中的氨基酸种类有一定的关系。在断奶仔猪
饲粮中添加赖氨酸、色氨酸和苏氨酸对降低饲粮的蛋白质水平有重要作用。低蛋
白饲粮中缺乏的必需氨基酸比高蛋白饲粮更多。一般的高蛋白仔猪饲粮普遍缺乏
赖氨酸,而低蛋白饲粮则又进一步缺乏其它的必需氨基酸。低蛋白饲料一般要在
赖氨酸的基础上补充苏氨酸、蛋氨酸和色氨酸。在极端低蛋白的情况下,饲粮必
须补充异亮氨酸和亮氨酸,才能保持生产性能不受影响。
Borg等(1988)报道,在蛋白质含量为15%的断奶仔猪饲粮中添加赖氨酸、色
氨酸、苏氨酸、异亮氨酸和蛋氨酸,仔猪血清中的氨态氮含量显著降低,生产性
能达到蛋白质含量为18%(添加赖氨酸)饲粮水平1271。Papodopoulos(1987)在体重
为9.4k卫的5周龄断奶仔猪饲粮中添加赖氮酸使饲粮蛋白质水平由22%降低到
19%,仔猪生产性能得到明显改善,腹泻率T1绛40%t铷1。Corley和Easter(1980,
表2 降低饲粮的粗蛋白水平不影响仔猪的生产性能
Table2 LowdietaryCPcontentdoesn’tinfluencepigletperformance
体重(k曲对照组cP%试验组CP%低蛋白组补充氨基酸 文献来源
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图1 低蛋白饲粮对仔猪ADG、ADF/、F/O的影响
注:引自乔岩瑞(2003)
Figure1Effectsoflowproteind etonADG、ADFI、andF/Oofpiglets
Note:formOiaoyanrui(2003)
1983)及wahlstrom等(1988)经过一系列试验得出结论,添加赖氨酸可使断奶仔猪
饲粮蛋白质从18%降低到16%,再添加色氨酸,可进一步降低到14%,而仔猪生
瑚瑚懈㈣季!蛳瑚啪姗枷
珏削抽伯""协似“"
产性能不受影响f29,30]。JolIIl等(1995)认为,在断奶仔猪饲粮中添加赖氨酸可使蛋
白质含量由19%降到17%,再加色氨酸和苏氨酸可进一步降低蛋白质含量到15%,
面仔猪的生产性能不受影响。Rogerson(1982)研究表明,对6.20kg仔猪.17.8%CP
的饲粮添加赖氨酸可达N19.4%CP饲粮的生产性能。Hansen(1993)研究表明,
17%cP饲粮添加赖氨酸、含硫氨基酸、苏氨酸、色氮酸饲喂5.20l【g仔猪可获得
与21%CP饲粮相近的生产性能【10】。Roth(1983)对5.12kg仔猪研究表明,饲喂
18.2%CP与22.9%CP饲粮。仔猪的生产性能接近【ll】。可见,在满足了必需氨基酸
需要的基础上,可降低饲粮的粗蛋白水平。Kyriazalds(1990)报道,断奶仔猪有迅
速适应饲粮蛋白质变化的能力,为保证正常生长发育,断奶仔猪通过增加对低蛋
白质饲粮的采食量来满足自身对蛋白质的需要【311。张心如等(1994)用蛋白质含量
为23%和18%的两种饲粮饲喂35日龄断奶的仔猪N60日龄,结果表明,高蛋白质
组和低蛋白质组仔猪的曰增重分别为,饲料增重比为1.05、O.98;腹
泻发病频率为79.7%、41%:水肿病发病率分别为10.16%、5.6%。上述各项指标
差异均显著(P<0.05)或极显著(P<O.01)。可见饲粮含18%蛋白质能够满足早期断奶
仔猪的蛋白质需要量【32】。
董国忠等(1995c)报道,低蛋白氨基酸平衡饲粮可显著降低仔猪断奶后腹
泻和提高仔猪的生产性能,其中复合蛋白型氨基酸平衡饲粮的饲养效果优于全植
物蛋白型氨基酸平衡饲粮【3引。NRC(1998)发布的结果与此理论一致,即在玉米一
豆饼型饲粮中5.10kg断奶仔猪的粗蛋白需要量为23.7%,若在仔猪饲粮中使用
血浆粉或奶粉时,饲粮蛋白质水平可降低2%.3%191;Katz等(1973)将玉米一豆饼
型饲粮粗蛋自从19%降至16%,仔猪日增重、日采食量及增重/耗料的值显著下
降㈣。但将粗蛋白为17.6%的复合型饲粮(含有鱼粉、乳请粉、燕麦等)与含粗蛋
白19%的玉米一豆饼型饲粮比,仔猪日增重、F/G接近;蛋白质的种类也影响仔
猪的生产性能135,36】。可见饲粮蛋白质水平对仔猪生长性能的影响与饲粮类型以
及粗蛋白水平降低的幅度有关。Noblet()、Gomez(1998)也报道,仔猪
饲粮中以理想蛋白质模式添加限制性氨基酸,有效地改善饲稂中氨基酸的平衡,
可降低2%的饲粮粗蛋白质水平[37,38,45】。
然而,Mars(1988)l拘试验中,当将粗蛋白水平由19%降至于17%时,即使添
加了氨基酸,仔猪的生产性能也明显下降1391。Volf(1990)对5.9周龄仔猪的研究
表明,当饲粮粗蛋白低于19.2%,添加赖氨酸、苏氨酸后也不能获很好的生产性
能I“。Hansen(1993)ffff究也表明,对5-20kg仔猪,15%CP饲粮添加赖氨酸、含
硫氨基酸、苏氨酸、色氨酸也不能达到21%CP饲粮的生产性能【如1。这说明了即
使在满足赖氨酸、含硫氨酸酸、苏氨酸、色氨酸的需要条件下,过低的蛋白质水
平仍影响仔猪的生长。
随着仔猪生长速度的进~步提高,仔猪饲粮蛋白质需要量呈上升趋势。低蛋
白饲粮能够降低粪尿氮、特别是尿液中尿素氮的含量。一般来说,粗蛋白水平每
降低一个百分点,尿素和氨气的排放量可以降低百分之十左右{4】j。并且低蛋白
饲料能够减少仔猪的腹泻发生率;仔猪有限的酸化能力导致对高蛋白饲料的酸化
较低,并且,由于较高的PH值和残余的营养物使细菌在后肠道内繁殖而导致病
原细菌的增生。控制饲料的租蛋白水平能够减少到达消化道后段的蛋白质残留,
而且会在一定程度上降低食块的PH值。这些综合因素可以解释仔猪饲料粗蛋白
水平对腹泻率的影响。低蛋白饲粮降低到一定程度对仔猪体蛋白的合成以及肠道
结构等均有一定影响,不过适当降低饲粮蛋白质水平可减少仔猪肠道负担和断奶
后腹泻(见表3);并且低蛋白饲粮可以降低饲料的配方成本。
表3仔猪饲粮蛋白水平对腹泻率的影响
Table3Effectofdietaryp oteinlevelondiarrheaincidenceofpiglets
项目 粗蛋白(%) 腹泻率(%) 资料来源
试验1 25.4 17.0 Eggum等(1985)
Eggum等(1987)
Bolduan等(1993)
LeBellegoand
Noblet(2002)
2.3饲粮蛋白质与血液生化指标
血液是体内内环境的重要组成部分,体内代谢原料及废物由血液运输,其成
分的变化可反映机体的代谢情况,血液中与蛋白质代谢有关指标的变化,可反映
4丝搬孤∞埘嬲博撕船加碍
蛋白质的利用情况。Hesby等(1970)、Vernon等(1990)研究认为:血清白蛋白含量
是衡量动物蛋白质需要量很敏感的标识,而_衄清总蛋白并不十分敏感t50,51l。
Jahooreta1(1996)报道,饲粮蛋白质长期缺乏可影响仔猪血浆蛋白的动力学变化,
导致血清自蛋白、视黄醇结合蛋自浓度显著下降,白蛋白、纤维蛋白源、高密度
脂蛋白.1、转铁蛋白合成率显著下降,而转甲状腺紊蛋白绝对合成率显著升高;
血浆纤维蛋白源和转铁蛋白两组问没有显著差异,蛋白质缺乏的猪血浆转甲状腺
素蛋白浓度较高。因此,不能用血清总蛋白浓度作为衡量仔猪蛋白质营养不良的
指标152】。周小秋等(1994)研究表明,初生仔猪血清总蛋白、自蛋白含量与母
体蛋白的摄入量呈二次曲线相关,初生仔猪血清白蛋白含量可作为确定孕期母体
蛋白需要量的标识153J。
侯永清等(2001a)报道,26日龄断奶杜长大杂交仔猪,饲粮中不同的苏氨
酸水平影响血清SUN、TP的浓度(P<O.05)及血t清ALBI拘浓度(P<O.01)。血清SUN
浓度与饲粮苏氨酸水平呈显著负相关,随着饲粮苏氨酸水平的提高,血清SUN
浓度直线降低(P<0.01)。随着饲粮中苏氨酸水平和蛋氨酸水平的提高,血清中游
离苏氨酸与蛋氨酸水平分别呈直线上升(pO.05)‘”J。
2,4饲粮蛋白质与免疫
营养物质不但为动物维持正常的生长发育所必需,而且是保持畜禽免疫系统
功能以及充分发挥免疫能力的决定性因素。而蛋白质和氨基酸是构成机体免疫系
统的基本物质,与免疫系统的组织发生、器官发育有极为密切的关系。营养与免
疫之间存在着极为重要的相互作用:协同作用和拮抗作用。一方面,营养影响动
物的免疫活性,从而影响它们对传染病的抵抗力;另一方面,感染引起的免疫反
应又会影响生长、繁殖、代谢和营养需要。大多数营养因子的缺乏都会影响免疫
反应,增加对传染病的易感性,因为免疫系统是在不断发展成熟的,而且激发免
疫反应时细胞分裂速度快,还需要大量的辅助因子。在机体的免疫系统中,免疫
球蛋白都是蛋白质,因而饲料蛋白质的供给及体内蛋白质、氨基酸的正常代谢与
抗体产生的关系密切[sL58|。动物缺乏蛋白质时,免疫机能下降。这主要表现在以
下几个方面:
f11蛋白质对细胞免疫的影响 当机体受外来抗原刺激后,首先是体内的免
疫细胞增殖、分化,发挥细胞免疫作用。这些新的免疫细胞的生成需要大量蛋白
质。如果机体蛋白质水平低,必然影响免疫细胞的生成速度,从而影响免疫效果。
此外蛋白质能抑制肿瘤生长和脾的增大。蛋白质不足可能使抗体抗原结合反应和
补体浓度下降,免疫器官(如胸腺)萎缩,T淋巴细胞尤其是辅助性淋巴细胞数量
减少,吞噬细胞发生机能障碍,自然杀伤(NK)细胞对靶细胞的杀伤力下降。
Srivastava等(1987)试验发现小鼠在蛋白质缺乏时胸腺组织萎缩,T细胞特别是辅
助T细胞减少,对机体的细胞免疫及体液免疫产生明显的影响。唐祖明等(1993)
试验发现蛋白质缺乏时小鼠体重减轻,胸腺组织逐渐萎缩,胸腺细胞表面花生凝
集素(PNA)阳性细胞数减少,荧光反应强度减弱【59】。
(2)蛋白质对体液免疫的影响 抗体的合成需要酶的参与,丽酶是具有生
物学活性的蛋白质,机体蛋白质水平低,细胞内酶的含量不足,导致合成抗体的
速度减慢,从而影响体液免疫的效果。抗体均为免疫球蛋白即蛋白质。抗体的
合成需要酶的参与,而酶是具有生物学活性的蛋白质,机体蛋白质水平低,细胞
内酶的含量不足将导致合成抗体的速度减慢从而影响体液免疫的效果。从分子水
平来讲,蛋白质不足将影响到基因生成速度,若蛋白质含量低则DNA融合速度
减慢,mRNA合成速度减慢,从而影响至tJmRNA的‘‘力日工”、修饰和转移,进而表
现为影响到抗体的合成及其装配与修饰等。Petered(1973)发现大鼠在蛋白质不足
时脱氧核苷酸激酶活性下降,导致DNA合成数量减少【鲫。Kanamoto等(1994)报
道蛋白质的数量和质量对大鼠c.myc和类胰岛素生长因子-I(1GF一1)基因mRNATK
平有明显影响,饲粮中缺少蛋白质时C.myc的mRNA增加而IGF.1的mRNA减少,
这表明蛋白质不仅是构成机体的原料而且还影响到信号的传掣61】。郭长江等
f1996)的试验发现蛋白质不足时小鼠血清白蛋白降低,CD4+/cD8+比值下降。T
淋巴细胞转化反应显著下降1621。Price(1978)研究指出,蛋白质缺乏抑制小鼠对
SRBC的抗体反应。Glick等()研究发现,小鸡饲喂极度缺乏蛋白质的
饲稂时,降低机体对SRBC抗体反应和抑制T细胞型免疫力l嘲。Haye(1981)研究发
现,母猪在妊娠和泌乳期间分别饲喂9%和18%粗蛋白饲粮,对仔猪合成抗体的
能力没有影响,仔猪血清igG、[gA与IgM的水平不受母猪饲粮蛋白水平的影响;
表明适当限制母猪饲粮中蛋白质水平不会影响仔猪血清中被动转运的免疫球蛋
白数量,也不会影响仔猪合成抗体的能力【删。
(3)蛋白质对免疫器官的影响 用SpraqueDawley品种大鼠饲喂缺蛋白面
包饲粮4个月,它们的胸腺重量和组织学方面都呈现显著的改变,甚至于一部分
大鼠的胸腺不能被检测到(Faflane,1971)。饲喂缺蛋白饲料42天后,胸腺就出现
纤维组织浸润;大概由于丧失皮层而致完全丧失皮髓功能;哈氏小体增大并显示
出丧失正常胸腺中常见的深染小体;同时,脾脏减小,且脾脏生发中心也显著缩
小。重新给予J下常的高蛋白饲粮饲喂21天后胸腺恢复正常:5天后脾脏也恢复正
常的重量和功能。Woodward等(1992)研究指出蛋白质和能量营养不良时会导致小
鼠胸腺上皮褪化,皮质上皮褪化主要影响在细胞大小上,髓质上皮褪化主要影响
在细胞数量上,后一种褪化意味着组织难以恢复。由于胸腺髓质上皮对成熟的免
疫功能极其重要,这可以解释早期蛋白质增E量营养不良对胸腺依赖性免疫反应
的抑制作用f631。
具有抗体活性的免疫球蛋白是由多肽链组成的,因而,饲料蛋白质的供给及
体内蛋白质、氨基酸的正常代谢与抗体产生的关系很大。动物缺乏蛋白质时,抗
体合成受阻。免疫机能下降。但也有人认为,蛋白质的边缘缺乏可增强免疫力和
抗病力。Qureshi等比较了1991年和1957年使用的典型饲粮对肉鸡免疫性能的
影响,结果发现:虽然1957年使用的饲粮能量较低且蛋白质为边缘缺乏,但它
反而能提高鸡的体液免疫和巨噬细胞功能。Hill等也证明,当饲粮蛋白质水平从
30%降到20%时,可减少鸡因沙门氏菌感染引起的发病率f57】。可见,对于蛋白质
来说,在不影响畜禽生产性能的前提下,适当降低其水平反而有利于畜禽抗病力
3、有待研究的问题及本研究的目的和意义
3.1有待研究的问题
(1)有关蛋白水平对仔猪生产性能影响的报道较多,但是在等能、等氨基
酸模式以及饲粮类型和结构一致的条件下,饲粮蛋白水平对3周龄断奶仔猪生产
性能影响的报道较少,有待进一步研究。
(2)有关蛋白水平对早期断奶仔猪免疫力影响的报道较少,需要进一步深
(3)目前根据不同的评定指标来确定早期断奶仔猪蛋白质需要量的研究较
少,需深入研究。
3.2本研究的目的和意义
3.2.1本研究的主要目的
(1)在氨基酸模式一致条件下,了解饲粮不同蛋白水平对早期断奶仔猪生
产性能、血液生化指标及免疫机能的影响。
(2)确定3周龄断奶仔猪在最佳生产性能和最佳免疫状态时饲粮蛋白质的
适宜水平。
3.2.2本研究的意义
本试验的研究结果对于深入认识仔猪蛋白质营养与生产性能、血液生化指标
及免疫的关系具有一定的学术意义;同时对于合理配制早期断奶仔猪饲粮、制定
科学的营养管理方案来提高断奶仔猪的健康和生产性能具有较大的实践意义。
4、材料与方法
4.1试验设计
采用单因子试验设计,分为5个处理,其各个处理的饲粮蛋白水平依次为
14%、17%、20%、23%、26%,每个处理4个重复,每个重复4头仔猪。试验
预试期5天,正式期28天。
4.2试验动物及分组
选取80头21_+1日龄断奶、体重6.45_+0.16kg、健康DLY[杜洛克×(长白×大
约克)]杂交仔猪,随机分配到5个处理,公母各半。各处理组间起始体重差异不
显著(P>0.05)。
4.3试验饲粮
试验饲粮的营养标准参NNRC(1998)推荐5-10kgff猪的营养需要,各个处
理之间饲粮的氨基酸模式完全一致。其中DLys:DS-AA:DThr.-DTrp=100:57:
62:18。首先配制粗蛋臼水平为26%的饲粮,然后在此基础上用玉米淀粉稀释并
作调整,确保饲粮中DE、动植物蛋白比例保持一致,用谷壳调整各处理的粗纤
维含量使其保持一致,配出5种不同粗蛋白水平的饲粮。饲粮组成及营养水平见
表4饲粮组成及营养水平(%)
Table4Dietarycompositionandnutrientlevels(%)
DE(MJ/kg)
DTrI×%、0.13 o.16
沣:1、试验前测定各种蛋白原料的强白和氨基酸含量,色氨酸含量来单独测定,其古董参照中国铡科成
分及营养价值表2003年第14敝。
2、氨基酸消化率参照中国饲料成分及营养价值表2003年第14版.
3、每kg饲粮中含胄jFe100mg、Cul50mgtMn40嘴、z玎100。ng、10.5rag,Se0.3mg:
每k饲粮中含有:VAl80001U、VDj4000IU、VE401U、VK34mg、VBl6mg、VB212rag、VB66mg、
VBl20,05mg、生物素O.2mg、叶酸2mg、烟酸50mg、泛酸25rag·
4.4饲养管理
试验在四川农业大学动物营养研究所试验场进行,采用空调和红外灯控温,
饲喂颗粒饲料,每天饲喂四次,分别在8:00、12:00、16:00、20:00,每次
添加饲料直止槽内有少量余料为止。自由饮水,每日清扫圈一次。每隔三天对圈
舍周围用百毒杀喷雾消毒。其他按照常规饲养管理进行。
4.5测定指标及测定方法
4.5.1生产性能的测定
采食量试验期间以圈为单位准确测定和记录每天饲料喂量,并计算试验1.2
周、3-4周及全期(1-4周)各阶段的平均日采食量(ADV0。
日增重在试验期I’日J的第1天、第15天、第29天清晨8:00称量仔猪空腹体重。
并计算试验1.2周、3—4周及全期(1-4周)各阶段的平均日增重(ADO)。
料重比根据各阶段的平均闩采食量与平均日增重之比来计算各个阶段的
料重Et(F/G)。
腹泻指数采用Kelly(1990)【黼1报道的方法进行测定,测定天数共15天。
各处理组的腹泻指数为组内4圈腹泻指数的平均值。腹泻指数的高低表明腹泻程
度的重轻。
腹泻率=腹泻头数/总头数×100%;
腹泻频率=∑(腹泻仔猪头数×仔猪腹泻天数)/(试验仔猪头数×正试期天
数)X100%:
腹泻指数=粪便评分之和/供试验猪总头数。
该指数越高,代表腹泻越严重。评分标准见表5。
表5腹泻状况评分标准
Table5Diarrheascoringstandard
腹泻率反映发病率;腹泻频率、腹泻指数反映腹泻的严重程度,三项指标结
合使用,可较为全面地反映仔猪在试验期内的腹泻状况。
4.5.2血液生化指标的测定
试验结束时,分别从各重复中选1头仔猪,于清晨8:00进行空腹前腔静脉采
血15ml,其中约2ml的血液在无菌条件下加肝素钠抗凝用于Et%、Ea%测定;其
中2—3ml的血液在采血后无菌的条件下立即向制全血的血样中加入1640培养液,
防止细胞死亡,用于淋巴细胞转化率测定i其余的血液在室温下静止1h使之自然
凝固,用3000r/min离心15min制血清,放入.70℃的冰箱中备用。取3.5ml送雅
安市第二人民医院化验科进行血液生化指标、Ig检测。
(1)测定血液中的总蛋白、白蛋白、球蛋白、血红蛋白、胆固醇、甘油三脂(雅
安市第二人民医院化验科测定)。
总蛋白:双缩脲法作比色测定
白蛋自:溴甲酚绿比色法
球蛋白:总蛋白.白蛋白
白蛋白/球蛋白:ALB/GLO
胆固醇:磷硫铁法(GOD双试剂法)
(2)测定血清尿素氮
用脲酶.波氏比色法试剂盒再结合全自动生化分析仪(日本岛津CL-7200
型)来测定。
(3)测定血液中的酶活
谷丙转氨酶、谷草转氨酶:用IFCC动力法结合全自动生化分析仪(日本
岛津CL-7200型)来测定。
4.5.3免疫指标的测定
4.5.3.1体液免疫的测定
血清溶血素于试验第2l天各重复选取l头仔猪肌肉注射2m120%CRBC(鸡
红细胞)。分别于注射后7天,采前腔静脉血,测定血清中溶血素的含量。参照
Heugten等(1994)【19】方法进行,免疫血清用sA液稀释10倍,然后采用半数溶血
值法,测定血清抗鸡红细胞抗体(溶血素)。
血液抗体的测定 通过测定lgA、IgG、IgM来反映体液免疫水平,用免
疫投射比浊法试剂盒结合全自动生化分析仪(日本岛滓CL-7200型)来测定(雅
安市第二人民医院化验科测定)。
4.5.3.2细胞免疫的测定
T淋巴细胞转化率 采用RPM].1640组织培养基进行白细胞培养,植物血
凝素(PHA)作为非特异性促有丝分裂原,根据形态学方法检查法,计算T淋巴细
胞转化率。
淋巴细胞转化率=转化的淋巴细胞数(过渡型+母细胞)/淋巴细胞总数(转
化型、过渡型及未转化型)
迟发性过敏反应 参照Komegay等(】方法进行。在试验第27天每
重复随机挑选1头猪,右大腿内侧距最后乳头5cm及距腹中线5cm处皮内注射
O.1m!植物血凝索(PHA)生理盐水溶液(2500ug/m1),同时左大腿内侧注射等量
生理盐水,画圆圈标记注射部位,24小时后用游标卡尺测定试验仔猪双侧皮褶
厚度的变化。
E.玫瑰花环实验 参照刘玉斌等(1989)I酷】方法进行。其基本过程是分离
动物外周淋巴细胞并与一定比例的SRBC混匀,在37。C水浴中保温25min,取出
以500r/min离心5rain,弃上清留少许液体,即可用此细胞液进行涂片、染色、
镜检计数200个淋巴细胞,凡淋巴细胞表面吸附三个以上红细胞的,即为Fc受
体阳性细胞,计算出淋巴细胞总数中Ea-花环的百分率;如将混匀的细胞悬液置
4℃冰箱中作用2h形成的花环,代表T淋巴细胞总数,称为Et一花环,根据以上
的方法计算Et花环的百分率。
4.5.3.3非特异免疫的测定
采用朱立军等(】,免疫学常用实验方法进行巨噬细胞功能测定。
巨噬细胞吞噬率=(吞噬鸡红细胞巨噬细胞数/200)×100%
巨噬细胞吞噬指数=200个吞噬细胞中吞噬红细胞总数,吞噬的巨噬细胞数
4.5.3.4血液淋巴细胞数量的测定
采用白细胞分类计数方法测量血液中淋巴细胞数及占白细胞的比例(雅安市
雨城区人民医院化验科测定)。
4.6数据统计分析
所有数据采用平均数±标准误表示,用SPSSll.0软件进行统计分析,采用
Duncan法进行多重比较。
5、试验结果
5.1不同蛋白水平对仔猪生产性能的影响
表6不同蛋白水平对仔猪生产性能的影响
Table6Effectofdifferentproteinlevels011pigletperformance
CP% 14% 17% 20% 23% 26%
6。51+o.25
9.17±0.306
6.47+o.08
10.0t±0.25“
13.60±0.48。15.83±0.42。
189.75±11.886
316.52±12.82c
253.14±10.97"
252.50±17.27b
415.18±14.196
333.84±14.27b
6.42±0.17 6.38±o.11 6.45*-0.17
9.99±0.19“ 10.91--+0.42-9.05±0.266
17.01±0.4矿18.14±0.41。13.13±0.44c
55.15±14.10b321.50±21.99B185.50*-8.33‘
516.53±18.61。287|80±13T34c
365.24+-30.97b419.02±18.4于236.65110.76c
372.25±17.28c437.75±19.57".±22.71。317.50±8.50。
6.27I808.91+_.24.22a854.00+_56.10'557.92_+20.59c
522.58±22.±18._+10,*_.36.15·437.71±14.06c
1-2W 1.97±0.0881.75±o.066 L61±0.08bc
3-4W 2.13±0.02" 1.95-+0..吖
1.46--2-0.03‘
1.67±0.06c
1.72_-_+0.046
1-4W 2.05±0.04' 1.85±0.046 1,66±0.吁 1.56±0.03c 1.83±0.066
注:屑注不l母爱示差异显著--丑、b、c、d表刁i差异显著(p<0,05);肩注相同或者没有扁洼的表月i差异水显
由表6可知,仔猪在试验的前期(I-2W)、全期(1-4W)的平均同增重都
以23%CP组最高,差异显著(p0.05)。在前期(1-2W)23%CP组的平均日增重分别比蛋白水
平为14%组、17%组、20%组、26%组的提高69.43%、27.32%、26.00%、73.32%,
而20%CP组与17%CP组的差异不显著(p>O.05);在试验的后期(3.4W)23%CP
组的平均日增重分别比蛋白水平为14%组、17%组、20%组、26%组的提高
63.19%、24.41%、8.69%、79.48%,而23%CP组的平均臼增重与20%CP组的差
异不显著(p>0.05);在试验的全期(1-4W)23%CP组的平均日增重分别比蛋白
水平为14%组、17%组、20%组、26%组的提高65.53%、25.52%、14.72%、77.06%,
而20%CP组的平均日增重高于17%CP组,但差异不显著(p>O.05)。
在三个阶段的平均日采食量均以23%CP组最高,26%CP组最低,差异显著
(p0.05)。
在试验的三个阶段料重比以23%CP组最低,依次是20%组、26%组、17%
组、14%组最高;23%CP组与14%、17%、26%CP组差异显著(pO.05)。在前期(1-2W)23%CP组的料重比分别比
蛋白水平为14%组、17%组、20%组、26%组的降低26.15%、16.57%、9_31%、
15.11%;后期(3.4W)23%CP组的料重比分别比蛋白水平为14%组、17%组、
20%组、26%组的降低21.60%、14.36%、2.34%、14.36%;在试验的全期(1-4W)
23%CP组的料重比分别比蛋白水平为14%组、17%组、20%组、26%组的降低
23.90%、15.67%、6.02%、14.75%。
不同的生产性能指标值随饲粮蛋白水平增加呈二次曲线变化。因此,可建立
回归方程求出饲粮最适的粗蛋白水平(见表7)。
由表7可知,从ADG来看,仔猪断奶后的1-2W饲粮蛋白质的适宜水平为
20.4%;3-4W饲粮蛋白质的适宜水平为20.1%;1-4W饲粮蛋白质的适宜水平为
20.2%。从ADFI来看,仔猪断奶后的1-2W饲粮蛋白质的适宜水平为19.6%;3-4W
饲粮蛋白质的适宜水平为19.5%;1-4W饲粮蛋白质的适宜水平为19.5%。从F/G
来看,仔猪断奶后的1-2W饲粮蛋白质的适宜水平为21.9%;3-4W饲粮蛋白质
的适宜水平为21.2%;1-4W饲粮蛋白质的适宜水平为21.4%。
表7不同生产性能指标值(y)与不同蛋白水平(x)的回归方程
Table7Regressiveequationbetweenp rformanceandproteinlevels
项目 回归方程 R2 P 最优解(x)
腹泻率(%】 25.00+2.0481 .75_+6.2,4.7.21“
腹泻频率(%) 8.33-+0....0.40A
腹泻指数 1.56±0..4081瑚±0.458 2.06±0..72^
注:肩注不同表示差异显著一A B表示差异撮显著(p《O.01);肩注相同的表示差异不显著.
由表8可知,26%CP组的腹泻率、腹泻频率、腹泻指数都极显著的高于其
他各组(pO.05),17%CP组和20%CP组内都有一个重复组没有出现腹泻的症状;但是
从数值上来看,20%CP组的腹泻率、腹泻频率、腹泻指数都低于其他三个组。
5.2不同蛋白水平对仔猪血液生化指标的影响
由表9可知,血液中的总蛋白、自蛋白以23%CP组最高(pO.05);14%CP组与17%CP组之间的差异不显著(p>0.05),随着饲
粮蛋白质水平的增加血液中的总蛋白、白蛋白含量以及白蛋白/球蛋白的值先增
加后下降。血液中的球蛋白以17%CP组最高,20%CP组最低,试验的五个组之
间的差异不显著(p>0.05)。白蛋白,球蛋白的比值在饲粮蛋白水平为20%、23%、
26%组间差异不显著(p>0.05),却显著高于饲粮蛋白水平为14%和17%组。然
而,血液中血红蛋白、尿素氮各组问差异不显著(p>O.05)(见表9)。
血液中的甘油三酯各组间差异不显著(p>0.05)。总胆固醇的含量以20%CP
组最高,但是与14%CP组的差异不显著(p>O.05),与26%CP组差异显著
(pO.05)(见表9)。
血液中貉丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性都以26%CP组最高,
显著的高于其他组(p0.05),26%CP
组GPT的活性分别比蛋白水平为14%、17%、20%、23%组提高了114.31%、
53.56%、111.79%、137.97%;26%CP组GOT的活性分别比蛋白水平为14%、
17%、20%、23%组提高了96.34%、27.44%、81.58%、60.46%(见表9)。
表9不同蛋白水平对仔猪血液指标的影响
Table9Effectofdifferentpro einlevelsOnbloodparametersofpiglets
注:肩注小同表永差异显著-_a、b、c表示差异显著(p0.05);由于溶
血素各组内重复数之间的差异较大,组问差异并不显著。23%CP组的IgM最高,显
著高于其他各组(pO。05),20%CP组
与26%CP组之间差异不显著(p>0.05)。蛋白水平为20%、23%组的IgA显著高于其
他三组(p0.05)。
从免疫球蛋白的总量束看,各处理之间差异不显著(p>0.05)。
5.3.2不同蛋白水平对仔猪细胞免疫的影响
表11不同蛋白水平对仔猪细胞免疫的影响
Table11Effectofdifferentpro einlevelsOilcellularimmunefunctionofpiglets
注:肩沣不同表示差异显著-_a、b、c表示差异显著(pO.05);23%CP组的T淋巴细
胞转化率比蛋白水平为14%、17%、20%、26%组的分别提高了9.25%、5.66%、
5.64%、0.43%,蛋白水平为14%、17%、20%组之间、23%组与26%组之间的T
淋巴细胞转化率差异不显著(p>0.05)。17%CP与20%CP组之间的Ea差异不显著
(p>O.05),但明显高于14%CP组(pO.05)。PHA皮肤迟发性过敏反应试
验结果显示,各组间皮褶厚度的变化差异不显著(p>0.05)。但从数值上看,20%CP
组皮褶厚度的变化最大,随着蛋白质水平增加仔猪皮褶厚度变化先增加后减少的
5.3.3不同蛋白水平对仔猪非特异性免疫的影晌
表12不同蛋白水平对仔猪非特异性免疫的影响
Table12Effectofdifferentpro einlevelsonnon—specificimmunefunctionofpiglets
注:肩注不同表示差异显著一a、b表示差异显著(pc0.05):屑注相同和没有肩注的袭不差异不显著。
由表12可知,不同蛋白水平对仔猪巨噬细胞吞噬率影响差异显著(p<O.05)。
26%CP组的巨噬细胞吞噬率显著高于14%CP组(pO.05)。5个蛋白水平处理组的仔
猪巨噬细胞吞噬指数差异不显著(p>O.05)。
5.3.4不同蛋白水平对仔猪细胞计数的影晌
表13不同蛋白水平对仔猪细胞计数的影响
Table13Effectofdifferentpro einlevelsoncellnumberofpiglets
注:肩注不同表示差异显著--a、b表示差异显著【咩0.05);肩注相同或者没有肩注的表示差异不显著。
由表13可知,不同蛋白水平对猪血淋巴细胞数的影响差异不显著(p>0.05);
但从数值上看,蛋白水平为14%与17%组猪的血淋巴细胞数高于蛋白水平为
20%、23%、26%组。14%CP组试验仔猪的血淋巴细胞百分数显著高于蛋白水平
为17%、20%、23%、26%组(p0.05)。
6.1不同蛋白水平对早期断奶仔猪生产性能的影响
本试验的结果表明,饲粮蛋白水平过高或者过低都会显著影响仔猪的生产性
能。饲粮适宜的蛋白水平既有利于克服蛋白水平过高或者过低对仔猪的不良影
响,又能满足仔猪对氨基酸的需要和保证仔猪最佳的生产性能。粗蛋白水平为
14%与26%组的ADG差异不显著,但是都显著的低于其他各组,其原因可能是
一方面当饲粮中蛋白质不能满足需要量时,仔猪的生产性能下降:另一方面当饲
粮中蛋白质超过需要量时,其转化率下降,旦会造成体内氨基酸不平衡,并影响
动物对其他营养物质的消化吸收,从而导致生产性能下降。只有蛋白质和必需氨
基酸满足需要且氨基酸达到平衡时,仔猪才能获得较高的生产性能。本试验发现,
仔猪的ADG、ADFI、F/G都随饲粮蛋白水平的增加呈二次曲线变化。随着饲粮
蛋白水平的增加,仔猪的ADG、ADFI先增加后降低,而F/G先降低后增加。仔
猪在断奶后的1-4W,从ADG来看,仔猪适宜的蛋白水平为20.2%;从ADH
来看,仔猪适宜的蛋白水平为19.5%;从F/G来看,仔猪适宜的蛋白水平为21.4%。
这表明针对不同的生产性能指标作为考察对象,仔猪对蛋白质的需要量不同。以
ADG作为考察指标,仔猪在断奶后的1-2W其适宜的蛋白水平与NRC(1988)
[131、Hays等(1972)[17l、董国忠(199513)阿、林映才等(2001a)[221、侯永
清等(]报道的结果一致;与NRC(1998)19】推荐的5.10kg仔猪蛋白质
需要量23.7%相比下降13.92%。仔猪在断奶后的3-4W适宜的蛋白水平接近于
NRC(1998)推荐的10-20kg仔猪蛋白质需要量20.9%,比NRC(1988)【1]J、
侯永清等(2001b)[70l、林映才等(2001b)[71】报道10-20kg仔猪蛋白质需要量提
高11.67%。仔猪断奶后的1-4W适宜的蛋白水平为20.2%,这一结果与
Menge(、董国忠等(1995a)【8l报道结果一致;丽比Meade(1969)、Youngand
Jamicson(1970)|18l报道的仔猪蛋白质需要量高12.22%,比陈代文等(1995)06】
推荐的3周龄断奶仔猪玉米.豆饼饲粮中适宜的蛋白质水平低15.83%。
腹泻是影响断奶仔猪生长的重要原因之一。腹泻的原因很多,其中饲料是消
化道最直接的接触物,因而是仔猪腹泻的原发性原因㈣。仔猪早期断奶后,饲
料由母乳转变为固体饲料,由于肠道对饲粮的过敏反应,断奶后的仔猪小肠表现
为严重绒毛脱落、肠粘膜细胞增生和隐窝细胞有丝分裂速度加快。当摄入抗原性
饲料后会加剧这种情况的变化,引起肠道损伤,造成大肠杆菌在肠道中附着和增
殖(卞德民,1996),加上仔猪早期断奶后肠道受损以及消化酶活性降低等原因,
致使采食的蛋白质不能很好地被消化吸收,大量的蛋白质涌入大肠发生腐败,产
生的氨和胺类对结肠黏膜有毒性或药理活性作用(Guggenheim,1986;Visek,
1978),不仅使结肠吸收水分和无机盐的能力下降,而且还使肠液大量渗出,致
使粪便中水分含量增加,腹泻加重i73】:此外,断奶仔猪由吸吮母乳转为采食固
体饲料,往往会发生拒食现象,而在饥饿一段时间后过度采食,使工F在发育的消
化系统处于超负荷状态,引起消化不良,加剧了腹泻程度。
腹泻率反映发病率;腹泻频率、腹泻指数反映腹泻的严重程度,三项指标结
合使用,可较为全面地反映仔猪在试验期内的腹泻状况。本试验发现,当饲粮蛋
白水平超过20%时,随着饲粮蛋白水平的增加,仔猪的腹泻率、腹泻频率、腹泻
指数都增加。蛋白水平为26%组的腹泻率、腹泻频率、腹泻指数都极显著的高于
其他各组(p0.05),表明不同的蛋白水平对仔猪血液血红蛋白含量没有影响,
这与彭健等(报道一致。雷秋霞(2003)研究认为,断奶一2月龄肉兔
的血清蛋白质含量随饲粮蛋白质水平的提高而先上升后下降,但差异不显著
(p>0.05),说明饲粮蛋白水平(除蛋白水平外,其他指标相同)对血清蛋白质
含景影响不大176j。
此外,Wykes等(1996)1喂给3周龄仔猪低蛋白饲粮(3%粗蛋白)8周盾发现,
与对照组(20%粗蛋白)比,仔猪血浆尿素氮、总蛋白、清蛋白、氨基酸,特别是
必需氨基酸含量显著下降【硎。据报道,动物生长迅速代谢增强时,血液中就需
要相对较多的带极性基团的白蛋白运输合成体组织的原料和代谢废物,当肝脏合
成功能发生障碍时ALB降低与GLO的}B例下降。本试验中,随着蛋白水平的降
低,白蛋白的含量以及AuB/GLO下降,当饲粮蛋白含量由23%降到14%时,
ALB的含量降低了26.77%,删GLO的比值降低了27.60%。
血清中的尿素氮(SUN)是通过鸟氨酸循环合成,是蛋白质、氨基酸代谢的
终产物,其浓度受饲料中蛋白质、氨基酸量与质的影响,其含量与体内氮沉积率、
蛋白质或氨基酸利用率有显著负相关I781。因此,SUN值可以准确的反映动物体
内蛋白质代谢和氨基酸之间的平衡状况、较低的血清SUN值表明氨基酸平衡好,
机体蛋白质合成率较高(Hahn和Baker,1994;MalmolLl988;Smith,1988;Coma
等,1995)。本试验中各组仔猪SUN差异不显著(p>o.05);导致这一结果的原因
可能与饲粮氨基酸模式以及检测的误差有关。Brendemuhl等(1987)研究不同蛋白
质水平(380e,/a和7609,d)对泌乳猪血清尿素氮的影响时发现,饲粮蛋白质可直接
影响血清尿素氮含量,说明血清尿素氮与蛋白质代谢有密切关系I删。在饲粮蛋
白质含量稳定的情况下,血清SUN下降是由于蛋白质利用效率增加的结果。
Coma等(1995)发现瘦肉组织的增长与血清尿素氮的浓度显著负相关【79】:其他的
研究也发现血清尿素氮浓度与肌肉增长或猪的日增重呈负相关18lJ。林映/j等
(2001a),采食单位蛋白质的SUN浓度无显著差异(D>0.05)122】。
胆固醇是细胞膜的成分,因而体内不能缺少它,但太多时会引起动脉硬化;
血清胆I固醇和甘油三酯水平则反映体内脂类代谢情况,脂类在体内运输发生障碍
时,血脂含量会明显升高。本试验发现,仔猪血清中的甘油三酯各组间差异不显
著(p>O.05)。总胆固醇的含量以20%组最高,其次是14%组,两组的总胆固醇含
量都显著高于其他各组口0.05)。上述结果说明不同蛋白水
平对免疫球蛋白几乎没有影响。
本试验发现,不同蛋白水平对仔猪的血清溶血素没有影响。这-与Heugten等
(1994)11”、Crenshaw等(1986)【嘲的研究结果一致。Heugten等(1994)在研究饲粮
粗蛋白质水平(对照组的120%和60%)对断奶仔猪(以大肠杆菌脂多糖(LPS)处理)
生产性能和免疫功能影响的试验中发现,饲粮粗蛋白水平对断奶仔猪SRBC或卵
清蛋白的抗体反应没有影响,亦不能缓解免疫攻击引起生产性能的下降。
Price(1978)研究指出,蛋白质缺乏抑Nd,鼠对SRBC的抗体反应。Cooper等(1974),
Good等(1980),Ahmed等(1985)在小鼠和大鼠的实验中发现当饲粮蛋白水平从足
够降到缺乏时,其体液免疫能力降低【89,90,町】。Glick等()研究发现,小
鸡饲喂极度缺乏CP的饲粮时,降低机体对SRBC抗体反应和抑制T细胞型免疫力
【矧。饲粮蛋白质水平对体液免疫功能的影响结果不同的原因可能与蛋白质的缺
乏程度和蛋白质的组成有关。BounousandKongshavn(1985)研究发现饲喂乳清
蛋白的鼠比喂酪蛋白、大豆蛋白、小麦蛋白饲粮的鼠具有较高的体液免疫水平,
但加Phe到乳清蛋白饲粮时,则降低了体液免疫反应【92l。
综合本试验对体液免疫指标的分析讨论表明不同蛋白水平对仔猪体液免疫
没有影响。
6.3.2不同蛋白水平对早期断奶仔猪细胞免疫的影响
以PHA作为促分裂因子来检测淋巴细胞的转化功能,其转化率的高低常作为
衡量机体免疫水平的指标,T淋巴细胞转化率越低,意味着淋巴细胞在外来因子的
刺激下增殖反应下降,机体的细胞免疫能力下降【931。T淋巴细胞在细胞免疫功能
方面发挥着重要作用,同时具有免疫调节作用I州。早期玫瑰花环(Ea)形成的T
淋巴细胞是对SRBC具有高度亲和力的T细胞亚群,它与T细胞的体内外功能活性
密切相关,能更敏感地反映机体细胞免疫的水平和动态变化,是目前检测细胞免
疫水平最为简便快速的方法之一。试验的蛋白水平为23%、26%组的T淋巴细胞
转化率、Ea显著高于其他各组(p0.05),这表明在此氨基酸模式下,蛋白水平
在14%.20%之间,蛋白水平对T淋巴细胞转化率没有影响;但是随着蛋白水平进
一步增加,uT先增加后降低,在蛋白水平为23%时达到最大值。本试验中随着
蛋白水平的增加,Ea先增加后降低,蛋白水平23%时仔猪的Ea达到最大值,表明
不同蛋白水平对Ea有显著的影响。
由于PHA是一种促有丝分裂原,动物皮下组织对PHA的反应状况是一种很好
的体内细胞免疫评定指标195,961。本试验的PHA皮肤试验结果显示,各试验组皮褶
厚度的变化差异不显著(p>O.05)。从数值上看,随着蛋白质水平增加仔猪皮褶
厚度变化先增加后减少的趋势。这可能是由于仔猪的日龄较大或者猪只个体差
异,对PHA的迟发性过敏反应不敏感。Gonzalez等(1993)在研究猪从出,土NloN
的免疫学参数时发现,O一4周哺乳仔猪的自细胞数、总T淋巴细胞数、高亲合力T
淋巴细胞数及Fc受体B淋巴细胞数量少,对皮下注射PHA的反应差[971。B1echa等
(1983)研究了2、3、4、5周龄断奶对体内、外细胞介导免疫的影响,结果发现,PHA
皮内刺激反应在2、3周龄断奶被极显著抑制,4周龄断奶显著抑制,而5周龄断奶
变化不明显【951。
综合以上结果表明,不同蛋白水平对仔猪细胞免疫的影响较大,适宜的蛋白
水平会提高仔猪机体的细胞免疫功能。但是有文章报道降低蛋白质和氨基酸水平
会提高细胞免疫功f毙t89,98】。这可能与动物的种类、饲粮的组成、蛋白质的梯度等
6.3.3不同蛋白水平对早期断奶仔猪非特异性免疫影响
巨噬细胞是一类重要的免疫细胞,在免疫系统中具有吞噬杀菌、抗肿瘤、递
呈抗原及参与免疫调节等功能I吲。此外巨噬细胞可以通过直接作用或间接通过
所分泌的各种可溶性因子对免疫系统的启动及调节起关键性作用。机体免疫系统
的正常发育和机能健全的物质基础是蛋白质。蛋白质缺乏会导致外周巨噬细胞数
下降,吞噬细胞活性降低。
在本试验中蛋白水平26%组的巨噬细胞吞噬率显著高于14%组(口0.05)。而不同蛋白水平对仔猪巨噬细胞吞噬指数没有影响,但从数值上看,
蛋白水平为26%组的巨噬细胞吞噬指数比14%组提高了3.25%。这表明蛋白水平
过高或过低都会对仔猪的非特异性免疫产生显著的影响。饲粮中蛋白质缺乏可导
致畜禽淋巴器官发育缓慢,胸腺、脾脏重量减轻,淋巴组织器官中淋巴细胞数量
减少、外周巨噬细胞数量和吞噬细胞吞噬活力显著降低。从本试验的结果来看,
蛋白水平14%组的巨噬细胞吞噬率、吞噬指数最低,巨噬细胞功能减弱,表明
CPl4%的饲粮不能满足仔猪蛋白质的需要。Qureshi等(1991)发现,饲粮中蛋白质
的边缘缺乏,能提高鸡的体液免疫和巨噬细胞功能。
6.3.4不同蛋白水平对早期断奶仔猪细胞计数的影响
本试验发现,在此氨基酸模式下,饲粮不同蛋白水平对仔猪血淋巴细胞数量
没有影响;蛋白水平14%组试验仔猪的血淋巴细胞百分数显著高于其他各组
(p0.05),这与候永清等(的研究结果一致。经统计分析表明,随着
饲粮蛋白水平的增加,血液淋巴细胞百分比下降,这与Cohey(1967)、
Gilliray(1967)、Kelley(1987)报.道的结果相反。其原因可能与饲粮的组成以及猪的
品种不同有关,还有待进一步的研究。Cohey(1967)的研究表明,饲粮蛋白质摄
入量由0增加到35%时,猪血清抗体效价和血液淋巴细胞百分比直线上升,嗜中
性白细胞百分比相应减少。Gilliray(1967)报道,随饲粮蛋白质含量增多,仔猪对
沙门氏杆菌的杆菌滴度升高,增加饲粮蛋白质也可使血液淋巴细胞的百分比呈直
综合以上的讨论,就本试验所设蛋白水平来看,仔猪免疫机能最佳时的适宜
蛋白质需要量为23%。
7、小结与结论
7.1仔猪生产性能指标(ADG、ADFI、F/G)随饲粮蛋白水平增加呈二次曲线
7.2随着饲粮蛋白水平增加,仔猪血液中的TP、ALB含量以及ALB/GLO的值
先增加后下降:而蛋白水平对仔猪血清中的Hb、GLO、SUN的含量没有影响。
7.3饲粮蛋白水平显著影响仔猪机体的细胞免疫机能,而对机体体液免疫反应
没有影响。
7.4 21日龄断奶DLY仔猪,以ADG作为评定指标,在断奶后的1—4W饲粮蛋白质
的适宜水平为20.2%;以F/G作为评定指标,断奶后的1-4W饲粮蛋白质的适宜水
平为21.4%。仔猪免疫机能最佳时的饲粮蛋白质适宜水平高于生产性能最佳时的
饲粮蛋白质水平,就本试验所设蛋白水平来看,仔猪免疫机能最佳时的饲粮蛋白
质的适宜水平为23%。
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本论文是在恩师陈代文教授和张克英教授的悉心指导和无微不至的关怀下
完成的。恩师严谨的治学态度、渊博的学识、忘我的工作精神和无私奉献的崇高
品德将使我终生受益:恩师孜孜不倦的求知迸取精神、光明磊落的胸襟、辨证睿
智的处世哲学是我矢志不渝追求的宝贵财富。三年来,恩师的人格魅力无时无刻
不激励着我,鼓舞着我,令我在学习、工作、生活各个方面,都取得了长足的进
步。在此,谨向恩师致以崇高的敬意和最衷心的感谢!
特别感谢在论文写作过程中给予耐心指导的王康宁研究员、周安国研究员、
周小秋教授、吴德副教授、王之盛副教授、贾刚副教授、余冰老师、丁雪梅老师;
感谢在试验实施和样品分析过程中给予热情帮助的曾静康老师、吴秀群老师、陈
狭君老师、赵叶老师、蔡景义老师、吴树安老师、朱碧泉老师、宋德田老师。在
此,谨向他们表示最诚挚的谢意!
特别感谢动物科技学院微生物实验室的熊焰教授和2002级研究生刘中奇在
试验的实施和样品的分析过程中给予的大力支持和热情帮助。感谢营养所的博士
研究生金明昌、陈晓春;硕士研究生段志富、张敏贤、唐春祥、吕刚、张金伟、
彭焕伟、罗均秋、孙培鑫等同学给予的热情帮助。
特别感谢我的家人在我最困难的时候给予我的支持、关心、照顾和鼓励!尤
其感谢我的爱人冯天丽对我学习上的理解和生活上无微不至的关心与照顾,以及
对我论文工作所做出的默默无闻的奉献。
感谢四川I农业大学动物营养研究所这片沃土为我们的成长所付出的努力。衷
心祝愿四川I农业大学动物营养研究所再创辉煌。}

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