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高中生物DNA探针含义是什么?运行原理?
DNA探针是最常用的核酸探针,指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针.现已获得DNA探针数量很多,有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞DNA探针.这类探针多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列.这些DNA片段须是特异的,如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针.这些DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用.以细菌为例,目前分子杂交技术用于细菌的分类和菌种鉴定比之G+C百分比值要准确的多,是细菌分类学的一个发展方向.加之分子杂交技术的高敏感性,分子杂交在临床微生物诊断上具有广阔的前景.细菌的基因组大小约5×106bp,约含3000个基因.各种细菌之间绝大部分DNA是相同的,要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后分别克隆得到包含基因组的全信息的克隆库.然后用多种其它菌种的DNA作探针来筛选,产生杂交信号的克隆被剔除,最后剩下的不与任何其它细菌杂交的克隆则可能含有该细菌特异性DNA片段.将此重组质粒标记后作探针进一步鉴定,亦可经DNA序列分析鉴定其基因来源和功能.因此要得到一种特异性DNA探针,常常是比较繁琐的.探针DNA克隆的筛选也可采用血清学方法,所不同的是所建DNA文库为可表达性,克隆菌落或噬斑经裂解后释放出表达抗原,然后用来源细菌的多克隆抗血清筛选阳性克隆,所得到多个阳性克隆再经其它细菌的抗血清筛选,最后只与本细菌抗血清反应的表达克隆即含有此细菌的特异性基因片段,它所编码的蛋白是该菌种所特有的.用这种表达文库筛选得到的显然只是特定基因探针.  对于基因探针的克隆尚有更快捷的途径.这也是许多重要蛋白质的编码基因的克隆方法.该方法的第一步是分离纯化蛋白质,然后测定该蛋白的氨基或羟基末端的部分氨基酸序列,然后根据这一序列合成一套寡核苷酸探针.用此探针在DNA文库中筛选,阳性克隆即是目标蛋白的编码基因.值得一提的是真核细胞和原核细胞DNA组织有所不同.真核基因中含有非编码的内含子序列,而原核则没有.因此,真核基因组DNA探针用于检测基因表达时杂交效率要明显低于cDNA探针.DNA探针(包括cDNA探针)的主要优点有下面三点:①这类探针多克隆在质粒载体中,可以无限繁殖,取之不尽,制备方法简便.②DNA探针不易降解(相对RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性.③DNA探针的标记方法较成熟,有多种方法可供选择,如缺口平移,随机引物法,PCR标记法等,能用于同位素和非同位素标记.  DNA探针可以用来诊断寄生虫病,现场调查及虫种鉴定,可用于病毒性肝炎的诊断,遗传性疾病的诊断,可用于改造变异的基因,可用于检测饮用水病毒含量.具体方法:用一个特定的DNA片段制成探针,与被测的病毒DNA杂交,从而把病毒检测出来.与传统方法相比具有快速、灵敏的特点.传统的检测一次,需几天或几个星期的时间,精确度不高,而用DNA探针只需一天.据报道,能从1t水中检测出 10个病毒来,精确度大大提高.  DNA探针是一个单链的RNA,通过这条特定的RNA,让RNA上的碱基和目标DNA的碱基配对(目标DNA已经解旋,并分成两条链),
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dna探针技术
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DNA探针技术又称分子杂交技术,是利用DNA分子的变性、复性以及碱基互补配对的高度精确性,对某一特异性DNA序列进行探查的新技术。
dna探针技术原理
DNA探针利用同位素、生物素等标记的特定DNA片断,该片断可大至寄生虫基因组DNA,小至20个碱基。当DNA探针与待测的非标记单链DNA(或RNA)按碱基顺序互补结合时,以氢健将2条单链连接而形成标记DNA-DNA(或标记DNA-RNA)的双链杂交分子。将未配对结合的核苷酸溶解后用检测系统(放射自显影或酶检测等)检测杂交反应结果。由于DNA分子碱基互补的精确性,单链DNA探针仅与样品中变性处理的DNA单链出现配对杂交,由此决定了探针的特异性;用放射性同位素(如32P)或生物素标记探针,使杂交试验同时具有高度的敏感性。
dna探针技术与基因工程的关系
现已获得DNA探针数量很多,有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞DNA探针。这类探针多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。所以DNA探针属于基因工程重要技术之一。比如基因工程应用于环境监测,可以用DNA探针检测饮用水病毒的含量。具体方法:用一个特定的DNA片段制成探针,与被测的病毒DNA杂交,从而把病毒检测出来。与传统方法相比具有快速、灵敏的特点。传统的检测一次,需几天或几个星期的时间,精确度不高,而用DNA探针只需一天。据报道,能从1t水中检测出 10个病毒来,精确度大大提高。
dna探针技术DNA探针
DNA探针是以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体。DNA探针将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针。可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或其他检测手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。当前位置: &
探针的英文
音标:[ tànzhēn ]&&
英文翻译 wire probe
例句与用法1.Leptonic probes do not suffer from this handicap .轻子探针不会遇到这一困难。2.The forms of thermistors are beads, probes, disks, and rods .热敏电阻的形状有珠状、探针状、圆片状和柱状。3.Electric bulb and socket, with a pair of prods are used for testing for element shorts and defects .用电灯、插座和一对探针来检查各部的短路和故障。4.The alteration can be created by moving the charges region or probe, or by placing a chopper either before or after the probe .交变作用可以由带电区域或探针运动而形成,也可以在探针前面或后面,安装一断续器产生交变作用。5.Direct palpation with the fingers or indirect palpation with a probe is aimed at determining the size, consistency, temperature and sensitiveness of a lesion or organ .用手指直接触诊或用一根探针间接触诊,目的在于确定损害或器官的大小、坚度、温度和敏感性。6.The applications of scanning probe microscopy a review扫描探针显微术的应用综述7.Verification regulation of electron probe microanalyzer电子探针分析仪检定规程8.Specification for calibration of stylus instruments表面结构测量用探针式仪器规范9.The doctor probed the gunshot wound of the soldier医生以探针探查战士的枪伤。 10.2 torsion device include angle probe , air cylinder2扭簧装置含探针空压气缸&&更多例句:&&1&&&&&&&&
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All rights reserved高选择性荧光探针_百度百科
高选择性荧光探针
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WAKO新推出BES-H2O2,其作为细胞源性H2O2检测探针有很高的选择性,可用于辨别细胞应答和疾病中H2O2的动态功能。
ES-H2O2H2O2高选择性荧光探针
活性氧分子(Reactiveoxygenspecies,ROS)如O2-,H2O2,HO·,在多种疾病的生理过程中是很重要的调节因子。DCFH(2’,7’-Dichlorofluorescein,2’,7’-二氯荧光黄)及其双乙酸盐衍生物已被广泛用作测定细胞源性H2O2的荧光探针,但这类复合物有一个很大的缺点就是对H2O2的低选择性。
1.对过氧化氢H2O2高度选择性
2.可穿透细胞膜
3.检测细胞原性过氧化氢H2O2
4.可用于分子成象
BES-ThioThio/Serenol选择性荧光探针
被用来检测硫醇基团和胆碱脂酶活性的几种硫醇基团化学发光和荧光试剂都是低亲水性的,检测中需分开酶反应和检测反应步骤。
BES-Thio有很高的亲水性,可配成水溶液使用,可以乙酰胆碱(acetylthiocholine)和丁酰硫代胆碱(butyrylthiocholine)作为底物测定胆碱脂酶(cholinesterase)的活性。并且,通过调节PH值,BES-Thio可用于检测serenol基团,其硫醇基的S被Se代替,也可用作硒蛋白检测试剂。
1.高亲水性
2.硫醇基团(Thiol)PH应答值7.4
3.serenol基团PH应答值5.8
BES-SoO2-高选择性荧光探针
O2-(superoxide)是一种低细胞毒性的活性氧(ROS),可作为分子定位试剂。在几种检测O2-的化学发光和荧光方法中,都用到氢化乙啡啶(hydroethidine),但其对O2-有较低的选择性,而BES-So通过非氧化还原反应依赖机制,对O2-有高选择性。
细胞内脂酶作用O2-形成deacetoxymethyl复合物。}

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