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有关广西主栽平菇种质资源评价——论文
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有关广西主栽平菇种质资源评价——论文
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亩产20万元平菇高产栽培技术
核心提示：摘要：在同一日光大棚，面积700平方米，连续三年种植平菇，通过选择不同品种，采取科学种植，达到生物效率140%---160%,亩产值20多&摘要：在同一日光大棚，面积700平方米，连续三年种植平，通过选择不同品种，采取科学种植，达到生物效率140%---160%,亩产值20多万元。纯收入10多万元
平菇是山东省种植量面积最大，产量最高的，但大面积种植，产量不稳定。主要原因种植时间安排不当，品种选择欠佳，管理方法不够科学。本人从事食用菌制种栽培20多年，通过对一农户三年指导，在一面积700平方米日光大棚内，投料8万斤，三年连续产值达20多万元，纯收入10多万元。现将栽培技术总结如下：
配方：马铃薯（去皮）200克、葡头糖20克、蛋白胨2克、细玉米粉10克、琼脂18&20克。灭菌后接种，一般7天长满。
配方:棉籽壳89%、麦麸10%、生石灰1%。用17x35cm塑料折角袋，每袋装料400克，套环和棉塞封口。高压灭菌后接入母种，一般40天长满。
3栽培种制作
配方;棉籽壳93%、麸皮5%、石灰2%、另外加入千分之一的多菌灵或克霉灵，常压灭菌，100摄氏度保持10小时，再闷一夜，晾凉后接种箱无菌接种。一般25&30天长满。
4栽培时间：
大规模栽培，为了降低成本，往往采用大袋栽培，一般用28x55cm 低压聚乙烯袋，所以播种时间很重要，过早，气温高，易造成焼袋，且污染严重；过晚，气温低发菌困难，岀菇延迟，降低产量。我区一般8月10日开始做栽培种。8万料需做9000斤干料栽培种。分三次，每周3000斤，三周做完。即9月5日前做完。9月10日开始种植，每两天种植5000斤，35天全部种完，即10月15日前装完。
因我区对黑灰色品种比较信赖，所以三批栽培种全部为黑灰色。第一批为抗热，色黑品种：先锋7、8105、灰美2号，二批三批抗低温灰色品种：抗病2号、抗病3号。
采用的是半生料栽培即不经过发酵或灭菌而直接栽培的方法，此法在我区以大面积推广多年，具有方便、快捷、操作简便的特点，菇农易于接受。具体操作如下：
6.1半生料生产配方;棉籽壳96%、磷酸二铵0.5%、生石灰粉3.5%。
6.2建堆、半生料处理。
将棉籽壳和其他辅料加水 搅拌均匀后建堆，要求堆高1.5米，宽1.5&2米，长不限，盖上草帘或塑料薄膜。如陈棉籽壳虫卵较多，可拌入高效氯氰菊酯或辛硫磷(斤料用一斤)。本技术要求堆闷15&20小时，达到原料预热和半软化 程度、含水适中的目的。这种方法，由于不受发酵时间限制，头天上午或下午拌料，第二天上午即可装袋，较为实用。需要指出的是，装袋前，一定要把料摊开冷却。当天装不完 ，需重新建堆，等第二天在进行装袋。注意所拌料必须3天装完，不然，长时间会发生腐烂，变酸，变臭 。装袋后萌发但不吃料现象。
6.3装袋接种:袋膜选用28&52cm.装袋前含水量以手握紧料有水印但不能渗出为宜，如指缝内有水渗出，水分偏大，刚开始拌料时建堆前，水分可大一些，掌握在手握紧料有水渗出，并往下滴3-4滴，经15小时左右预热、挥发、下沉后，水分自动减少。
装袋时，先在袋底部放一层菌种，再装料，边装边压实，装至进袋口时，放一层菌种，用种量20%，扎好袋口后，在2小时内用自制打孔器在两头各打3-4个透气孔（我区栽培袋购买时，两端有0.5cm成型孔4个），深度5-8厘米。
培养料水分和透气性时决定半生料栽培的成功关键，装料前培养料水分过大，菌丝生长速度明显减慢，杂菌感染几率大大增加。另外袋两头菌种就是通过透气孔吸取氧气而萌发生长的，没有透气孔，菌种层由于缺氧而闷死。透气孔少或过小，有两个缺点：一是在发菌中期菌丝生长速度滞缓，甚至停止，严重时甚至感染杂菌；二是不利于菇蕾形成和生长。透气孔过大也不行，会带来两个缺点：一是已引起虫害和杂菌感染，二是形成菇蕾基数过多，给管理带来麻烦。
6.4发菌管理。
6.4.1合理排放均袋，严格控制料温。半生了栽培。接种量大，用料量大，料内各种微生物繁殖活动聚集的发酵热和平菇菌丝生长产生的生物热，会使料温升高，所以合理排放均袋很重要。菌袋可采取井字排列，在棚内每墩四层，墩与墩间距30cm。每3排留50cm走道。棚内能排放五万斤左右，剩余两万斤排放在杨树林中，每墩5层，如果遮阴效果差，可在上面覆盖杂草。无论棚内棚外，事先场地要杀菌杀虫。
6.4.2棚内加大通风。将棚北面风口全部打开，支开南面薄膜一米高，棚顶部风口全部打开，大通风，预防料温过高，料温不可超过34度。否则易造成焼袋或感染杂菌。
6.4.3加强倒袋翻堆和检杂工作。装袋2&3天检查一次，看菌袋两端是否忘记放菌种，并补种。以后每隔10天翻袋一次如发现袋中建有少许毛霉、黄曲霉，只要不是绿霉，都不要惊慌，这类菌袋经正常管理和培养后，都能发好菌，并正常出菇。如发现个别菌袋水分偏大，可将菌袋立放到地面上，让水通过透气孔流出。反污染绿霉严重，检出场地，倒料晒干或倒出加入3%石灰熟料栽培。
6.4.4加强对虫害的防治。每隔4&6天，对菌袋及周围环境喷施2000倍氧化乐果、高效氯氰菊酯、敌杀死等，可收到明显的防虫、驱虫、杀虫效果。特别注意：敌敌畏等有机磷发菌期不能喷施，出菇会引起大量畸形菇，且终生畸形。
6.5出菇管理。一般经30&40天，菌袋发满并拱菇蕾，进入出菇管理阶段。
6.5.1码垛。在大棚内，每隔80cm打一宽30cm高15cm的土埂，上面覆盖地膜防治菇体带泥。其上排放菌袋，前期发满排放的三万斤，因温度较高，袋与袋之间相隔1&2cm,四层高，出完头茬后再排放七层高。后期出菇直接排放七层，且袋之间不留间隙。
6.5.2幼菇期管理(菌盖直径3cm以下).保持相对湿度80%--90%,出菇场地每隔2天浇一次水，前期温度较高，可将风口全部打开，保持新鲜空气，如风大干燥，可一面通风，即北风打开南面通风口，防治通风量大将原基吹死。冬季温度较低，可每天中午通风一次，每次4小时左右。总的管理原则是保湿、空气新鲜，切记向幼菇上喷水。
6.5.3成菇期管理。前期出菇，温度较高，每天下午14点喷水一次，最好喷雾状水，一带而过。切记大水喷，因为灰黑色品种对积水很敏感，极易产生黄斑病。经常保持地面湿润，可隔2&3天向地面浇一次水。雨天、雾天不喷水。大通风，风口全部打开，保持空气新鲜，特殊大风，可一面通风。冬天温度低，棚内湿度大，可不喷水，向地面浇水即可，如向菇体喷水，难以蒸发，极易产生细菌性病害。通风在中午，保持棚内空气新鲜即可。
6.5.4适时采收。平菇成熟的标准是菌盖边缘有内卷转向平展，此时，菇体从重量达到最大值，菌盖破损率低，菌肉厚，外观好售价高。前期温度高，易起早采收，成熟度七八成熟。冬季，前一天下午采收，成熟度十成熟。采完后放入塑料筐中，由于出菇期不向菇喷水，菇体比较干，所以，放入塑料筐中的菇在水池中浸2&3分钟，这样出售时，菇体鲜艳，边缘不裂，售价高。我们这种种植方法，一般十月下旬开始采菇，日采菇500&800斤，且天天有菇上市，直到来年五月。
6.5.6补水。两茬菇采完后4-5天，可用补水器补水，补水易每公斤干料补0.3-0.4公斤为宜。配方如下：磷酸二铵6公斤，三十烷醇20支，石灰5公斤，水1000公斤。补水后，将所有风口全部打开，大通风2天，防治水分过大菌袋、菇体感染细菌。四茬菇后，再补一次水，方法一样，但补水数量减半。即每公斤干料补0.15-0.2公斤。共可采收6-7茬菇。
7本模式栽培特点：科学选择品种，严格按播种期种植，播种期内天天投料，出菇期低湿管理，防治病害发生，天天有菇均衡上市，避免菇价忽高忽低影响种植效益。经三年实践证明;种植简单，管理方便，成本较低，风险较小，效益很高，值得大面积推广。
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广西主栽平菇种质资源评价
【摘要】：近年来,广西食用菌产业发展迅速,侧耳是广西食用菌主要栽培种类,栽培规模不断扩大。但栽培菌种名称混乱,随意冠名,造成很多品种同物异名,给菌种管理增加了成本和难度,正是基于以上原因,开展了本研究。论文选取15个广西主栽平菇作为供试菌株,采用拮抗试验、RAPD分子标记、ITS序列分析、28S rDNA D1/D2区序列分析,结合子实体形态特征,对它们进行鉴定和遗传多样性分析,排除同物异名。
1、根据拮抗试验结果,将供试的15株侧耳菌种分为5类,第一类：早秋65、锡平1号、黑平王、P015、P012；第二类：灰美2号、高产8105、特抗650；第三类：秀珍0811、秀珍0910；第四类：杏鲍菇；第五类：平214、姬菇1007、姬菇33、姬菇96,无拮抗反应的菌株可能为同物异名。
2、选取6条10碱基引物进行RAPD标记,结果表明只有S62、S78对供试菌株具有多态性扩增,利用NTSYSpc2.10软件构建聚类树状图,从相似性系数0.75处截断,可将供试菌株分为5个类群,综合树状图和电泳图谱,进一步证明供试菌株存在同物异名,与拮抗试验结果一致,RAPD分析表明无拮抗的菌株条带间无差异,有拮抗反应的菌株条带有明显差异。
3、对16个菌株进行ITS序列测定,提交NCBI比对,16个菌株有5株为糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus);2株肺形侧耳(P. pulmonarius);3株肺形侧耳变种(P。pulmonarius var.);1株为刺芹侧耳(P. eryngii);4株为佛州侧耳(P.florida);1株为斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)。
4、选取5株有拮抗和5株无拮抗反应的菌株进行ITS片段碱基组成分析,各菌株(C+G)%都小于(A+T)%,约为44%,5.8S是保守区,每个菌株该序列都相同,长度为154bp,ITS1、ITS2进化速率快,长度约为250bp；发生拮抗反应菌株间序列有差异而无拮抗反应的菌株ITS序列相同。
5、对侧耳属15个菌株的28S rDNA D1/D2区进行扩增和序列分析,其长度约为570bp,每个菌株的D1/D2区序列都相同,(C+G)%大于(A+T)%,约为57%,28S中D1/D2区为保守序列,并不能用于供试侧耳的菌种鉴定。
6、温度试验表明,4株有拮抗侧耳菌株菌丝最适生长温度为30℃,该温度下菌丝生长最快11.60-14.29mm/d,40℃时导致菌株死亡。
7、栽培试验表明,有拮抗反应的菌株子实体形态有差异,无拮抗的菌株之间子实体形态相同。
【关键词】：
【学位授予单位】：广西大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2013【分类号】：S646.14【目录】：
摘要4-6Abstract6-8缩略词表8-111 前言11-21 1.1 平菇分类11 1.2 平菇生物学特性11-12 1.3 平菇的栽培12-13 1.4 食用菌菌种生产现状13 1.5 食用菌种质资源评价13-20
1.5.1 形态学研究14
1.5.2 细胞学研究14-15
1.5.3 同工酶研究15
1.5.4 分子生物学研究15-20 1.6 研究目的意义20-212 材料与方法21-29 2.1 材料21-25
2.1.1 供试菌株21
2.1.2 培养基21-22
2.1.3 主要仪器22
2.1.4 主要试剂22-23
2.1.5 试剂配制23-24
2.1.6 PCR扩增引物24
2.1.7 栽培原料24-25 2.2 方法25-29
2.2.1 菌种培养25
2.2.2 拮抗试验25
2.2.3 DNA的提取25-26
2.2.4 RAPD分析26-27
2.2.5 PCR扩增及序列测定27-28
2.2.6 温度对菌丝体生长的影响28
2.2.7 栽培试验28-293 结果与分析29-48 3.1 拮抗试验29-32 3.2 总DNA提取结果32 3.3 RAPD分子标记32-37
3.3.1 RAPD标记结果32-36
3.3.2 RAPD标记分析36-37 3.4 ITS序列分析37-43
3.4.1 ITS序列比对38-41
3.4.2 基于ITS序列构建系统发育树41-43 3.5 供试菌株28S上D1/D2区分析43-44
3.5.1 D1/D2区扩增结果43-44 3.6 不同温度对菌丝体生长的影响44-48
3.6.1 菌丝生长速度44-46
3.6.2 出菇栽培试验分析46-484 结论与讨论48-51 4.1 结论48-49 4.2 讨论49-51致谢51-52参考文献52-58附录A58-66附录B66
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