如果我改英国药典梯度洗脱的流动相的比例,让有机相的比例比原来比例小5%,结果峰形和分离度都提高了.改后的方法可以被认可吗?5%的幅度会不会太大而不经研发通过_百度作业帮
如果我改英国药典梯度洗脱的流动相的比例,让有机相的比例比原来比例小5%,结果峰形和分离度都提高了.改后的方法可以被认可吗?5%的幅度会不会太大而不经研发通过
如果我改英国药典梯度洗脱的流动相的比例,让有机相的比例比原来比例小5%,结果峰形和分离度都提高了.改后的方法可以被认可吗?5%的幅度会不会太大而不经研发通过
我个人观点,这种比例关系,可能是标准制定的时候考虑的印象因素比较多,你现在改变比例提高,只能说明你现在做的这个体系比较适应这个比例,如果想推出自己全新的方法,需要多种因素考虑和重复试验.求助，不出峰 -
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领域：液质联用
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测得枞酸安捷伦HPLC流动相：甲醇：水 80:20,& & &甲醇：1%乙酸铵 85:15alltima C18 AQ 柱子波长240nm基线不稳定，有时会出现波浪状，有时前半段是平的后半段下滑到负的mAU还有就是峰一直出不来。流动相还有参数设置参考的文献。柱子不一样，但都是C18柱子。即使出峰，峰值也超级小，感觉不像目标峰。请问是什么原因。超级菜鸟一筹莫展，第一次做HPLC请问负的mAU是怎么回事？基本是参考文献做的，为什么峰却出不来？
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级别：色谱研究生
领域：农残兽药
很正常的，虽然都是C18柱，但柱与柱之间的区别是非常大的。
要根据自己的系统条件调试不同的设置；流动相，柱温，流速，波长都有可能需要调整的。你说测的是“枞酸”？没接触过，不过应该是酸性物质吧？可以考虑用磷酸把流动相调ph至酸性试试。
回答时间： 20:09:21
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级别：色谱一年级
领域：分析化学
我最近也遇到这个问题了，你是出的峰小，我的直接走直线
回答时间： 11:26:33
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安捷伦1260 DAD在梯度变为高比例有机相时基线波动很大，求解！
如题，我用80%乙腈洗脱，并在30min内渐变为100%乙腈并保持20min，空白溶剂在梯度渐变以及100%乙腈保持20min时，基线波动很大，甚至出现很大的鼓包，并且基线不稳，波动明显。我的波长是210nm和254nm。虽然说低波长会有干扰，但是这个干扰实在是太大了些。
请问有没有人遇见过这种情况？求高人支招能减弱干扰。
最好有图看一下
梯度洗脱在一般都会出一些梯度峰，平时注意各种试剂的纯度 怀疑系统不干净，冲洗一下看能否稳定。 开始那20%是水的话，那么冲洗管路后多次平衡应该就能解决问题，如果开始那20%是磷酸类的缓冲液。。。那估计悬 : Originally posted by 就爱小糊兔 at
怀疑系统不干净，冲洗一下看能否稳定。 系统在实验之前已经保证冲洗干净了。跟污染无关吧。 : Originally posted by herokfc at
开始那20%是水的话，那么冲洗管路后多次平衡应该就能解决问题，如果开始那20%是磷酸类的缓冲液。。。那估计悬 我的就是乙腈水体系，我换了不同的乙腈，问题还是存在，我怀疑会不会是水的问题啊？我们用的是桶装乐百氏纯净水，我一直都怀疑这个水到底能不能达到实验用水要求。 : Originally posted by akosrios at
最好有图看一下
梯度洗脱在一般都会出一些梯度峰，平时注意各种试剂的纯度 您说的这个我明白，现在的情况是变成100%乙腈后的基线总是上下大波动，就像是路面的坑洼一样，以前做实验，梯度峰不是这样的啊。 用纯度好的试剂，建议用merck的试试看 你可以换根柱子，换一下试剂试试，祝你好运 1，换一根柱子，冲洗干净充分平衡后相同条件下试一下；2，充分清洗一下进样阀和针，不要用乐百氏的水了，用屈臣氏或超纯水 : Originally posted by 星海慧儿 at
系统在实验之前已经保证冲洗干净了。跟污染无关吧。... 你怎么能保证已经冲干净了？一般来说你80%已经转100%已经应该是平稳的。建议你多跑几个空针啊，估计是哪儿污染了。也有可能是流动相脏。 可能是试剂的纯度达不到色谱测定的要求，换纯度高的试剂，用超纯水或者娃哈哈纯净水 : Originally posted by 星海慧儿 at
我的就是乙腈水体系，我换了不同的乙腈，问题还是存在，我怀疑会不会是水的问题啊？我们用的是桶装乐百氏纯净水，我一直都怀疑这个水到底能不能达到实验用水要求。... 换下水，并超生一会 水用之前滤了吗？或者用哇哈哈的，我们离子色谱用的这种，但是最好还是过下0.45的膜 把压力线调出来看看，是有八九是单向阀有析盐造成密封不好！试试换个单向阀的滤头，或者有10%ipa低速冲洗系统看看 : Originally posted by e_liang369 at
把压力线调出来看看，是有八九是单向阀有析盐造成密封不好！试试换个单向阀的滤头，或者有10%ipa低速冲洗系统看看 从压力线的情况如何看出问题所在呢？求教。还有，这个系统我在用之前就已经用10%IPA冲洗过20h了；至于滤头，请问你说的是不是那种白色的过滤头啊，要是这个的话，我也是新换的。 : Originally posted by 星海慧儿 at
从压力线的情况如何看出问题所在呢？求教。还有，这个系统我在用之前就已经用10%IPA冲洗过20h了；至于滤头，请问你说的是不是那种白色的过滤头啊，要是这个的话，我也是新换的。... 因为你是走梯度造成的基线不稳，不外乎两个原因：
1、单向阀或者密封出问题，造成有机相比例一升高，就出现压力迅速下降又回归正常的现象，这种可以通过调压力线或在线监视压力来判断。
2、梯度洗脱要是流动相品质太差，的却可能冲出不上杂质峰，但我看你的梯度变得不是很急，流动相正常的话基本不至于出现明显的杂峰。可以试试其他品牌的有机相及水相排查一下。
你能把图谱传上来最好不过了（包括空白、样品） 此贴已完结 最近我也是遇到这个问题，我的波长是210nm，水相是0.1%磷酸，而且我的基线在维持2min等度之后就一直向下漂移，直到保持等比例的乙腈才变成一条直线（但也不是在0mAU），请问楼主最后怎么解决的？？ : Originally posted by Caizhua90 at
最近我也是遇到这个问题，我的波长是210nm，水相是0.1%磷酸，而且我的基线在维持2min等度之后就一直向下漂移，直到保持等比例的乙腈才变成一条直线（但也不是在0mAU），请问楼主最后怎么解决的？？ 我们的情况还不是太一样，不过据我所知，安捷伦的高压梯度泵本身就很难平衡，特别是在210nm时，你这个也是安捷伦高压梯度？如果是的话想优化好比较有难度，其他四元泵的应该情况比这好。}