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目的:类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis, RA)是一种以对称性、多关节炎为主要表现的慢性、全身性、自身免疫性疾病。RA 的病因目前仍不十分清楚。随着分子生物学和免疫学的进展,RA 动物模型的建立,发现细胞因子、Thl/Th2(T helper 1/T helper 2)细胞平衡、细胞凋亡、原癌基因等在RA的发病过程中起着重要作用,尤以Thl/Th2和Fas/Fas L (Fas/Fas Ligand )系统的表达最为重要。本课题拟研究 RA 患者外周血中 T淋巴细胞的 Thl / Th2水平和Fas系统表达情况,阐述它们在 RA活动期与非活动期的关系,以期寻求二者在 RA发病机制中的作用及临床意义。
方法:选择 20例健康献血者为正常对照,选用 2002年 2月一2004年 1月在我院免疫风湿科门诊及住院部就诊的 Rr、患者 51例,所有病例均符合美国风湿病协(来源：淘豆网[/p-5055482.html])会 (ARA) 1987年修订的 RA诊断标准。其中非活动期患者19例,活动期患者 32例,活动期患者均符合 19% 年美国风湿病协会 R)、活动期诊断标准。所有受试者均在清晨空腹采取静脉全血 I ml,应用流式细胞仪,检测外周血淋巴细胞的肿瘤坏死因子一洲白细胞介素一4
( interferon
-gamma/interleukin-4 IFN-7/IL-4)以及Fas/Fas L比值,I司时检测血沉和 C 反应蛋白水平,观察上述指标的变化。实验数据均应用SAS 8.2大型统计学软件进行处理。中丈摘要
结果:1, RA活动期 IFN-y/IL-4水平与正常对照组的比较:活动期IFN-y产生增高,IL-4产生降低,IFN-y升高与正常对照组比较有显著性差异(P&0.05), IL-4降低正常对照组比较亦有显著性差异(P&0.05), IFN-y/IL-4(Th 1 /Th2)水平与正常对照组比较有显著性差异(P&0.01).2, RA非活动期IFN-y/IL-4水平(来源：淘豆网[/p-5055482.html])与正常对照组的比较:非活动期 IFN-y产生增高,IL-4产生降低,二者水平及其比值与正常对照组比较无显著性差异(P&0.05).3, RA活动期 IFN-y/IL-4水平与非活动期的比较:活动期与非活动期IFN-y产生均增高,IL-4产生均降低,二者水平及其比值相比较有显著性差异(P&0.01)04, RA活动期Fas/Fas L水平与正常对照组的比较:活动期Fas与 Fas L明显升高(P&0.05), Fas/Fas L产生亦增高,而且与正常对照组比较有显著性差异(P&0.0 I ) o5, RA非活动期Fas/Fas L水平与正常对照组的比较:非活动期Fas与Fas L无明显升高,Fas/Fas L产生不增高,与正常对照组比较无显著性差异(P&0.05).6, RA 活动期 Fas/Fas L水平与非活动期的比较:活动期Fas与Fas L水平明显升高,Fas/Fas L比值亦升高,非活动期 Fas/Fas L 产生不升高,二者比较有显著性差异 (P&(来源：淘豆网[/p-5055482.html])0.05)。7, RA活动期IFN-y/IL-4水平与Fas/Fas L水平的相关性比较:RA活动期 IFN-y/IL-4水平与 Fas/Fas L水平均上调,二者呈正相关,相关系数(r)为 0.78 (P&0.01)。同时我们也检测了IFN-y/IL-4水平与Fas/Fas L水平与血沉、C一反应中文摘要蛋白水平的相关性,均呈正相关,相关系数(r)分别为0.84 (P&0.01)、0.71(P&0.01)、0.66(P&0.01)和 0.67
(P&0.01)。
结论:Thl, Th2细胞分泌的细胞因子能通过自分泌刺激自身的增殖,并相互下调对方的分化生长。Thl和 Th2细胞之间的平衡,在 RA的诱导和发展中起着关键作用,分析Th l /Th2细胞平衡对治疗RA和判断预后有很大帮助。本研究结果显示 RA患者外周血淋巴细胞 IFN-y水平和 IFN-r/IL-4比值显著高于健康对照组,二者之间差异有显著性,而 IL-4水平下降,在各组之间亦有显著性差异。简单(来源：淘豆网[/p-5055482.html])的说,Thl细胞是一种分泌炎症介质的细胞,起致病作用,而Th2细胞主要出现于炎症的恢复期,对关节炎有保护作用。
Fas是机体细胞表面重要的介导凋亡的分子,Fas系统对于个体的正常生长发育,(如T淋巴细胞分化调节)有重要作用。Fas诱导凋亡可以通过细胞表面表达密度的变化,转录后水平剪接产生不同产物和下游各种蛋白的作用而产生精确调节。其中任何一个环节出现异常即可导致疾病的发生。Fas和 Fas L交联诱发细胞凋亡的功能,在 RA发病机制方面起着至关重要的作用。正常人体内存在极少量自身反应的 T, B淋巴细胞,但并不发病。当这些自身反应性T, B淋巴细胞的凋亡发生异常,出现增生则会诱发 RA.在本实验中当 RA患者处于疾病的活动期时,Fas/Fas L的比值升高,而处于疾病的非活动期时,二者的比值则无明显升高。
Th1, Th2细胞之间的平衡失调,使细胞因子的分泌发生改变,改变的细胞因子通过调节细胞凋亡,反过来又会中丈摘要加重 RA的症状。异常的细胞因子谱通过影响细胞凋亡,使正常 T细胞(来源：淘豆网[/p-5055482.html])的分化和凋亡发生改变,导致 T淋巴细胞等免疫细胞自我耐受的破坏和炎症介质的大量产生,从而对机体产生损伤。本实验在 RA 活动期时二者比值升高呈正相关,也说明二者在RA的发病机理中起着不可替代的作用,并且二者互为因果,共同影响着 RA的发病。
关键词:类风湿关节炎,肿瘤坏死因子_Y,白细胞介素-4,T辅助细胞 1/T辅助细胞2,Fas/Fas配体。英丈摘要The correlation between levels of IFN-y/IL-4and Fas/Fas Ligand in peripheral Bloodleukocyte of rheumatoid arthritisABSTRACTObjective: Rheumatoid arthritis (RA) is a kind of chronic andsystematical disease with the appearance of symmetrical andmultiple arthritis. The cause (来源：淘豆网[/p-5055482.html])of RA remains unknown. By theprogressing of immunoloty and molecular biology .There are alot of important reasons on the rheumatoid arthritis,forexample, the appearance of rheumatoid arthritis animal model,cell
cell apoptosis, proto-oncogenes, et al, especially Thl/Th2 and Fas/Fas L have beenpaid much more attention. The aim of this study was to analysesthe correlation between levels of Thl/Th2 and Fas/Fas L inperip(来源：淘豆网[/p-5055482.html])heral blood leukocyte of rheumatoid arthritis. We can findthe relations of two others on the active period or inactive periodfor rheumatoid arthritis and their clinical significance indevelopment of rheumatoid arthritis.Methods: A total of 51 patients with RA in 2002, 2 to 2004,1were investigated. There are 32 patients with active RA, and 19patients with inactive RA. All patients fulfilled the 1987classification criteria of the American Rheumatism A(来源：淘豆网[/p-5055482.html])ssociationfor RA. Another 20 outpatients were also investigated as normalcontrols. All the blood samples were obtained from the patients英文摘要in fasting in the morning. Everyone was obtained lml. wedetermined the percentage of IFN-7/IL-4 and Fas/Fas L inperpheral Blood leukocyte of rheumatoid arthritis using flowcytometry. All the results were expressed by the SAS 8.2 systemResults: 1. The percentage of IFN-y/IL-4 in peripheral bloodleukocyte of activ(来源：淘豆网[/p-5055482.html])e rheumatoid arthritis were found to besignificantly higher than the normal controls (P&0.01). 2. Thepercentage of IFN-y/IL-4 of inactive rheumatoid arthritis wasfound to be not significantly with the normal controls (P&0.05).3. The percentage of IFN-y/IL-4 of active rheumatoid arthritiswas found to be significantly higher than inactive RA (P&0.01).4. The percentage of Fas/Fas L in peripheral blood leukocyte ofactive rheumatoid arthritis we(来源：淘豆网[/p-5055482.html])re found to be significantly higherthan the normal controls(P&0.01). 5. The percentage of Fas/FasL of inactive rheumatoid arthritis was found to be notsignificantly
(P&0.05).6.
ThePercentage of Fas/Fas L of active rheumatoid arthritis werefound to be significantly higher than inactive (P&0.01). 7. Theexpression of IFN-y/IL-4 and Fas/Fas L of active rheumatoidarthritis correlated with ESR and CRP, r is 0.84 (P&0.01),0.71
(P&0.01),0.66 (P&0.01),0.67 (P&0.01)Conclusions: The cell agents releasing by Thl and Th2 cellscan stimulate themselves accrementition by autocrine. They candownfall the growth to each other. It is important to the balanceof ThI and Th2 cells on the beginning and development for RA.We can understand the treatment and e by analysis to RA.英丈摘要We can understand the treatment and e by analysis to RA.The percentage of IFN-y and IFN-y/IL-4 in peripheral bloodleukocyte of active rheumatoid arthritis were found to besignificantly higher than the normal controls. IL-4 lower thanthe normal controls. So we can see, Thl cells can productinflammatory agent, it have the action to make them ill.Th2cells appear in the period of inflammation, they can protect thejoint
Fas is a important agent of the cells on body to cause cellapoptosis. Fas system has great action to growth for the body.Cell apoptosis can alter volume of cell appearance, make a lot ofproduct on splicing after transcription, and adjust acutely theaction for all kinds of Protein. If it appear a little abnormalpneumonia, it will cause rheumatoid arthritis. So Fas and Fas Lcan make cell apoptosis.
There are a little of T and B leukocyte cells to reactionthemselves. But they cannot cause rheumatoid arthritis. Whenthese cells appear cell apoptosis, they will accrementition andcause rheumatoid arthritis. In this article, the rate of Fas/Fas Lwill ascendant with the active rheumatoid arthritis. However, therate will not ascendant significantly.
Losing the balance between Thl and Th2 cells can alter cellagents. These cell agents make the cell apoptosis, and makeclinical significance for RA seriously. So they make a lot ofinflammatory agent, cause the body badly. This test indict thatthe level of IFN-y/IL-4 and Fas/Fas L monly in英丈摘要the active rheumatoid arthritis. Their actions are important tocause RA. Both them can lend to monly.Key words: rheumatoid arthritis, interferon-gamma ,interleukin-4, T helper 1/T helper 2, Fas/Fas Ligand.研究论文 外周血淋巴细胞IFN-y/IL-4和Fas/Fas L裹达水平在类风湿关节炎发病中的作用研究前言
类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis, RA)是一种以关节炎症为主,伴有一些关节外炎症表现的一种疾病。RA 的病因目前仍不十分清楚。随着分子生物学和免疫学的进展,RA 动物模型的建立,发现细胞因子、Th 1 / Th2细胞平衡、细胞凋亡、性激素、原癌基因等在RA的发病过程中起着重要作用,尤以Thl/Th2和 Fas/Fas L系统的表达最为重要。
1986年 Mosmann等首先根据长期培养的小鼠 CD4+ T细胞分泌细胞因子和介导免疫功能的不同,将其分为 Thl和Th2两个亚群11]0 1991年,Romagnani等发现人类也存在Thl和Th2两个亚群[21. ThI和Th2两个不同的T细胞亚群,在自身免疫的发生和消退中起决定作用。在免疫反应中,Thl亚群分泌细胞因子 IL-2, IFN-y, TNF-a, GM-CSF和 IL-3等,以IFN-y为代表,主要激活细胞介导的免疫应答和促进IgG 2a的产生;Th2亚群分泌的细胞因子IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13等,以IL-4为代表,主要促进体液免疫应答和IgG 1的产生。
细胞凋亡是一种由基因控制的细胞自主性死亡方式。它与组织器官的发育,机体正常生理活动的维持,某些疾病的发生以及细胞恶变等过程均有密切关系。目前发现的死亡受体有四种,即Fas, TNFR, DR4 / DR5(TRAIL系统)研究论文和DR3。其中Fas/Fas L(Fas Lgand, CD95)系统对细胞凋亡的表达最为重要。Fas抗原是一种分子量为 40KD一 50KD的I型跨膜糖蛋白,其基因组位于染色体 10g23一上,属于肿瘤坏死因子大家族,有三个富含半肤***酸的肤链。该抗原主要在 CD4+, CD8+, B细胞、少数 NK细胞、骨髓细胞系和部分组织上表达。Fas L是一种分子量约为40K1〕的 11型跨膜糖蛋白,其编码基因位于 1g23上。Fas L主要在某些活化淋巴细胞表面上表达,尤其是激活的T细胞,其 Fas L表达增强。
本课题拟研究 RA 患者外周血中 T淋巴细胞的 Fas系统、Thl / Th2水平,阐述它们在 RA 活动期与非活动期的关系,以期寻求二者在 RA发病机制中的作用。材料和方法1.研究对象1.1正常对照组:选自健康献血者 20例,其中男性 8例,女性 12例,男:女=1: 1.5。年龄 26 .68岁,平均年龄42.75士6.2岁。经询问病史、体格检查和常规生化化验、心电图和正位胸片等辅助检查,无器质性疾病,而且既往无RA及其它自身免疫性疾病。1.2 RA患者病例:选用 2002年 2月一2004年 1月在我院免疫风湿科门诊及住院部就诊的 RA患者 51例,所有病例均符合美国风湿病协会(ARA) 1987年修订的 RA 诊断标准。其中活动期患者 32例,符合 1996年美国风湿病协会RA活动期诊断标准。其中男性 6例,女性 26例,男:播放器加载中，请稍候...
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甲氨蝶呤联合烷化剂对类风湿关节炎外周血淋巴细胞生长、细胞周期及IFNγ与IL4分泌水平.
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发布时间：11-06-2012
&本项目检测要求：
1)需足量新鲜活性好的单个核细胞，所有样本均要求当日新鲜采集，当天处理，无法保存；
2)常温保存，不能用冰袋冷藏。冬季运送标本时还需注意保温，避免冷冻。
3)若检测脑脊液、胸水、腹水、心包积液和关节液，须同时送检静脉血。
4)检测周期：因实验为手工操作，处理过程繁琐，耗时长；故家属需4个工作日后在新门诊楼一层的查询台或自助终端取结果凭条码或就诊卡取结果，无法提前出报告。
5）所有的周五、节假日的前1天（无论上周几班）均不接收标本。
如有疑问，请提前与实验室联系（010-）。
感谢大家的配合，如有不便，敬请谅解。
北京协和医院感染科实验室
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作者：感染内科
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