孕妇血清表皮生长因子在判断胎儿成熟度中的价值
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孕妇血清表皮生长因子在判断胎儿成熟度中的价值
15:19:49 【
王丹瑞　曹树军　崔礼敬　杜兴邦　周国宏　赵昌银　宋鑫　李艳 　　【摘要】　目的　了解正常孕妇在妊娠各期血清中表皮生长因子(EGF)及孕激素(P)，与羊水中EGF、P、淀粉酶(Ams)、肌酐(Cr)、间接胆红素(TB)的浓度变化在判断胎儿成熟度中的价值。方法 用放射免疫法测定正常孕妇181例(早孕35例，中孕69例，晚孕77例)血清及其中87例孕妇(中孕44例，晚孕43例)羊水中的EGF、P浓度变化；用生化分析仪测定此87例孕妇羊水中Ams、Cr、TB浓度变化。同时还对其中23例足月分娩的新生儿的脐静脉、脐动脉血清中EGF及P的浓度进行测定。结果　孕妇血清中EGF和P的浓度均随孕周增长而增加。羊水中EGF浓度与羊水中Ams、Cr浓度呈正相关。孕32周以后，当EGF&4.5 &g/L时，胎儿成熟率为70.59%。结论　妊娠期孕妇血清中EGF的浓度变化可用于判断胎儿成熟度。 　　【关键词】　表皮生长因子-尿抑胃素　　孕激素类　　胎儿器官成熟度 Assessment of Fetal Maturation by Epithelial Growth Factor in Serum of Pregnant Women　Wang Danrui, Cao Shujun, Cui Lijing, et al. Taihe Hospital, Hubei Shiyan 442000 　　【Abstract】　Objective　To study the concentrations of human epithelial growth factor (EGF), progesterone (P) in serum, and EGF, P, amylase (Ams), creatinine (Cr) and total bilirubin (TB) in amniotic fluid at different trimester normal pregnancy. Methods　The concentrations of EGF, P in serum of 181 cases of pregnant women (first trimester 35, midtrimester 69, late trimester 77) and the concentrations of EGF, P, Ams, Cr, TB in amniotic fluid of 87 cases (mid-trimester 44, late trimester 43) were determined. At the same time, the concentrations of EGF, P in serum of umbilical veins and arteries from 23 full term neonates were determined as well. The concentrations of EGF and P were measured by radioimmunoassay and Ams, Cr, TB in amniotic fluid by PA110 autobiochemistry analyzer. Results　(1) The concentrations of EGF, P in serum increased as pregnancy advanced. (2) There were significant correlations between EGF level and Ams, Cr levels in amniotic fluid. After 32 gestational weeks, the fetal maturity rate was 70.59% when EGF was &4.5 &g/L. There were significant positive correlations between EGF in maternal serum and in amniotic fluid. (3) The maternal serum EGF concentration was significantly higher than that in the umbilical vessels, and there was positive correlations between them. Conclusion　The change of maternal serum concentration could be used to determine the fetal maturation. 　　【Key words】　Epidermal growth factor-urogastrone　　Progestational hormones 　　Fetal organ maturity 　　目前产科临床常规判断胎龄、预产期及胎儿成熟度，仅根据病史、体检以及超声检查，均欠准确。若准确判断胎儿成熟度，仍需测定羊水中能反映胎儿各组织器官及功能成熟的生化指标并综合判断，但此需进行羊膜腔穿刺，孕妇难以接受。为探讨表皮生长因子(EGF)在孕妇血清及羊水中浓度的变化及与胎儿成熟的相互关系，我们测定了正常孕妇血清及羊水中EGF及孕激素(P)水平，现将结果报告如下。 资料与方法 　　一、资料来源 　　收集我院1995年9月～1996年4月，门诊及住院的早、中、晚期孕妇及足月分娩的181例无并发症的志愿者为研究对象(观察组)，其中早孕35例，中孕69例，晚孕77例。同时以19例健康非孕妇女为对照组。 　　二、方法 　　1.标本收集：两组均取静脉血4～5 ml，立即离心取血清，-20℃冻存待检。中、晚期孕妇采用经腹羊膜腔穿刺，取无污染羊水4～5 ml。足月分娩：(1)经阴道分娩者，待宫口开大3～4 cm经阴道用9号针头接一次性导尿管取中段无污染羊水4～5 ml；(2)剖宫产时，钝性分离子宫下段肌层，见羊膜囊膨出，用一次性注射器抽取无污染羊水4～5 ml，共收集羊水标本87例。在足月胎儿娩出后取23例新生儿脐静脉及脐动脉血各3～4 ml。 　　2.EGF的测定：采用北京华清生化技术研究所提供的放射免疫试剂盒。灵敏度&0.1 &g/L，批内变异&5%，批间变异&10%。 　　3.P的测定：采用天津德普公司提供的放射免疫试剂盒，按规定程序进行检测。 　　4.羊水中淀粉酶(Ams)、血肌酐(Cr)、间接胆红素(TB)的测定：采用美国RA1000自动生化分析仪测定。 　　5.胎儿成熟的临床标准：孕满37周，出生体重&2 500 g，出生后1周内无呼吸窘迫综合征发生者。 　　6.统计处理：将所有数据输入计算机进行统计学分析。采用SAS软件。 结　　果 　　一、孕妇血清中EGF和P浓度的变化 　　孕妇血清EGF和P均随孕周增长而增加(P＜0.05)，EGF明显高于对照组(P＜0.01)。见表1。 　　二、孕妇血清与新生儿脐血清EGF和P的比较 　　孕妇血清中EGF浓度明显高于脐静脉和脐动脉(P&0.001)，脐动脉与脐静脉EGF浓度呈正相关(r=0.812 1, P&0.001)，孕妇血清中P浓度明显低于脐静脉和脐动脉(P&0.001)，见表2。 　　三、羊水中EGF、P、Ams,Cr,TB浓度变化及与胎儿成熟度的关系 　　中期妊娠后羊水中EGF、Ams和Cr随孕周的增长而增加。羊水中EGF与羊水中Ams、Cr呈正相关(r=0.455 2, 0.315 0；P&0.005)，与羊水中TB呈负相关(r=-0.253 6, P&0.05)；而羊水中TB、P则随孕周增长而下降，孕妇血清EGF与羊水中EGF呈正相关(r=0.597 1, P&0.001),见表3。 表1　两组血清EGF和P浓度变化(&s) 　组别 　例数 EGF(&g/L) P(ng/L) 对照组 19 2.48&1.01 观察组(周) 4～ 11 2.92&0.83 92.80&　8.15 8～ 12 3.21&0.78 112.26&42.45 12～ 12 3.19&1.28 162.66&121.65 16～ 19 3.37&1.16 153.09&90.94 20～ 27 3.89&1.61 157.65&110.45 24～ 23 5.40&3.01 186.30&178.11
28～ 25 4.42&1.88 214.71&106.19 32～ 22 4.38&1.18 274.06&166.94 36～42 30 5.45&1.14 385.70&239.12 表2　孕妇血与脐血中EGF、P的浓度比较(&s) 类别 例数 EGF(&g/L) P(ng/L) 孕妇血　 23 5.86&0.49 339.78&104.04 脐静脉血 23 5.23&0.33 555.98&443.29 脐动脉血 23 5.10&0.32 779.69&951.18 　　孕32周以后，孕妇血清EGF&4.5 &g/L时，胎儿成熟率为70.59%；羊水Cr&120 &mol/L时，胎儿成熟率为86.97%；TB&1.0 &mol/L时，成熟率为62.96%，Ams&80 &mol/L时，成熟率为78.26%。 讨论 　　一、孕妇血清和胎儿体内EGF来源及生理作用 　　孕3月前，孕妇血清EGF来源为滋养叶细胞分泌产生［1］，同时，证实P和甲状腺素对EGF有促进释放作用［2］。所以在孕妇血清中增加的甲状腺素和P可使孕妇血清中EGF浓度增加。本研究结果提示，孕妇血清中P和EGF随孕周增长而增加，且EGF在妊娠期伴随P的增长而增加。 表3　羊水EGF、P、Ams、Cr、TB浓度比较(&s) 孕周 例数 EGF (&g/L) P (ng/l) Ams (U/L) Cr (&mol/L) TB (&mol/L) 16～ 10 6.26&3.07 31.77&22.82 45.30&43.42 61.00&8.79 2.50&1.08 20～ 24 8.85&4.12 19.24&8.30 34.42&15.07 60.75&27.49 2.38&2.24 24～ 10 29.68&26.08 22.69&12.77 43.20&13.24 71.10&19.06 3.40&3.37 28～ 9 19.61&11.48 21.53&10.06 57.56&48.08 93.00&21.63 1.78&1.09 32～ 10 22.55&5.49 20.48&12.73 60.70&29.90 110.60&39.61 1.00&0.82 36～42 24 33.45&42.60 18.79&8.40 188.52&142.72 144.35&46.12 0.71&0.91 　　胎儿体内EGF来源：(1)甲状腺素和P共同促使胎儿体内EGF释放。(2)孕妇血清中EGF通过胎盘进入胎儿循环。(3)羊水中EGF可通过胎儿呼吸、吞咽重新吸收到胎儿体内。胎儿体内EGF可影响胎儿消化道、肺等全身脏器成熟［3～4］。EGF参与调节胎儿各组织器官细胞的分裂增殖，诱导DNA合成，使胎儿各组织器官结构和功能得以发育成熟。 　　EGF对受精卵发育至囊胚着床期及妊娠中期起着重要作用［5］，可调节和影响胎盘发育及功能［1，6］。在妊娠1～3月间主要通过自分泌EGF的方式影响滋养细胞增生和促合成作用，在妊娠4～9月间主要通过旁分泌的方式调节胎盘功能，增加胎盘通透性。还可通过影响孕妇血氨基酸浓度从而影响胎儿发育。 　　二、孕妇血清中EGF浓度变化与胎儿成熟度的关系 　　国外曾报道，羊水中EGF与卵磷脂及鞘磷脂的比值(L/S值)呈正相关，表明羊水中EGF浓度变化与传统判断胎儿成熟度的参数Ams、Cr、TB、L/S值等有密切相关性。本研究结果中，阳性率偏低可能与例数少有关。因此，羊水中EGF有可能替代传统判断胎儿成熟度的多项参数Ams、Cr、TB、L/S，以便在无创伤的情况下，更准确、简便地判断胎儿成熟度。 参考文献 1　Matsuo H,Maruo T, Murata K, et al.Epidermal growth factor regulates trophoblast proliferation and differentiation in an autocrinel paracrine manner. Nippon Sanka Fujinka Gakkai Zasshi, -30. 2　傅小兵主编.生长因子与创伤修复. 北京：人民卫生出版社，. 3　Raaberg L,Nexo E, Jorgensen PE,et al. Fetal effects of epidermal growth factor deficiency induced in rats by autoantibodies against epidemal growth factor .Pediatr Res, -181. 4　常青，朱楣光.羊水中几种细胞因子的作用.国外医学妇产科分册，6-339. 5　Morita Y, Tsutsumi O, Taketani Y. In vitro treatment of embryos with epidermal growth factor improves viability and increases the implantation rate if blastocysts transferred to recipient mice. Am J Obstet Gynecol, 6-409. 6　Bloxam DL,Bax BE,Bax CM.Epidemal growth factor and insulin-like growth factor I differently influence the directional accumulation and transfer of 2-aminoisobutyrate(ATB) by human placental trophoblast in two-sided culture.Biochem Biophys Res Commun, 2-929.
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猪表皮生长因子及其应用前景
来源： 　作者：李超
尹永志　时间：　
表皮生长因子(epidermal&growth&factor，EGF)是动物乳中含量最丰富的生长因子之一，它主要由颌下腺腺管细胞合成分泌，合成后被释放到唾液、胃液、肠液、尿液、乳汁、血液、精液、前列腺液和羊水等体液中。EGF是一种强有力的细胞有丝分裂原，具有刺激细胞分裂、增殖与分化、促进离子交换和细胞外基质合成等生物学特性。猪表皮生长因子(porcine&epidermal&growth&factor，pEGF)是猪乳中含量较高的一种生长因子，其功能和结构与人、牛、鼠等动物的EGF类似。据相关文献报道：pEGF有利于猪早期胚胎发育、能提高母猪的窝产仔数、提高仔猪成活率。以及促进断奶仔猪的生长。目前，EGF与动物消化道关系方面的研究受到人们的普遍关注，并已成为研究的热点之一，但针对pEGF的研究报道还相对较少。关于pEGF的研究限于：pEGF在原核生物、单细胞生物中的表达及其生物活性的鉴定；pEGF对早期断奶仔猪胃肠道发育的影响；pEGF对某些特定生理指标的影响。本文综述了国内外有关pEGF生理作用，pEGF产品的开发及其在养猪生产中的应用研究进展，以期为pEGF作为新型饲料添加剂产品的工业开发和在养猪生产中的应用提供参考。 1&猪表皮生长因子的生理作用& 猪表皮生长因子(porcine&epidermal&growth&factor，pEGF)是含有53个氨基酸的单链多肽，分子质量为6&ku。作为一种丝裂原，pEGF能刺激培养细胞的分裂增殖，同时也能促进表皮细胞及其他组织的生长与分化。pEGF在猪常乳中的相对含量约为124ug/l，初乳中的含量是1500ug/l比常乳高10倍；而人初乳中的含量为350ug/l比常乳高70倍。研究表明，pEGF在哺乳仔猪胃肠道中比较稳定而不易被消化，甚至部分能被完整吸收进入循环而作用于外周器官，且乳中的EGF对初生动物胃肠道生长发育具有重要作用。 1&.1&促进肠道上皮细胞的增殖和分化& EGF是一种强烈的细胞分裂刺激物，主要作用是促进上皮组织的细胞增殖与肠细胞分化。，对胚胎的发生和生长以及组织修复和再生均有调节作用，并能增加DNA与蛋白质的合成。研究表明，EGF能显著增加回肠黏膜DNA的合成与上皮细胞的增殖，调节肠细胞分化，刺激胃肠组织生长。EGF能显著增加初生大鼠胃的重量、泌酸黏膜细胞DNA和RNA含量¨5|，用3H．胸苷掺入DNA作为生长的短期指标，EGF能加速3H一胸苷掺人初生大鼠小肠的DNA，饲喂EGF的泌乳大鼠小肠重量、长度及DNA、RNA含量均高于对照组；在乳中加入EGF抗体则抑制小肠生长，这表明EGF对新生大鼠小肠生长有促进作用；用EGF对吮乳大鼠处理3&d后显著增加小肠单位长度的重量，而断奶大鼠则无此现象。 1.2增加胃肠黏膜血流量并抑制胃酸分泌& EGF能显著增加胃黏膜血流量，在胃黏膜的防御功能中起重要作用。Ishi&kawa等报道，EGF能显著降低缺血再灌注损伤，治疗组黏膜损伤指数由40％±6％降至17％±6％，组织学坏死深度亦减轻，表明EGF能保护黏膜微血管，改善微循环，发挥了细胞保护作用。Hui等观察对照组及行颌下腺切除组大鼠的胃黏膜血流量，发现在生理状态下，两者无明显差异；但给予乙醇后，颌下腺切除组的胃黏膜血流量明显下降，当给予大剂量EGF灌胃后，黏膜血流量明显增加，黏膜损伤程度减轻。由此提示在生理状态下，EGF对血流影响较小，当使用大剂量时，可显著增加血流量并参与黏膜早期的修复过程。此外研究证实，EGF能抑制组胺刺激的胃酸分泌，其抑制壁细胞分泌是通过诱导鸟氨酸脱羧酶活性和增加多胺合作而发挥作用。 1.3影响肠道生物酶的活性 pEGF对断奶仔猪胃肠道的发育有非常重要的影响。断奶使得乳源性EGF突然中断，仔猪的消化系统还未发育完全，抵抗力较弱，断奶仔猪的胃肠黏膜难以适应饲料，从而引发断奶应激。断奶应激会造成仔猪肠道损伤、绒毛高度降低和腺窝深度增加，同时伴随黏膜上皮细胞刷状缘的水解酶(乳糖酶、蔗糖酶等)活性降低及养分吸收能力下降。利用外源EGF调节黏膜刷状缘消化酶的活性，改善机体对养分的消化利用是促进初生动物生长的有效措施。研究表明，EGF能提高新生仔猪或小鼠小肠黏膜刷状缘水解酶及胰腺消化酶的活性，加强小肠和胰腺的分泌功能，从而明显加快初生动物肠道的成熟。同时，EGF能显著增加乳糖酶活性。研究表明，对3&~13龄仔猪使用EGF可使肠道乳糖酶和麦芽糖酶的活性升高。EGF能使新生小鼠蔗糖酶活性提前升高，增加海藻糖酶、葡萄糖淀粉酶、乳糖酶、碱性磷酸酶活性。对5&~13龄前大鼠施用EGF可增加空肠蔗糖酶和氨基肽酶的活性，同时能促进其胃和十二指肠鸟氨酸脱羧酶(ODC)的活性。每l3给予断奶仔猪124&ug或372ug&EGF，空肠蔗糖酶及乳糖活性提高，且呈浓度依赖性。 1.4促进胃黏膜黏液糖蛋白的合成及受损胃肠组织的恢复& 糖蛋白是胃黏膜屏障的主要成分，可形成具有强烈黏滞性的糖蛋白凝胶，覆盖在胃黏膜上皮细胞表面，保护胃黏膜免受各种损伤因子的侵蚀和攻击，同时，覆盖黏液可提供有利于细胞增殖的良好碱性环境，有利于黏膜的修复。EGF具有促进猪肠黏膜细胞分化和刺激黏液释放的作用，同时外源性EGF也有助于受损胃肠组织的恢复。感染旋转病毒的新生仔猪代用乳中添加0.5或1.0&m9／L&EGF，其小肠绒毛高度与乳糖酶活性的增加呈剂量效应。20&kg重的猪每天按0.5ugkg腹腔注射EGF&5&d，能增加防止胃被损伤的张力强度。此外有试验证实，EGF能防止E．coli等病菌侵入兔、大鼠等动物肌体，并改善其受损肠道的消化机能。 EGF具有促有丝分裂和非促有丝分裂二重活性，能刺激外胚层、中胚层和内胚层细胞增殖和分化，促进组织生长、发育和成熟。EGF在伤口愈合过程中能刺激角膜上皮细胞增殖、趋化和移行。在体外培养的牛角膜内皮细胞中，EGF表现出潜在的有丝分裂原的特性，增加细胞数量，促进DNA合成和有丝分裂。在器官培养的人角膜内皮损伤模型中，EGF促进内皮细胞的DNA合成，加速损伤区愈合的动物模型中，EGF增加角膜内皮损伤愈合速度，刺激内皮细胞增殖。& 此外，EGF还具有增加体内物质的转运和糖代谢、增加前列腺素的合成和释放、维护皮肤细胞外基质、促进皮肤毛细血管的生成、促进细胞存活、延缓皮肤衰老及抑制皮肤癌变的作用。并且在猪体细胞克隆胚胎体外发育胚胎培养基中添加10&ng／mL&EGF或FGF能提高猪克隆胚胎的囊胚发育率。 2猪表皮生长因子产品开发及其应用&， 2.1猪表皮生长因子产品开发& 2.1.1利用基因工程技术开发 汪洋等人采用人工合成的pEGF基因为模板，通过PCR扩增获得pEGF一6His片段，将其克隆到载体pPIC9构建重组质粒pPIC9一pEGF并电转化毕赤酵母，获得毕赤酵母pEGF工程菌。对工程菌的表达产物，用His-ta9亲和层析纯化方法，可使重组pEGF的纯度达到95％以上。 杨桂香等人采用RT―PCR方法从猪肾脏皮质组织中扩增出pEGF基因，将其连接到克隆载体pMDl8-T上，经测序鉴定正确后，再克隆到原核表达载体pET-41&a(+)上，构建重组表达质粒pET．EGF。用重组质粒转化E．coli&BL21(DE3)宿主菌，经IPTG诱导使pEGF在大肠杆菌中表达。表达后利用SDS．PAGE电泳和Western―blottin9对GST-EGF融合蛋白进行分析，结果表明37℃诱导表达的融合蛋白含量较高，占菌体总蛋白的20.2％；30℃诱导表达的可溶性融合蛋白含量较高，占菌体总蛋白的7.7％。 黄秉仁利用甲基营养型酵母工程菌可规模化生产EGFL2&91，该工程菌含有至少一个拷贝的能够编码51个氨基酸的人EGF的基因序列，其特征在于所述的人EGF的基因序列的5’端连接一个a-因子前导肽，在该a-因子前导肽DNA序列前融合一个Kozak序列，然后再克隆到醇氧化酶启动子下游以构建成整合型盼．能表达单拷贝EGF的序列。杨桂香使用基因工程菌C32合成pEGFL3，该基因工程菌的pEGF表达量高，并且纯化简单，生产成本低，为工业化生产pEGF提供了可能。 2.1.2通过生物化学方法分离提取 刘荣秀利用虾及其废弃物制备EGF[311，其具体方法是将海产品绞碎、匀浆，冻融，离心，收集沉淀另用；上清液调pH至7，放置数分钟再离心，取上、清液入透析袋浓缩，再离心；上清液再以醋酸缓冲液作梯度洗脱，收集目的物透析、除盐、除菌，冻干保存，将收集的沉淀消化、清洗、脱钙、漂白、粉碎、干燥即可提取副产物壳聚糖。此方法具有原料丰富、工艺简单、低成本高产率等优点，其目的物达到电泳纯，社会效益和经济效益极为可观。 2.2猪表皮生长因子在养猪生产中应用& 2.2.1&表皮生长因子对断奶仔猪免疫功能影响 单安山研究了EGF对早期断奶仔猪免疫功能的影响，试验选取21日龄断奶长白仔猪37头，按表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子I(IGF-I)、基础日粮、自然哺乳随机分为4组，每组3重复，每个重复3头。EGF和IGF-I的剂量为17．86ug／d，研究其对早期断奶仔猪免疫功能的影响。结果表明：EGF组和IGF-I组脾淋巴细胞转化率均极显著(P&0．Ol)高于基础日粮组，空肠后段肠黏膜SIgA含量极显著(P&0．01)高于基础日粮组而且EGF组脾淋巴细胞转化率高于IGF-I组。EGF组小肠各段黏膜上皮间淋巴细胞数极显著(P&0．01)高于基础日粮组；IGF-I组空肠和回肠黏膜上皮间淋巴细胞数极显著(P&0．01)高于基础日粮组；EGF组回肠黏膜上皮间杯状细胞数极显著(P&0．01)高于基础日粮组；IGF-1组回肠黏膜上皮间杯状细胞数极显著(P&0．01)低于自然哺乳组。 2.2.2表皮生长因子对促进激素合成与分泌的影响 单安山通过试验证实，饲粮中添加EGF可显著提高21&13龄断奶仔猪血清中胰岛素、皮质醇、促肾上腺皮质激素的激素水平。选择3窝21&~13龄断奶的长白仔猪，随机分为自然哺乳、基础日粮、EGF、胰岛素样生长因子．l4组，施以剂量为17.86ug／d的EGF和胰岛素样生长因子。试验结论表明EGF可能是通过增加胰岛素、皮质醇、促肾上腺皮质激素水平，促进肌肉蛋白质的合成与周转，进而促进细胞对氨基酸和葡萄糖的摄取，增加蛋白质、脂肪、糖原的合成，刺激细胞的增殖与分化。& 2.2.3表皮生长因子对仔猪生产性能的影响 研究表明，EGF以功能性肽制品添加入仔猪日粮中，仔猪的平均日增重、平均日采食量、饲料报酬均有提高的趋势，且腹泻率有下降的趋势。而且可促使生产成本明显下降，经济效益提高，尤其同时添加动物提取功能性肽制品(喂大快2000)及植物提取肽蛋白获取的经济效益更加显著。单安山通过试验证实，饲粮中添加EGF&l周后可显著降21日龄断奶仔的料重比。试验选择21日龄断奶长白仔猪37头随机分为4组，每组3个重复，每个重复3头，分别施以表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子I(IGF-I)、基础日粮、自然哺乳处理，表皮生长因子和胰岛素样生长因子l的剂量均为17.86ug／d。试验结果表明在早期断奶仔猪中利用诸如EGF之类的乳源性生长因子，能够有效地弥补由于断奶母乳供应中断而造成的仔猪体内内源性生长因子的不足。 3猪表皮生长因子的应用前景 鉴于pEGF和肠道结构及功能的密切联系，及其在初生动物中生产应用方面所表现出的良好效果，可利用乳源性EGF来减轻断奶应激对早期断奶仔猪肠道结构和功能的不利影响，促进肠道修复。同时它特定的理化性质也为其作为饲料添加剂奠定了基础。 经分离提纯的pEGF作为针剂目前已经在实际生产中得到了应用。因采用直接注射的方式，pEGF可以直接进入机体参与代谢循环使其发挥作用更迅速。pEGF蛋白质针剂纯度高、计量浓度确定，再采用注射的方式即可以准确确定使用剂量，有助于试验时减少剂量误差并控制使用剂量。 与皮下注射相比较，在实际生产方面使用pEGF直接饲喂动物有较明显的优势。经工业批量生产的pEGF作为饲料添加剂直接添加到饲料中对早期断奶仔猪进行投喂，此方法很大程度上简化了操作过程，从而使pEGF得到更广泛的应用。pEGF直接饲喂仔猪可以完全消除在注射时对仔猪的刺激，以及由于操作不当或过失对仔猪造成的额外伤害。此外，从制作工艺、生产标准以及生产条件等方面进行讨论，制作蛋白质针剂与制作饲料添加剂相比较前者的要求均相对较高，且分离纯化目的蛋白也较为困难。制作蛋白类饲料添加剂可以减少加工环节、缩短加工周期，从而减少成本投入。 虽然目前针对pEGF在生产实际中的应用已有部分试验报道，但使其作为饲料添加剂仍存在一些技术方面的困难：pEGF是乳源性蛋白质分子，其在饲料加工过程中受到物理因素(冲压、制粒)与化学因素(温度)作用时是否会发生变性；制成饲料添加剂后稳定性是否可以保证使其可以中短途甚至是长途运输；制作成本是否可以限制等等。对这些问题做进一步研究在理论和实践上均具有重要的意义。 4&结语 pEGF作为猪乳中含量较高的生长因子之一，它对初生仔猪胃肠道发育有着极其重要影响。早期断奶是缩短母猪生育周期的重要手段，而早期断奶导致的断奶应激是影响早期断奶仔猪生产性能的主要原因，通过在饲料中添加pEGF可以缓解断奶应激。虽然目前关于pEGF在生产实际中应用的研究还很少，但凭借其独特的理化特性以及显著的生理作用，pEGF为饲料添加剂具有广阔的发展前景。
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