大曲中主要酵母菌的分子鉴定
大曲是生产大曲酒的糖化发酵剂,含有多种微生物,由它构成了酿酒过程的内在动力[1-2]。酵母菌是大曲主要的功能微生物之一,主要有酒精酵母和产酯酵母等,其中酒精酵母是大曲中的主要产酒功能菌,产酯酵母可产多种醇、醛、酯等芳香物质[2]。随着DNA序列分析技术的日益成熟和简化,26SrD-NA及其转录间区(ITS)的序列分析被愈来愈多地应用酵母菌的分子分类学、分子系统和多样性等方面的研究中。KURTZMAN等[3-4]和FELL等[5]研究绝大部分子囊菌酵母和担子菌酵母26S rDNA中的D1/D2区域序列,发现用这段序列,可以将绝大部分种区别开,而种内菌株间的碱基差异1%。由于这些序列均已公布于GenBank/EM-BL/DDBJ等国际核酸数据库,为酵母菌的分子分类学、分子系统学和多样性的研究带来很大便利。本研究从大曲中进行酵母菌的分离,在获得纯培养菌株的基础上,以26S rDNA中D1/D2区域(500￣600)的碱基序列分析为依据...&
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随着世界能源的逐渐耗竭,生物质能源越来越受到人们的关注。甜高粱秸秆作为可再生的生物质,可通过酿酒酵母发酵生产燃料乙醇。但是在长期的传代和保藏过程中,由于外界条件或某些因素的变化,使群体表现出衰退现象;或者受培养条件影响(如培养基营养不良、缺乏氧气、接种时间掌握不当等),菌种会发生衰老或者污染杂菌等现象[1],这些都会造成一些优良性状如发酵力等减弱或消失[2～3],所以对菌种进行复壮以恢复其性能显得非常重要。酵母H15是通过诱变育种得到的乙醇高产菌株,它能利用甜高粱秸秆所含的大量葡萄糖生产乙醇。但是在长期的实验操作中其乙醇发酵力出现退化现象,通过对酵母H15进行纯化复壮,可以使优良性状得到恢复,保证菌种长期稳定。本文以H15为实验材料,对酵母菌种的复壮方法进行探讨,以期恢复H15的优良性状,并对酵母菌种复壮工作提供实验指导。1材料与方法1.1材料酵母H15,本实验室诱变的乙醇高产菌株,但出现退化现象。1.1.2培养基5%YPD培养...&
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0前言酵母菌不是分类学上的名称,是一类以出芽繁殖为主要特征的单细胞真菌的统称。根据Lodder的分类系统,酵母菌可以分为四大类,即子囊酵母类,黑粉菌目酵母类,掷孢酵母类和无孢酵母类。目前已知的酵母菌有500多种,共有56个属,分属于子囊菌亚门,担子菌亚门及半知菌亚门。酵母菌通常分布在含糖量较高和偏酸性环境中,种类繁多,与人类关系密切,在酿造、食品、医药工业中占有重要的地位。但有些酵母菌能使肉类、酒类、蜂蜜、果汁、果酱等食品及其他原料腐败变质,少数嗜高渗压酵母菌如蜂蜜酵母(Saccharomyces mellis)、鲁氏酵母(Saccharomycesrouxi)可以使果酱、蜂蜜败坏;有些酵母菌会引起人和植物的病害,如白假丝酵母(C a n d i d aalbicans)可引起皮肤、黏膜、消化道、呼吸道以及泌尿系统等多种疾病,新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)可以引起慢性脑膜炎、肺炎等;而有些酵母菌是...&
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对新的酵母菌种,在生产中使用性能是否稳定,产品口感是否较好,需要在大生产中进行适应性研究。1试验目的 自从使用新的酵母菌种后,发酵阶段的降糖和双乙酸还原不同步。对麦汁充氧量和满罐温度作了适当调整,降糖速度有所降低,双乙酞还原慢。为了了解决此问题,在发酵阶段作温控实验,并且对产品的风味物质进行检测,了解发酵阶段不同的温控工艺对啤酒酵母发酵代谢形成风味物质的影响。2试验方案 在大生产中做三罐发酵液作对比实验。 l)主酵温度控制在12士0.2℃,双乙酞还原12士0 .2℃; 2)主酵温度控制在11士0.2℃,双乙酞还原坦士0 .2℃; 3)主酵温度及双乙酞还原按现在温控正常工艺控制。3试验数据收集 l)降糖速度的跟踪见(表l)。 表I(oP)2)双乙酞还原情况跟踪见(表2)。表2(,飞zL)┌────┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬───┬─────┐│大罐号 │l天 │2天 │3天 │4天 │5天 ...&
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1 导 苦 嗜盐和耐盐的细菌、嗜盐的藻类、耐渗透压的酵母菌和喜干燥的真菌在高盐和高糖的环境中都能生仔,其中,嗜盐的绑崎研究得最为广泛. 关于以z∥g。s州c‘hat·orltycw为代表的嗜高渗酵母菌的早期研究,onishj(1 963)曾做过综述.自从Von Rj曲ter(1 9l 2)将能够在具有较高渗透压环境中生长较好的酵母菌定义为“嗜高渗酵母”以来,那些表现出耐糖或耐盐性质的酵母都被习惯性地称为“嗜高渗”或“耐高渗”的酵母。然而并不准确,从起源来看Zygosacchat’。们yces ro“z撕耐糖性和耐盐’陆在株和株问有肴很大的聋肄.Auand等(1 963)也认为大多数的嗜高渗酵母菌所需要的水活度并不低于基本培养丛的,K活咬(O.997).所以建议将这些酵母命名为“耐盐”和“耐糖”的酵母. 虽然耐栅f。耐盐的酵母没有严恪的定义,但是Phaff等(1 978)建议将能在40～70?,6(u,/u,)惦仔如∥卜K的酵母称...&
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基于乳酸菌自身是营养缺陷型菌株,早期研究乳酸菌与酵母菌之间存在的共生机理时,有研究者认为是乳酸菌与酵母菌的代谢产物之间存在互补机制,如酵母菌为乳酸菌提供营养因子,乳酸菌为酵母菌提供能量来源等。进一步的研究发现乳酸菌与酵母菌之间存在互作关系,如乳酸菌或酵母菌上清液能够减缓酸抑制作用促进目标活菌数的增加,且促进作用与上清液添加量有关;混合培养能够促进有机酸、游离氨基氮等含量的提高,更有利于风味代谢产物的产生[1-4]。经研究证实引起乳酸菌与酵母菌产生共生作用的关键物质是代谢产物中的某些蛋白类或大分子肽类物质[5]。这些能够在菌种间引起共生作用的物质在研究中还没有明确的信息,因此研究者开始从Lux S/AI-2介导的群体感应系统相关联的信号分子AI-2角度解释乳酸菌与酵母菌的共生机理。群体感应(Quorumsensing,QS)即细菌随着菌体密度的增大和生长周期的变化分泌出一种或几种化学信号分子,通过这些信号分子进行种内或种间交流,协...&
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产酯酵母论文：筛选诱变选育发酵优化复合培养
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【摘要】中国是世界上最古老的酿酒发祥地之一,它有着悠久的历史和深厚的酒文化。中国酒品种繁多,生产工艺独特,质量优异,深受国内外市场的欢迎。在白酒的发酵过程中适当地添加产酯酵母,对于提高各种香型白酒的质量是行之有效的技术措施之一。本课题先从优质白酒曲中筛选出较好的产酯酵母菌株,并对其进行紫外诱变选育,然后对诱变得到的菌株的发酵特性进行了研究。结果如下：本文首先从中温优质酒曲中筛选出11株生香酵母,并对其形态及生理生化特性进行了初步分析,近而确定其种属。通过发酵产酯实验,筛选出产酯较高的菌株。在11株产酯酵母中,产酯最高的菌株是S8,其发酵液总酯含量达到1.78g/L对生香酵母S8菌液经紫外线照射处理后进行平板培养,挑选出直径较大的菌落接种到试管培养,用杜氏发酵管通过产二氧化碳体积进行初筛,再进行发酵总酯复筛获得一株优良菌株Y16,其发酵产总酯量可达3.21g/L原始S8的发酵产总酯量为1.78g/L,诱变后产酯总量提高了75.28%左右,产酯酵母紫外处理的最佳时间为2min。再对该产酯最高的酵母菌株Y16进行发酵条件的优化。以产酯酵母的生理条件为因素,通过单因素实验确定了该酵母菌株最佳产酯培养基的pH为5、酒精添加量为2%,而且静止定期通气培养比振荡培养产酯要高。再选取温度、糖度、发酵时间三因素作响应面分析得出：当培养基中黄豆芽汁浓度为100g/L、温度28℃、发酵时间为6d时,发酵液中总酯可高达4.033g/L。这些研究的结果对进一步探索产酯酵母的生理生化性能具有一定的借鉴意义。浓香型白酒的主题香味成分是己酸乙酯,但产酯酵母所产酯类大多是乙酸乙酯。通过研究产酯酵母与白酒窖泥中筛选出己酸菌的复合培养得出以下结论：己酸菌能产生大量己酸与酵母所产乙醇在产酯酵母酯化酶的作用下转化成己酸乙酯。而且产酯酵母与己酸菌的接种量的比例为1：2时,效果最为明显,总酯为4.815g/L,己酸乙酯为1.720g/L。其己酸乙酯的产量最高。此结论对浓香型白酒的生产具有一定的研究意义。
【关键词】产酯酵母；筛选；诱变选育；发酵优化；复合培养；
【篇名】产酯类酵母菌的选育
【目录】产酯类酵母菌的选育
第一章 文献综述
1.1 中国酿酒微生物的起源与发展
1.1.1 酒曲的起源
1.1.2 酒曲的分类体系和应用
1.2 生香酵母的国内外研究现状分析
1.2.1 生香酵母概述
1.2.2 生香酵母产生的主要芳香气味物质
1.2.3 生香酵母培养的基本条件
1.2.4 生香酵母发酵液中总酯的检测方法
1.2.5 生香酵母在白酒中的应用
1.2.6 生香酵母在葡萄酒生产中的应用研究
1.2.7 生香酵母在醋生产中的应用
1.2.8 生香酵母在黄酒生产中的应用
1.2.9 生香酵母在果汁饮料和香精、香料生产中的应用
1.3 产酯酵母配合己酸菌在白酒中的应用
1.4 酿酒微生物的菌种保藏技术
1.5 本论文的研究意义与目的
第二章 酒曲中生香酵母的分离及生理生化鉴定
2.1 实验材料与仪器
2.1.1 研究材料
2.1.2 主要实验设备
2.1.3 主要试剂
2.1.4 实验培养基
富集培养基
筛选培养基
鉴定培养基
发酵产酯培养基
2.2 实验方法
2.2.1 生香酵母的分离方法
生香酵母的初筛
酵母菌的分离复筛
2.2.2 酵母菌的鉴定
形态学鉴定
生理学初步鉴定
2.2.3 产酯试验
2.2.4 发酵
2.2.5 总酯测定方法
皂化中和滴定法
气相色谱法(HPLC)
2.3 结果与讨论
2.3.1 酵母菌的分离与纯化
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