含量测定: 芦丁标准品品,样品,空白液,三个测紫外,怎么测定样品的含量呢

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采用紫外光谱法测定药物的吸收度时,应考虑A.选择适当溶剂溶解样品,溶剂吸收尽可能小B.做空白实验
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采用紫外光谱法测定药物的吸收度时,应考虑A.选择适当溶剂溶解样品,溶剂吸收尽可能小B.做空白实验C.选择测定波长,通常选λmaxD.配制适当浓度的供试液,使吸收度约为0.3~0.7E.选择适当溶剂溶解样品,溶剂吸收尽可能大此题为多项选择题。请帮忙给出正确答案和分析,谢谢!
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【求助】用紫外中的比色法测定某一类物质的含量,如何确定标准品?
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这个帖子发布于7年零203天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
查了一些文献说:可以根据氨基酸与茚三酮的显色反应用分光光度法在特定的波长下测定氨基酸的含量.但供试品溶液中有十多种氨基酸.如何确定那一种作为对照品?甚为迷惑 希望各位大侠给予帮助 不胜感激!
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文献上肯定是指某单一氨基酸含量的检测,如果是氨基酸混合溶液,那用茚三酮显色的方法,不是很合理,就象楼主说的,不知道找哪种氨基酸做对照,假如用多种氨基酸混合后做对照的话也很难对某种氨基酸定量,势必引起较大误差。氨基酸分析,我提两种方法:1. 高效液相或氨基酸自动分析仪,用它来检测样品中的含量,定量较准确,可以分别测出每种氨基酸的含量,假如要测游离氨基酸总量,那只需加起来就可以。但缺点是,成本高,时间慢,新手还要经过较长时间的学习才能掌握。2. 如果对准确度要求不高(误差在20%以内),且只需知道样品中总氨基酸含量(包括游离的和非游离的),则可以用定氮法检测,用总氮乘以6.25得到的值可以认为是氨基酸总含量。关于总氮的检测方法可见中国药典2005版附录43页。
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谢谢,十分感谢您的帮助!可是我还是有不解之处:1.我所要控制的目标物是一个含有十多种氨基酸的供试品,如果选用高效液相法那么是不是要测不止一种氨基酸的含量?2.氨基酸自动分析仪我想是个最佳选择,但是我们并没有这种仪器,多少钱?有没有可以委托检验的地方?3.凯氏定氮法,是法认的检验标准.可是太不方便,而且是不是只要含有氨基的物质就会发生反应?4紫外的茚三酮比色法是不是可以这么理解:α-氨基酸与茚三酮反生定量反应生成紫色物质,用紫外测定含量.那么我是不是可以选取供试品中含量较多的一种α-氨基酸来作为对照品呢,以此来测定样品中α-氨基酸的含量呢?
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首先,请楼主去查一下有关文献资料,了解相关的检测方法和仪器,不要只凭自己想像来猜测检验方法。但是,针对你提出的问题,我还是简单做些回答:1. 用高效液相法测氨基酸,不需要18种氨基酸一个个的测,而是只用进一针样品和一针对照就可以了,当然,为了结果 的可靠性,至少平行进两针。高效液相测氨基酸是有专门的方法和试剂包的,各种氨基酸在同一样品的图谱里可以得到有效分离,从而达到一次性检测的效果。2. 凯氏定氮法中,只要是含N的物质,都会被检测,不论它是否是氨基里的,所以只能算个粗蛋白的含量,用它来近似的估算氨基酸含量。但是,方法还算方便的,成本也低,一套装置也不会超过200元钱。另外,此方法要求实验人员有较好的动手能力。3.茚三酮法建议不要选取,按你的方法检测,国家不会认可的。4. 测氨基酸,法定方法目前就是高效液相和自动氨基酸分析仪。如果委托外面单位检测,也不算贵。以杭州为例:高效液相法有省农科院和省药检所两家单位都可以对外检验,且都经过计量认证的,农科院价格不会超过150元/批,药检所可能要500元/批,但是药检所的检测过程更严谨,平行样做的也多。氨基酸自动分析仪,浙一医院肝病研究所和省丝绸研究院可以做,但可能都没经过计量认证。如果是用于新药报批,建议委托当地药检所检测比较好。如果当地药检所没有条件检测,可以由他们出面委托其他单位检测,最终拿的报告还是当地药检所的报告,权威性高。
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我也很有兴趣,楼主是不是想测十中氨基酸的总量,那么我觉得比色法可行,如同比色法测总黄酮一样,不过计算时要标明以什么计算,反而高效液相法,不容易,记得前两天有一个同学想用一个对照品,液相测总黄酮,这里就有两个问题,第一、那么多的峰,没有对照你怎么知道哪个是你要测的黄酮峰。第二、凭什么你用此黄酮来测定彼黄酮。大家用液相同时测多组分,通常用多个对照品,如果做得好的话没准还能投一篇水平较低的sci的,不过要同时分离十个氨基酸恐怕不容易。比色法的原理教科书上是有的,药典上有些就是用该法测的,当然结果不是100%准确。
gududeyun edited on
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谢谢各位大侠的帮忙!
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