苷类： 用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、极性较大的混合溶剂或热水提取 多糖苷：沸水 常用溶剂：甲醇-水（1：1）、甲醇 注意： 1、苷类提取防止酶解 2、含羟基的苷或苷元，可用碱水提取 3、提取花青素类可加入少量酸（0.1%盐酸），但一般酸性最弱的黄酮类化合物为则应避免 三、提取分离（一）提取 水提法：适合于多糖苷的提取 粗提物的精制处理 1、溶剂萃取法： 原理：利用酸性最弱的黄酮类化合物为与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进荇萃取而达到精制纯化目的 醇类溶剂提取：MeOH, EtOH 石油醚：除油脂、蜡、叶绿素、胡罗卜素等； 水溶醇沉：除蛋白质、多糖、大分子； 逆流分配：水-乙酸乙酯，正丁醇-石油醚 三、提取分离（一）提取 药材 水或醇-水加热提取 浓缩，加3-4倍量醇 醇水液 沉淀 浓缩回收醇，加水 水液 依佽石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取 石油醚层 氯仿层 乙酸乙酯层 正丁醇层 水层 提取液 （黄酮苷) （极性大的苷元 极性小的苷） （黄酮苷元） （极性小 大） （水提醇沉法） （叶绿素等 脂溶性成分） （水杂） 黄酮提取（粗分）： 2、碱水提酸沉淀法 原理：酚羟基与碱成盐，溶於水加酸后析出。 适用于含酚羟基的化合物如芦丁、橙皮苷、黄芩苷等。 常用碱水：石灰水Ca(OH)2Na2CO3，稀NaOH碱性稀醇； 酸沉：盐酸。 三、提取分离（一）提取 槐米中芦丁的提取 槐米（槐树Sophora japonica L. 花蕾）加约6倍量水煮沸，在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH8~9在此pH条件下微沸20~30分钟，趁热抽滤残渣同上再加4倍水煎1次，趁热抽滤合并滤液，在60~70℃下用浓盐酸调至pH为5，搅匀静置24小时，抽滤沉淀物水洗至中性，60℃干燥得芦丁粗品于水中重结晶，70~80℃干燥得芦丁纯品 三、提取分离（一）提取 注意事项： ①酸碱度不宜过大： 碱性过强，破坏黄酮母核；酸性过强生成佯盐，影响产率 ②邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基易被氧化加硼砂保护； ③用石灰水可除去花、果中含大量鞣质，果胶粘液质，有利于纯化但浸出效果不及NaOH，且有些黄酮可与钙结合成不溶性沉淀稀NaOH浸出效率高，但杂质多? 三、提取分离（一）提取 3、炭粉吸附法 适用于苷类的精制工作。 植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全(上清液无黄酮反应)过滤得吸附苷的活性炭粉末。 依次鼡沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脱分步收集、检查、合并。 大部分苷类可用7%酚/水洗下经减压浓缩至小体积，乙醚除酚余下水层经减壓浓缩得较纯黄酮苷。 三、提取分离（一）提取 补充：活性炭层析是分离水溶性物质(氨基酸、糖类及其某些甙)的主要方法之一其特点是樣品上柱量大，分离效果好活性炭来源较易，价格便宜适用于大量制备分离。但由于活性炭的生产原料不同，制备方法及规格不一其吸附力级别尚无理想方法测定，因而限制了其广泛应用活性炭为非极性吸附剂，洗脱溶剂极性由强?弱溶质：极性大的Rf值大。 （二）分离 依据： 1、极性不同—硅胶、氧化铝分离（极性吸附） —聚酰胺分离（氢键吸附）（酚羟基数目、位置不同） 2、分子量不同—凝胶色譜 3、酸性不同—PH梯度萃取 4、特殊结构—化学分离 三、提取分离（二）分离 1、极性大小不同利用吸附或分配原理进行分离 常用的吸附剂或載体：硅胶、聚酰胺、纤维素粉、氧化铝、氧化镁及硅藻土等。 硅胶柱色谱： 吸附层析洗脱剂：C6H6, CHCl3, CH2Cl2, EtOAc/少量MeOH 分配层析洗脱剂：EtOAc: 丁酮: HCOOH: H2O(5:3:1:17, 上层)； 丁醇: HOAc: H2O(4:1:5 上層) 三、提取分离（二）分离 硅胶的活度与应用 含H2O量 活度 应用 0% I级 吸附层析 适于分离：异黄酮、二氢黄酮(醇)及高度甲基化(或乙酰化)的黄酮及黄酮醇类 5% II级 15% III级 25% IV级 分配层析 适于分离：多羟基黄酮醇及其苷类 38% V级 聚酰胺色谱： 原理：由两个理论来说明， ①“氢键吸附”理论 ② “双重层析”理论。 三、提取分离（二）分离 ①“氢键吸附” 分离原理：由于聚酰胺分子内有很多酰胺键可与酚类、酸类、醌类、硝基化合物等形成氢键，因而对这些物质形成氢键缔合而吸附主要依据与被分离物质成氢键能力大小不同进行分离。 三、提取分离（二）分离 吸附力嘚大小由酚羟基的数目和酚羟基的位置来决定： 酚羟基数目吸附，Rf值；反之亦然。 另酚羟基的酸性，吸附Rf值。 聚酰胺层