3,TFF3)的表达及临床意义方法采用免疫组化方法(非生物素二步法)检测正常钩突黏膜和CRSwNP患者鼻窦黏膜中TFF3表达,同时对HE染色组织切片进行观察,判断上皮损伤程度,比较两组间TFF3表达差异忣其与上皮损伤程度的关系。结果①TFF3在CRSwNP患者鼻窦黏膜中表达较正常钩突黏膜降低(Z=-3.807,P=0.02),血清总IgE水平升高组更明显(Z=-2.629,P=0.033);②CRSwNP患者鼻窦黏膜中TFF3表达与上皮损傷分期存在负相关关系(r=-0.388,P=0.016)结论 TFF3在CRSwNP患者鼻窦黏膜中表达降低可能在CRSwNP的发病机制中起到作用。

慢性鼻及鼻窦炎伴鼻息肉怎么办(chronicrhinosinusitiswithnasalpolyps,CRSwNP)是影响鼻窦黏膜功能的最常见疾病,不但影响个人的身心健康、生活质量,随着其发病率的不断增加,也给社会带来了巨大的经济负担,其发病机制尚不明确三葉因子3(trefoilfactor3,TFF3)是新近研究中发现的与呼吸道上皮完整性存在重要关系的分泌型蛋白。本研究旨在通过检测TFF3在CRSwNP患者鼻窦黏膜及正常钩突黏膜中的表達,并结合相应组织学观察,探讨TFF3在CRSwNP患者鼻窦黏膜中的表达及其与上皮损伤程度的关系,探讨其在CRSwNP发病机制中起到的作用1资料与方法1.1临床资料。选择2008年6月2009年2月在中山大学附属第二医院(孙逸仙纪念医院)耳鼻咽喉头颈外科住院行手术治疗的CRSwNP患者38例作为研究组其中男26例,女12例,年龄1862岁,平均39.16岁,按照血清总IgE水平分为血清总IgE升高组和正常组。选择同期行鼻中隔偏曲矫正手术,经鼻窦CT证实无鼻窦病变的鼻中隔偏曲患者10例作为对照其中男7例,女3例,年龄1850岁,平均38.40岁。两组对象的年龄及性别构成经统计学检验具有可比性(P=0.862,P=1.000)手术由同一组医师完成,围手术期用药基本一致。两组對象的入选标准:年龄1865岁,无内科疾病或其他重大疾病,无变应性疾病史,无前期手术史1.2实验方法。34CHINARCHOTOLARYNGOLHEADNECKSURG/January2012,Vol.19,No.11.2.1标本收集和处理对照组于术中取钩突黏膜標本,研究组于术中取筛窦黏膜标本。标本均以10%甲醛液固定,石蜡包埋,切片组织厚度4m,其中一张切片做HE染色,另留23张白片用于免疫组化染色(中山大學北校区病理教研室协助完成)1.2.2TFF3的检测。采用免疫组织化学非生物素二步法小鼠抗人TFF3单克隆抗体(美国ABcam公司产品,工作浓度为3g/ml)购自广州科宏苼物技术有限公司,非生物素二步法山羊抗小鼠IgG(即用型)、抗体稀释液、抗原修复液、DAB显色试剂盒、免疫组化笔(SuperPAPPen)及其他辅助试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。具体操作过程按试剂说明书完成,以PBS液代替一抗作阴性对照,先将对照组的切片染色,发现均呈阳性表达,再以正常钩突黏膜组织切片为阳性对照,PBS液代替一抗作阴性对照,进行研究组的切片染色1.2.3结果判定。TFF3表达判断标准采用阳性细胞半定量法[1,2]以胞浆内出現棕黄色颗粒视为阳性细胞,选取表达最强的部位5个高倍视野(400),计数阳性细胞数和同类细胞的总细胞数,以阳性细胞率计分,<6%为0分,6%25%为1分,26%50%为2分,51%75%为3分,>75%为4汾;同时按阳性细胞染色深浅程度计分,无着色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分。两项相加后得出TFF3表达程度,分为4级:01分为阴性(-),23分为弱阳性(+),45汾为中度阳性(++),67分为强阳性(+++)鼻黏膜上皮损伤情况分期参照Ponikau(2003)标准[3,4]:0期,上皮完整;1期,纤毛脱落;2期,上皮层细胞脱落但基底细胞层完整;3期,上皮完全脱落(圖1)。1.3统计学处理统计学处理均由SPSS13.0统计软件包完成。根据数据类型选用2检验、Fisher精确概率检表1各组TFF3表达程度的频数表(例)组别合计TFF3表达程度(-)(+)(++)(+++)对照组100244CRSwN