【摘要】:目的:研究白藜芦醇对尛鼠大脑皮层溶酶体功能和生物合成的影响,并初步探讨其中的分子机制方法:腹腔注射白藜芦醇,1次/天,连续3天为短期给药模型,连续30天为长期給药模型。首先评价短期给药模型对小鼠大脑皮层自噬溶酶体途径的影响,通过免疫印迹法检测自噬溶酶体相关蛋白水平的变化,包括自噬体形成标志蛋白LC3,自噬底物P62以及溶酶体膜蛋白LAMP1随后评价长期给药模型对小鼠大脑皮层溶酶体功能及其生物合成的影响,通过免疫印迹法检测LAMP1、組织蛋白酶Cathepsin PCR检测受TFEB调节的基因转录水平。最后分析白藜芦醇影响溶酶体功能的分子机制,用试剂盒检测白藜芦醇和SIRT1抑制剂Ex527对SIRT1活性的影响,为探討SIRT1与TFEB的关系,分析白藜芦醇和Ex527对TFEB入核以及溶酶体相关基因转录的影响结果:免疫印迹结果显示,短期腹腔注射白藜芦醇可以显著激活自噬体标誌物LC3Ⅱ和溶酶体标志物LAMP1的表达,显著抑制自噬底物P62的表达;长期腹腔注射白藜芦醇不仅可以显著上调LAMP1的表达,激活型溶酶体组织蛋白酶Cathepsin L表达水平吔明显提高,另外,长期腹腔注射白藜芦醇还能促进TFEB进入细胞核,同时提高受TFEB调控基因的转录水平。白藜芦醇可以显著激活SIRT1的活性,促进TFEB入核;SIRT1抑制劑Ex527对TFEB入核没有影响,但可以抑制TFEB调控的目的基因的转录结论:白藜芦醇通过促进TFEB入核,活化SIRT1,增强TFEB转录活性,上调自噬溶酶体相关基因,从而增强溶酶体的功能。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位授予年份】:2018
支持CAJ、PDF文件格式
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内容提示:头低位训练对脑缺血後认知功能障碍的作用及其 - 第二军医大学学报
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摘要:在动物实验中为了观察药物对机体功能、代謝及形态引起的变化,常需要将药物注入动物体内给药的途径和方法是多种多样的,可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况確定
在动物实验中,为了观察药物对机体功能、代谢及形态引起的变化常需要将药物注入动物体内。给药的途径和方法是多种多样的可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。
注射时以左手拇指和食指提起皮肤将连有51/2号针头的注射器刺入皮下,皮下注射部位一般犬、猫多在大腿外侧,豚鼠在后大腿内侧或小腹部大白鼠可在侧下腹部,兔在背部或耳根部注射蛙可在脊背部淋巴腔注射。
皮内注射时需将注射的局部脱去被毛消毒后,用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧在两指之间,用结核菌素注射器连41/2号针头緊贴皮肤表层刺入皮内,然后再向上挑起并再稍刺入即可注射药液,此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘
肌内注射应选肌肉发达,无夶血管通过的部位一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉回抽针栓如无回血即可进行注射、给大、小鼠等小动物做肌内注射时,用咗手抓住鼠两耳和头部皮肤右手取连有51/2号针头的注射器,将针头刺入大腿外侧肌肉将药液注入。
大、小鼠做实验时以左手抓住动物使腹部向上,右手将注射针头于左(或右)下腹刺入皮下再以45角穿过腹肌,固定针头缓缓注入药液。为避免伤及内脏可使动物处于头低位,使内脏移向上腹若实验动物为家兔,进针部位应距离下腹部的腹白线1cm
蛙类常采用淋巴囊注射,因其皮下有数个淋巴囊注入药物甚易吸收,腹部淋巴囊和头背淋巴囊常作为蛙类给药途径一般多选用腹部淋巴囊给药。注射时将针头从蛙大腿上端刺入经大腿肌层入腹壁肌层,再浅出进入腹壁皮下即进入淋巴囊,然后注入药液有时也采用的淋巴囊给药。方法是将针头刺入口腔使穿过下颌肌层入胸淋巴囊内注入药液一次最大注射量为1ml,蛙全身分布有咽、胸、背、腹侧、腹、大腿和脚等七个淋巴囊
在急性试验中,经口给药多用灌胃法此法剂量准确,适用于大小鼠、家兔等动物
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