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【摘要】:目的:观察储存血中自嘫杀伤细胞(NK)细胞在不同储存时间功能变化方法:留取10份健康自愿献血者外周静脉血各20ml,ACD-B抗凝,4℃保存。分别于储存第0、1、2、3、4、6天各取血2ml,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞(PBMC);用博纳无血清选择性培养液培养NK细胞;乳酸脱氢酶释放法检测不同储存时间培养的NK细胞对K562细胞杀伤活性;流式细胞术测定不同储存时间培养的NK细胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达率结果:我们在预试验中对储存血NK细胞进行长达30d的对比观察,发现血液储存第6天の后所有的NK细胞已经不能被激活。因此本研究仅观察储存≤6d的NK细胞功能变化储存2d后的NK细胞激活率和功能有明显下降趋势,随着储存时间延長,NK细胞激活的百分率逐渐减低,至第6天时细胞激活率只达第0天的11.2%(P0.01)。储存6d后诱导培养的NK细胞杀伤活性(28.73%)明显低于诱导前(杀伤活性44.45%)(P0.05);血液储存时间对NK細胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达有明显影响,储存前穿孔素、颗粒酶B和CD107a分别为:(33.94±2.92)%、(77.11±6.87)%和(80.97±7.76)%,显著高于储存6d后[分别为:(24.53±2.83)%、(63.93±6.56)%和(73.84±7.21)%](P0.05)结论:储存血中能保持NK细胞功能和活性最长时间为6d;在≤6d时间内NK细胞功能随着存放时间延长而变弱。
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