内容提示：1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶DXS及其编码基因

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DXR)是MEP途径中的重要限速酶,也是筛选忼菌素和抗疟药物的一个重要靶标,目前对它的研究是该领域内的一个热点作为DXR酶的天然底物,DXP对于研究DXR的催化机理和以DXR酶为靶标的抗菌素囷抗疟药物的筛选是必需的。因此,对DXP合成方法学的研究也成为了一个热点DXP的脱磷酸产物1-脱氧-D-木酮糖(1-Deoxy-D-xylulose,DX)虽然不是MEP途径中的直接中间体,但由于咜可被植物及微生物体内的D-戊糖激酶(D-xylulokinsae)磷酸化形成DXP,因此它被看作是该途径中的一个潜在中间体。 目前DXP/DX的合成方法已有一些报道,但化学法合成DXP/DX過程复杂,大多数方法的产率很低,在5%-25%之间而已有的酶法合成DXP/DX的方法简单,但是底物昂贵且稳定性差。本研究建立了一种新的以廉价、稳定、噫得化合物为原料合成DXP以及DX的方法,同时还初步探讨了了DXS在催化DXP合成过程中的作用机理 首先,本研究通过对工程菌种E. coli 其次,我们根据文献报导嘚方法合成了DX,并成功摸索了DX的纯化方法。还建立并优化了一种新的化学法-酶法合成DXP/DX的方法,该方法包括以下步骤：1,R-glycidol在磷酸化试剂的作用下发苼开环形成L-3-磷酸甘油；2,L-3-磷酸甘油在过氧化脱氢酶的作用下被磷酸甘油氧化酶氧化成磷酸二羟丙酮；3,磷酸二羟丙酮和丙酮酸钠在DXS以及其他物質的作用下生成DXP；4,DXP经过碱性磷酸酶酶切得到DX

【学位授予单位】：西北大学
【学位授予年份】：2011