定容至100ml4℃暗处可以贮存一个月。贮存中有可能发生结晶3.反应缓冲液：GUS 提取缓冲液中加入 1mmol/l MUG（100ml 加入 35.23mg） ，4℃可以保存 2 周4. 考马新亮旒 G250 溶液：lOOmg 考马斯亮蓝 G250 溶于 50m1 95％乙醇中，加 lOOml 磷酸dH2O 定容至 1L 过滤后于 4℃贮存。操作步骤： 新鲜的植物组织 6US GUS 蛋白提取液 20ul加 H2O 至 4ml，加入 lml 考马斯亮蓝混匀，室温下放置 2min测定 595nm 光吸收值根据标准曲线计算蛋白质含量。GUS 酶活反应：1. 将反应缓冲液于 37℃预热2．取 6 支 1.5ml 离心管，各加入 900ul 反应终止液编号。3．取 1 支 1.5ml 离心管加入 1ml 预热的反应緩冲液，再加入 200ul 的提取缓冲液(具体用量根据材料而定)混匀，立即取出lOOul 加入到 l 号管中此为反应 0 时的样品(荧光测定时以此为空白)，并开始嚴格计时4．将反应管放入 37℃水浴中进行酶反应，分别于5、10、15、30、60min 时的样品供荧光测定用。4 荧光测定1．制作标准曲线配置 4-MU 梯度浓度液：lOOumol/l 4-MU：取 lOOul 1mmol／L MU 与 条件下测各样品的荧光以反应终止液为空白溶液，绘制标准曲线2． 以 l 号管为空白，在上述条件下测定 2～6 号管的荧光强度从標准曲线上查出 2～6 号管中的 4-MU。酶活力的计算：1．以酶反应时间对 4-MU 含量作图直线部分的斜率即为酶反应初始阶段的速度。2酶活力单位定義为：每分钟水解 4-MUG 生成 1nmol 或1mg、lug、1ng 4-MU 的酶量为一个活力单位。根据定义求出各样品的酶活力3．GUS 基因表达活性以每毫克蛋白的酶活力表示，将样品酶活力除以上述测得的样品蛋自含量