：一种可视化蛋白芯片装置的制莋方法

本实用新型涉及生物芯片和生物分析器材更确切地说，涉及一种适于多指标、多样品平行检测的可视化蛋白质芯片装置

利用抗原、抗体反应是疾病诊断的重要方法之一，在临床上已获得了广泛应用但是，目前的免疫学检测方法如ELISA,放射同位素标记、金标、突光、化学发光、时间分辨突光等，绝大多数是单指标检测也就是说单个样品只能检测出单个指标的信息。生物芯片技术的发展为实现临床診断的快速化并行化，高通量化检测提供了可能检测效率获得了较大提高，检测时间、成本随之也会大大减少生物微阵列芯片是指采用微量点样等方法将生物分子样品有序地固定化于支持物(如载玻片，塑料膜等载体)表面，组成密集分子排列然后与已标记的待测生粅样品中靶分子孵化反应，通过特定的仪器如激光共聚焦扫描或电荷耦合器件(CCD)对反应信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从洏判断样品中靶分子的含量同一张芯片可构建多个样品池，每个样品池可检测一人份样品每个样品池内部可固定成千上百种抗原，抗體或其他生物捕获分子阵列进行多靶标同时检测。据此一张芯片可实现多样品、多指标的并行化、通量化检测分析。然而利用上述原理制造出的方便实际样品应用的生物芯片产品，还必须解决以下问题I.为实现同一张芯片上多个样品的分析检测要把各个生物样品反应池分开，不同样品的免疫反应可单独进行2.反应池要方便加样，清洗等操作3.防止反应过程中试剂渗漏等交叉污染。4.反应后的芯片要便于掃描进行图像处理。5.反应后样品结果可以通过显色方法显示阵列点的颜色各样品池中的阵列点可以通过普通扫描仪检测，可以实现实際样品的快速检测因此，本领域迫切需要开发新的、使用方便成本低廉的可视化微阵列生物芯片。

实用新型目的本实用新型所要解决嘚技术问题是针对现有技术的不足提供一种可视化蛋白芯片装置。为了解决上述技术问题本实用新型公开了一种可视化蛋白芯片装置，包括片基在片基上设有一组向内凹陷的样品池，所述片基的一侧边上设有台阶形状的片基延展边便于操作。所述片基经过表面处理对生物识别分子具有高吸附且为透明。本实用新型中所述片基为高分子聚合物、玻璃以及塑料等任意一种材料制成的片基。[0014]本实用新型中所述片基横截面为长方形。本实用新型中所述一组样品池包括24个样品池，呈3行、8列阵列状分布各样品池之间相互独立，底部为岼面且与上端横截面大小相同。本实用新型中所述样品池截面形状为圆形、方形、六角形或者椭圆形中的任意一种，样品池的横截面媔积小于或等于开口处的横截面面积本实用新型中，样品池内设有生物识别分子等微阵列区域所述凹形孔状结构内有生物识别分子等微阵列区域。所述蛋白质微阵列区域可用普通平板CCD扫描仪进行扫描采集图像。有益效果本实用新型中样品池中固定有多个生物分子识別物，这样能实现高通量检测生物样本中多个生物指标的目的同时4块芯片可组合成96孔板形状及结合多个样品池的设计，能一次分析大批量的生物样本真正实现通量化检测目的，即可实现多样品、多指标并行化处理各样品池相互独立，减少交叉污染且试样和试剂消耗量小。四块本实 用新型可组合成标准96孔板形状也便于自动加样，清洗等操作简易可行，大大提高了检测效率本实用新型可用普通平板CCD扫描仪进行可视化扫描，采集图像本实用新型能广泛适用于抗体筛选，药物筛选食品安全检测，环境中小分子检测以及体外临床診断监测等领域。

对本实用新型做更进一步的具体说明本实用新型的上述和/或其他方面的优点将会变得更加清楚。图I为实施例I的俯视结構示意图图2为实施例2的长边处的剖视图。

具体实施方式 如图I和图2所示本实用新型可视化微阵列生物芯片是由一张经过表面处理高吸附嘚横截面为长方形片基I组成。所述片基材料为塑料、载玻片膜等透明材料，优选为塑料与醛基玻片相比，大大降低了材料成本该片基总长76. 2mm,宽为25. 4mm,高为2mm。下端短边处有一阶梯型延展凹条3,该凹条长即所述片基的宽为25. 4mm,凹条宽没有特别限制一般为0. 5-2. 5mm，优选为l_2mm高也没有特别限制，一般为0. l_2mm优选为0. 5-1. 5mm。片基四周边框中间区域具有横三竖八阵列排布的24个凹型样品池2，所述凹型样品池的形状为圆形、方形、六角形、椭圓形等优选为圆形。所述样品池底部为平面且与上端横截面大小相同，直径为3-8mm,优选为5_7mm,凹型样品池深度为0. l-2mm,优选为0. 5-1. 5mm ;各样品池相互独立,两孔の间最小距离为优选为2_4mm,且两样品池中心距离为9mm ;样品池距离片基顶部优选为2-4mm,距离片基底部凹边处为优选为2_3mm,距离两侧各为0. 7mm样品池内部为蛋白質微阵列区域，所述的每个微阵列区域含有2-1000个蛋白质点样点各反应池内的样品体积也没有特别限制，通常为10-100微升优选为20-50微升。四块所述芯片装置可组合成标准96孔板形状因此96孔板中生物样本也可以一一对应的加入组合后芯片的每一样品池中，一方面便于自动加样清洗等操作，实现一次同时加取多个待测或反应样本，另一方面也可省略在转移过程中的样品标记加快检测进程，操作简易可行大大提高了检测效率。且结果可进行可视化检测大大降低了检测成本。实施例I本实施例制备和检测了本实用新型的抗生素残留检测芯片如图I囷图2所示，本实施例包括 经过表面处理高吸附的透明长条状塑料片基1总长76. 2mm,宽为25. 4mm,高为2mm。下端短边处有一凹条3,该凹条长为25. 4mm,宽为

1.5mm高为1mm。片基㈣周边框中间区域为横三竖八阵列排布的24个凹型圆柱形样品池

2,其直径为6mm,深度为Imm;各样品池相互独立,两孔之间最小距离为3mm,两样品池中心距离為9mm ;样品池距离片基顶部3mm,距离片基底部凹边处为2. 7mm,距离两侧各为0. 7mm。样品池内部为蛋白质微阵列区域所述的每个微阵列区域含有甲，乙丙，丁四种抗生素人工抗原固定后封闭。检测方法I.加一定稀释的待检样品及相应抗体50微升于反应池中(同时做空白对照，阳性对照孔)37°C孵育30min。2. PBST洗涤3次每次15min，拍干3.各反应池内加入金标二抗，37°C孵育30min4. PBST洗涤3次，每次15min去离子水洗涤，拍干5.各反应池内加入银增强显色液，避咣反应6.将芯片放入平板扫描仪中进行可视化检测。7.计算机图像分析图像上的亮点，表示阴性强度越高，表示待检物质含量越高结果本实施例芯片装置不仅方便加样、清洗，而且可防止反应过程中试剂渗漏等交叉污染反应结束后的芯片便于普通平板CCD扫描仪扫描，进荇图像处理大大降低了检测成本，可实现样品的多样品多指标并行化处理，且操作简便易行本实用新型提供了一种可视化蛋白芯片裝置的思路及方法，具体实现该技术方案的方法和途径很多以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理的前提下还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围本實施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。

1.一种可视化蛋白芯片装置其特征在于，包括片基在片基上设有ー组向内凹陷嘚样品池，所述片基的ー侧边上设有台阶形状的片基延展边

2.根据权利要求I所述的ー种可视化蛋白芯片装置，其特征在于所述片基为高汾子聚合物、玻璃以及塑料等任意ー种材料制成的片基。

3.根据权利要求I所述的ー种可视化蛋白芯片装置其特征在于，所述片基横截面为長方形

4.根据权利要求I所述的ー种可视化蛋白芯片装置，其特征在于所述ー组样品池包括24个样品池，呈3行、8列阵列状分布

5.根据权利要求I所述的ー种可视化蛋白芯片装置，其特征在于所述样品池截面形状为圆形、方形、六角形或者椭圆形中的任意ー种，样品池的横截面媔积小于或等于开ロ处的横截面面积

本实用新型公开了一种可视化蛋白芯片装置，包括片基在片基上设有一组向内凹陷的样品池，所述片基的一侧边上设有台阶形状的片基延展边便于操作。所述片基经过表面处理对生物识别分子具有高吸附且为透明。本实用新型能實现高通量检测生物样本中多个生物指标的目的各样品池相互独立，减少交叉污染且试样和试剂消耗量小。四块本实用新型可组合成標准96孔板形状也便于自动加样，清洗等操作简易可行，大大提高了检测效率本实用新型可用普通平板CCD扫描仪进行可视化扫描，采集圖像本实用新型能广泛适用于抗体筛选，药物筛选食品安全检测，环境中小分子检测以及体外临床诊断监测等领域。

许丹科, 李周敏 申请人:许丹科