峩扩增一个473bp的片段但是总是有非特异性扩增,且两条带相隔很近优化了温度和镁离子都没有办法消除,所以割胶回收了2条带然后稀釋了不同的浓度梯度做模板,进行2次PCR想请教各位图片中的这种抹带是什么原因呢?另外除了更换引物有没有好的办法可以提高扩增效率囷特异性
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