目 录 摘 要……………………………………………………………………一1一 Abstract……………………………………………………………………………………………-3- 缩略词表……………………………………………………………………一5- 第一章长链非编码RNA在肝癌发生、发展过程中的生物学功能和作用 机制研究……………………………………………………………………一7- 一、前言………………………………………………………………．7． ——、月|I青……………………………………………………………………………………， 二、材料与方法………………………………………………………一9- 三、实验结果………………………………………………………一25一 四、分析与讨论…………………………．…………………………．┅54一 五、参考文献………………………………………………………一55- 第二章长链非编码RNA在肝癌转移过程中的生物学功能和作用机制研 究…………………………………………………………………………………………………．一59一 一、日Ⅱ舌…………………………………………………………………………………．一)y。 一、前言……………………………………………………………一59． 二、材料与方法……………………………………………………一60一 三、实验结果………………………………………………………一71- 四、分析与讨论……………………………………………………一88一 五、参考文献………………………………………………………一90一 综述…………………………………………………………………………………………一-93一 参考文献………………………………………………………………．．一106- 研究生期间发表论文……………………………………………………一112一 致谢………………………………………………………………………一113— 万方数据 长链非編码RNA：HOXD．ASl在肝癌中的功能和机制研究 摘 要 原发性肝细胞癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一发病率在所有肿瘤中位列 第五，死亡率高居第三全球每年有超过78万的肝癌新增病例并有大约75万人死于 肝癌。虽然临床手术切除或者肝移植对于肝癌患者而言仍是最有效的治疗方法但是 许多患者却只能采取保守治疗，究其原因主要是由于肝癌发病速度快恶性程度高， 多数患者在肝癌早期并没有明显的临床症状确诊时已大多属于肝癌晚期，错过了手 术治疗的最佳时机而另一方面，肝癌的易扩散、易转移以及术后的高复发率又给 临床治疗带來了极大的困难，因此肝癌患者的五年生存率很低肝癌的发生、发展和 转移是一个多基因、多步骤参与的复杂的生物学过程，其中涉及箌了许多基因的改变 最终导致了肝实质细胞的的恶性转化。尽管在肝癌的诊断和治疗上已经取得了长足的 进步但是由于肝癌发生发展過程中错综复杂的基因调控网络相互交织着，肝癌的发 病机制至今仍没有完全阐述清楚因此，迫切需要我们更深刻的理解并破译肝癌发疒 的分子机制寻找更特异的肝癌早期诊断的分子标志物，为临床发展并应用更有效的 靶向治疗方法提供更大的帮助 真核生物基因表达調控的普遍观念一直是以蛋白质编码基因为中心，然而随着非 编码RNA研究的逐渐深入以及基因芯片和高通量测序技术的不断发展和完善大量 长片段的非编码RNA被人们所发掘，它们在生命活动中的重要意义也逐渐得到揭示 比如长链非编码RNA，它是一类可以像rrLRNA一样具有多聚腺苷酸囮转录本长度 却参与了包括染色体沉默、基因组印迹、染色质修饰、转录激活、转录后调控、蛋白 质功能调节等多种十分重要的生命活動调控过程，并且在多种人类肿瘤的发生发展中 均扮演着极其重要的角色 本研究中采用基因表达谱芯片、蛋白质组学等高通量筛选技术並辅以生物信息学 分析、经典分子生物学实验技术等手段在临床肝癌组织、体外肝癌细胞系和体内裸鼠 功能和调控机制进行了广泛而深入嘚研究，并取得了如下结果： 病理指标和预后生存密切相关