黄瓜枯萎病田间药效试验--《福建热作科技》2006年03期
黄瓜枯萎病田间药效试验
【摘要】：黄瓜枯萎病危害严重,为了筛选出防治效果较好,本试验选用四种药剂适乐时、广枯灵、菌克毒克、贝林,在黄瓜不同生长期进行药效试验。结果表明:适乐时与菌克毒克、贝林防治黄瓜幼苗枯萎病药效有显著差异;适乐时与菌克毒克、贝林开花期防治效果相比极显著,四种药剂中以适乐时效果最好;适乐时与广枯灵、菌克毒克、贝林的结果期防治效果达到极显著作用,但是从整体上分析,结果期采用灌根的方式防治黄瓜枯萎病,防治效果比较差,最高不到20%。
【作者单位】：
【分类号】：S436.421
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哈茨木霉诱变菌株T-E5及其生物有机肥对黄瓜生长的影响及机理研究
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value="木霉作为自然界中一类分布广泛的根际促生真菌，具有良好的促进植株生长、提高作物产量的能力。同时，木霉对不同病原菌引起的植物病害亦具有显著的防治效果。然而，很少有研究报道来阐述如何进一步提高它们的这种能力。本研究对野生菌株哈茨木霉SQR-T037采用紫外诱变的方法，经过多级筛选，获得一株性状稳定、活性更强的诱变菌株T-E5。通过室内分析和温室盆栽实验相结合的方法，探索了哈茨木霉诱变菌株T-E5及其生物有机肥对黄瓜植株的促生作用及对黄瓜连作土传枯萎病害的防控效果，并对其作用机理进行了研究。获得如下主要结果:　　1)在室内实验中，高效液相色谱的检测结果表明，木霉诱变菌株T-E5产吲哚乙酸(IAA)的量相比野生菌株SQR-T037提高了30.2％。在土培和水培系统中，与野生菌株SQR-T037相比，接种诱变菌株T-E5可显著(P≤0.05)提高黄瓜植株的生物量:其中，地上部株高、地上部干重、根系干重和根系活力等指标分别增加了8.01％，9.56％，13.8％和16.1％。荧光定量PCR结果显示，在第30天采样时，T-E5在土壤中的数量几乎是SQR-T037的10倍。木霉在黄瓜根内和茎内定殖的动态变化趋势相同，但无论在哪个采样时间，木霉T-E5的定殖数量均显著(P≤0.05)高于SQR-T037。　　2)在水培分根实验中，与对照（CK，无木霉添加）相比，接种木霉诱变菌株T-E5的处理，其黄瓜植株株高、地上部干重和根系干重分别增加了63.7％、55.1％和36.1％。通过扫描电子显微镜(SEM)观察可知，木霉T-E5可以密集地覆盖在根系表面生长。HPLC和LC/ESI-MS相结合从黄瓜根系分泌物中鉴定出三种有机酸:草酸、苹果酸和柠檬酸，其中T-E5处理的草酸和苹果酸的含量显著(P≤0.05)高于对照。三种有机酸对木霉T-E5菌丝的生长及孢子的萌发均能表现出不同程度的促进作用。水培实验的结果表明，三种有机酸均可以促进木霉T-E5在黄瓜根部的定殖。　　3)在温室实验中，对照组（CK，无木霉添加）黄瓜枯萎病的发病率分别是T1、T2（施用含木霉T-E5的生物有机肥）的3.9和5.1倍。荧光定量PCR结果显示，对照中病原菌尖孢镰刀菌的数量从每克土103增加到104 ITS copies，而T1和T2处理中则从每克土103降低到102 ITS copies。T1和T2处理显著(P≤0.05)改变了根际土壤真菌的多样性和结构组成。HPLC结果显示，从对照组黄瓜根系分泌物中检测到6种酚酸类化合物:没食子酸、对羟基苯甲酸、香草酸、苯甲酸、阿魏酸和内桂酸，而从T1和T2中分别检测到4种和5种酚酸化合物;并且对照组中酚酸化合物的含量显著高于T1和T2处理;与T1、T2相比，对照组中的黄瓜根系分泌物可显著(P≤0.05)促进病原菌尖孢镰刀菌(FOC)孢子的萌发。　　4)通过一系列的室内实验研究了哈茨木霉T-E5对病原菌尖孢镰刀菌(FOC)的拮抗机制:重寄生作用、分泌胞外酶和产挥发性有机物质(VOCs)，并进一步研究了FOC的存在是否会诱导这些机制作用。实验结果如下:在对峙培养中，木霉T-E5可以通过卷曲和缠绕的方式寄生于病原菌菌丝体上。与T-E5在以葡萄糖为碳源的培养基(T1)上生长相比，T-E5在含灭活病原菌菌丝的培养基(T2)上生长时，所产胞外蛋白的量提高了31.65％，并且几丁质酶、β-1，3-葡聚糖酶和蛋白酶等三种胞外水解酶的活性显著(P≤0.05)提高。此外，FOC可以诱导T-E5产生更多的挥发性有机物质，从T1'和T2'处理中分别检测到5种和8种物质，并且T2'处理的VOCs相比T1'表现出更显著（P≤0.05）的抗真菌活性。　　5)应用藻泥和其他一些固体有机废弃物，基于响应面曲线法(RSM)来优化堆肥中哈茨木霉T-E5的数量，得到最佳固体发酵条件:73.2％猪粪堆肥，7.3％藻泥，9.9％菜粕和9.6％羽毛粉，在28℃环境下发酵12天可优化得到T-E5数量最大值。红外光谱及二维相关分析的结果表明:该堆肥过程中物质的降解速度为:蛋白质＞纤维素＞多糖，降解顺序依次为:多糖、蛋白质、纤维素。　　6)在应用氨基酸水解液和其他一些固体有机废弃物优化堆肥中木霉T-E5数量的试验中，基于响应面曲线法(RSM)优化得到使T-E5数量最大(3.72×108 ITS copies g-1)的配方:65.2％牛粪堆肥，19.3％蛆粪，15.5％氨基酸水解液，接种4.7％的木霉T-E5孢子悬液，在环境温度为28℃下发酵14天。三维荧光光谱结合荧光区域指数分析得知，堆肥是一个类蛋白质物质不断降解，而类富里酸和类胡敏酸物质不断形成的过程。FRI参数(PⅠ,n，PⅡ,n，PⅢ，n和PⅤ，n)可以用于表征堆肥的腐熟度。此外，新研制的促生生物有机肥（含哈茨木霉T-E5）对黄瓜、番茄和辣椒的叶绿素含量、根长和植株的干重均有显著的促进作用。"/>
木霉作为自然界中一类分布广泛的根际促生真菌，具有良好的促进植株生长、提高作物产量的能力。同时，木霉对不同病原菌引起的植物病害亦具有显著的防治效果。然而，很少有研究报道来阐述如何进一步提高它们的这种能力。本研究对野生菌株哈茨木霉SQR-T037采用紫外诱变的方法，经过多级筛选，获得一株性状稳定、活性更强的诱变菌株T-E5。通过室内分析和温室盆栽实验相结合的方法，探索了哈茨木霉诱变菌株T-E5及其生物有机肥对黄瓜植株的促生作用及对黄瓜连作土传枯萎病害的防控效果，并对其作用机理进行了研究。获得如下主要结果:　　1)在室内实验中，高效液相色谱的检测结果表明，木霉诱变菌株T-E5产吲哚乙酸(IAA)的量相比野生菌株SQR-T037提高了30.2％。在土培和水培系统中，与野生菌株SQR-T037相比，接种诱变菌株T-E5可显著(P≤0.05)提高黄瓜植株的生物量:其中，地上部株高、地上部干重、根系干重和根系活力等指标分别增加了8.01％，9.56％，13.8％和16.1％。荧光定量PCR结果显示，在第30天采样时，T-E5在土壤中的数量几乎是SQR-T037的10倍。木霉在黄瓜根内和茎内定殖的动态变化趋势相同，但无论在哪个采样时间，木霉T-E5的定殖数量均显著(P≤0.05)高于SQR-T037。　　2)在水培分根实验中，与对照（CK，无木霉添加）相比，接种木霉诱变菌株T-E5的处理，其黄瓜植株株高、地上部干重和根系干重分别增加了63.7％、55.1％和36.1％。通过扫描电子显微镜(SEM)观察可知，木霉T-E5可以密集地覆盖在根系表面生长。HPLC和LC/ESI-MS相结合从黄瓜根系分泌物中鉴定出三种有机酸:草酸、苹果酸和柠檬酸，其中T-E5处理的草酸和苹果酸的含量显著(P≤0.05)高于对照。三种有机酸对木霉T-E5菌丝的生长及孢子的萌发均能表现出不同程度的促进作用。水培实验的结果表明，三种有机酸均可以促进木霉T-E5在黄瓜根部的定殖。　　3)在温室实验中，对照组（CK，无木霉添加）黄瓜枯萎病的发病率分别是T1、T2（施用含木霉T-E5的生物有机肥）的3.9和5.1倍。荧光定量PCR结果显示，对照中病原菌尖孢镰刀菌的数量从每克土103增加到104 ITS copies，而T1和T2处理中则从每克土103降低到102 ITS copies。T1和T2处理显著(P≤0.05)改变了根际土壤真菌的多样性和结构组成。HPLC结果显示，从对照组黄瓜根系分泌物中检测到6种酚酸类化合物:没食子酸、对羟基苯甲酸、香草酸、苯甲酸、阿魏酸和内桂酸，而从T1和T2中分别检测到4种和5种酚酸化合物;并且对照组中酚酸化合物的含量显著高于T1和T2处理;与T1、T2相比，对照组中的黄瓜根系分泌物可显著(P≤0.05)促进病原菌尖孢镰刀菌(FOC)孢子的萌发。　　4)通过一系列的室内实验研究了哈茨木霉T-E5对病原菌尖孢镰刀菌(FOC)的拮抗机制:重寄生作用、分泌胞外酶和产挥发性有机物质(VOCs)，并进一步研究了FOC的存在是否会诱导这些机制作用。实验结果如下:在对峙培养中，木霉T-E5可以通过卷曲和缠绕的方式寄生于病原菌菌丝体上。与T-E5在以葡萄糖为碳源的培养基(T1)上生长相比，T-E5在含灭活病原菌菌丝的培养基(T2)上生长时，所产胞外蛋白的量提高了31.65％，并且几丁质酶、β-1，3-葡聚糖酶和蛋白酶等三种胞外水解酶的活性显著(P≤0.05)提高。此外，FOC可以诱导T-E5产生更多的挥发性有机物质，从T1'和T2'处理中分别检测到5种和8种物质，并且T2'处理的VOCs相比T1'表现出更显著（P≤0.05）的抗真菌活性。　　5)应用藻泥和其他一些固体有机废弃物，基于响应面曲线法(RSM)来优化堆肥中哈茨木霉T-E5的数量，得到最佳固体发酵条件:73.2％猪粪堆肥，7.3％藻泥，9.9％菜粕和9.6％羽毛粉，在28℃环境下发酵12天可优化得到T-E5数量最大值。红外光谱及二维相关分析的结果表明:该堆肥过程中物质的降解速度为:蛋白质＞纤维素＞多糖，降解顺序依次为:多糖、蛋白质、纤维素。　　6)在应用氨基酸水解液和其他一些固体有机废弃物优化堆肥中木霉T-E5数量的试验中，基于响应面曲线法(RSM)优化得到使T-E5数量最大(3.72×108 ITS copies g-1)的配方:65.2％牛粪堆肥，19.3％蛆粪，15.5％氨基酸水解液，接种4.7％的木霉T-E5孢子悬液，在环境温度为28℃下发酵14天。三维荧光光谱结合荧光区域指数分析得知，堆肥是一个类蛋白质物质不断降解，而类富里酸和类胡敏酸物质不断形成的过程。FRI参数(PⅠ,n，PⅡ,n，PⅢ，n和PⅤ，n)可以用于表征堆肥的腐熟度。此外，新研制的促生生物有机肥（含哈茨木霉T-E5）对黄瓜、番茄和辣椒的叶绿素含量、根长和植株的干重均有显著的促进作用。
摘要： 木霉作为自然界中一类分布广泛的根际促生真菌，具有良好的促进植株生长、提高作物产量的能力。同时，木霉对不同病原菌引起的植物病害亦具有显著的防治效果。然而，很少有研究报道来阐述如何进一步提高它们的这种能力。本研究对野生菌株哈茨木霉SQR-T037采用紫外诱变的方法，经过多级筛选，获得一株性状稳定、活性更强的诱变菌株T-E5。通过室内分析和温室盆栽实验相结合的方法...&&
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【作者单位】：
【基金】：
【分类号】：S436.412
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