欲配制1mol/L的cacl2溶液怎么办_百度知道
欲配制1mol/L的cacl2溶液怎么办
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取1000mL的容量瓶，那么就用天平称量11.1gCaCl2固体，倒入烧杯加水溶解，将溶液倒入容量瓶并用蒸馏水润洗2-3次，润洗液一并倒入容量瓶，再向容量瓶里加蒸馏水至刻度为止，最后塞紧玻璃塞并摇匀即可。
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来自：百度作业帮
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制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue方法总结：
Inoue 法制备感受态大肠杆菌总结1． 培养基的准备 ． SOB 培养基： 100ml 培养基： 胰化蛋白胨 酵母提取物 NaCl 250mM KCl 高压灭菌 使用前加 2mol/L MgCl2 0.5 ml 2 g 0.5 g0.05 g 1 mlSOB 琼脂板 琼脂板（含 20mmol/L MgSO4 和 20mmol/L 氨苄） 100ml 胰化蛋白胨 酵母提取物 NaCl 琼脂 250mM KCl 高压灭菌 再加 2mol/L 2mol/L 2 0.5 g g0.05 g 1.5 1 g ml50℃温浴 MgSO4 MgCl2 1 ml0.5 ml 100 ul20mg/ml 氨苄 混均倒平板（90mm2） SOC 培养液 50ml 胰化蛋白胨 酵母提取物 NaCl 250mM KCl 2mol/L MgCl2 1 g 0.25 g 0.025 g 0.5 ml 0.25ml 1 ml1mol/L 葡萄糖(0.22um 过滤除菌)2． INOUE 转化缓冲液的准备：(250ml) 转化缓冲液的准备：MnCL2.4H2O CaCL2.2H2O KCL PIPES(0.5mol/L,PH6.7)2.72g 0.55g 4.6625g 5 ml 定容到 250ml0. 45μm 孔径滤膜过滤，分 50ml 每份―20℃保存 3． 挑取一个经 37℃培养 19h 平皿上的单菌落 ． （2~3mm 直径）接种至 250ml 锥形瓶中的 25ml ， SOB 培养液中，37℃摇床（250~300r/min）培养 6~8 小时。 此时培养物 OD600 约 0。680） （此时培养物 680） 。 （ 4． 从上述的 25ml 的初始培养物接 4ml 大肠杆菌于盛有 100ml SOB 的 500 ml 锥形瓶中， ． 于 18~22℃中速摇床过夜。 次日取出达到 OD 值 0.55 时的培养液置于冰浴中 10min。 次日 5． 平均分装到两个 50ml 的贝克曼离心管于 4℃以 2500g 在贝克曼离心机上离心 10min 收 集菌体。 6． 倒去培养液，将离心管倒扣在吸水纸上 2min 以吸干剩余液体，用真空吸引器将贴附在 管壁的培养基吸干。 7． 加 32ml 冰预冷的 Inoue 转化缓冲液轻轻旋转重悬细菌(没有用枪吹吸和振荡重悬 没有用枪吹吸和振荡重悬) 没有用枪吹吸和振荡重悬 8． 于 4℃ 2500g 离心 10min 收集菌体。 10．倒去上层培养液，将离心管倒扣在吸水纸上 2min 以吸干剩余液体，用一真空吸引器将 附在管壁上的培养基吸干。 冻存感受态细胞 11．用 8ml 预冷的 Inoue 转化缓冲液轻轻重悬沉淀(此时两管混合于一管 此时两管混合于一管 此时两管混合于一管)。 12．向剩余的细胞中加 0.6mlDMSO DMSO，混匀冰浴 10min. DMSO 13．迅速将悬液分装到冷却的无菌 1.5ml 离心管中（每管 200ul ，没入液氮中快速冰冻感 每管 200ul） 受态细胞。贮存于-70℃备用。 转化 15．要转化的 PET 加入装有感受态细胞（加 DMSO 保存于-70℃的感受态细胞）的管中，轻轻 旋转几次混匀内容物。设一对照管：只有感受态细胞。冰浴 30min [保存于-70℃的感受态 保存于-70℃ 保存于 10min,然后再加 DNA.] 细胞从冰箱拿出后用手心溶解后立即在冰浴上冰浴 10min,然后再加 INSERT DNA. 16．将管放入预加温到 42℃的水浴中，恰恰放置 90s 不要摇动 不要摇动。 恰恰放置 90s，不要摇动17．快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却 1~2min。 18．每管加 800μl 在 37℃培养箱中温浴到 37℃的 SOC 培养基，然后将管转移到 37℃摇床 上，温育 45min（中速温和摇培 ，使细菌复苏并表达质粒编码的抗生素抗标记基因。 中速温和摇培） 中速温和摇培 19．将 200μl 体积的已转化的感受态细胞转移到含抗生素和 20mmol/L,MgSO4SOB 培养基上。 于 37℃培养箱正放到液体被吸收。 20．倒置平皿 12~16h 后可出现菌落。 转化 PET 标准质粒的结果如下图:图A转化 10μl 浓度为 50ng/μl 的 PET 标准质粒图B转化 2μl 浓度为 50ng/μl 的 PET 标准质粒图 C 空白对照分析： 仅与本人每次成功的经验为准，供参考） （仅与本人每次成功的经验为准 分析： 仅与本人每次成功的经验为准，供参考） （ 1、本实验所用的菌株是 XL1―BLEU ，注意不同种的大肠杆菌的各种参数不同。 2、培养基需新鲜配置，液体培养基的瓶子要专用，每次使用后洗净凉干后，锡铂纸封口， 使用前只用清水洗后蒸馏水荡几遍， 最后用超纯水润洗两遍。 注意专用器皿都不用任何清洁 剂，第一次使用时可以用稀的洗液浸泡。 3、 培养初始培养物的培养基可以用 SOB 或 LB， 其它步骤中所用各培养基均用 SOB （MgCl2 需在使前加） 。 4、大体积培养菌时如温度固定在 18~22℃，有如下细菌 OD600 的增长经验数值,多次记录时发 现增长的情况相近，以一次记录为例希望能为以后制作时带来一点方便： 时间 6：40 7：40 8：40 9：40 10：20 11：24 12：19 13：00 13：50 14：50 15：45 16：18 16：40 16：50 OD600 0.100 0.134 0.165 0.195 0.218 0.258 0.303 0.327 0.386 0.433 0.483 0.520 0.545 0.5535、实验中有两次重悬沉淀步骤中要注意，勿用枪头吹吸的方法，只需在加入缓冲液以后轻 轻悬转离心管就行了（轻重的标准是重悬时不会使里面的液滴飞溅） 。 6、感受态细胞有液氮速冻后于-70℃可以长期保存（半年内感受性不会下降，以后将再继续 延长观察期） 。 7、转化实验中最关键的是热激一步，温度，时间绝对准确性。还需要注意的是在热激过程 中离心管不能摇动，包括在取出离心管时都不能摇动，取出后立即放入冰浴中静置 2min。
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如何用 CaCl2 2H2O配制1M CaCl2溶液
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准确称取147g CaCl2 2H2O溶解于适量蒸馏水中,再用1L容量瓶定容即可
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CaCl2&#O 的摩尔质量为 147g/mol ，而CaCl2 的摩尔质量是111g/mol 。因为只相差结晶水质量，因此配1升 CaCl2(1mol/L) 需要147克CaCl2&#O ，溶于溶剂并稀释至一升即可。
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