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传染病:2017 年 11 月每月要闻 - 医纬达
传染病:2017 年 11 月每月要闻
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表达单纯疱疹病毒受体HVEM的黑色素瘤B16-ova-HVEM细胞系的构建及成瘤后oHSV2治疗效果初探
【摘要】:目的构建可被单纯疱疹病毒感染的新型细胞系B16-ova-HVEM,体外验证目的基因的表达并初步探究其成瘤后,应用Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(oHSV2)的治疗效果。方法构建表达单纯疱疹病毒受体(HVEM)的质粒载体,脂质体转染B16-ova细胞,嘌呤霉素筛选表达HVEM的阳性克隆。体外验证后进行体内检测,B16-ova-HVEM荷瘤C57BL/6小鼠,成瘤后分为两组,每组5只小鼠,给予oHSV2治疗为oHSV2治疗组,荷瘤未治疗的小鼠为对照组。治疗后测量肿瘤大小,观察小鼠生存期;流式细胞术检测两组小鼠外周血中CD4~+、CD8~+T细胞和髓系来源的抑制性细胞(MDSC)比例变化。结果质粒DNA测序和酶切鉴定结果均显示成功构建含HVEM的质粒;荧光显微镜下可观察到筛选后细胞发绿色荧光;流式细胞术检测筛选后细胞GFP阳性率为98.3%;RT-PCR验证结果显示筛选后细胞含有目的基因HVEM;oHSV2在感染复数(MOI)为0.1、0.5和1的情况下均能明显感染筛选出的细胞;动物实验显示,oHSV2体内治疗后抑瘤效果显著(P﹤0.001);流式检测结果显示oHSV2治疗后小鼠外周血中CD4~+、CD8~+T细胞比例明显高于对照组(P﹤0.01),而MDSC比例明显低于对照组(P﹤0.01)。结论成功构建B16-ova-HVEM细胞系,其既可被OT-1小鼠T细胞特异性识别又可被单纯疱疹病毒感染,为肿瘤特异性免疫治疗和溶瘤病毒联合治疗的研究奠定基础。
【作者单位】:
【基金】:
【分类号】:R730.51
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400-819-9993单纯疱疹病毒疫苗在HSV2生殖器感染的雌性豚鼠模型上的相对效力试验--《国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册》1989年02期
单纯疱疹病毒疫苗在HSV2生殖器感染的雌性豚鼠模型上的相对效力试验
【摘要】:正 作者采用的免疫原包括2批1型单纯疱疹病毒(HSV1)感染的MRC5细胞经福尔马林处理的去垢剂提取的HSV1亚单位疫苗(1、2批疫苗),用γ射线照射后的第2批疫苗和用未感染的MSC5细胞制备的模拟疫苗(对照)。用ELISA测定了3批疫苗的HSV1抗原含量,此法在大约三倍误差范围内具有可重复性。试验结果表明,1、2批疫苗及照射后疫苗的HSV1总抗原含量无差别,而模拟疫苗未检出抗原活性。豚鼠攻击试验分两组进行,第1组用含不
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单纯疱疹病毒2型感染血清流行病学研究进展
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关注微信公众号新型溶瘤病毒oHSV2~(hGM-CSF)体外溶瘤作用及其对B16R黑色素瘤的治疗效应--《2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集》2011年
新型溶瘤病毒oHSV2~(hGM-CSF)体外溶瘤作用及其对B16R黑色素瘤的治疗效应
【摘要】:正背景:溶瘤性单纯疱疹病毒(Oncolytic HSV,简称为oHSV)具有强效、特异、广谱、安全及易于生产制备等特点。oHSV1已进入临床Ⅰ-Ⅲ期试验阶段,oHSV2则研究较少。虽有文献报道oHSV2对肿瘤细胞的杀伤活性比oHSV1强,在治疗动物膀胱癌以及卵巢癌腹腔转移时,疗效明显好于oHSV1。然而,由于病毒基因组中保留了嗜神经的ICP34.5毒性基因,使其安全性受到质疑。另外,oHSV作为载体还可以携带各种治疗性基因(如GM-CSF、
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