人胚胎干细胞定向诱导分化为造血细胞的实验研究--《中国人民解放军军事医学科学院》2010年博士论文
人胚胎干细胞定向诱导分化为造血细胞的实验研究
【摘要】：
血细胞输注和造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)移植是目前细胞治疗的常用手段,广泛应用于恶性血液疾病、遗传性疾病、感染性疾病、重症免疫缺陷及肿瘤放化疗治疗后的造血支持治疗等领域。然而,血细胞来源紧张及病原微生物传播等问题给其临床应用的安全性和广泛性带来了很大的挑战。因此,人们期望寻找更为安全、经济和有效的血细胞和造血干细胞的资源。
胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)在体外具有高度增殖和多向分化潜能,可定向诱导分化为神经细胞、心肌细胞、肝脏细胞、胰岛β细胞、造血细胞等多种类型的细胞。ES细胞具有比成体细胞更为广泛的分化潜能和可塑性,是最丰富的干细胞来源,备受科学家的青睐。
大量的研究表明人ES细胞在体外可定向诱导分化为造血细胞,有可能为临床输血和造血干细胞移植,及恶性血液疾病的治疗提供新途径。目前,HSCs主要来源于脐带血、骨髓和动员后的外周血。从临床应用考虑,与传统来源的HSCs相比,人ES细胞来源的HSCs具有很多优势:合适的供体骨髓的来源短缺,虽然脐带血已建库,但脐血中的HSCs数量仍相对不足,限制了其在成人病人中的广泛应用。随着干细胞及其相关技术的发展,如核移植技术以及细胞重编程技术获得诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPS细胞)等有可能为HSCs的获得提供患者自身遗传背景的ES细胞。此外,ES细胞在体外具有无限增殖潜能,可大量扩增培养,进而生成足够数量的HSCs,有可能成为治疗各种血液疾病的新的HSCs来源。
目前,研究者主要采用可溶性细胞因子诱导法或造血基质细胞共培养法定向诱导人ES细胞向造血细胞分化。尽管ES细胞向造血细胞分化的研究已经取得了很大进展,且其研究和应用前景非常广阔,但体外大规模地定向诱导人ES细胞分化为成熟红细胞并最终应用于临床仍有很多关键的问题需要解决。首先,造血发育的过程有着复杂的基因调控,目前造血细胞分化的分子调控机制尚不明确,探讨ES细胞向造血细胞定向诱导分化调控的机制也将会提高ES细胞体外诱导分化的效率。其次,诱导中使用的各种细胞因子多为基因工程产品,价格昂贵。此外,鼠源饲养层是目前常用的诱导方法。然而,鼠源饲养层所带来的异源污染极大地限制了该研究在临床上的广泛应用。
本研究中,我们首先探讨了前列腺素E2(prostaglandin,PGE2)在人ES细胞向造血细胞分化的作用并初步探讨了其机制,在此基础之上建立了转染促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)基因的人胎肝基质细胞(human fetal liver stromalcells,hFLSCs),利用其条件培养基诱导人ES细胞向红系细胞分化,建立了一种新型诱导人ES细胞向造血细胞分化的方法,既降低了实验成本,又可以避免异源污染。
本研究主要包括两部分内容:
一、PGE2促进人ES细胞向造血细胞分化
人ES细胞在体外可定向诱导分化为造血细胞,尽管目前已建立了多种不同的诱导体系,仍处于起步阶段,细胞分化调控的机制尚不清楚,成为广大科研工作者研究的热点。
PGE2是一种重要的细胞生长和调节因子。研究发现PGE2在正常及缺氧、感染等异常情况下对造血发育都有重要的调节作用。近年来,研究表明PGE2能够促进造血干细胞的存活、增殖及内环境调节方面具有一定的作用。最近研究指出PGE2能够促进放射性损伤后的成年斑马鱼恢复造血重建能力,提示PGE2在胚胎的造血发育过程中发挥重要的作用。此外,PGE2也可促进小鼠ES细胞向造血干细胞分化。因此,我们推测PGE2在人ES细胞向造血分化过程中也发挥一定作用。
我们通过与OP9基质细胞共培养的方法考察PGE2对人ES细胞向造血细胞分化的影响:实验组添加PGE2,对照组不添加PGE2。结果发现,100ng/ml的PGE2可抑制集落的生长,20ng/ml的PGE2对集落生长有明显的促进作用,接种于半固体培养体系生成的造血集落最多,诱导产生的细胞具有向造血各谱系分化能力,加入PGE2抑制剂吲哚美辛后集落形成能力受到明显的抑制。为了观察PGE2对人ES细胞向造血细胞分化的影响,我们于显微镜下观察共培养细胞的形态学变化,结果发现不添加PGE2的情况下,人ES细胞接种于OP9细胞上,部分向上皮样细胞分化;部分形成血岛样的结构,随着培养时间的延长类似于血岛的结构会逐渐消失、变平。在加入PGE2的情况下,大部分会形成血岛样的结构,随着培养时间的延长血岛样的结构体积变大,但形态不会发生改变。收集共培养3～9d的细胞,用半定量PCR检测胚胎干细胞标志Oct4及造血和内皮相关基因的表达情况。结果表明,在不添加PGE2的情况下,诱导的细胞持续表达Oct-4,从培养的第3d开始表达中胚层标志Brachyury,早期造血标志CD34和内皮细胞标志VE-cad,从第5d开始表达造血调控相关基因Runx1,GATA1,SCL和内皮标志vWF。在添加PGE2的情况下Oct-4的表达从培养第3d开始降低,共培养的细胞从培养第3d开始表达Brachyury,CD34,Runx1,GATA1,SCL和VE-cad,从培养第5d开始表达vWF。这提示外源性添加PGE2可明显促进造血和内皮相关基因的表达。我们进一步考察了PGE2处理后Smad信号通路的变化。Western-blot结果显示,与对照组相比,PGE2处理能够上调p-Smad1/5的表达,同时Smad4的表达也上调。而加入PGE2的抑制剂后p-Smad1/5和Smad4的表达受到抑制,提示Smad信号通路可能参与了PGE2介导的人ES细胞向造血细胞分化。
二、EPO基因修饰的hFLSCs条件培养基诱导人ES细胞向红系细胞分化
在ES细胞体外诱导分化为造血细胞的过程中,研究造血微环境的调控机制是其发生和分化的重要环节。在胚胎发育的过程中,不同的造血微环境对造血的发生发挥着重要的作用。造血发生经历了卵黄囊造血、胎肝造血和骨髓造血三个阶段。人卵黄囊造血时期发生在胚胎的4～6周;胎肝造血时期发生在胚胎的6～22周;骨髓造血时期从22周至出生以后。胎肝是造血早期发育的主要位点,是造血细胞发育和分化的重要微环境,构成其微环境的胎肝基质细胞很有可能在造血细胞的发育和分化过程中发挥重要的作用。此外,血细胞的产生还受到造血干细胞内在基因和造血因子的共同调控,EPO是其产生的最重要的因子。EPO是一种糖基化的蛋白质激素,主要来源于肾脏和肝脏,而脑、肺、脾也能产生少量。EPO可促进造血干细胞向原始红细胞分化,加速幼红细胞的分裂、增殖,促进血红蛋白的合成,在红细胞诱导分化研究中发挥重要作用。而造血因子提供的方式对其作用的发挥也有重要的影响。研究表明以造血生长因子基因修饰的基质细胞比相同条件下的造血生长因子更能有效地调控造血。
因此,本部分研究中我们采用慢病毒系统建立了稳定高表达EPO基因的hFLSCs,能够高效分泌具有生物学活性的EPO蛋白,从而避免了添加外源性细胞因子,极大地降低了实验成本。随后,将人ES细胞培养于低黏附的细胞培养皿中诱导生成拟胚体(embryoid bodies,EBs),用过表达EPO基因的FLSCs条件培养基(EPO/hFLSCs-CM)诱导EBs细胞向造血细胞分化,未转染EPO基因的FLSCs条件培养基(hFLSCs-CM)作为阴性对照,未转染EPO基因的FLSCs条件培养基外源性添加重组的EPO(hFLSCs-CM+EPO)作为阳性对照。收集诱导不同天数的细胞,通过流式细胞术分析诱导过程中CD34阳性的表达,以确定不同培养条件下EBs向造血细胞分化的情况。结果表明三种不同的培养体系均能诱导人ES细胞向造血细胞分化。然而,hFLSCs-CM组的诱导效率较低,在诱导第12d中CD34阳性细胞低于11%。添加外源性EPO之后,人ES细胞向造血细胞定向分化的能力增强,其中CD34+细胞最高可达13.1%。EPO/hFLSCs-CM组能更为有效地促进人ES细胞向造血细胞分化,其中CD34+细胞可高达22.74%。此外,我们还应用实时定量PCR检测不同组细胞造血相关基因的表达情况;应用克隆形成实验检测了诱导细胞的造血集落形成能力;通过瑞氏-吉姆萨染色观查了诱导细胞的形态;应用联苯胺染色和RT-PCR方法检测了诱导造血集落珠蛋白的表达情况。结果表明,诱导生成的细胞具有造血细胞的一般特性,在半固体培养基中可分化为不同种类的造血集落,不同培养条件下产生的造血细胞的集落形成能力与珠蛋白的表达量不同,EPO/hFLSCs-CM诱导产生细胞的造血基因的表达量及所形成的造血克隆最多,且以红系克隆为主。此外,我们还检测了诱导产生的红系细胞的携氧能力。结果显示,EPO/hFLSCs-CM诱导的红系细胞具有和脐带血相似的“S”形氧离曲线,这表明体外诱导的红系细胞具有和脐带血相似的携氧能力。
综上所述,在本研究中我们初步考察了PGE2在人ES细胞向造血细胞分化过程中的作用并初步探讨了其作用机制;并利用稳定表达EPO基因的FLSCs条件培养基诱导人ES细胞向红系细胞分化,该方法可高效诱导人ES细胞定向诱导分化为造血细胞,同时降低了研究成本,且有效避免了鼠源饲养层带来的异源基因污染。上述研究为深入探讨造血细胞的发育调控机制及以胚胎干细胞或造血干细胞为启动细胞大规模地诱导产生红细胞奠定了一定的实验基础。
【关键词】：
【学位授予单位】：中国人民解放军军事医学科学院【学位级别】：博士【学位授予年份】：2010【分类号】：R329【目录】：
缩略词表（Abbreviations）6-8
Abstract12-16
一、胚胎干细胞的特性16-17
二、胚胎干细胞定向诱导分化为造血细胞的研究进展17-20
三、ES细胞来源的造血细胞的应用前景和存在的问题20
四、本实验的研究方法与目的20-21
第一章 前列腺素E2 促进人胚胎干细胞向造血细胞的分化21-50
第一节 人胚胎干细胞体外培养体系的建立23-33
材料与方法23-30
第二节 前列腺素E2 促进人胚胎干细胞向造血细胞分化33-48
材料与方法33-43
第二章 促红细胞生成素基因修饰的胎肝基质细胞条件培养基诱导人胚胎干细胞向红系细胞分化50-84
第一节 慢病毒介导的稳定表达促红细胞生成素的胎肝基质细胞系的建立52-71
材料与方法52-65
第二节 促红细胞生成素基因修饰的胎肝基质细胞条件培养基诱导人胚胎干细胞向造血细胞分化71-82
材料和方法71-77
参考文献85-91
个人简历95-97
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8岁孩子先天左手畸形
状态：就诊前
希望提供的帮助：
在当地三甲医院 医生说可以等到以后克隆技术出来了再做 现在孩子8岁了 请问您认为现在怎么治疗对孩子最好？最好手指能恢复成什么样？另外做手术大概需要多少费用？真的麻烦您了
所就诊医院科室：
罗源县医院 x光室
厦门大学附属福州第二医院 手外科
检查资料：
拇指和小指较长，但没有虎口，现在可以先做虎口开大和小指分指手术，使拇指和小指可以对捏，有个基本功能，中环指可以再造，进一步改善功能和外观。再造12岁以上做更好。
状态：就诊前
医生您好！孩子现在可以两个手指对捏。
如果要做的话 先期的手术费用要准备多少啊 ？到12岁后做中环指 那中环指是怎么做的？是脚指移植吗 ？缺了三根可以做几根？麻烦您了 医生！！
8岁也可以做，只是风险大点，可以三个都造，也可以只造两个，全形再造，不是直接移植足趾，足趾外观功能都不好
状态：就诊前
那请问医生第一次手术的费用大概要准备多少啊？如果再造的话是用什么材料再造？谢谢医生了！
状态：就诊前
郝医生您好
请问您之前说的再造是移植哪里的呢 麻烦您了
虎口开大手术需要约4万元，全形再造是多个部位的多种组织拼装，指甲和关节是足趾的，皮肤需要从足趾和腹股沟都取点，骨头可以延长也可以用髂骨
状态：就诊前
使用付费咨询服务
患者1***购买了大夫
次咨询服务
状态：就诊前
郝医生 您好 请问孩子是先做拇指开虎口和小指分指手术吗
那中间的三指可以怎么做呢 那三指也有些指甲可以怎么利用呢 谢谢
先做皮瓣虎口开大、小指分指，再做示中环指再造，示指的指甲可以利用，中指也有可能能用部分。
疾病名称：手畸形&&
希望得到的帮助：这个现在可以手术了吗？什么时候手朮比较好？用不用给他斑一斑呢？
病情描述：我家里没有人有畸形，请问这是什么原因，是不是吃什么东西吃的，可以手朮吗，朮后恢复怎么样
疾病名称：拇指畸形&&
希望得到的帮助：想问几个问题：1.现在去看，五一期间可以安排到手术吗？2.需要恢复多久可以上幼儿园呢...
病情描述：陈医生好，小孩四岁，右拇指多半个指甲壳大小，不影响活动，拿笔都很灵活，就像多了一块多余的肉在旁边。
疾病名称：天生小脚趾背骑在无名趾上，该怎么办&&
希望得到的帮助：是需要手术还是矫正。
病情描述：小脚趾背骑在无名趾上，长辈中都没有，但这辈中她与表妹都这样。
疾病名称：小儿先天性足畸形&&
希望得到的帮助：想咨询下什么时间做手术比较合适。
病情描述：孩子一出生就是在左脚第五指上有个多余的第六指，现在已经快8个月了，想咨询下什么时间做手术比较合适。
疾病名称：大拇指有两个指甲&&
希望得到的帮助：多大可以手术，要去骨科还是整形科呢
病情描述：今天去医院，医生说要八个月之后做，并且让去整形科
疾病名称：先天性多指&&
希望得到的帮助：预约的6号看病，第一次去检查这几天孩子感冒输液呢！不知道还能正常做检查吗，可以做检...
病情描述：男,8个月。左手拇指多指，有指甲，有骨头，也会回弯，
疾病名称：脚趾上长了一个小肉丁；先天性脚趾并在一起&&
希望得到的帮助：是否可去门诊就诊，是否需要手术
病情描述：出生时发现是一个白点，现在长出一个小肉丁
疾病名称：右手六指多指&&
希望得到的帮助：我想请问方教授孩子多大能做手术？我希望能预约方教授为我儿子做手术，想请问需要提前...
病情描述：你好方教授：我儿子出生时就右手拇指外多指六指，现在孩子刚满月。
疾病名称：左手小拇指多长了一根手指只有皮连在上面&&
希望得到的帮助：可以等出院去儿童医院直接搞掉吗？
病情描述：新生儿出生左手指多了个手指是连在上面的，县医院说用头发丝就能裹掉我想问等出院可以直接搞掉吗？还有脚趾多了个脚趾什么时候可以矫正
疾病名称：并趾&&
希望得到的帮助：想问问什么时间做手术合适，宝宝现在刚学会走路。
病情描述：宝宝出生第二天剪指甲时发现左脚四五趾并趾，五趾比正常的小脚趾要宽，而且有两个小指甲盖。当时咨询医生时说不要紧，大一点做手术就好了。宝宝四个月时去郑州儿童医院看病时顺便咨询了下该院的...
疾病名称：娃多指请问什么时候可以做手术！&&
希望得到的帮助：做手术要提前预约吗？检查报告出来当天可以做手术吗？床位要预约吗？
病情描述：小孩大母子多指请问手术前要做什么准备？去检查了各方面的身体，当天可以做手术吗？
疾病名称：多指切除纠正后不能弯曲伸直，且手指无力。&&
希望得到的帮助：现在一岁两个月，请问这是什么原因，是否手术损伤了神经肌腱和关节，还有什么办法可以...
病情描述：宝宝，蟹钳指，今年五月中旬做的多指切除和纠正术（钢针固定纠正），术后发现宝宝手指无力，且不能弯曲和伸直，一直被动给他弯曲，现在能手动能弯一点点，但宝宝日常活动中，自己不弯曲和伸直，...
疾病名称：右手先天拇指缺失&&
希望得到的帮助：移植或再造，恢复手指美观及具备拇指功能
病情描述：右手先天拇指缺失，目前孩子未满月，没有家族遗传史
疾病名称：并趾手术得住院多久？会花费多少钱可报销吗&&
希望得到的帮助：大龄并趾手术后怎么起居才影响小，不易使伤口长泡泡
病情描述：小时候没有进行手术，怕走路问题，留到了现在。之前去医院看过医生说等脚藓没了再弄，现在脚藓好了，想做手术，但担心这个20 多岁的术后有什么痕来着，想咨询一下，这个年纪走路会不会有什么影响...
疾病名称：孩子刚出生发现两个脚趾头连一起&&
希望得到的帮助：是否需要手术解决
病情描述：不知道什么时候可以治疗。。。。。。。。。。。。。。
疾病名称：我宝十个月了大拇指上多个手指 可以做吗&&
希望得到的帮助：左手多指手术有什么风险麻药会对孩子大脑有伤害吗？
病情描述：左手多指手术有什么风险？现在可以手术吗？
疾病名称：六指手术&&
希望得到的帮助：要手术。为了宝宝
病情描述：医生。 这种手术医学院可以做吗
医疗可以报吗
我电话130******167发个短信也可以
疾病名称：先天性多指症&&
希望得到的帮助：请问多大做手术合适
病情描述：左手多指（无骨）
右手多指（有骨）
疾病名称：多指切除与纠正，手指关节不能弯曲&&
希望得到的帮助：请问这是什么原因？
病情描述：宝宝一岁零一个月，今年五月中旬做的多指切除与纠正手术（拇指），现取钢针有取半个月，发现关节处一直不能弯曲，尤其下关节一点都弯不动，很硬
疾病名称：婴幼儿进展性巨趾畸形&&
希望得到的帮助：您好，请您帮看看我女儿的病，制定一套治疗方案，谢谢您！！！
病情描述：您好，田主任！打扰您了，我女儿先天右脚巨趾畸形，现在有四个月了，想请您帮看看她这种情况什么时候手术比较好，还有就是手术后能正常走路和穿鞋子吗？
投诉类型：
投诉说明：（200个汉字以内）
郝丽文大夫的信息
手指全形再造、四肢创面修复、游离皮瓣、骨髓炎、周围神经损伤修复、四肢肌腱损伤修复、锤状指、手部骨关节...
郝丽文，男，本科毕业于北京大学医学部，后被免试保送至山东大学攻读硕士研究生，师从世界著名手显微外科专...
手外科可通话专家
副主任医师
武汉协和医院
上海华山医院
副主任医师
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副主任医师
吉林大学第一医院
副主任医师
重庆儿童医院
副主任医师
上海华山医院
上海第九人民医院
好大夫在线电话咨询服务胚胎干细胞和成体干细胞应用前景与问题的比较--《中国现代医学杂志》2004年17期
胚胎干细胞和成体干细胞应用前景与问题的比较
【摘要】：综述比较了胚胎干细胞(ES)和成体干细胞(AS)的应用前景,以及在临床应用方面的优势与局限性。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：Q813【正文快照】：
干细胞(Stem cell, SC)是一种具有多种分化潜能,自我更新和高度增殖能力的细胞,能产生出与自身完全相同的子细胞,同时又可以进一步分化成为各种不同的组织细胞,从而构成机体各种复杂的组织器官[1]。根据其发育阶段,干细胞分为胚胎干细胞(embryonic stem cell, ES)和成体干细胞
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王鸿,郑瑞珍,安利佳;[J];中国生物工程杂志;2002年02期
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张怡;[J];生物医学工程学杂志;2002年02期
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陶靖,葛坚,黄冰,王智崇,郭彦,余克明,陈慧怡,陈系古;[J];中国病理生理杂志;2003年03期
滑冰,任雪萍;[J];商丘师范学院学报;2003年02期
【共引文献】
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付明;[J];湖北民族学院学报(自然科学版);2004年04期
王智崇,葛坚,黄冰,高前应,刘炳乾,王凌华,喻瓴,范志刚,路晓明,刘敬波;[J];中国科学C辑;2005年02期
杨锋,张世馥;[J];基础医学与临床;2002年05期
华秀峰;李建远;;[J];实用糖尿病杂志;2006年01期
李天东;陈桂芳;;[J];绵阳师范学院学报;2006年03期
白旭华;[J];内蒙古民族大学学报(自然科学版);2004年04期
宋晓平;窦忠英;雷安民;华进联;冯秀亮;屈雷;;[J];农业生物技术学报;2006年01期
杨学义,华进联,马勇江,窦忠英;[J];中国生物工程杂志;2002年06期
钱晖,许文荣,王文兵,韩崇旭,郝顺祖,朱伟,孙晓春,胡嘉波,黄诒森;[J];中国生物化学与分子生物学报;2005年01期
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王启凤;[D];南京农业大学;2003年
倪雪峰;[D];南京医科大学;2004年
王得志;[D];武汉大学;2004年
刘志君;[D];第三军医大学;2004年
王志勇;[D];甘肃农业大学;2004年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库
王晓刚,魏学忠,周定标;[J];军医进修学院学报;2001年04期
郭启仓,刘志勇,李占清,张宇,张金凤,王国臣;[J];华北煤炭医学院学报;2004年01期
陈忠平,周旺宁;[J];中国肿瘤;2005年02期
常颖,齐欣,卜丽莎,徐忠信;[J];中国危重病急救医学;2005年02期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库
黄秀榕,祁明信;[J];福建中医学院学报;2002年01期
徐令,乔春平,黄绍良,李树浓,吴旋;[J];科学通报;2000年08期
潘兴华,韩毅冰,郭坤元,陈系古;[J];生命科学研究;2001年S1期
徐洁,丛笑倩,姚鑫;[J];实验生物学报;1991年04期
黄冰,陈系古,邓新燕,林以理,陈颖青,黄春浓,梁英杰;[J];细胞生物学杂志;2001年01期
都同功,黄冰,钟女奇,邓新燕,陈颖青,陈系古;[J];中国病理生理杂志;2001年02期
曾秋棠,曹林生,祝武强;[J];中国病理生理杂志;2001年07期
华进联,窦忠英,李松,屈雷;[J];中国科学基金;2000年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库
汪涛;马祥瑞;王洪云;苏燎原;;[J];细胞生物学杂志;1981年01期
伊惠贤;;[J];国外医药.植物药分册;1981年02期
丛笑倩;;[J];细胞生物学杂志;1981年04期
史敏言;;[J];安徽医科大学学报;1981年01期
唐佩弦,韩福刚,刘永;[J];基础医学与临床;1982年Z1期
高舜德,张红卫,黄浙;[J];山东大学学报(理学版);1982年02期
施渭康,除振国,姚(金王玉);[J];实验生物学报;1982年01期
David H蒋效东;;[J];世界科学;1982年07期
陆德裕;;[J];细胞生物学杂志;1982年01期
吴蔚;;[J];医学分子生物学杂志;1982年03期
中国重要会议论文全文数据库
王福生;吴祖泽;;[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
高舒平;王太一;时伟红;李福才;陈玲;;[A];中国实验动物学会第五届学术年会论文汇编[C];2000年
窦忠英;高志敏;雷安民;杨春荣;韩晓良;樊敬庄;;[A];西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集[C];2000年
安立龙;窦忠英;杨奇;雷安民;高志敏;杨春荣;邱怀;;[A];西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集[C];2000年
陆应麟;张超华;安明榜;王妍;谢庆军;;[A];中国动物学会全国显微与亚显微形态科学分会第十次形态科学与显微注射技术学术研讨会论文摘要集[C];2000年
艾国平;粟永萍;冉新泽;刘晓宏;刘贤华;罗成基;程天民;;[A];面向二十一世纪的生物医学体视学和军事病理学论文摘要汇编[C];2000年
王琳;马旭;王毅;李雁;白睛;许勇刚;谢京红;;[A];第五届全国优生科学大会论文汇编[C];2000年
王树玉;张军;任国庆;;[A];第五届全国优生科学大会论文汇编[C];2000年
成国祥;朱焕章;;[A];中国实验动物学会第五届学术年会论文汇编[C];2000年
廖侃;;[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
中国重要报纸全文数据库
孙文德;[N];北京科技报;2000年
译;[N];北京科技报;2000年
张田勘;[N];大众科技报;2000年
张田勘;[N];大众科技报;2000年
滴石;[N];广东科技报;2000年
吴仕高;[N];广东科技报;2000年
通讯员　张献怀　雷永升;[N];光明日报;2000年
章静波;[N];光明日报;2000年
山今;[N];解放日报;2000年
;[N];解放日报;2000年
中国博士学位论文全文数据库
梁新乐;[D];浙江大学;2001年
龚振明;[D];第二军医大学;2001年
陈希哲;[D];第四军医大学;2001年
吴旋;[D];第三军医大学;2001年
艾国平;[D];第三军医大学;2001年
杨莉;[D];重庆医科大学;2001年
郑敬民;[D];第二军医大学;2001年
李相运;[D];西北农林科技大学;2001年
徐营;[D];南京农业大学;2002年
李莲军;[D];中国人民解放军军需大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库
张蓉;[D];甘肃农业大学;2000年
张霞;[D];第二军医大学;2000年
郑磊;[D];第一军医大学;2000年
曹漫明;[D];第一军医大学;2000年
杨学义;[D];西北农林科技大学;2001年
周振明;[D];河北农业大学;2001年
李松;[D];西北农林科技大学;2001年
蔡斌;[D];第二军医大学;2001年
张文志;[D];安徽医科大学;2001年
徐群;[D];南京医科大学;2001年
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