关注今日：0 | 主题：312560
微信扫一扫
【求助】跑单链DNA能和DNA marker比较大小吗？
页码直达：
这个帖子发布于2年零90天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
问题已关闭悬赏丁当:2
我跑了琼脂糖凝胶电泳，但是是单链DNA，这样能用普通的DNA marker比较大小吗？可以的话，与双链DNA有区别吗？求赐教~~~~
不知道邀请谁？试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
Normally, on 1% agarose ssDNA runs ~10% faster, than dsDNA of the same size. This is due to complex folding structure of ssDNA comparing to dsDNA.
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
楼主这是检测cDNA吗？市面上有单链的ladder吗？
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
有单链dna吗？？长见识了啊
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园关注今日：0 | 主题：312560
微信扫一扫
请教DNA电泳和回收－－切胶，回收纯化和DNA ladder等
页码直达：
这个帖子发布于10年零234天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我的目的是提取污泥细菌DNA，PCR后进行DGGE，然后进行回收测序，但是很多问题不是很清楚，请大家多指教。（1）做完DNA的DGGE后，用试剂盒回收纯化胶上的DNA时，需不需要考虑band中的是dsDNA还是ssDNA？似乎有些试剂盒需要区分。此外测序的话需要考虑ssDNA吗？（2）DNA回收试剂盒就是纯化试剂盒吗？如果用试剂盒回收后是否还需纯化？（3）如果胶带靠得很近如何能够切得比较好？大家切胶是是用切胶机吗？如果切下的胶混有其他DNA，是不是再次进行PCR，跑胶进一步分离？（4）用DNA ladder作为电泳marker的目的是什么呢？是通过亮度来定量不同带的DNA浓度吗？那么亮度又如何定量呢？band所代表的DNA分子量是不是页只能是大概估计？在选择marker时，又该选择哪个范围的呢？（实在是很基础的问题，但都不懂。）请问在哪里可以查到这些基本问题的解答。十分感谢。
不知道邀请谁？试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
abuck edited on
关于第一，因为我不太知道DGGE，所以我不太好回答你。第二个，胶回收试剂盒也可以用于DNA的纯化，只不过是将BINDING BUFFER直接加到要回收的DNA中代替电泳切割的过程。回收后按操作步骤已经纯化了，无需进一步纯化。第三个，如果条带靠得很近，那么需要电泳长点时间，待条带拿开后再切，或者提高PCR的特异性，如用降落PCR，或提高退火温度等。再此pcr只会造成更多非特异性扩增，且增加突变的几率。第四，DNA ladder或marker只是痕量DNA片段的大小，如DL，250，500，750，bp六个不同大小的条带。不能用来定量。marker的有很多种，只能根据你目的分子的大小来选用合适的。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
fangk1974 edited on
谢谢你。今天我也去查了一些资料也向周围的师兄请教了一些。十分感谢。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园}